全 文 ：China Pharmacy 2010 Vol. 21 No. 45 中国药房 2010年第21卷第45期
Δ2009年河南省科技攻关重点基金资助项目（092102310028）
＊主管药师，硕士。研究方向：临床药学。电话：0371-63589336。
E-mail：elijx@163.com
#通讯作者：副研究员。研究方向：抗肿瘤药物制剂与药理学。电
话：0371-66658210。E-mail：hhylu@yahoo.com.cn
紫苏醇（Perillyl alcohol，POH）是一种广谱、高效、低毒、具
有预防和治疗肿瘤作用的单萜类物质。国内对POH的报道主
要在高级香料和各种紫苏茶、紫苏油的应用方面[1]。国外POH
仅见其口服胶囊制剂的临床试验[2]和用于治疗皮肤癌的乳膏
剂研究的报道[3]。由于POH为挥发油，水溶性差，口服给药生
物利用度低，且胃肠道不良反应严重，包括乏力、恶心、呕吐、
胃灼热、轻度低钾等[4]。因此，为减轻其不良反应，提高疗效，
笔者将其制成油/水型静脉注射用亚微乳剂。本试验主要研究
POH亚微乳剂对人乳腺癌细胞MCF-7增殖的抑制作用，以为
后续研究提供基础。
1 材料
1.1 细胞株
人乳腺癌细胞MCF-7细胞株（浙江大学肿瘤研究所提
供）。
1.2 试药
POH亚微乳剂、POH溶液（郑州大学医药科学研究院，批
号：20080303、20080522，规格均为：2.5 mg·2 mL－1）；DMEM培
养基（海克隆生物化学制品（北京）有限公司）；小牛血清（杭州
四季青生物工程材料有限公司）；二甲基亚砜（DMSO，北京化
工厂）；MTT（美国Amresco公司）；磷酸盐缓冲液（PBS）（北京
中杉金桥生物技术有限公司）。
1.3 仪器
CO2培养箱（美国 Forma公司）；倒置生物显微镜（日本
Olympus公司）；双人单面净化工作台（苏州净化设备有限公
司）；酶标仪（美国Biorad公司）；96孔培养板（美国Corning公
司）。
2 方法
·实验研究·
紫苏醇亚微乳剂对人乳腺癌细胞MCF-7增殖的抑制作用研究Δ
李建勋 1，2＊，华海婴 2#，李 瑞 3（1.郑州市儿童医院药剂科，郑州市 450053；2.郑州大学医药科学研究院，郑州市
450052；3.郑州市妇幼保健院乳腺科，郑州市 450012）
中图分类号 R965；R944.9；R979.1 文献标识码 A 文章编号 1001-0408（2010）45-4238-02
摘 要 目的：研究紫苏醇亚微乳剂对人乳腺癌细胞MCF-7的增殖抑制作用。方法：以紫苏醇溶液为对照，采用MTT比色法检
测不同浓度（0、50、100、200、400、800 μmol·L－1）紫苏醇亚微乳剂处理不同时间（24、48、72 h）后对人乳腺癌细胞MCF-7的抑制率
及半数抑制量（IC50）值，并设立空白组进行比较。结果：与空白组比较，试验组与对照组在作用24 h、浓度高于400 μmol·L－1，48 h、
浓度高于100 μmol·L－1，72 h、浓度高于50 μmol·L－1时均表现出明显抑制作用（P＜0.05）；后2组抑制作用比较无显著性差异；试验
组与对照组对MCF-7细胞株的 IC50值分别为353.9、377.9 μmol·L－1。结论：紫苏醇制成亚微乳剂后与其溶液比较，对人乳腺癌细
胞MCF-7具有相同的抑制作用。
关键词 紫苏醇；亚微乳；人乳腺癌细胞MCF-7；MTT；增殖抑制
Inhibition Effect of Perillyl Alcohol Sub-microemulsion on the Proliferation of Human Breast Cancer Cell
MCF-7
LI Jian-xun（Dept. of Pharmacy，Zhengzhou Children’s Hospital，Zhengzhou 450053，China）
LI Jian-xun，HUA Hai-ying（Academy of Medical and Pharmaceutical Sciences，Zhengzhou University，Zheng-
zhou 450052，China）
LI Rui（Dept. of Mammary，Zhengzhou Maternity and Child Care Hospital，Zhengzhou 450012，China）
ABSTRACT OBJECTIVE：To investigate inhibition effect of Perillyl alcohol sub-microemulsion on the proliferation of human
