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火鹤花的组织培养



全 文 :2011年 第 46 卷 第 7 期 生 物 学 通 报 51
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多次旋开目镜,造成目镜松动、脱落,甚至损坏。
3.4 避免了因目镜和物镜放大倍数的改变,需要
重新校正目镜测微尺的烦琐操作。 基于以上的优
点,激发了学生的实验兴趣,提高了实验效果。
主要参考文献
1 黄秀梨 ,辛明秀 .微生物学实验指导 .第 2 版 . 北京 :高等教育
出版社 ,2008:40—42.
2 李洪臣,杨秀艳 .使用血细胞计数板测定微生物数量实验的
改进 .生物学通报,2007,42(70):22.
(E-mail:cz-lhc@163.com)
火鹤花(Anthurium scherzerianum Schott Com.)
为天南星科 ,花烛属 ,别名卷尾花烛 、红苞芋 、安
祖花、 佛焰苞, 原产地哥斯达黎加、 危地马拉等
地,多年生草本花卉,属高档观花类花卉。 它的繁
殖可采用分株、切茎和播种等多种方法。现国内对
火鹤花的授粉结实尚有困难, 所以无法满足商业
性种植对种苗的需求,如要批量生产,则可进行组
织培养育苗, 以争取较快获得经济效益和社会效
益。另外火鹤花组织培养增殖阶段增殖系数很高,
苗量大, 利用此优点可以为高中学生提供大量组
织培养实验材料,效果极佳。
1 材料与方法
1.1 材料 火鹤花的叶片。
1.2 方法
1.2.1 火鹤花外植的获取 取幼嫩的叶片, 用毛
笔蘸洗洁精刷洗,然后把叶片放入玻璃瓶内用纱窗
布扎瓶口,放在流动的自来水下冲洗 10 min 后,移
入超净工作台或无菌箱内,将叶片转入经高压灭菌
的玻璃瓶内用无菌水冲洗叶片 2~3 次, 再用 75%
的乙醇处理 30 s,然后用 0.1% HgCl2灭菌 7 min 并
不时地轻轻搅动, 可按情况及经验加入吐温 1~15
滴,吐温多,灭菌时间可适当缩短。 倾去 HgCl2 溶
液 ,用无菌水冲洗 5 次 ,每次不少于 8 min,切取
0.5 cm×0.5 cm 大小的叶片接种在诱导叶片的初代
培养基中,经过一段时间培养叶片表面出现愈伤组
织。 经培养 6~8 周后侧芽分化成丛生苗,然后移植
到继代培养基进行增殖,每个继代周期为 45 d。
1.2.2 火鹤花无菌苗的继代繁殖试验 取由火
鹤花叶片诱导分化出的丛生芽 , 分别接种在含不
同浓度的 6-BA 和 IBA 的 MS 培养基上培养,45 d
后进行统计分析。
1.2.3 火鹤花无菌苗的生根试验 取 2~3 cm 高
的火鹤花再生苗 ,接种在附加不同浓度 IBA 的
1/2 MS 培养基中,观察根发生情况。
1)培养基处理:上述 MS 培养基含蔗糖 3%,
琼脂 0.7%,pH 为 5.8。
2)培养条件:温度(25±1)℃,每天光照 14 h,
光照强度 2 000 lx。
2 结果分析
2.1 火鹤花叶片愈伤组织的诱导及分化 试验结
果表明, 不同激素组合及浓度配比的培养基对叶
片外植体愈伤组织的诱导有不同影响, 并发现外
植体在愈伤组织诱导培养基上可进一步分化出健
康茁壮的丛生芽,培养 6~8 周后的结果见表 1。 通
过分析比较得出 , 培养基 1/2MS+6-BA 2 mg / L+
NAA 1 mg / L 为火鹤花的最适诱导及分化培养基。
火鹤花的组织培养
耿明清 (辽宁鞍山广播电视学校 辽宁海城 114200)
摘要 对火鹤花进行组培实验。 1)用幼嫩的叶片和 1/2MS 培养基进行初代培养,继代培
养培养基又恢复正常的 MS,此点与以往的组培初代培养培养基的配方有区别。 2)初代启动培
养时间(6~8 周)和继代培养(45 d)周期很长与其他植物组培也有所区别。 3)火鹤花因为极易
生根且叶片革质不易失水,所以炼苗极其容易。 实验证明,火鹤花的组培苗驯化成苗率达 95%
以上,使得火鹤花苗完全可以工厂化生产。
关键词 火鹤花 叶片 组培
中国图书分类号:Q813.1+2 文献标识码:B
52 生 物 学 通 报 2011 年 第 46 卷 第 7 期
