全 文 ：235
张 鑫，张志军* ，李会珍，乔绍俊，王慧杰
(中北大学化工与环境学院生命科学系，山西太原 030051)
摘 要:以紫苏叶为原料，对不同提取方法、不同品种和不同生育时期紫苏叶中迷迭香酸(RosA)的含量分别进行了提
取和测定。结果表明，迷迭香酸最佳提取方法为:水∶甲醇∶HCl(20∶80∶1)。紫野 8 紫苏叶中 RosA 含量明显高于其它
11 个品种，开花后到结实初期紫苏叶中 RosA含量最高。
关键词:迷迭香酸，紫苏，提取，测定
Extraction and determination of rosmarinic acid from perilla leaves
ZHANG Xin，ZHANG Zhi－jun* ，LI Hui－zhen，QIAO Shao－jun，WANG Hui－jie
(Department of Life Science，College of Chemical ＆ Environmental Engineering，
North University of China，Taiyuan 030051，China)
Abstract:The extraction methods and the concentrations of rosmarinic acid (RosA)in perilla leaves were studied
in this paper.The results showed that the optimal extraction method phase ratio was water∶methanol∶HCl(20∶80∶1)，
the Ziye 8 had the highest RosA content in 12 perilla varieties，and the optimum time for RosA extraction from perilla
leaves was the period of from flowering to seed setting.
Key words:rosmarinic acid;perllia;extraction;determination
中图分类号:TS201.2 文献标识码:A 文 章 编 号:1002－0306(2009)11－0235－02
收稿日期:2008－11－12 * 通讯联系人
作者简介:张鑫(1984－) ，男，硕士研究生，研究方向:植物组织的分离
及提取。
迷迭香酸 (rosmarinicacid，简称 RosA)是一种多
功能酚酸类化合物，在唇形科的多种植物中存在［1］。
RosA 作为抗氧化剂，其抗氧化活性强于咖啡酸、绿
原酸、叶酸、BHT 等，具有极强的清除体内自由基的
活性，且能抑制内皮细胞调节的低密度脂蛋白的氧
化［2－3］。RosA也具有抗病毒活性，除抑制病毒生活周
期中某些酶的活性外 ，它还能迅速与病毒外壳蛋白结
合，从而使病毒失活［4］。此外，RosA 还具有其它功能，
如作为化妆品的添加剂能抑制急慢性感染，抗紫外线，
抑制弹性蛋白的降解，增加细胞膜的稳定性［5］，在制
药、食品、化妆品等领域中都具有重要的应用价值。紫
苏叶中由于 RosA 的含量较高，有望成为 RosA的重要
生产来源。本研究以紫苏叶为原料，通过对不同提取
方法、不同品种和不同生育时期紫苏叶中迷迭香酸的
含量分别进行提取和测定，以期确定最佳分离提取方
案，为紫苏的进一步开发利用提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 材料与仪器
不同品种紫苏叶 由山西农科院旱地农业研究
中心提供;无水乙醇、硫酸亚铁、甲醇、乙酸乙酯、盐
酸、丙酮、醋酸钠 国产分析纯;RosA标准品。
旋转蒸发仪 RE－2000，上海亚荣生化仪器厂;
SHZ－D 循环水式真空泵 巩义市英峪仪器厂;真空
干燥箱、721E 型可见分光光度计 上海光谱仪器有
限公司;SHH－W21 恒温水浴锅 北京长风仪器公
司;电子天平 上海天平仪器厂。
1.2 实验方法
1.2.1 迷迭香酸的提取 将新鲜紫苏叶烘干粉碎，
称取其粉末 2g，置于三角瓶中，加入 50mL 水或有机
溶剂，在 80℃水浴中浸提 30min，浸提两次，用纱布粗
滤，合并浸提液。用 1mol /L的盐酸调 pH至 2.0～2.5，
然后进行抽滤，将滤清液用乙酸乙酯萃取 3 次，合并
萃取液。用旋转蒸发仪除去乙酸乙酯，浓缩液经真
空干燥制得紫苏提取物。以无水乙醇溶解提取物并
稀释至 25mL，留作分析待用［6］。
1.2.2 迷迭香酸含量的测定 取 RosA 标准品溶于
无水乙醇中，配制 50～300μg /mL 的系列标准溶液，
采用 FeSO4比色法绘制 RosA 标准曲线
［7］。10mL 反
应体系中含有 0.1mol /L 醋酸钠溶液 8.9mL，0.2mol /L
FeSO4 溶液 60μL，50 ～300μg /mL RosA 标准品溶液
1mL。充分混匀后，静置 5min，于 568nm 处测定吸光
度。以吸光度为纵坐标，以反应体系中 RosA 含量
(μg /mL)为横坐标，绘制标准曲线，并计算回归
方程。
1.2.3 实验处理 采用热水浸提及有机溶剂提取两
种方法进行紫苏叶中 RosA 的提取。不同有机溶剂
236
