全 文 ： 正交试验法优选蒲葵子多糖的提取工艺
叶浩婷1，曹思玮1，翁立冬1，乡世健1，洪军辉1，陈活记1，刘 莉1，张 璐1，朱红霞2，刘
强1*
（1. 南方医科大学中医药学院，广东 广州 510515；2. 南方医科大学中西医结合医院，广东 广州 510315）
摘 要：目的 建立水提醇沉法提取蒲葵子多糖的最佳提取工艺。方法 采用正交试验，以多糖含量为指标，优
选提取时间（A）、提取次数（B）、粒度（C）。结果 影响蒲葵子多糖含量的因素主次关系C＞A＞B，最佳
提取工艺为A2B3C2。结论 药材粒度对结果有显著影响，从经济、省时的角度考虑，生产上应把药材的粒度
作为关键性因素考虑。
关键词：蒲葵子；多糖；水提醇沉；正交试验
中图分类号： R284.2 文献标识码：A 文章编号：1672-979X（2016）02-0092-03
Optimization of Extraction Technology of Polysaccharide from Livistonae Chinensis Fructus
by Orthogonal Test Method
YE Hao-ting1, CAO Si-wei1, WENG Li-dong1, XIANG Shi-jian1, HONG Jun-hui1, CHEN Huo-ji1, LIU Li1, ZHANG
Lu1, ZHU Hong-xia2, LIU Qiang1
(1.College of Tranditional Chinese Medicine, Southern Medical University, Guangzhou 510515, China; 2. Hospital of
Integrated Chinese and Western Medicine, Southern Medical University, Guangzhou 510315, China)
Abstract: Objective To set up the optimum extraction technology of polysaccharide from Livistonae chinensis
fructus by water extraction and alcohol precipitation. Methods By using orthogonal test method, with the content
of polysaccharide as the index, the extraction time (A), extraction times (B), and the particle size of the medicinal
material (C) were optimized. Results The order of the influencing factors on the content of polysaccharide from
Livistonae chinensis fructus was as follows: C＞A＞B. The optimum extraction technology was A2B3C2. Conclusion
The particle size shows remarkable infl uence on the extraction results. From the perspective of cost reduction and time
effi ciency, the particle size should be considered as the sticking point on production.
Key Words: Livistonae chinensis fructus; polysaccharide; water extraction and alcohol precipitation; orthogonal test
method
收稿日期：2015-11-23
作者简介：叶浩婷（1993-），女，广东惠州人，硕士研究生，从事专业：中药学 E-mail: 1255404934@qq.com
*通讯作者：刘强，男，博士，教授，研究方向：中药新剂型与新技术 Tel: 020-61648264 E-mail: gzlq2002@163.com
蒲葵（Livistona chinensis R. Br.）属棕榈科
（Trachycar Pus Fortinei）常绿乔木，分布很
广，在我国广东、广西、福建、台湾等省区普遍
栽培。蒲葵子为该植物种子。《中药大辞典》中
记载其味甘、苦、性平，有小毒。蒲葵子在民间
常与土鸡、猪肉等蒸炖，用于治疗白血病、鼻咽
癌、绒毛膜癌、食管癌，效果显著。国外文献也
有报道，蒲葵子提取物对肿瘤血管发生和肿瘤细
胞有较强的抑制作用[1]。多糖是由十几个甚至上
千个单糖分子缩合、失水而成，是一类分子结构
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复杂且庞大的糖类物质。多糖是重要的生物活性
大分子，大量研究表明，多糖具有明显的生物活
性，如调节免疫[2]、抗肿瘤、降血糖、降血脂、
抗辐射、抗菌、抗病毒、抗氧化、保肝护肝[3]等
作用。蒲葵子多糖的活性日益引起研究者的重
视，我们首次采用正交试验法[4]优选水提醇沉法
提取蒲葵子多糖的最佳工艺，以冀为方便、快捷
地提取蒲葵子多糖提供帮助。
1 材料与方法
1.1 材料
蒲葵子购于新会药材市场。粉碎，55 ℃烘
干后冷却至室温，分别过20，60，100目筛，封
口袋密封保存备用。
1.2 试剂
无水葡萄糖（中国食品药品检定研究院，
批号：140619-201421）；无水乙醇（天津致
远）；苯酚（广州化学试剂厂）；硫酸（天津致
远）；水为双蒸水；其他试剂均为分析纯。
1.3 仪器
UV-2401紫外分光光度计（日本岛津）；
SL4001N电子天平（上海民桥）；KH-100DE型
