全 文 ：生 物 工 程
2013年第4期
Vol . 34 , No . 04 , 2013
紫苏乳状液酶解破乳工艺的研究
张雅娜1，李 杨1，2，江连洲1，2，*，王 妍1，张 妍1，冯红霞1，隋晓楠1
（1.东北农业大学食品学院，黑龙江哈尔滨 150030；
2.国家大豆工程技术研究中心，黑龙江省哈尔滨 150030）
摘 要：利用水酶法进行紫苏油脂的提取时会形成乳状液，乳状液是由油脂、蛋白、磷脂以及碳水化合物共同组成的
稳定的乳化体系，由于乳状液中富含油脂，因此如何对乳状液进行有效的破乳是提高水酶法油脂得率的关键。以水酶
法提取紫苏油过程中所形成的乳状液为研究对象，通过二次酶解的方法对其破乳工艺进行研究，考察了酶解时间、酶
解温度、pH以及加酶量对紫苏油脂回收率的影响，并采用响应面法对破乳工艺进行优化。 结果表明，在Protex 6L酶解
时间1.6h，酶解温度62.6℃，pH9.4，加酶量1.9%条件下，紫苏油脂回收率为85.52%；利用酶解进行破乳，此方法可行，操
作安全，具备工业化应用潜力。
关键词：紫苏籽，水酶法，乳状液，二次酶解破乳
Research of hydrolysis de-emulsification of emulsion from
enzyme-assisted aqueous extraction processing of perilla frutescens
ZHANG Ya-na1，LI Yang1，2，JIANG Lian-zhou1，2，*，WANG Yan1，ZHANG Yan1，FENG Hong-xia1，SUI Xiao-nan1
（1.College of Food Science，Northeast Agricultural University，Harbin 150030，China；
2.National Research Centre of Soybean Engineering And Technology，Harbin 150030，China）
Abstract：Emulsion was formed during the process of enzyme-assisted aqueous extraction of perilla frutescens
seeds oil. It is stabilized by oil，proteins，phospholipids and carbohydrates，which compose a state emulsified
system，as it is rich in oil，therefore，how to demulsify effectively the emulsion，which is the key to increase the oil
yield of enzyme-assisted aqueous extraction processing（EAEP） of oil. Emulsion formed in the emulsion from
enzyme-assisted aqueous extraction processing（EAEP） of Perilla Frutescens Seeds oil was taken as study
object，and econdary hydrolysis de -emulsification was adopted to demulsify the emulsion，the effect of
hydrolysis time，hydrolysis temperature，hydrolysis pH and enzyme dosage on oil recovery yield. Response
surface methodology （RSM ） was applied to optimize the demulsification technology . Optimal hydrolysis
conditions were Protex 6L，hydrolysis time of 1.6h，hydrolysis temperature of 62.6℃ ，hydrolysis pH of 9.4 and
enzyme dosage of 1.9%. Under these optimal hydrolysis conditions，the maximum oil recovery yield was up to
85.52%. For hydrolysis de-emulsification，it was a good method that feasible，safe operation，and potential for
industrial application.
