全 文 ：V o l
.解 ,No . 9声阴
紫苏叶挥发油杭菌活性研究
(青岛大学天然色素研究所 山 东省重点实验室 ,青岛 2 6 6 0 7 1) 郭群群 杜桂彩 李荣贵
研与拐究讨
重要依据 。
1 材料与方法
,
.
, 材料与仪器
紫苏 叶 于 7 月 份采 自青 岛赛 元公 司 生产基
地 ;金黄色葡萄球菌 ( tS叩柳 Zoc oc c。 。 er us ) 、 大肠杆
菌 ( sE c he ir c ih o co il ) 由青 岛大学分子生物学实验
室提供 ;培养基 为 L B 培养基 ;石油醚 ( 3 0 一 6 0℃ ) 、
乙醚 、 无水硫酸钠 、 二 甲基 甲 酞胺 ( D M F ) 均为分析
纯 。
日本 岛津 U V一 16 01 型紫外可见分光光度计 , 日
本 岛 津 QP 一 5 0 0 0 型 G C / M S 联用 仪 , G C 一 17 A 色谱
柱 。
实验方法
1 紫苏叶挥发油 的提取 新鲜紫苏叶洗净 阴干
2
2:
摘 要 : 以金黄 色萄萄球菌和大肠杆 菌为代表菌种 , 对 紫苏叶挥
发 油进行 了杭 菌性研究 。 结果表明 , 紫苏叶挥发 油对 两种
细 菌均有杭 菌 活性 , 对金黄 色葡萄球菌 的 M I C 值 为
50 0协g ]/ 刀 L , 对大肠 杆菌的 M IC 值 为 12 50 卜幼 n L 。 采用
G C 一M S 对挥发油 中主要成分进行分析 , 确 定了 10 种含
量较高的化合物 , 并 首次从其 中发 现 了拢牛儿基珑牛儿
醇 ,含 量约 为 2 . 69 % 。
关键词 : 紫苏叶 ,挥发油 , 抗菌活性 ,拢牛儿基拢牛儿醇
A b s t ar
c t : T h e a n t ib a e te r 一a l a e t iv ity o f th e e s s e n t ja { o 一J f ro m
eP
r
i ll a rF u t e s e e n s le a v e s o n G r a m 一 P o s itiv e
S t即 h刃o e o e e u s a u re u s a n d G ra m 一 n e g at iv e
及 e h e r i e h i a e o l i w a s s tu d ie d , a n d th e r e s u jts s h o w :
th e e S S e 门t ia l o 一} o f eP ir ll a rF “ ze s e e ns }e a v e s e 0 U }d
以 f e e t iv e }y in h ib it t h e g ro w t h o f th e e h o s e n
b a e t e r ia
,
M IC o n st 叩句肠 e o e e us au re us 一5 5 0 0 协g /
m L
.
M IC o n sE
e h e ir e h i a e o li 15 1 2 5 0 协g / m L . Th e
m a 旧 e o n s t }t u e n t s of th e e s s e n t ia } 0 1} f「o m eP 了 i l l a
声)1乙t e s e e ns Ie a V e s w e re a n a ly z e d b y G C 一M S
.
10
r e la t iv e ly a b u n d a n t e o m P o n e n t s w e re id e n t jf一e d ,
a nr o n g w h ie h g e r a n }g e 「a n 一。 } w a s fo u n d }n t h e
e s s e n t旧 } o 一} o f eP ir l l a Fr u t e s e e ns }e a v e s fo r th e f一r s t
t im e
.
及y wo dr s : eP ir l la fr u t e s e e砒 fe a v e s : e s s e n t ia l 0 11; a n t 一b a e te r ja l
a e t iV ity : g e r a n jg e ra n 一0 1
中图分类号 : ST 2 01
.
