全 文 ：·58·(总 ) 广西中医药 2007年 2月第 30卷第 1期
蒲葵子的含药血清体外抗肿瘤作用的实验研究
曾春晖 杨 柯 郑作文 广西中医学院 530001 南宁市明秀东路 179号
摘 要 目的:观察蒲葵子的含药血清体外抗肿瘤作用。方法:采用 MTT法 ,观察蒲葵子提取物的含药血清
对肉瘤细胞(S180)和肝癌细胞(H22)增殖的抑制作用。结果:蒲葵子提取物的 20%含药血清在体外对 S180细胞和
H22细胞有明显的抑制作用 , 抑制率分别为 41.15%、 47.43%。结论:蒲葵子含药血清能抑制 S180肉瘤细胞和
H22肝癌细胞的增殖 。
关键词 蒲葵子;肉瘤细胞 S180;肝癌细胞 H22;抗肿瘤作用;血清药理学
中图分类号:R285.5 文献标识码:A 文章编号:1003-0719(2007)01-0058-02
蒲葵 Livistona chinensis R.Br.为棕
榈科植物 , 药用叶 、种子或根 。其性平味
淡 、甘涩 , 具有止血 、抗癌等功效 ,主治外
伤出血 , 血崩等 [1 ] 。蒲葵子的成分为酚
类 、还原糖类 、鞣质及甘油三酯 [ 2 ]。有资
料 [3 ]记载 “葵树子抗癌” , 但尚未见相关
试验研究报道 , 故笔者对蒲葵子提取物
含药血清的抗肿瘤作用进行初步研究 ,
现报道如下 。
1 实验材料
1.1 细胞 肉瘤 S180细胞(广西中医药
研究所惠赠);肝癌 H22细胞(广西民族医
院惠赠);以上瘤株均于动物身上以腹水
形式传代保种 。
1.2 动物 昆明种小白鼠 , 体重 22 ～
26g , 雌雄兼用 , 由广西中医学院实验动
物中心提供 , 合格证号:桂医动字第
11004号。
1.3 药物 蒲葵子经药用植物教研室
韦松基副教授鉴定为棕榈科植物蒲葵
Livistona chinensis R.Br.的干燥种子 , 蒲
葵子粗提取物由本院中药化学教研室提
供 。
1.4 试剂 RPMI 1640培养基 (GIBCO
公司产品 , 批号:1243098);新生牛血清
(NBS , 杭州四季青公司 , 批号:050910);
MTT(北京拜尔迪生物公司分装 , Amresco
0793);二甲基亚砜[ DMSO ,生工生物工程
(上海)有限公司 ,批号:54186] 。
1.5 器材 二氧化碳培养箱(美国 For-
ma公司);倒置显微镜(德国 Leica公司);
酶标仪 (奥地利 Sunrise公司);吉尔森微
量移液器 (法国 Pipe tman公司);BDX-
35BI 型座式自动电热压力蒸汽灭菌器
(上海申安医疗器械厂)。
2 实验方法与结果[ 4 ]
2.1 S180细胞 、 H22细胞体外培养 分
别取接种后第 8天的瘤源动物 , 颈椎脱
臼处死 ,用 75%酒精浸泡 ,于超净工作台
中用一次性注射器抽取 1ml 腹水置于
4ml不含血清的 RPMI 1640溶液中 。滴管
冲吸均匀 ,离心(2 000rpm , 10min),重复 2
次 , 最后将细胞重悬于含 10%新生牛血
清的 RPMI 1640培养液中 , 制成细胞悬
液 。台盼蓝拒染 , 计数活细胞 , 要求活细
胞达 95%以上 。用含 10%新生牛血清的
RPMI 1640培养液将 S180细胞 、H22细胞悬
液稀释为 1×105个/ml后接种于 96孔培
养板 ,100μl/孔 ,平行设空白对照孔(只加
培养液 , 不加细胞)。接种后置于 37℃,
5%CO2的二氧化碳培养箱中预培养 24h ,
然后进行以下体外实验 。
2.2 含药血清的制备[ 5] 取小鼠 10只 ,
体重 22～ 26g ,雌雄兼用 。分为 2组:空白
血清组 (灌肠给予生理盐水), 蒲葵子提
取物血清组(按每次 20g生药/kg剂量灌
肠给药)。每天给药 2次 ,连续 3天 ,末次
给药后 1h , 摘眼球取血 , 一鼠一管 , 离心
分离血清 , 56℃灭活 30min。分别用不含
血清的 1640培养液稀释成 40%浓度 , 分
别过滤 , 4℃保存备用 。
2.3 含药血清对肿瘤细胞的抑制作用
取含药血清加入已进行体外预培养 24 h
肿瘤细胞的 96孔培养板中 ,每鼠 3孔 ,含
药血清终浓度为 20%。并用同浓度空白
血清作对照 。继续培养 48h , 然后加入
0.5%MTT溶液 ,10μl/孔 ,继续培养 4 h。
2 000 rpm离心 15min , 弃去上清液;每孔
加入 200μl DMSO ,轻振 10min后在 550nm
波长处用酶标仪测OD值 。应用 SPSS14.0
统计软件进行组间 t 检验 , 并按以下公
式计算抑制率 。结果见表 1。
抑制率%=(空白血清组 OD值均数
-蒲葵子提取物血清组 OD值均数)/空
白血清组 OD值均数×100%。
含药血清组OD值 空白血清组OD值 抑制率%
S180细胞 0.1825±0.01558 ① 0.3101±0.09551 41.15%
H22细胞 0.4138±0.07926 ① 0.7871±0.2568 47.43%
表 1 含药血清对肿瘤细胞的抑制作用 (-x±s , n=5)