Key words：perilla frutescens seeds；aqueous enzymatic method；emulsion；secondary hydrolysis demulsification
中图分类号：TS224.2 文献标识码：A 文 章 编 号：1002-0306（2013）04-0201-07
收稿日期：2012－10－10 * 通讯联系人
作者简介：张雅娜（1988-），女，硕士研究生，研究方向：粮食、油脂及
植物蛋白工程。
紫苏（perilla frutescens（Linn．）britton），别名：赤
苏、红苏、黑苏、红紫苏、皱紫苏等，其种子称为苏子，
其叶称为苏叶，属桃金娘科蒲桃属，系唇形科
（Labiate）一年生草本植物，原产于中国，广泛分布在
中国、日本、韩国、越南、土耳其和美国[1]。紫苏籽是一
种独特的保健油料作物，从紫苏籽中提取的紫苏油
含有丰富的α-亚麻酸，含量可达56.1％~64.8％，远远
高于其他植物油[2]，近年来备受国内外学者瞩目。水
酶法是一种新的油脂提取技术，它具有作用条件温
和、避免使用有机溶剂等优势[3]。但目前很多研究表
明，在酶解过程中会形成稳定的乳化体系，是由于在
乳状液中大部分油脂和蛋白紧密结合[4]，阻碍油脂释
放[5-6]，降低油脂提取率，因此，打破乳状液的稳定性，
使油脂能够充分的释放出来，已经成为水酶法在提
油工艺中的瓶颈问题。目前已有越来越多的研究集
中到破乳工艺上[7-9]。其常用破乳方法有：转相法[10-11]、
加热法 [12-13]、冷冻解冻法 [12，14-17]、酶法 [18]、调整pH
法[19-21]、剪切法[22-23]等。目前酶解破乳已应用在大豆水
酶法提油过程中[24-25]，应用酶法进行破乳能够尽量减
少乳状液的稳定性，从而提高油的回收率。本实验对
紫苏水酶法过程中形成乳状液的酶解破乳工艺进行
研究，应用不同酶（Protex 6L、Protex 7L、Alcalase 2.4L）
对乳状液进行破乳，首先对酶种类进行选择，选出最
佳酶，并在单因素的基础上选择出最佳酶解破乳参
201
DOI:10.13386/j.issn1002-0306.2013.04.025
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2013年第4期
数，再利用响应面法对紫苏乳状液酶法破乳工艺进
行优化。
1 材料与方法
1.1 材料与仪器
紫苏 产自长白山；Cellulase 丹麦诺维信公
司；Alcalase 2.4L 丹麦诺维信公司；Protex 6L、7L 无
锡杰能科生物工程有限公司；Viscozyme L 丹麦诺
维信公司；乙醚、石油醚、乙醇、正己烷 北京昊科尔
化工有限公司；氢氧化钠 宜兴市辉煌化学试剂厂，
分析纯；其他试剂 均为分析纯。
JY-9211N超声波细胞粉碎机 宁波新芝生物
科技股份有限公司；JE-502电子天平 上海浦春计
量仪器有限公司；MJ-60BE01B美的料理机 广东美
的精品电器制造有限公司；HH-4丹瑞数显恒温水浴
锅 金坛市双捷实验仪器厂；PHS-25C数字酸度计
上海大普仪器有限公司；LGR20-W台式高速冷冻离
心机 北京京立离心机有限公司；BGZ-246电热鼓
风干燥箱 上海博讯实业有限公司医疗设备厂；
BCD-215cm美的冰箱 合肥美的荣事达电冰箱有限
公司；KDN-103F自动定氮仪、HYP-1040四十孔消化
炉 上海纤检仪器有限公司；SCT-02索氏抽提器 天
津玻璃仪器厂；SX-4-10箱式电阻炉 天津市泰斯
特仪器有限公司；Agillent 6890-5973气相色谱-质谱
联用仪 安捷伦科技有限公司。
1.2 实验方法
实验工艺流程见图1。
1.2.1 紫苏主要成分的测定 水分的测定：根据
GB304-87进行测定；粗脂肪的测定：根据GB5512-85
中索氏抽提法进行测定；粗蛋白的测定：根据
GB6432-94进行；灰分测定：根据GB5009.4-85进行
测定。
1.2.2 紫苏籽脱壳处理 紫苏籽用脱壳机进行脱壳
处理，利用风机将壳除去，脱壳后的紫苏籽立即用于
提取实验或放入两层的封口袋中密封并储存在4℃
的冰箱中，用于进一步实验。
1.2.3 粉碎处理 准确称取30g脱壳清理后的紫苏
籽，料理机干磨Ⅱ档粉碎15s，用180mL的蒸馏水冲洗
三次搅拌杯内壁，要求搅拌杯内壁冲洗完全干净，然
后倒入500mL烧杯中，用于进一步实验。