3 文献标识码 : A
文 章 编号 : 10 0 2 一0 3 0 6 ( 2 0 0 3 ) 0 9 一0 0 2 5 一 0 3
紫苏 ( eP r i l lo fr o t e s e e o s B r i t t . ) 系唇形科 紫苏属
植物 ,可在全 国范围 内广泛栽培 , 可用资源丰富 。 在
东亚一些 国家 , 紫苏叶是广受青睐的 民间药物 ,主要
用于解毒 、 散热 、镇 咳 、 抗菌 、 宽肠下气 、抗过敏等等 。
紫苏叶香气浓厚 , 源于其 中丰富的挥发油 。 有关紫苏
挥发油的研究 已有不少报道 , 大部分集 中于成分研
究 1[司 ,性质研究相对较少 S[ 一“ ] ,而紫苏叶的多种药用功
能预示其 中含量丰 富的挥发 油具有较 高 的药用 价
值 , 故本文对 当地紫苏叶中的挥发油进行了抗菌活
性的研究 , 同时采用 G C 一M S 对该挥发油 中的主要成
分进行 了鉴定 , 为进一步开发天然抗菌药物提供 了
收稿 日期 :
作者简介 :
2 0 0 3一 0 1一04
郭群群 ( 19 7 一 ) ,女 ,硕士 , 研究方向 : 天然活性物质 的研 究
与开发 。
山 东省 自然科学基金资助项 目 ( Q 9 13 09 ) 。
后用石油醚萃取三次 , 浓缩提取液 ,浓缩物按常规水
蒸气蒸馏法提取挥发油 ,馏 出物用重蒸石油醚萃取 ,
萃取液用无水硫酸钠干燥 ,过滤后浓缩得淡黄色 、 具
浓郁特殊芳香气味的液体 ,得率约为 .0 7 % 。
1
.
.2 2 紫苏叶挥发油的抗菌性研究
1
.
.2 2
.
1 平板培养法测定抗菌活性 取少许所得挥
发油溶于二甲基甲酞胺 ( D M F )中 ,配成浓度为 1 0 1 1笔 / i l l L
的测试液 。
将试验菌金黄色葡萄球菌和大肠杆菌接种于平
皿 中的 L B 固体培养基上 , 培养基上打孔 ,孔 内加人
测试液 , 1 ” 为挥发油的 D M F 溶液 , #2 为 D M F , 3 7℃培
养 1 2 h ,测量孔外抑菌圈 的毫米数 。
1
.
.2 .2 2 比浊法测定最低抑菌浓度 ( M IC ) 在 已经
灭菌的培养管 中分别加人 s m L 经灭菌的 L B 液体培
养基 , 用微量移液器定量吸取 1 0 m g / m L 挥 发油 的
D M F 溶液 , 使挥发油浓度依次为 5 0 、 10 0 、 1 5 0 、 2 5 0 、
3 5 0
、
5 0 0
、
6 0 0
、
7 5 0
、
1 2 5 0 林舒m L 。 各加 人 2 0 林 L 菌 悬
液 , 混匀 , 于 3 7℃ , 巧o r/ m i n 振荡培养 s h 后 , 分别 以
未接菌种 的培养液加人相应量的 D M F 作空 白 , 测定
培养液在 6 0 O n m 处的 消光值 ( 以上使用的菌悬液为
金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的菌悬液 ) 。基金项 目 :
!亘画至翻画 2 5
DOI : 10. 13386 /j . i ssn1002 -0306. 2003. 09. 010
一漏 一 S c i创褚 ed an朴沁 ho n!哪 一成一 F血川 .d nt s l印
0 24 .名… 6刀 0 1ǎ层州à啊华耸擅 1
.