breast cancer cell MCF-7. METHODS：The inhibition rates of MCF-7 by different concentrations of Perillyl alcohol sub-micro-
emulsion（0 μmol·L－1，50 μmol·L－1，100 μmol·L－1，200 μmol·L－1，400 μmol·L－1，800 μmol·L－1）at different time（24 h，48
h，72 h）were measured by MTT with Perillyl alcohol solution（POH-SOL）as control and compared with blank group. RESULTS：
Compared with blank group，Perillyl alcohol sub-microemulsion and POH-SOL in trial group and control group showed obvious in-
hibition effect at concentration of more than 400 μmol·L－1 at 24 h，100 μmol·L－1 at 48 h and 50 μmol·L－1 at 72 h（P＜0.05）.
There was no significant difference between 2 groups. IC50 of trial group and control group to MCF-7 were 353.9 μmol·L－1 and
377.9 μmol·L－1，respectively. CONCLUSION：Perillyl alcohol sub-microemulsion can inhibit the proliferation of human breast can-
cer cell MCF-7 as well as POH-SOL.
KEY WORDS Perillyl alcohol；Sub-microemulsion；Human breast cancer cell MCF-7；MTT；Inhibition effect of proliferation
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中国药房 2010年第21卷第45期 China Pharmacy 2010 Vol. 21 No. 45
2.1 分组与测定
MCF-7细胞株常规培养，采用MTT比色法进行检测。即
取对数生长期的乳腺癌MCF-7细胞株，0.25％胰蛋白酶消化，
用含 10％小牛血清的DMEM培养液稀释成 2×104个·mL－1浓
度的单细胞悬液。将细胞悬液接种于 96孔板上，每孔 150 μL
（3×103个细胞），置于 5％CO2培养箱中，37 ℃培养过夜，24 h
后，按对照组（POH溶液）、试验组（POH亚微乳剂）、空白组（细
胞+培养液）、调零组（仅培养液无细胞）进行给药处理，对照组
和试验组各设 0（溶剂或空白脂肪乳）、50、100、200、400、800
μmol·L－1 6个浓度，每个浓度6个复孔，空白组和调零组各6个
复孔，每孔 200 μL。分别培养 24、48、72 h后，每孔加入 5 mg·
mL－1 MTT溶液 20 μL（调零组除外），继续孵育 4 h，移去上清
液，加入 150 μL DMSO，震荡 10 min使其充分溶解，然后在参
考波长 630 nm、测定波长 490 nm处，记录每孔的吸光度（OD
值），并计算抑制率和半数抑制量（IC50），抑制率（％）＝（1－
（药物组平均OD值/空白组平均OD值））×100％。
2.2 统计处理
所有数据用SPSS16.0统计软件包进行处理，同一作用时
间各组间均数比较用单因素方差分析，POH亚微乳剂与POH
溶液组间均数比较采用配对样本 t检验。数据结果用x±s表
示，P＜0.05表示差异有统计学意义。
3 结果
经计算，试验组对MCF-7细胞株的 IC50值为 353.9 μmol·
L－1，对照组对MCF-7细胞株的 IC50值为 377.9 μmol·L－1。不
同时间各组MCF-7细胞吸光度与抑制率比较结果详见表 1，
POH溶液和POH亚微乳剂对MCF-7细胞的浓度-抑制率曲线
见图1。
表1 各组MCF-7细胞抑制率比较（x±s，n＝6）
