全 文 ：应用与环境生物学报 2011，17 ( 1 ): 029~033
Chin J Appl Environ Biol=ISSN 1006-687X
2011-02-25
DOI: 10.3724/SP.J.1145.2011.00029
促有丝分裂活化蛋白激酶（Mitogen-activated protein
kinase，MAPK或MPK）途径是调控细胞刺激应答的重要信
号途径之一，广泛存在于动物、酵母、植物等真核生物中. 当
细胞内或细胞外环境发生变化时，MAPK kinase（MAPKK）
通过双磷酸化MAPK活化位点TxY中的苏氨酸和酪氨酸残基
激活MAPK. 激活后的MAPK通过磷酸化底物调节相应的生
理功能 [1~3]. 在植物中，已报道了多条MAPK参与了植物的各
种生理调控 [4~5]. 根据相似性可将植物MAPK分为A、B、C、D
四大类，其中A、B、C的模体为TEY，而D类的模体为TDY. 在
已有报道中，A、B、C、D四类植物MAPK都参与了多种生理
应答 [6]. 在对MAPK进行进化分析中发现，植物MAPK形成独
立的进化分支，与动物和酵母的MAPK区分明显 [7]，说明植物
MAPK有着其特有的进化途径.
植物MAPK通 过多个水平调节胁迫的应答. 在 水稻中
已发现有多 个MAPK的转录受到胁迫的诱导 [8]. 在 拟南芥
中，有 报 道 AtMPK3的 转 录受 到 低 温、盐、氧化等 非生物
胁迫的诱导 [9~10]. 此 外, 在 D类MAPK中还发现了选择性剪
切的MAPK基因，OsBWMK1. OsBWMK1有3种剪切形式：
OsBWMK1L、OsBWMK1M和OsBWMK1S. 在对它们的转录
分析中发现OsBWMK1M和OsBWMK1S会受到胁迫条件的诱
导，而OsBWMK1L则是恒定表达 [11]. MAPK的磷酸化修饰变
化是MAPK胁迫应答的关键调控方式. 在胁迫中MAPK的蛋
白量常常是保持较为恒定的水平，以保证MAPK磷酸化修饰
调控的正常执行. 在植物中已发现多个A、B类MAPK的活性
非生物胁迫对盐生杜氏藻DsMPK转录、翻译和
磷酸化修饰的影响*
雷高鹏1 冯晓虎2 徐 辉1 孙建瑞1 谢 力1 曹 毅1**
（1四川大学生命科学学院微生物与代谢工程四川省重点实验室 成都 610064）
(2成都生物制品研究所 成都 610023）
Effect of Abiotic Stress on Transcription, Translation and Phosphorylation of
DsMPK in Halotolerant Algae Dunaliella salina*
LEI Gaopeng1, FENG Xiaohu2, XU Hui1, SUN Jianrui1, XIE Li1 & CAO Yi1**
(1Micobiolgy and Metabolic Engineering Key Laboratory of Sichuan Province, College of Life Sciences, Sichuan University, Chengdu 610064, China)
(2Chengdu Institute of Biological Products, Chengdu 610023, China)
Abstract Mitogen-activated protein kinase (MAPKs) cascades play key roles in cell development, proliferation, and
differentiation of all eukaryote under biotic and abiotic stresses. The microalgae Dunaliella salina is a model for studying
tolerance to various abiotic stresses, and it performs excellent in its adaptation to the hypersalinity environment and other
abiotic stresses. Previously, from D. salina we had indentified DsMPK, which was repressed on transcription level under
cold and hypersalinity condition. In this study, the transcription of DsMPK was analyzed under heat, hypersalinity, UV and
oxidative stresses. The transcription of DsMPK also decreased under oxidative stress. The DsMPK profiles of translation and
phosphorylation were detected by western blotting. On phosphorylation level, DsMPK was repressed under cold, heat, UV and
oxidative stresses, but not under hyposalinity stress. Furthermore, the DsMPK profile of phosphorylation was correlated with
the change of growth rate during D. salina culture. It was proposed that DsMPK might mediate a signal transduction of cell