2 .3 紫苏叶挥发油 的主要成分分析 采用 G / CM S
对所得紫苏叶挥发油进行分析 , 确定其主要化学成
分及相对含量 。 测试条件 : G C ,柱温 10 0一28 0℃ , 程序
升温 10 ℃ / m in ,进样温 度 3 0 0℃ , 分流 比 3 :0 1 , 流速
1
.
s m L / m in ; M S
,
E l 离子源 , 电子能量 7 Oe v , 倍增器电
压 15 0 OV ,质量扫描范围 3 5 一 4 0 0 , 扫描周期 1 5 。
对所得 的主要色谱峰所代表化合物的质谱 图通
过 N I H一 E P A 一M S 一D C 计算机谱库检索以及人工谱图
解析 ,确定紫苏 汗卜挥发油 中的主要化学成分 。
2 结果与分析
2
,
1 紫苏叶挥发 油的抗菌活性测定
2
.
1
.
1 紫苏叶挥发油的抑菌效果 由表 1 及图 1 、 图
2 可知 ,紫苏叶挥发油对两种试验菌均有明显的抗菌
活性 ,且对金黄色葡萄球菌的抗菌活性较强 。
0 2 (X ) 40 60 80 1《XX) 12 0
挥发油浓度 (林g八 11工 )
图 4 对大肠杆菌的抑菌情况
2
.
0
月.五
9!
8l表 l
测试液
紫苏叶挥发油对试验菌的抗菌效果
抑菌圈直径 (m m )
金黄色葡萄球菌 大肠杆菌
纂
6 R 10 12
缪 图 5 紫苏叶挥发油 的气相色谱图办 表 2 紫苏叶挥发油主要成分的 G C 一M S 分析序号 检出化合物名称 分子量 相对含量 (% )
图 1 对金黄色葡萄球菌的抑菌情况 图 2 对大肠杆菌的抑菌情况
l :紫苏叶挥发油 2 : 空白对照
2
.
1
.
2 紫苏叶挥发油对试验菌的 M IC 由图 3 、 图 4
可知 , 比浊法测定紫苏叶挥发油对金黄色葡萄球菌
的 M CI 值为 5 0 0 林 g / m ;L 对大肠 杆菌 的 M CI 值为
12 5 0 林g / m L 。
.2 2 紫苏叶挥发油主要成分分析
对 图 5 中所注 的 1o 个 主要色谱峰所对应 的 质
谱图通过谱库检索 、 人工解析 ,确定 出 了这 ol 种主
要成分 (如表 2 ) 。
由表 2 可知 , 本文所选紫苏叶 的挥发油 中含有
拢牛儿基拢牛儿醇 , 且为主要成分 中的一种 ,这是首
芳樟醇
紫苏醛
紫苏醇
1一 ( 3一映喃基 )一 4一甲基-
1一戊烯一 l 一酮日一金合欢烯
议一金合欢烯
十三烷酸 乙醋
十六烷酸 _
植物醇 一拢牛儿基咙牛儿醇 _
15
.
10
39
.
1 1
15
.
4 8
1勺山内j
研与究探讨
2 93
3
.
2 8
4
.
6 2
2
.
7 4
2 3 3
9
l 0
6 9 3
2
.
6 9
4
n目
2
一连力`峙,`U6门U51岛产Oné04ù万九,八,1f .勺翻今ù吞乙乃2
次从紫苏叶挥发油中发现这种物质 。
3 结论
本实验结果说明 , 紫苏 汗卜挥发油对革兰 氏阳性
菌中的金黄色葡萄球菌和革兰 氏阴性菌中的大肠杆
菌都有较强的抗菌作用 , 并且对金黄色葡萄球菌的
抗菌效果更好 ; 在对紫苏叶挥发油 的主要成分进行
分析鉴定时 , 首次从中发现了 拢牛儿基 拢牛儿醇 ,它
是一种具有特殊生物活性的物质 。 以上成果为从紫
苏中开发天然药物提供了重要的科学依据 。
参考文献 :
ǎ鑫川à咧率州耸佃
0 100 2 0 0 30 4 00 50 0
挥发油浓度 (林 g / m L )
图 3 对金黄色葡萄球菌的抑菌情况
2 6 廊亘嘛瓤骊
〔11 I n a K a z u o , 0 Is a o · C o m p o n e n t s o f eP r il la e s s e n t ial 0 11 1
N e u tar l E s s e n t ia l 0 11[J」. N i p p o n N o ge i K a g a k u K a i s h i , 19 70 , 44
(5 )
:
2 09
一
2 12
.
z[] 潘炯 光 ,徐植 灵 ,吉力 ,等 . 白 苏挥发油 的化 学研究 [J] . 中国
中药杂志 , 1 99 2 , 17 (3) : 1 64 ~ 1 65 .
