免费文献传递   相关文献

异叶青兰对高原实验家兔红细胞作用的形态计量学研究



全 文 :19 9 4年
第 4期
青海师范大学学报 (自然科学版 )
Jo u r na lo fQ ing ha iNo r ma U l n iv
e rs ity ( Na tu ra lS e ie ne e )
19 9 4
No
.
4
异叶青兰对高原实验家兔红细胞
作用的形态计量学研究
王索安 马志军 王晋青
(青海医学院 )
陆秋霞 李玉兰
(青海省人民医院 ) (青海师范大学 )
摘 要 本文应用扫描电镜技术及形态计量学方法 ,对平原移居高原 (海拔 3 9 0 0 米 )实验家兔外周血红细胞
进行了研究 。 实验分为平原组 , 高原给药组 ,高原对照组 。 结果发现 : 高原给药组家兔红细胞的直径和体积均小
于高原对照组 ,有显著意义 , (P < 0 . 01 ) 。 高原给药组的红细胞体积与高原对照组相 比 , 平均减少 8 . 4 %左右 . 高
原给药组红细胞直径 (亨 )与高原对照组红细胞直径 (x )呈正相关 , Y 一 0 . 58 , P < 0 . 05 。 另外高原给药组红细胞 直
径 (至)与红细胞计数 ( x )也呈正相关 , r 一 0 . 67 , P < 0 . 05 。 结果提示异叶青兰不仅可降低由缺氧 引起的红 细胞体
积增大 , 而 巨还可降低红细胞的数量 ,从而降低血液的粘滞性 ,改善血循环 。
关键词 红细胞 高原 扫描电镜 形态计量学 异叶青兰
异叶青兰又名白花夏枯草 ,在我省分布广资源丰富 ,几年来省 内外学者对异叶青兰的研究
发现 , 该药对低氧环境下动物组织的某些器官和细胞有明显的保护作用川川 , 初步认为该药是
一种比较有前途的抗低氧中草药 。 但该药对高原缺氧的骨髓形态学作用 , 尚未见报导 。 我们在
进行高原实验动物研究的同时 ,增设了给药组 ,应用扫描电镜及形态计量学等方法对红细胞直
径 ,体积 ,及红细胞形态等进行了研究 。 旨在探讨异叶青兰对缺氧状态下骨髓造血的影响 ,为探
讨高原红细胞增多症 (简称高红症 )的发病机理及防治提供资料 。
l 材料与方法
1
.
1 实验对象 选用西安产 (海拔 3 97 米 )纯种大耳 白兔 ,随机分为平原组 (7 只 ) ,高原给药组
( 7 只 ) ,高原对照组 ( 2 1 只 ) 。
DOI : 10. 16229 /j . cnki . i ssn1001 -7542. 1994. 04. 008
青海师范大学学报( 自然科学版 ) 14 9 9年
实验场地 青海果洛州大武地区( 海拔 0 0 3 9米 )和西安( 海拔 397米 )。
1
.
3血液采集的途径及时间 采血的部位 为耳缘静脉及下腔静脉 ,平原组 4 只在西安采血 ,高
原给药组及高原对照组随机每次各选 5 只在高原实验现场采血 ,高原组采集血样周次分别为
第 1 , 3 , 5 , 8 周 。
1
.
4 实验方法 将采集的血液 0 . 1 毫升滴入含 4%戊二醛的等渗磷酸缓冲液 4 毫升中 ,摇匀固