Tab 1 Comparison of inhibition rates of MCF-7 prolifera-
tion among those groups（x±s，n＝6）
组别
空白组
试验组
对照组
浓度
/μmol·L－1
0
50
100
200
400
800
0
50
100
200
400
800
24 h
OD值
0.334±0.023
0.343±0.022
0.334±0.024
0.331±0.021
0.324±0.021
0.304±0.020＊
0.266±0.021＊
0.340±0.021
0.331±0.024
0.325±0.021
0.317±0.024
0.303±0.021＊
0.262±0.021＊
抑制率/％
-
-2.60
0.10
0.90
3.00
8.99
20.27
-1.80
1.00
2.60
4.94
9.19
21.62
48 h
OD值
0.472±0.023
0.476±0.021
0.462±0.021
0.440±0.019＊
0.419±0.020＊
0.361±0.022＊
0.271±0.019＊
0.478±0.024
0.458±0.025
0.435±0.023＊
0.402±0.021＊
0.352±0.022＊
0.254±0.017＊
抑制率/％
-
-0.67
2.12
6.95
11.29
23.57
40.27
-1.24
3.03
7.97
14.93
25.44
46.29
72 h
OD值
0.704±0.021
0.702±0.019
0.664±0.023＊
0.609±0.023＊
0.526±0.018＊
0.356±0.018＊
0.161±0.018＊
0.701±0.025
0.657±0.022＊
0.598±0.021＊
0.502±0.023＊
0.341±0.019＊
0.155±0.019＊
抑制率/％
-
0.28
6.95
13.45
25.33
49.46
77.15
0.43
6.75
15.13
28.72
51.59
78.03
与空白组比较：＊P＜0.05
vs. blank group：＊P＜0.05
由表1可知，与空白组比较，试验组与对照组在24 h、浓度
高于400 μmol·L－1，48 h、浓度高于100 μmol·L－1，72 h、浓度高
于 50 μmol·L－1时均表现出明显抑制作用（P＜0.05）。说明增
殖抑制作用均表现出浓度和时间相关性，且试验组与对照组
具有相同的细胞毒性。
配对样本 t检验结果显示，与对照组比较，72 h时浓度为
100、200 μmol·L－1的试验组的OD值有显著性差异（P＜0.01或
P＜0.05），这可能与亚微乳剂的缓释作用有关。其他时间点，
各浓度试验组与对照组对MCF-7细胞的增殖抑制作用无显著
性差异（P＞0.05）。上述结果表明，试验组与对照组具有相同
的细胞毒性。
4 讨论
有文献[5]报道POH对人胰腺癌PaCa-2、前列腺癌PC-1细
胞株的 IC50值为290、480 μmol·L－1。本试验得出试验组 IC50值
略低于对照组，并与文献接近。
本课题前期研究确定了POH亚微乳剂最佳处方和最佳制
备工艺条件；建立了POH亚微乳中POH含量测定的HPLC法；
相分布和体外释放研究结果表明其具有一定的缓释作用。本
试验证实了POH亚微乳剂和POH溶液对MCF-7细胞的增殖抑
制作用具有明显的时间和浓度依赖性，具有相同的细胞毒性。
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（收稿日期：2010-01-11 修回日期：2010-03-22）
图1 2种POH制剂对MCF-7细胞的浓度-抑制率曲线
A. POH溶液；B. POH亚微乳剂
Fig 1 Concentration-inhibition rates dependent manner of
2 kinds of POH preparation on the MCF-7
A. POH solution；B. POH sub-microemulsion
90
70
50
30
10
-10 0 50 100 200 400 800
浓度/μmol·L－1
A
24 h
48 h
72 h抑
制
率
/％
90
70
50
30
10
-100 50 100 200 400 800
浓度/μmol·L－1
B
24 h
48 h
72 h抑
制
率
/％
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