注:与空白血清细胞组比较 , ①P<0.05
结果显示 :蒲葵子提取物灌胃给药
后 , 分离的含药血清对 S180细胞和 H22细
胞均有明显抑制作用 。 20%含药血清对
其抑制率分别为 41.15%、47.43%, 显示
出较好的抑瘤活性 。
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3 讨 论
恶性肿瘤是人类最主要的死亡原因
之一 ,治疗难度大 , 且发病率一直呈上升
趋势 , 据世界卫生组织预测 , 至 2020年
随世界人口达 80亿 , 将有 2 000万新发
癌症病例 , 其中死亡人数将达 1 200万 ,
而其中大部分将发生在发展中国家[6 ] 。我国
肿瘤引起的死亡率在所有病因中占
17.9%, 居第 2位 , 且发病率呈上升趋
势 。目前的治疗手段以手术 、放疗、化疗
为主 , 手术多适用于早期癌瘤患者 , 放
疗 、化疗只对敏感瘤种有效 ,但同时又会
出现严重的毒副反应和后遗症 , 甚至造
成严重的医源性疾病而危及生命 , 因此
中草药的抗癌作用越来越受到重视 。
中药血清药理学是指在动物经口服
给药后一定时间采血分离血清 , 用此含药
血清进行体外实验的一种实验方法[7 ] 。这
种新的实验方法可排除在体外实验中各
种干扰因素的影响 , 比较接近药物在体
内环境中产生药理效应的真实过程 。笔
者利用血清药理学方法 , 研究蒲葵子在
体外对 S180肉瘤 、H22腹水型肿瘤增殖的
抑制作用 , 结果表明蒲葵子含药血清有
良好抗肿瘤作用 , 提示蒲葵子可能在体
内对肿瘤具有抑制作用 , 我们将进一步
对肿瘤移植到动物体内进行体内抗肿瘤
试验 。
参考文献
1 江苏新医学院编 .中药大辞典 (下
册).上海:上海人民出版社,1977.2459.
2 广州市药检所 .农村中草药制剂技
术 .北京:人民卫生出版社 , 1971.250.
3 广州部队后勤部卫生部编 .常用中
草药手册 .北京:人民卫生出版社 ,
1969.772.
4 杨 柯 , 曾春晖 , 李玲芝 .广西藤茶
提取物 TTF 体外抗肿瘤作用实验研
究 .中华现代中医学杂志 , 2006 , 2
(1):11 ～ 14.
5 孟 李 ,王宁生 .含药血清的制备方
法研究 .中药新药与临床药理 ,
1999 , 10(5):290 ～ 292.
6 Eaton L.World cancer rates set to dou-
ble by 2020.BMJ , 2003 ,326:728.
7 赵万红 , 曹永孝 , 袁泽飞 .中药血清
药理学的方法学探讨 .中药新药与
临床药理 , 2002 , 13(2):122 ～ 124.
(2006-09-07收稿/编辑 陈明伟)
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毛果算盘子与算盘子的药材形
态极为相似 ,难以鉴别 。本文对两种
算盘子的根 、茎 、叶组织结构及粉末
特征进行研究 , 为临床应用和进一
步开发利用提供鉴别依据。
1 毛果算盘子
毛果算盘子 Glochidion erio-
carpum Champ.exBenth.为大戟科植
物 , 别名毛七公 、漆大伯 、两面毛。
全株清热解毒 , 祛湿止痒 。主治生
漆过敏 , 稻田皮炎 ,皮肤瘙痒 ,荨麻
疹 , 湿疹 , 烧伤 , 乳腺炎 , 急性肠胃
炎 ,痢疾 [1]。
1.1 组织结构
1.1.1 根横切面 木栓层由 4 ～ 5
列细胞构成;皮层窄 , 由 2 ～ 3列细
胞构成;韧皮部较宽;形成层不明
显;木质部宽广 ,导管大 ,多单个散
在。木射线由 2 ～ 3列细胞构成 ,中
央具较小髓部 。(图 1)
1.1.2 茎横切面 表皮细胞 1
列 ,外具薄角质层 , 下方具木栓层 ,
由 4 ～ 5列细胞构成;皮层较宽 ,由
5～ 6列细胞组成;韧皮部较宽 , 外
侧具纤维束 , 成环状排列;形成层
不明显;木质部较宽 ,导管少 ,多单
个散在;射线由 2～ 3列细胞组成;
髓部较窄 。(图 2)
1.1.3 叶横切面 表皮细胞 1列;
外具众多由 4 ～ 5个细胞构成的短
而粗的非腺毛;栅栏组织细胞 1列 ,
圆柱形;海绵组织细胞间隙大;主脉
歪斜 ,主脉维管束呈半月形 ,韧皮部
外侧有一圈明显的纤维束鞘;形成
层不明显;木质部导管多单个或2～
3个纵向排列成行。(图 3)
1.2 粉末特征 ①根 、茎 、叶粉末
呈黄褐色;非腺毛粗大 ,由 3～ 4个细
胞组成 ,直径 25～ 32μm。②导管主要
为孔纹和梯纹导管 , 直径18 ～
35μm。③叶表皮细胞呈波浪状 ,气孔
毛果算盘子与算盘子的
显微鉴别
韦松基 广西中医学院壮医药学院 530001 南宁市明秀东路 179号
陈建霞 韩剑平 广西中医学院药学院 2006届毕业生 530001
关键词 毛果算盘子;算盘子;显微鉴别
中图分类号:R282.5 文献标识码:A
文章编号:1003-0719(2007)01-0059-02
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