division. Fig 4, Ref 29
Keywords Dunaliella salina; mitogen-activated protein kinase; abiotic stress; signalling mediation; phosphorylation
CLC Q945.78 : Q78
摘 要 促有丝分裂活化蛋白激酶（Mitogen-activated protein kinase，MAPK或MPK）途径是在真核生物中广泛存在
的调控多种生理 过程的信号 途 径，在细胞增殖、分化、凋亡、生物和非生物胁迫等生理 过程的调控中起着关键的
作用. 盐生杜氏藻（Dunaliella salina，盐藻）是目前世界上最耐盐的真核光合生物之一. 在前期实验中，已发现盐藻
MAPK（DsMPK）的表达受到低温和高盐胁迫的抑制. 分析DsMPK在高温、低盐、氧化、紫外胁迫中的表达变化，发
现DsMPK还受到氧化胁迫的抑制. 进而分析DsMPK在高温、低盐、氧化、低温、高盐和紫外胁迫中翻译和磷酸化修
饰的变化，发现除低盐胁迫外，在磷酸化修饰水平DsMPK同样受到各种非生物胁迫的抑制. 在对不同生长阶段盐藻
DsMPK磷酸化变化的分析中还发现，DsMPK的磷酸化水平与生长速率有一致性. 各方面DsMPK的变化趋势说明其为
一调控生长相关的MAPK. 图4 参29
关键词 盐生杜氏藻；促有丝分裂活化蛋白激酶；非生物胁迫；信号调控；磷酸化修饰
CLC Q945.78 : Q78
收稿日期：2010-05-12 接受日期：2010-05-22
*国家自然科学基金项目（Nos. 30871321，30971817）资助 Supported by
the National Natural Science Foundation of China (Nos. 30871321, 30971817)
**通讯作者 Corresponding author (E-mail: caoyi_01@163.com)
30 17 卷应 用 与 环 境 生 物 学 报 Chin J Appl Environ Biol
受到胁迫的诱导 [12~14]. 最近研究表明C类MAPK也受到胁迫
和激素的诱导 [15~16]，而AtMPK7能被氧化胁迫和生物胁迫激
活. 研究较多的植物D类MAPK，OsBWMK1也能被多种非生
物胁迫和激素所激活[17]，而拟南芥AtMPK9则受到ABA的诱
导 [18]. 在藻类中的MAPK途径研究报道还很少. 近来从测序
完成的衣藻基因组序列中挖掘得到了8条MAPK基因. 其中
的CrMPK_LF4和鞭毛长度调节相关 [19]，但其它衣藻MAPK
的功能还有待进一步研究. 在较早的杜氏藻MAPK研究中发
现，在高盐胁迫下存在2个潜在的MAPK相关蛋白 [20~21]. 而
后在Dunaliella viridis中利用非磷酸化和磷酸化的p38和JNK
特异抗体杂交分析，发现了多个与非生物胁迫相关的MAPK
蛋白 [22]. 此后在D. viridis中，通过磷酸化TEY的特异抗体找
到了两个细胞分裂相关的MAPK蛋白. 但 通 过同源克隆获
得的基因片段发现，该片段编码的MAPK蛋白活化区却为
TDY [23]. 虽然如此，在藻类中的MAPK研究仍未有将基因和
胁迫条件下藻类MAPK的转录、翻译、翻译后修饰变化有效
地联系起来. 盐生杜氏藻是耐盐机制研究的模式生物之一，
具有广泛的盐耐受性 [24~25]. 在高盐胁迫中，盐藻通过积累大
量甘油以平衡渗透压 [26]，并在叶绿体的外缘积累大量的β-
胡萝卜素[25]，因而具有巨大的生物学和经济学价值. 已有研
究机构开展了对盐藻全基因组测序的工作. 本实验室对盐藻
抗逆机制进行了长期的研究，已发现盐藻对渗透、紫外、营
养等非生物胁迫有较高的耐受性. 在前期已经获得一个盐藻
MAPK（DsMPK）基因的基础上，开展了对DsMPK在非生物
胁迫条件下的转录、翻译和磷酸化修饰变化研究.
1 材料与方法
1.1 盐藻的培养及胁迫处理
将原藻种按5%的接种量加入到盐藻培养基中. 光照16
h，黑暗8 h，25 ℃于光照培养箱中培养. 把在正常培养条件下
生长到对数生长期的盐生杜氏藻50 mL转移到100 mL的三角
瓶里，进行以下各种胁迫处理：高盐胁迫中，向培养盐生杜
氏藻的三角瓶里加入NaCl，使体系中NaCl的终浓度为3 mol/
L；低盐胁迫中，将盐生杜氏藻离心收集后，重悬于相同体积
含盐0.5 mol/L的盐生杜氏藻培养基中；低温胁迫中，把装有
盐生杜氏藻的三角瓶放置在4 ℃的光照培养箱中；高温胁迫
中则将其转移到37 ℃的光照培养箱中；氧化胁迫中，向培养
盐生杜氏藻的三角瓶里加入H2O2，终浓度为0.4 mol/L；紫外
胁迫中，将50 mL盐生杜氏藻置于平板中，于150 µW/cm2的紫
外照射下处理. 然后分别于不同时间段，离心收集盐生杜氏
藻细胞，用于进一步实验.
1.2 荧光定量PCR
将 处 理 过 的 样 品 通 过 Tr i z o l 方 法 提 取 R N A . 利 用
SYBR ExScript RT-PCR Kit（Perfect real time）（TaKaRa
公司）中的反转 录 试 剂获得 cDNA. 根 据说明书用 iCycler
iQTM Multi-Color Real Time PCR Detection System（BIO-
R A D）进 行 荧 光 定 量 PCR分 析 . 所 用 荧 光 定 量 PCR引物
如下：Q-sense1：5’-AAGACATGGCTGCGCTTCACC -3’；
Q-ant isense1：5’-AAGCCCGTCAGTCTTCTCCTCT-3’；
18-sense：5-TTGGGTAGTCGGGCTGGTC-3；18-antisense：
5-CGCTGCGTTCTTCATCGTT-3. 每次实验经过3次重复.