1.2.4 超声预处理 将步骤1.2.3中装有紫苏料的烧
杯放入超声波细胞破碎仪中进行超声处理，条件为：
时间20min，功率400W，温度40℃。超声处理后的紫
苏籽进行下一步水酶法酶解实验。
1.2.5 水酶法乳状液的制备 如图1所示。超声预处
理后，将装有紫苏料的500mL烧杯置于60℃的水浴锅
中，用2mol/L的HCl溶液/NaOH溶液调整pH5.0，加入
3%（紫苏籽质量的3%）的Cellulase酶，搅拌3h以进行
酶解。酶解结束后进行离心操作（10000r/min、20℃、
40min），离心后分为四层（游离油、乳状液、水解液、
残渣），最上层游离油用正己烷萃取，用蒸气浴挥发
充分后进行称量计数，剩余的乳状液和水解液倒入
500mL分液漏斗中，4℃下静止12h，分离出乳状液置
于已称重的烧杯中，用于进一步破乳实验[26]。
1.2.6 酶破乳处理的方法 图1显示了二次酶解破
乳处理的破乳条件（酶的种类、加酶量、酶解时间、酶
解温度、pH、料液比w/v）及后续步骤，其中，pH为每
一种酶的最佳pH，由厂家说明书指定。每次破乳实验
重复3次。空白处理不添加酶，其余与三种酶法破乳
的条件一致，破乳处理后，样品转移到50mL离心管
中，20℃10000r/min下离心40min，离心后，通过巴斯
德吸管吸取上层游离油，剩下的残留在乳状液表面
的游离油用正己烷洗涤、蒸气浴挥发后准确称量油
重，并计算油脂回收率。油脂回收率计算公式如下：
油脂回收率（%）= 二次酶解游离油质量
乳状液质量×乳状液含油量 ×100
式中，乳状液含油量测定方法参照1990-AOAC
Method，AOAC 955.19[27]。
1.2.7 二次酶解破乳的单因素实验
1.2.7.1 pH对二次酶解破乳油脂回收率的影响 实
验选择在Protex-6L碱性蛋白酶的工作pH范围内
（pH=8~10）。在温度60℃，酶添加量2%（乳状液质量
的2%），酶解1h，乳状液/水=1∶20（w/v）的条件下，分别
考察了pH为8.0、8.5、9.0、9.5和10.0对酶解紫苏乳状
液的影响，并测其油脂回收率。
1.2.7.2 酶解温度对二次酶解破乳油脂回收率的影
响 实验选择Protex-6L碱性蛋白酶的工作温度范围
（50~70℃）。在pH=9.5、酶添加量2%（乳状液质量的
2%）、酶解1h、乳状液/水=1∶20（w/v）的条件下，分别考
察了温度在50、55、60、65和70℃对酶解紫苏乳状液
的影响，并测其油脂回收率。
1.2.7.3 加酶量对二次酶解破乳油脂回收率的影响
实验选择酶添加量范围为1%~3%。在pH=9.5、酶解温
度60℃、酶解1h、乳状液/水=1∶20（w/v）的条件下，分
别考察了底物浓度在1%、1.5%、2%、2.5%和3%时对
酶解紫苏乳状液的影响，并测其油脂回收率。
1.2.7.4 酶解时间对二次酶解破乳油脂回收率的影
图1 实验工艺流程
Fig.1 Experimental procedure flow
超声波预处理脱壳、粉碎紫苏
水酶法（EAEP）Cellulase酶
离心
1st游离油 乳状液 水解液 残渣
破乳处理
Alcalase 2.4L
pH9.0、60℃、添
加2%、料/水=
1∶20（w/v）、1h
Protex 6L
pH9.5、60℃、添
加2%、料/水=
1∶20（w/v）、1h
Protex 7L
pH7.0、60℃、添
加2%、料/水=
1∶20（w/v）、1h
空白
60℃、料/水=
1∶20（w/v）、1h
离心
2nd游离油 剩余乳状液 2nd水解液
脂肪酸分析
计算油脂回收率（%）
202
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响 实验在pH=9.5、酶解温度60℃、酶添加量2%（乳
状液质量的2%）、乳状液/水=1∶20（w/v）的条件下，分
别酶解0.5、1、1.5、2、2.5h，考察酶解时间对酶解紫苏
乳状液的影响，并测其油脂回收率。
1.2.8 响应面实验 以单因素为基础，利用Design
Expert 7.1.1软件，采用响应面实验对二次酶解破乳
酶解参数进行优化。表1为实验设计方案。
1.2.9 实验设计与统计分析 乳状液的提取和对乳
状液的每步处理均独立操作三次。因此，所有油脂回
收率的计算都是3个数的平均数。实验以单因素为基
础，利用Design Expert 7.1.1软件设计，进一步对二次