表 2 12 个品种紫苏叶中提取 RosA的含量(mg /g)
品种 紫野 8 紫野 6 紫野矮 紫野 2 紫野旱 紫野 9 紫野 3 食用 紫野 1 白苏 白苏 2 紫旱 7
RosA含量 3.923 1.605 2.15 2.423 0.544 2.605 0.998 1.453 1.438 2.377 1.423 2.302
提取液及比例处理分别为:水－甲醇－HCl(20∶80∶1、
40∶60∶1、60∶40∶1、80∶20∶1) ;水－乙醇－HCl(20∶80∶1、
40∶60∶1、60∶40∶1、80∶20∶1) ;水－丙酮－HCl(20∶80∶1、
40∶60∶1、60∶40∶1、80∶20∶1)。采用最佳提取方法提取
测定 12 个紫苏品种叶片中 RosA 的含量。分别对花
蕾期，开花期，结实初期，成熟期 4 个不同生育时期
提取测定紫苏叶中 RosA含量，确定最佳提取时期。
2 结果与分析
2.1 分光光度法测定标准曲线
在上述反应体系中，以加样量为横坐标，以吸光
度为纵坐标，RosA在 50～300μg /mL的浓度范围内与
吸光度呈现良好的线性关系，得到回归方程为:
y = 0.1338 + 0.0029x。
2.2 不同溶剂提取液及比例对 RosA 提取效果的
影响
采用不同方法及不同提取液浓度对同一品种同
一时期的紫苏叶子进行 RosA 提取(表 1)。结果表
明，使用有机溶剂水－甲醇－HCl(20∶80∶1)的提取方
法获得的 RosA 产量最高，为 2.926mg /g;水－丙酮－
HCl(20∶80∶1)含量为 2.732mg /g;水提法提取的含量
为 2.105mg /g。当甲醇和丙酮作为提取溶剂时，随着
它们浓度的增加，RosA得率总体呈增加趋势，当浓度
为 80%时，RosA得率最大，浓度继续增高，得率反而
降低;而采用乙醇作为提取剂时，浓度在 60%得率最
高。这主要是因为当有机溶剂浓度增大到一定程度
时，紫苏叶中的一些非极性物质也溶解出来，如叶绿
素等，所以在提取过程中，要注意采用溶剂的浓度，
防止过高浓度影响 RosA的得率。
表 1 不同溶剂提取液提取 RosA的含量(mg /g)
溶剂浓度(%) 20 40 60 80 100
水 2.105
甲醇 1.014 2.018 1.963 2.926 2.562
乙醇 0.763 1.831 2.308 2.120 2.051
丙酮 1.348 1.393 1.211 2.732 2.710
2.4 不同紫苏品种叶片中 RosA含量的差异
采用最佳提取方法水－甲醇－HCl(20∶80∶1)对 12
个不同的紫苏品种进行提取，结果见表 2。紫野 8 和
紫野 9 叶中 RosA 含量较高，分别为 3.923mg /g 和
2.605mg /g。值得注意的是，在提取过程中，不同品种
的紫苏提取液表现出色泽有一定差异，香味也有区
别，值得我们进一步研究探讨。
2.5 不同生育时期紫苏叶片中 RosA含量的差异
分别对 4 个品种紫苏花蕾期、开花期、结实初
期、成熟期叶片中 RosA的含量进行测定(表 3)。结
果表明，紫苏不同品种、同一品种不同生育时期叶片
中 RosA含量均有较大差异。本实验选用的 4 个紫
苏品种中，紫赤 10 叶片中 RosA 含量在各个生育时
期相对较高，而紫野 1 相对较低。紫赤 10 叶片中
RosA含量在花蕾期为 2.138mg /g，开花期 3.66mg /g，
而结实初期含量最高，达到为 6.226mg /g，在种子成
熟后叶中 RosA含量又下降为 3.377mg /g。其它 3 个
品种也均在不同生育时期间也呈现出类似的变化规
律，均为结实初期 RosA含量最高。
表 3 不同时期紫苏叶中提取 RosA的含量(mg /g)
不同时期
(月 /日)
花蕾期
(8.20)
开花期
(9.15)
结实初期
(9.25)
成熟期
(10.6)
紫野 4 1.605 2.282 3.345 1.968
白苏 2.55 2.695 4.712 2.953
紫赤 10 2.138 3.66 6.226 3.377
紫野 1 1.082 1.831 3.574 1.771
3 讨论
本文主要分析了不同方法及不同比例有机溶剂
对提取紫苏叶子中 RosA含量的影响，并针对在不同
时期以及不同品种间提取 RosA 含量的差别进行了
研究。结果表明，紫苏叶中 RosA 最有效的提取方法
是水∶甲醇∶HCl(20 ∶80 ∶1) ，但由于甲醇毒性较大，在
提取过程中不易操作，容易造成污染，也可采用丙酮
水溶液进行浸提(水 ∶丙酮 ∶ HCl，20 ∶80 ∶1)［8］来代替，
浸提液经萃取﹑真空干燥后即得紫苏提取物。12 个
品种叶片中 RosA含量差异较大，其中紫野 8 的含量
显著高于其它品种，开发利用潜力最大。紫苏的花
期一般为 7 月～8 月，9 月～10 月为结实期，本实验中，
由于本地气候冷凉，紫苏的花期相对较晚，约为 8 月
上旬到 9 月上旬，结实期约为 9 月中旬～10 月初。开
花后到结实初期紫苏叶中 RosA 的含量最高，此时最
适合采摘新鲜叶片进行 RosA 提取。研究结果为进
一步开发和利用紫苏提供了依据。
参考文献
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