定 ,待细胞 自然沉淀后换等量固定液一次 ,按常规制备红细胞扫描电镜样品 , 日立 s 一 52 0 型扫
描 电镜观察 ,随机选择视野照相 ,对扫描 电镜照片的红细胞进行测量 ,测量的内容包括红细胞
直径 ,红细胞 内凹区直径以及厚度 。 直径测量采用费莱特法 。根据一轮廓面的平均费莱特直径 ,
常以两个互相垂直的随机方向上的费莱特直径平均估计川 。 所测得红细胞平均体积是根据扫
描和透射 电镜所测得的红细胞厚度结合所测得的 R B C 直径 , R B C 内凹区直径的数值 ,运用古
尔金体积公式 V 一 2叮 A 所计算得出 aj[ 。 对所测得的数据进行形态计量学和统计学处理 。
2 实验结果
2
.
1 红细胞直径的变化 高原第 3 , 5 , 8 周给药组与同周的高原对照组相 比 , 红细胞直径变
小 , (P < 0 . 0 1 ) 。 给药组红细胞直径砰 )与高原对照组红细胞直径 ( X )呈正相关 , r 一 0 . 58 , P < .0
05
。 结合我们前期所测得的给药组家兔外周血红细胞计数发现困 ,高原给药组红细胞直径 (亨)
与红细胞计数 ( X )也呈正相关 , r ~ 0 . 67 , (表 1 图 , 图 , ) 。
2
.
2 红细胞平均体积的变化 高原第 3 , 5 , 8 周给药组与同一周的内高原对照组相 比 ,体积明
显变小 , 依次分别降低 8 . 7% , 7 . 9% , 8 . 8% ,平均减少 8 . 4左右 , (表 l ) 。
2
.
3 红细胞内凹区直径 (内径 )的变化 高原第 3 , 5 , 8 周给药组与同一周内对照组相 比 ,红细
胞 内凹区直径 (内径 )变小 , 有显著意义 , P < 0 . 0 1 。 (表 2 ) 。
2
.
4 红细胞的形态与细胞膜的变化 正常红细胞大部分呈光滑 ,大小相似的双凹 圆盘形 。 而
在缺氧的情况下患者的红细胞不少失去了双凹圆盘结构 ,变成大小不等 ,边缘不规则 ,表面凹
凸不平的异型红细胞 ,这些异型红细胞在正常人或动物中虽可 见 ,但比较少 e[, 7 , ` 。 , “ 〕。 平原组实
验家兔红细 胞呈 光滑 , 大 小相似 的双 凹圆盘形 , 红细 胞膜平滑 , 异型 红 细胞 出现 的 比较
少呱片 ` 〕 , 高原对照组红细胞随着时间延长 , 有直径变大 , 内凹区相应增大变薄的趋势 ,异型红
细胞较多见 ,细胞为椭圆形 ,厚薄不均 , 形状不规则 , 呈扭曲状或棘形 ,但红细胞表面仍较平滑 ,
未见有红细胞表面膜蛋白颗粒出现大小不一 , 分布不均的现象 。 〔照片 ’ · 3〕 。 高原给药组与高原对
第 4期 王索安等 :异叶青兰对高原实验家兔红细胞作用的形态计量学研究 3 4
照组相 比 ,也有 _ _L述异型红细胞的出现 ,但 明显少于对照组 ,而且红细胞膜较平滑 。 滩片 ` t 5 6习。
次0 .8 |次6 .卜|次卜.0|次对.的
洲0 .èd旧0 .è乌
望黔塔耸