酶解破乳酶解参数进行优化。
1.2.10 紫苏油脂肪酸分析方法
1.2.10.1 紫苏籽脂肪酸甲酯的制备 称取油脂或脂
肪酸50mg置于10mL量瓶内，加入3mL正己烷和苯的
混合溶剂（1 ∶1）轻轻摇动使之溶解。再加入2mL
0.5mol/L氢氧化钾-甲醇溶液，混匀。在室温静置
30min，加蒸馏水使全部有机相甲酯溶液升至瓶颈上
部。澄清后吸取上清液，所得清液即可用于气相色
谱-质谱联用仪分析。
1.2.10.2 GC-MS分析条件 色谱条件：色谱柱为
HP-88（100m×0.25mm×0.20μm）弹性石英毛细管柱；
载气为He气；载气流量为1mL/min；进样口温度为
250℃；初始温度80℃，保持5min，以10℃/min升温到
150℃，保持2min，再以5℃ /min升温至230℃，保持
10min，总分析时间为40min，进样模式为split，分流比
30∶1，进样量0.2μL。
质谱条件：电离方式EI，电子能量70eV，四级杆
温度为150℃，离子源温度230℃，传输线温度为250℃，
质谱扫描范围50~550amu。
2 结果与分析
2.1 紫苏籽的主要成分及乳状液中的油脂含量
参照AOAC 955.19方法测得紫苏乳状液中油脂
含量为39.96%。本实验材料紫苏籽的主要成分如表2
所示。
2.2 单因素实验结果
2.2.1 不同酶的破乳处理 由图2可知，用Protex 6L
进行二次酶解破乳，得到油脂回收率为69.56%，破乳
效果最好；而空白实验组的油脂回收率为30.91%，破
乳效果最差；Alcalase 2.4L和Protex 7L破乳效果处于
两者之间。不加酶的油脂回收率低于添加酶的油脂
回收率，结果表明蛋白酶能够破坏紫苏乳状液的稳
定性，对油脂的回收具有重要意义。因此，选择Protex
6L进行以下实验。
2.2.2 pH对二次酶解破乳油脂回收率的影响 由
图3可知，当pH小于9.5时，随着pH的增加，油脂回收
率逐渐增加；当pH为9.5时，油脂回收率最高，为
75.56%；pH在9.5以后，油脂回收率反而降低；当pH
为10时，油脂回收率最低。因此，最适酶解pH为9.5。
主要原因是Protex 6L的最适pH接近9.5，pH在9.5附
近时酶活高，酶对底物作用效果明显，油脂回收率
最高。
2.2.3 酶解温度对二次酶解破乳油脂回收率的影响
由图4可知，随着温度的升高，油脂回收率增加，当
温度为60℃时，油脂回收率最高，而后随着温度的升
高，油脂回收率反而逐渐降低。因为温度超过了
Protex6L的最适温度，导致酶活性降低，同时温度过
高会使酶变性，使酶的活性中心结构受到破坏，部分
或全部失去催化活性 [28]。因此，最适的酶解温度为
60℃。
2.2.4 加酶量对二次酶解破乳油脂回收率的影响
由图5可知，随着加酶量的增加，油脂回收率显著上
升，添加量达到2%时，油脂回收率最大；当添加量超
过2%后，油脂回收率变化不明显，趋于稳定。主要原
因是酶添加量增加，使酶与底物可以充分接触，酶能
成分 粗蛋白 粗脂肪 水分 灰分
质量分数（%） 23.05±0.03 40.53±0.17 17.40±0.09 4.35±0.28
表2 紫苏籽的主要成分
Table 2 Main components of the perilla frutescens seeds
图2 不同酶二次酶解破乳油脂的回收率
Fig.2 The econdary hydrolysis de-emulsification oil recovery
yield of different enzyme
70
60
50
40
30
20
10
0
油
脂
回
收
率
（
%）
Alcalase 2.4L Protex 6L Protex 7L 空白
酶种类
图3 不同pH对二次酶解破乳油脂回收率的影响
Fig.3 Effect of pH on the econdary hydrolysis de-emulsification
oil recovery yield
80
75
70
65
60
55
50
45
40
油
脂
回
收
率
（
%）
8.0 8.5 9.0 9.5 10.0
pH
编码
因素
x1 pH x2酶解温度（℃） x3加酶量（%）x4酶解时间（h）
-2 8.5 50 1.0 0.5
-1 9.0 55 1.5 1.0
0 9.5 60 2.0 1.5
1 10.0 65 2.5 2.0