Vo l
.
2 4,No
.
9
,加03
影响 X a n t h o m o n a s X C 一X H 9 9
爵窿戳篡矍巍勤争翰黔参爵骸氰谕
某些微量元素的研究
(河北新河生物化工有限公 司
研究与探讨
摘 要 : 报道 了 采用 八 种微 量元 素进行试 验 , 以 探 索它 们 对
X an ht o m o an s X C 一 X H 9 诱 变株生 长代谢 和胞外 多糖积
累的 影响 。 结 果表 明 , 八种微 量元素都 对 X an t h二o1 二
x C 一 X H 9 诱变株 生 长代谢和胞外 多糖积 累有较 明显的
促进作 用 ,将八种微量元素组合 成复 因子加入培养基中 ,
O D 值 和胞 外 多糖分 别 比 对 照 样 平均 提高 了 2 3 . 1% 和
21
.
7%
, 且优于 各单因 子 。
关键词 :微量元素 , 生长代谢 , 多糖积 累
中图分类号 : T S 2 01 . 3 文献标识码 : A
文 章 编 号 : 10 02 一0 3 0 6 ( 2 0 3 ) 0 9 es OO2 7 一0 2
X a n t h o m
o n a s X C 一X H 9 9 诱变 株是 黄原 胶生 产
菌 , 它以碳水化合物为主要原料 ,通过微生物发酵工
艺和后处理 回收工艺生产得到胞外多糖 一黄原胶 。 该
菌株的 生长代谢受多种因素的 影响 , 本文主要 阐述
在相同温度 、 溶氧 、 P H 条件下添加 eF +2 、 C u +2等对该菌
株生长代谢速度和胞外多糖积累量的影响 。
, 材料与方法
收稿 日期 : 2 0 0 3一 0 6一 1 5
, 1 菌种与培养基
菌种 X a n t h o m o n a S X C一 X H 9 9 诱变 株 河 北新
河生物工程技术研究所保存 。
种子培养基 (酬 OI 0 m )L 葡萄糖 1 . 0 , 磷酸氢二
按 .0 2 , 硝酸钠 .0 0 5 , 磷酸氢二钾 .0 2 , 氯化钾 0 . 1 ,
蒸馏水 l X )n 止 , p H .7肚 .0 ;2 发酵培养基 (岁 1朋 n 正 ) 葡
萄糖 .4 0 ,磷酸氢二按 .0 2 , 硝酸钠 0 .巧 ,磷酸氢二钾
o
·
2 5
,氯化钾 0 . 1 ,碳酸钙 0 . 1 5 , p H 7 . 0 土 0 . 2 。
,
.
2 测试方法
1
.
2
.
1 O D 值的测定 7 2 1 分光光度计 , 波长 6 5 O n m ,
l e m 比色皿测试 。
1
.
.2 2 胞外多糖的测定
1 .2 2
.
1 黄原 胶含量测定 对发 酵液升温 至 10 0 一
10 5℃ , 维持 3 0 m in 后 降至 3 5 士 1℃ , 与 9 5 %食用级酒
精按 1 : 1 . 2 体积混合 , 充分搅拌得胶体沉淀 ,洗涤后
真空干燥称重 。
1
.