狱冤狱
寸对.囚制哪01的卜.囚+1阅0洲0
.闪制囚卜.T?囚荆的旧.N价卜.囚制洲89闪60 .1制对寸囚工们.N+I的C .T洲.囚荆哪卜.gNO卜.1州旧0闪
ǎ。三二è

的一.0荆9对1 .0州旧60 .州9阅 旧ū .0州的囚洲 旧.0泪9的寸洲.0州瞬帅60 .+9瞬O一.0+旧一.0+叶价
娜日戚贬蓄碑烹岔念公叹
|
零黔
哪公戚电七国
|
华d
, ~ 一
ǎ日立à
仪侧吵é国
狱狱冤狱琪
d
澳彩暴碱炯ù展
|

6哪!O+1闪?旧卜娜
.
0洲9的旧卜阅.0洲囚的旧即寸.0+l6旧O对.0荆叶囚旧囚对.0制哪旧O寸.0制囚曰卜叶.0荆寸囚
田 l e
旧对.0+1们6 .寸
ǎ已公
以尽侧é国州
邢彩本编耸那把钾m仆盈思翻票眨友口聆烈探职匹框
9曰工对6的01O6O曰T们01胜 口闷 口习0 0 0 勺ǎ口à姻铸聆
貂掀。找?黯歉。以?呢翼软叹?、程掀呼?啊哥
戚吸十

曰邢
青海师范大学学报 (自然科学版 ) 19 94 年
表 2 高原给药组和对照组红细胞内凹区直径 (劝扫描电镜统计表
N #Z(件 m )P 值
平原组 2 . 30 0.4 4
高原一周 给药组对照组
0 1 3
0 1 5
2
.
50
2

2 7
0
.
4 3
0
,
2 9
试狱
高原三 周 给药组对照 组
7 5
丫丫
2
.
3 4
2
.
5 6
0
.
2 5
0
.
3 0
试减
高原五周 给药组对照组
7 2
8 1
2 7
5 3
0
.
3 5
0
.
2 8
火试
高原八周 给药组对照组
6 9
8 7
2
.
2

3 0
6 0
0
.
3 0
0
.
2 6
狱试
N
二 代表动物数
N 代表所测 红细胞数
P 值— 周内两 组比较
狱 P < 0 . 0 5
洲灭 P < 0 . 0 1

尺BC 直径
( 井斑 夕
R B C 计数 ( X ,O咧 )
图 , 高原给药组红细胞直径 ( Y )与红细胞计数 ( X) 直线相关图
第 4期 王索安等 :异叶青兰对高原实验家兔红细胞作用的形态计量学研究 4 5
。 手琢组
` 给药组
O
r… l`|. we卜 11. 1卜 L wel| lr l8 56刘蛇知8 4丫给药组又 B C
直径 (火 n I)
峨 , 5 0 5 . 1 5` 2 5 . 3 5滩 5 . 5 5石 5 7 2
对照妞又BC直任 (岁爪 )
图 : 高原给药组 ( Y )与高原对照组 X( )红细胞直线相关图
3 讨论
3
.
1 在研究中 ,我们发现从第三周开始 ,高原对照组与平原组相 比 , 红细胞直径 , 内凹区
直径及平均体积变大 。 不论动物或人在高原上适应 良好的血液学标志应表现为红细胞的适度
增多 , 因过度的红细胞数 目增多及体积变大必将导致血液粘滞度增高 ,血流缓慢和循环阻力增
加 ,反使血氧结合量减低 , 又可刺激红细胞增生 , 从而形成恶性循环 ; 因此有人提 出 “ 最适红细
胞压积 ”概念 ,多数学者认为最适红细胞的压积是 50 一 52 % 图 。 而高原给药组与同一周高原对
照组相 比 ,红细胞直径 , 内凹区直径及平均红细胞体积 明显小于高原对照组 ,并发现高原给药
组红细胞直径 (亨)与给药组红细胞计数 (劝也呈正相关 , 即高原给药组红细胞体积与红细胞计
数增长幅度均低于高原对照组 , 由此看出异叶青兰不仅可降低由缺氧引起红细胞数 目的增高 ,
而且可降低红细胞的体积 ,其结果必然可降低血液的粘滞性 ,改善血循环 。
3
.
2 异叶青兰在我省资源丰富 , 目前以国内研究较活跃 ,许多学者均认为此药是 比较有
前途的抗低氧中草药 ,关于该药的作用机理 ,有人认为主要作用在细胞的线粒体上 ,亦有人认
为在于祛除过多的自由基上 , ’ 〕由于我们后期对骨髓造血系统的研究还未完成 , 所以还不能过
早给药物的作用机制下结论 ,但我们认为可能是该药改善了整个机体组织及细胞的缺氧状况 ,
或直接作用于骨髓造血系统而引起红细胞体积及数 目的降俘。
3
.
3 异型红细胞的增多 ,可使其血红蛋白对氧的亲和力减弱 , 仁7〕 。 高原给药组与高原对照
组相 比 ,虽然也有异型红细胞的出现 ,例如不规则或扭 曲状 , 棘形红细胞等 , 但明显少于对照
组 ,结果提示异叶青兰可能通过降低异型红细胞的数目 ,来增强其血红蛋白对氧的亲和力 。
(该研究属省科委 ,省 卫生厅 “ 八五 ”攻 关项 目 ) 。