2 10.5 70 3.0 2.5
表1 Box-Behnken实验设计
Table 1 Box-Behnken experimental design
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够渗透到脂质体膜内，并且酶对脂蛋白的分解作用
有利于油脂从油脂-蛋白的复合体中释放出来[29]。考
虑到经济效益，油脂回收率几乎接近的条件下，最佳
的加酶量选为2%。
2.2.5 酶解时间对二次酶解破乳油脂回收率的影响
由图6可知，当酶解时间少于1.5h时，油脂回收率随
酶解时间增加呈现快速上升趋势，变化较明显；而当
酶解时间高于1.5h时，油脂回收率随着时间的增长
反而逐渐降低，但变化较平缓。因为随着酶解时间的
增加，底物不断减少，酶解充分，但酶解时间过长，油
脂与空气长时间接触，会影响油的品质，而且时间长
能耗相对较高，从经济效益的角度考虑酶解时间不
宜过长，因此，综合考虑最适的酶解时间为1.5h。
2.3 响应面法对二次酶解破乳工艺条件的优化
运用Design Expert 7.1.1统计分析软件，在单因
素实验的基础上，采用响应面中心组合实验设计，研
究二次酶解破乳各酶解参数对考察指标的影响规
律，并得到二次酶解破乳的最佳条件。以二次破乳各
酶解工艺参数pH（x1）、酶解温度（x2）、加酶量（x3）、酶
解时间（x4）为自变量，以乳状液中油脂回收率为响应
值设计了四因素五水平的响应面分析实验，其因素
水平编码表见表1；响应面共设计了30个实验点，包
括24个分析因点和6个零点，响应面实验方案及结果
见表3。
2.4 方差分析
通过统计分析软件Design Expert 7.1.1对数据进
行多元回归拟合，对油脂回收率（y）与pH（x1）、酶解
温度（x2）、加酶量（x3）和酶解时间（x4）之间建立二次
响应面回归模型如下：y=85.04-0.76x1+1.04x2+0.061x3+
1.64x4-2.79x1x2-1.07x1x3+2.96x1x4-1.23x2x3+0.45x2x4-
2.31x3x4-2.61x12-2.15x22-1.20x32-5.70x42。
回归与方差分析结果见表4。
实验号 x1 x2 x3 x4 y 油脂回收率（%）
1 -1 -1 -1 -1 68.56
2 1 -1 -1 -1 66.14
3 -1 1 -1 -1 75.44
4 1 1 -1 -1 65.53
5 -1 -1 1 -1 75.28
6 1 -1 1 -1 72.28
7 -1 1 1 -1 79.07
8 1 1 1 -1 65.56
9 -1 -1 -1 1 67.12
10 1 -1 -1 1 81.14
11 -1 1 -1 1 78.53
12 1 1 -1 1 80.23
13 -1 -1 1 1 67.38
14 1 -1 1 1 75.89
15 -1 1 1 1 74.54
16 1 1 1 1 68.75
17 -2 0 0 0 78.14
18 2 0 0 0 74.20
19 0 -2 0 0 75.24
20 0 2 0 0 80.75
21 0 0 -2 0 80.45
22 0 0 2 0 83.15
23 0 0 0 -2 60.39
24 0 0 0 2 67.27
25 0 0 0 0 84.18
26 0 0 0 0 86.29
27 0 0 0 0 84.50
28 0 0 0 0 86.59
29 0 0 0 0 84.39
30 0 0 0 0 84.30
表3 Box-Behnken实验设计与结果
Table 3 Box-Behnken design and experimental results
图4 不同酶解温度对二次酶解破乳油脂回收率的影响
Fig.4 Effect of hydrolysis temperature on the
econdary hydrolysis de-emulsification oil recovery yield
80
75
70
65
60
55
50
45
油
脂
回
收
率
（
%）
50 55 60 65 70
酶解温度（℃）
图5 不同加酶量对二次酶解破乳油脂回收率的影响
Fig.5 Effect of enzyme dosage on the econdary hydrolysis
de-emulsification oil recovery yield
80
75
70
65