.2 .2 2 发酵液粘度 的测定 N D J一 4 型旋转粘度计 ,
2 5℃ , 转速为 3 O r/ m i n , 4 号转子 。
2 结果与讨论
· 刊一一卜 . 刊一 ~ 一卜 . 斗 . 州卜一卜 “ 刊~ ~ 曰卜 ·仲斗 . 刊一 ~ 一十 ” 刊` ~ 一卜 二十 . 呻一~ 月一 ” 十 . 刊一一卜 . 斗 一卜 如 刁一 . 州卜 ·宙斗 ~ ” + . 州卜一 + 二 刊卜 ~ ~干 . 十 , . 斗 . +- ” 一卜 一卜 ” 十 ~ .一卜 .’斗 一十~ .一卜 . 刊一一卜 . +- . ,司卜一卜 ” 日卜 .
[3 ] 赵淑平 ,权丽辉 . 白 苏挥发油 的化 学研究和三 个吠喃类化 e o m p o u n d s o f eP ir ll a 夕 u t e s e e ns B ir t t o n : .ar e r呷 a D e e n e 汇习.
合物结构的质谱鉴定 [J]· 药物分析杂志 , 19 92 , 12 (’) : 2 06一 2 10 . Sh o y ak u g ak u Z a s s h i , 1 9 84 , 3 8 (1) : 127 一 1 30 .
[4」 赵淑平 ,朱兆仪 ,冯 玉秀 ,等 .不 同类型 紫苏挥发 油成分的研 [9」 R a P h a e l K a n g , R a n d i H e lm s , M i e h a e l J s t o u t , e t a l .
究 [J ].天然产物研究与开发 , 1 993 , 5 (3 ): 8一 2 0 . A n t im ie or b i a l a e t iv i ty o f th e v o l a t i le e o n s t i t u e n t s 。 f eP r i lla
〔5」 Ja n g H e e J in , p a r k Ju n Y o u n g , K im Y o n g T a e . V o l a t i le 户u t e s c e n 、 a n d i t s s y n e吧i s t i e e fl Z c t s w i th p o ly g o d i a l口」. A群ie
c o m p o n e n t s o f eP
r i ll
a
fo li
u
m [J ]
·
H a n德u k S i k p ,u m F o o d C h e m , 1 9 92 , 4 0 (1 1): 2 3 2 8一 2 3 3 0 .
Kw
a h a kh o e e h i
,
1 99 1
,
2 3 (2 )
: 12 9一 13 2
.
[10 ] G H
o n
d
a , Y K o e z u k
a ,
W K
a m is a k
o , e t a l
.
I s o l
a t io n o f
「6」 D u n g N gu v e n X u a n , M o i L a D in h , C u L u ,u D a m , e t a l . s e d a t iv e p ir n e ip le s ofr m eP ir l la 户u te s e e n s J[ ]. C h e m hP a rm
E s s e n t i a l
0 11
c o n s t i t u e n t s ofr m ht
e
ae ir al p arts
o f eP
r il la B u l
,
1 9 8 6
,
34钧 : 1 67 2一 1 67 7 .
户u t e s e e 。 (L · ) B r i艺t o n [J]· E s s e n t 0 11 R e s , 1 995 , 7 (4 ) : 4 2 9一 4 32 . 【1 1 ] G H o n d a , Y K o e z u k a , M aT b a t a , e t a l . I s o la t io n o f D il la p i o l
口] tI o M ie ihn o , M T叮 o d a , G H on d a
.
C h
e m i
e al e o哪o s i t io n of ofr m a e h e m o ty p e o f eP r il la fr u r e s e e ns a s a n a e t iv e p i n e ip le
ht e e s s e nt ial 0 11 of eP ir l
a
fru te
s e e ns 田. N at M e d , 1999 , 53 (1) : 3 2一 36 . fo r p or lo n g in g h e x o b a br it a l 一 i n d u e e d s le e p [J」. C h e m hP a二
【8」 G H o n d a , K K o g a , Y K o e z u k a , e t a l . A n t id e加 a t o Ph y t i e B u l l , 19 8 8 , 36 (8 ) : 3 1 5 3一 3 1 55 .
{面石百万靡万丽下 2 7