4 8青海师范大学学报 (自然科学版 )1 9 9 4年
S TU D YO F T HE E F FEC TO F D RAC C O E PA H LUM HE E TO R P H YL LUM
E B N T HO N T HE E X PE RE ME N TA 工 RA I B B TS A T HIG H
A LI T TU DE丫 I V T HMO R P HO ME T RIC
H乙 n g声及湘双” 乙 e t砚
Q (i n gha i M
e i de a lC o l l
e ge )
A S B T RAC T
T h
e Pe ri Phe ra l b lo o de ry t h ro ey te s o fa ri b b ts w hie hw
e re m o ve d fo rm P la i n to hi h P l ga te a u
(9 3 0 0m )w
e e s r tu die d by m e a s no E f 5M (s e a n ni nE gl
e e to r nMie ros e o P七 )a n dm o r Pho m e ta rie
m e t he d
.
T h
e e x Pe rim
e n ta la ri b b ts w e re i d vi de di n to t h re e gro u Ps : t he P la i n go u r P
,
t h
e Pl a t e a u 一 h e r b
g r o u P a n d th e P l a t
e a u 一 e o n t r o l g r o u P . T h e r e s u l t s h o w e d th a t th e e r y t h r o e y t e F e r e t d i a m e t e r a n d v o l-
u m e o f t h
e
P l a t
e a u 一 h e r b g r o u P w a s s m a l l e r t h a n t h a t o f P l a t e a u 一 e o n t r o l g r o u P ( P < 0 . 0 1 ) T h e v o l -
u m e o f t h e
e r y t h r i e y te s o f p l a t e a u 一 h e r b g r o u p w e r e d e e r e a s e d 8 . 4% i n a v e r a g e t h a n t h a t o r t h e
P l a t e a u 一 e o n t r o l g r o u P . T h e e r y t h o e y t e F e r e t d ia m e t e r o f th e Pl a t e a u 一 h e r b g r o u P w e r e Po s i t i v e l y r e l a -
t i v
e t o t h e P la t
e a u 一 e o n t r o l g r o u P , ( r = 0 . 5 8 , P < 0 . 0 5 ) , a n d th e e r y t h r o e y t e F e r e t d i a m e t e r a n d t h e
e r y t h r o c y t e ` 5 C o u n t o f P l a t e a u 一 h e r b g r o u P w e r e Po s i t iv e l y r e l a t iv e a s w e l l , ( r = 0 . 6 7 , P < 0 . 0 5 ) . x t 15
e o n s kl e r e d t h a t t h e i n f l u e n e e o f th e h e r b a r e b o th i n t h e v o lu m e a n d th e n u m be r s o f e r y t h r o e y t e
,
w h i e h
n o t o n l y d e e r e a s e s e r y t h r o e y t e ) 5 e n la r g e d v o l u m e e a u s e d b y h y P o x i a b u t a l s o r e d u e e s t h e n u m be r o f
e r y
-
t h r oc y t e ; a n d it 15 a ls o s h o w e d t h a t t h e h e r b r e d u e e s t h
e
b lo o d v i s e
o u s a n d im P r o v e s th e b l o od e ir e u l a to
-
t y
·
K e y W o r d s
e r y t h r o e y t e
,
P l a te a u
,
5 E M
,
m o r Ph o m e t r i e
,
d r a e o e e Ph a l u m h e t e r o P h y l lu m b e n t h