培养基编号 基本培养基类型 6-BA(mg / L) NAA(mg / L) 芽萌动状况 萌动时间 /周
1 1/2MS 2 0.5 1 个有萌动现象 8
2 1/2MS 2 1 1个有萌动现象 8
3 1/2MS 2 2 1个有萌动现象 8
4 1/2MS 0.5 1 2个有萌动现象 8
5 1/2MS 1 1 2 个有萌动现象 8
6 1/2MS 2 1 4 个有萌动现象 8
表 1 火鹤花叶片愈伤组织初代启动培养基的筛选
培养基编号 6-BA(mg / L) IBA(mg / L) 统计数据
A1 0.1 0.05 株高约 2 cm
A2 0.2 0.1 株高约 6 cm
B1 0.5 0.3 株高约 1 cm
B2 0.5 0.4 株高约 0.5 cm
C1 1.0 0.5 萌动 ,形成愈伤组织
C2 2.0 1.0 形成愈伤组织
为它能在很短的时间内诱导出现芽的分化。 继代
增殖培养用 MS+6-BA 0.2 mg/L+IBA 0.1 mg/L 培
养基效果最好 , 壮苗生根培养同样 1/2MS+IBA
0.3 mg/L 培养基效果理想。 火鹤花的叶片非常幼
嫩,在浓度过大的培养基中培养叶片 ,容易导致嫩
叶片中毒变黑死亡 ,从而造成实验失败 。 而采取
1/2MS 培养基做为初代培养的培养基, 取得了令
人满意的良好效果, 同时也为规模化生产体系的
迅速建立奠定了很好的基础。另外,由于火鹤花初
代培养启动周期比较长, 不要在短期内看不到效
果就把培养材料废弃, 随着时间的增长会慢慢地
分化出来。 足够的耐心是火鹤花培养成功另一大
因素。
主要参考文献
1 沈国军 ,徐祖荣 ,诸常青 . 火鹤花组织培养繁殖初探 . 内蒙古
科技与经济 ,2006,(11):90—91.
2 莫磊兴 ,李小泉 ,林贵美等 . 火鹤花离体培养育苗技术研究 .
西南农业学报 ,2003,(1):126.
3 崔月羚 ,卢庆延 , 徐迎春 . 火鹤花离体培养无菌体系建立技
术的研究 .山东农业科学 ,2007,(2):26.
4 郭淑华 . 火鹤的植物组织培养 . 广西农业科学 , 2004,35(5):
355—357.
5 苏荣存,薛玉剑,张红等 .火鹤花的组培与快繁研究 .北方园
艺 ,2006,(2):121.
(E-mail:mingqing064@163.com)
2.2 继代增殖培养 将 2~3 cm 长的无菌芽从诱
导成功的原茎段上切下 ,再分别将其切成 1~2 cm
的带 1~2 个腋芽的茎段 , 转入继代增殖培养基中
进行培养 ,45 d 后统计结果如表 2。 从表 2 分析比
较得出 ,培养基 MS+6-BA 0.2+IBA 0.1 为火鹤花
的最适增殖培养基。
表 2 火鹤花继代增殖培养基筛选
2.3 壮苗生根培养 将生长健壮、 高 2~3 cm 的
无根幼苗转入生根培养基中,15 d 后统计结果如
表 3。 从表 3 可以看出,3 种培养基 30 d 后茎均
有生长,且 3 种培养基中外植体均能生根 ,叶面积
增大, 经观察比较,B3 培养基 1/2MS+IBA 0.3 在
壮苗同时可以达到较好的生根效果,株高、生根条
数、平均长度以及根的生长状况都有较优的表现。
3 结论与讨论
在初代培养之前笔者进行大量资料查阅 ,得
知大多数火鹤花的组织培养初代培养采用 MS 培
养基, 通过实验得知初代培养采用 1/2MS 培养基
效果更好。 实验结果表明 1/2MS+6-BA 2 mg / L+
NAA 1 mg / L 做为初代培养的培养基效果最好 ,因
表 3 火鹤花试管苗生根培养基筛选
培养基编号 IBA/(mg / L) NAA/(mg / L) 株高(cm) 生根数目(条) 根生长状况 平均根长 (cm)
A1 0 0.01 6 长势中 2 根为白色 2
A2 0 0.02 4.5 长势弱 3 根有分枝 ,初为白 1.5
A3 0 0.05 3.5 长势中 2 其中 1 条根有分叉 2
B1 0.1 0 3.5 长势弱 2 短粗根 0.5
B2 0.2 0 4.5 长势弱 3 - 0
B3 0.3 0 6 长势旺盛 7 根多分叉 ,顶端有微黄色小突 2
C1 0.1 0.01 1.5 长势弱 2 - 0
C2 0.2 0.03 叶片微黄 1 - 0
C3 0.3 0.05 下部叶片发黄 0 - 0