60
55
50
45
40
油
脂
回
收
率
（
%）
1.0 1.5 2.0 2.5 3.0
加酶量（%）
图6 不同酶解时间对二次酶解破乳油脂回收率的影响
Fig.6 Effect of hydrolysis time on the econdary hydrolysis
de-emulsification oil recovery yield
80
75
70
65
60
55
油
脂
回
收
率
（
%）
0.5 1.0 1.5 2.0 2.5
酶解时间（h）
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对该回归模型进行显著性检验，方差分析结果
见表4。从表4中可以看出，该模型一次项x4、交互项
x1x2、x1x4、x3x4和二次项x12、x22、x32、x42的影响极显著（p＜
0.01），一次项x2、交互项x1x3、x2x3的影响显著（p＜
0.05），其他项不显著，表明各因素对于油脂回收率
的影响不是简单的线性关系。该模型回归极显著（p＜
0.001），失拟误差不显著，并且R2=0.9659，R2Adj=
0.9341，说明该模型与实验拟合良好，自变量与响应
值之间线性关系显著，实验误差小，可以用此模型来
分析和预测水酶法提取紫苏油的结果。因此，上述二
次回归方程模型是合适的。由F检验可以得出因子贡
献率为：x4＞x2＞x1＞x3，即酶解时间＞酶解温度＞pH＞加
酶量。
2.5 响应面分析
应用响应面寻优分析方法对回归模型进行分
析，当酶解时间为1.6h，酶解温度为62.6℃，pH为9.4，
加酶量为1.9%，响应面最优值为85.524%±0.74%。
图7为各交互项的响应曲面图。由图7分析结果
可以看出：pH（x1）与酶解温度（x2），pH（x1）与加酶量
（x3），pH（x1）与酶解时间（x4），酶解温度（x2）与加酶量
（x3），加酶量（x3）与酶解时间（x4）的相互作用对油脂
回收率的影响。由此可知，在加酶量为1.0~3.0范围
内，加酶量对油脂回收率的因子贡献率虽然小，但其
与其他因素的交互作用对油脂回收率影响较大。
2.6 验证实验
在酶解时间为1.6h、酶解温度为62.6℃、pH为
9.4、加酶量为1.9%条件下进行3次平行实验，得到平
均油脂回收率为85.52%。响应值的实验值与回归方
程预测值吻合良好，说明该模型能够较好预测实际
变异来源 平方和 自由度 均方 F值 p值
模型 1516.11 14 108.29 30.38 <0.0001 极显著
x1 13.92 1 13.92 3.91 0.0668
x2 25.79 1 25.79 7.24 0.0168
x3 0.089 1 0.089 0.025 0.8767
x4 64.94 1 64.94 18.22 0.0007
x1x2 124.43 1 124.43 34.91 <0.0001
x1x3 18.45 1 18.45 5.18 0.0380
x1x4 139.71 1 139.71 39.20 <0.0001
x2x3 24.21 1 24.21 6.79 0.0199
x2x4 3.22 1 3.22 0.90 0.3568
x3x4 85.47 1 85.47 23.98 0.0002
x12 187.00 1 187.00 52.46 <0.0001
x22 127.35 1 127.35 35.73 <0.0001
x32 39.73 1 39.73 11.15 0.0045
x42 889.92 1 889.92 249. 68 <0.0001
残差 53.46 15 3.56
失拟误差 47.50 10 4.75 3.98 0.0703 不显著
纯误差 5.97 5 1.19
总和 1569.57 29
注：总回归的相关性系数（R2）为0.9659，决定系数（R2Adj）为
0.9341。
表4 回归与方差分析结果
Table 4 Variance analysis of the fitted regression model for
oil recovery yield
87
83.75
80.5
77.25
74Y
油
脂
回
收
率
（
%）
9.00
9.25
9.50
9.75
10.00
x1：pH
60.00
62.50
65.00
57.50
55.00
x2：酶解温度
87
83.75
80.5
77.25
74
9.00
9.25