数控超声波清洗器（昆山禾创）；HH-S2数显恒
温水浴锅（金坛医疗仪器厂）
2 方法
2.1 蒲葵子多糖的提取
称取干燥过筛后的蒲葵子，加4倍量无水乙
醇，回流提取2 h，滤过，滤渣再加入8倍量的
水，提取一定时间和适当次数，过滤，合并滤
液，浓缩、冷却后加4倍量95 %乙醇沉淀、干
燥，得蒲葵子粗多糖。
2.2 标准曲线绘制
精密量取葡萄糖标准溶液（0.0903 mg/mL）
0，1，2，3，4，5，6 mL，分别置入10 mL量
瓶，加水定容，分别精密量取2 mL，置入具塞
试管，分别加入新配制的5 %苯酚溶液1 mL，混
匀，迅速加入浓硫酸7 mL，摇匀，置40 ℃水浴
保温30 min，再置冰水浴中放置5 min，紫外-可
见分光光度法测定最大吸收波长（488.5 nm）处
的吸光度（A）值。以葡萄糖溶液的浓度（C）
为横坐标，以A值为纵坐标绘制标准曲线。
2.3 样品中多糖含量的测定
准确称取干燥至恒重的蒲葵子粗多糖
102.7，99.9，100.4，102.4，101.1，107.7，
103.2，107.9，106.9 mg，加水溶解，定容至250
mL，分别精密量取2 mL，置入具塞试管，按2.2
项方法处理样品，紫外-可见分光光度法测定A
值，根据标准曲线的回归方程计算多糖含量。
样品中多糖的含量（%）=（C样×250×10-3/
W样）×0.90×100 %
其中：C样为标准曲线上查得的样品浓度
（mg/mL）；W样为称取的粗多糖样品量（g）；
0.90表示多糖的校正系数[5-6]。
2.4 正交试验设计
以提取时间（A）、提取次数（B）及药材
粉碎粒度（C）为因素设计正交试验，研究水提
醇沉法提取多糖的最佳工艺，因素及水平见表
1。
表1 因素水平表
水平 提取时间A
提取次数
B
药材粉粹粒度/目
C
1 1.0 2 20
2 1.5 3 60
3 2.0 4 100
3 结果与分析
3.1 线性范围和标准曲线
以吸光度值A对浓度C（m g / m L）进行
线性回归，得回归方程：A=13.29C-0.0108，
r²=0.9989。
3.2 最佳工艺条件确定
由表2可见，3个因素对提取多糖含量的影
响程度C＞A＞B，即因素对收率影响顺序为：
药材粉碎粒度＞提取时间＞提取次数；各因素水
平的最佳组合为A2B3C2，即药材过60目筛，提取
4次，每次提取1.5 h。由表3可见，药材粉碎粒度
对多糖的提取效果有显著影响（P＜0.05）。
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本刊侧重报道食品、药品领域中与营养、保健和健康密切相关的生物科技研究成果，包括新产品及新生物
活性物质，新工艺和新技术，药理及功能实验，临床及人群应用研究等。对于新产品、新技术的开发性研究论
文给予优先发表。
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表2 实验结果与直观分析
因素 提取时间/hA
提取次数
B
粒度/目
C
空白
D
多糖含量
/%
实验1 1 1 1 1 0.65
实验2 1 2 2 2 0.69
实验3 1 3 3 3 0.58
实验4 2 1 3 2 0.57
实验5 2 2 1 3 0.72
实验6 2 3 2 1 0.74
实验7 3 1 2 3 0.71
实验8 3 2 3 1 0.57
实验9 3 3 1 2 0.69
均值1 0.64 0.64 0.69 0.65
均值2 0.68 0.66 0.71 0.65
均值3 0.66 0.67 0.57 0.67
极差 0.04 0.03 0.14 0.02
表3 方差分析
因素 偏差平方和 自由度 F 显著性
粒度 0.033 2 48.129 *（0.020）
煎煮次数 0.001 2 1.581 0.388
煎煮时间 0.002 2 2.935 0.254
误差 0.001 2
按上述提取条件即药材过60目筛，提取4
次，每次提取1.5 h，经验证按此工艺提取的多糖
含量最高，效果最好。
4 结论与讨论
水提醇沉提取蒲葵子多糖的最佳工艺为：
药材过60目筛，提取4次，每次提取1.5 h。此工
艺具有方便、快捷、产率高的特点，为蒲葵子多
糖开发和利用提供了技术保障。
多糖与水形成氢键而溶于水，在多糖的水
溶液中加入乙醇会破坏其氢键，从而降低多糖溶
解度，使多糖沉淀析出。利用多糖的这一性质，
可将多糖从水溶液中沉淀出来。相比酶提法、超
声法、超临界萃取法和超滤法等，传统的水提醇
沉法有利于节约提取成本，降低某些负效应，如
酶法降解副产物对提取的影响，超声法的凝聚作
用及热点作用下多糖的降解问题等[7]。影响多糖
提取效果的因素复杂，包括提取时间、提取次
数、药材粒度、温度、醇沉浓度、醇沉时间等，
本研究仅取前3个常见因素进行正交优选。今后
有必要就工艺纯化方面和提取工艺中其他因素的
影响效果做深入研究。
参考文献
[1] 黄月凤, 许海婷, 陈平, 等. 蒲葵籽的化学成分及其抗癌活性成
分研究[J]. 海峡药学, 2011, 23(4): 38-40.
[2] 杨炳友, 孟永海, 宋佳欣, 等. 吴茱萸多糖水提工艺优化研究[J].
中医药学报, 2012, 40(2): 66-69.
[3] 佟茵, 吴红娟. 植物多糖的提取方法研究进展[J]. 中医药信息,
2012, 29(5): 108-110.
[4] 夏泉, 谢永忠, 黄赵刚, 等. 正交设计优化黄精多糖的水提醇沉
工艺[J]. 中国药师, 2006, (10): 905-906.
[5] 张惟杰. 复合多糖生化研究技术[M]. 上海: 上海科学技术出版
社, 1987: 7.
[6] 林颖, 吴毓敏, 吴雯, 等. 天然产物中的糖含量测定方法正确性
的研究[J]. 天然产物研究与开发, 1996, 8(3): 6-9.
[7] 高续春. 多糖提取纯化方法研究进展[J]. 榆林学院学报, 2009,
(4): 65-67.

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