9.50
9.75
10.00x1：pH
2.00
1.75
1.50
2.25
2.50
x3：加酶量
87
80.25
66.75
60
2.00
1.75
1.50
1.25
1.00x4：酶解时间
9.50
9.25
9.00
9.75
10.00
x1：pH
73.5
87
84
82
78
75
65.00
62.50
60.00
57.50
55.00x2：酶解温度
2.00
1.75
1.50
2.25
2.50 x3：加酶量
87
80.25
66.75
60
2.00
1.75
1.50
1.25
1.00
x4：酶解时间
73.5
2.00
1.75
1.50
2.25
2.50 x3：加酶量
图7 各交互显著项对紫苏油脂回收率影响的响应面图
Fig.7 Response surface of Each significant interaction effect
on oil recovery yield of perilla frutescens oil
a
b
c
d
e
Y
油
脂
回
收
率
（
%）
Y
油
脂
回
收
率
（
%）
Y
油
脂
回
收
率
（
%）
Y
油
脂
回
收
率
（
%）
205
Science and Technology of Food Industry 生 物 工 程
2013年第4期
紫苏油提油及破乳情况。
2.7 紫苏油脂肪酸分析
本实验得到的紫苏油呈淡黄色，澄清透明，具有
紫苏独特的香味。由图8及表5可知，对紫苏油脂肪酸
甲酯进行GC-MS分析，根据GC-MS联用仪获得质谱
信息经数据库检索与标准谱图对照，分析了肉豆蔻
酸、棕榈酸、硬脂酸、油酸、亚油酸、α-亚麻酸、花生酸
7种主要组分，利用面积归一化法分别对各种脂肪酸
的质量分数进行定量，结果表明，紫苏油脂肪酸的
质量分数分别为：肉豆蔻酸0.46%、棕榈酸9.38%、硬
脂酸6.81%、油酸22.11%、亚油酸12.23%、α-亚麻
酸53.10%、花生酸0.52%。
3 结论
利用响应面进行优化得出二次酶解破乳的最佳
条件为：Protex 6L酶解时间为1.6h，酶解温度为62.6℃，
pH为9.4，加酶量为1.9%，紫苏油脂回收率为85.52%。
得到的紫苏油呈淡黄色，澄清透明，具有紫苏独特的
香味。提取的紫苏油经脂肪酸分析得到7种脂肪酸，
质量分数分别为：肉豆蔻酸0.46%、棕榈酸9.38%、硬
脂酸6.81%、油酸22.11%、亚油酸12.23%、α-亚麻酸
53.10%、花生酸0.52%。
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图8 紫苏油气相色谱图
Fig.8 Gas-phase chromatogram of perilla frutescens oil
15
14
13
12
11
10
9
8
7
6
5
4
3
2
1
强
度
（
×1
06 ）
20.00 24.00 28.00 32.00 36.00 40.00
时间（min）
编号 化学名称 类型
相对含量
（%）
相似度
（%）
1 十四烷酸甲酯 肉豆蔻酸 C14:0 0.46 95
2 十六烷酸甲酯 棕榈酸 C16:0 9.38 99
3 十八烷酸甲酯 硬脂酸 C18:0 6.81 99
4 （Z）-9-十八碳
烯酸甲酯
油酸 C18:1 22.11 99
5 十八碳二烯酸 亚油酸 C18:2 12.23 99
6 十八碳三烯酸 α-亚麻酸 C18:3 53.10 99
7 二十烷酸甲酯 花生酸 C20:0 0.52 98
表5 紫苏油中主要的脂肪酸种类及含量
Table 5 Main fatty acid compositions and contents of
perilla frutescens oil
（下转第211页）
206
生 物 工 程
2013年第4期
Vol . 34 , No . 04 , 2013
作方便，成功地排除了食醋中蛋白、色素等杂质对有
机酸HPLC分析的干扰。
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（上接第200页）
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实验方法的稳定性。
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211