1.3 总蛋白的提取和免疫共沉淀
根据报道的总蛋白提取方法 [12]做一定的修改. 将50 mL
胁迫处理的盐藻4 000 r/min离心3 min收集沉淀. 用蛋白提取
Buffer [HEPES-KOH（pH 7.5）50 mmol/L，EDTA 5 mmol/L，
Triton X-100 0.5%，EGTA 5 mmol/L，DTT 5 mmol/L，NaF 25
mmol/L，Na3VO4 5 mmol/L，β-glycerophosphate 50 mmol/L，
glycerol 10%，PMSF 2 mmol/L，leupeptin 2 mg/mL，pepstatin
A 2 mg/mL] 重悬沉淀，4 ℃静置30 min，放-80 ℃至少2 h. 取
出融化后12 000 r/min离心10 min，上清即为盐藻总蛋白. 将总
蛋白用蛋白提取Buffer稀释至1 mg/mL. 取300 µL总蛋白与10
μL protein A beads（GE），4 ℃混合1 h，4 000 r/min离心3 min
取上清. 向上清中加入10 μL抗体，4 ℃混合1 h. 再向混合液中
加入20 μL protein A beads，4 ℃混合1 h，4 000 r/min离心3 min
弃上清. 向沉淀中加入蛋白上样Buffer，经处理后进行蛋白电泳.
1.4 Western杂交
经SDS-PAGE电泳后，将分离胶浸入预冷的转移缓冲液
中. 在转移槽中于4 ℃电压100 V转膜1 h. 每张膜加入约10 mL
封闭液，室温封闭1 h. 用抗体 稀释液将一抗按比例推荐稀
释，4 ℃孵育过夜. TTBS洗膜4次，每次10 min. 用抗体稀释液
将二抗稀释后，室温孵育1 h. TTBS洗膜4次，每次10 min. 用
二氨基联苯胺（DAB）方法进行显色. 在对DsMPK蛋白分析
中一抗为对DsMPK的兔特异性多抗. 在DsMPK磷酸化变化
分析中，将总蛋白用DsMPK兔特异性多抗免疫共沉淀后，用
商业化磷酸化TEY特异性抗体进行分析.
2 结果与分析
2.1 非生物胁迫下DsMPK表达量变化
DsMPK在低温和高盐胁迫下的表达量随时间增加而降
低，在前期实验已得到证实. DsMPK在高温、低盐、氧化胁
迫下的表达量变化如图1所示. 在高温胁迫下，DsMPK表达
量在胁迫后期仅有少量增加. 而在低盐胁迫中，DsMPK表达
量不受影响. 在氧化胁迫中，DsMPK的表达量在前30 min维
持在80%左右，而后迅速下降，在3 h时达到最低，约为正常
水平的30%，但其后逐渐恢复到正常水平. 在紫外胁迫15 min
后，盐藻RNA便无法提取. 在15 min内DsMPK的表达量变化
如图1所示. 在紫外处理过程中DsMPK表达量并未表现出明
显变化. 根据已有报道，当紫外辐射剂量达到200 mJ/cm2时，
藻类就开始出现凋亡和细胞裂解 [27]. 本实验中当紫外胁迫15
min时，辐射剂量达到135 mJ/cm2，而到30 min时就已超过200
mJ/cm2. 因而，在15 min后无法提取出RNA可能是由于紫外对
核酸的破坏，导致细胞凋亡而无法提取得到RNA.
2.2 非生物胁迫下DsMPK蛋白量的变化
各种胁迫下DsMPK蛋白量变化如图2所示. DsMPK在低
温胁迫下的蛋白量从30 min后逐渐降低，直到3 h后才开始
恢复. 而在高温胁迫下，DsMPK蛋白量在90 min左右有小幅
的下降. DsMPK的蛋白量不受低盐和高盐胁迫的影响. 在氧
化胁迫中，DsMPK的蛋白量变化也并不明显. 在紫外胁迫15
min后，虽然盐藻RNA无法提取，但在30 min时仍可检测到
DsMPK蛋白. 在胁迫时间内DsMPK的蛋白量没有明显变化.
2.3 非生物胁迫对DsMPK磷酸化水平的变化
各种胁迫下DsMPK磷酸化修饰变化如图3所示. DsMPK
311 期 雷高鹏等：非生物胁迫对盐生杜氏藻DsMPK转录、翻译和磷酸化修饰的影响
在低温 胁迫下的磷酸化 逐渐 降 低，在3 h时就 达 到最低 水
平，而后开始逐渐恢复. 而在高温和高盐胁迫下，DsMPK磷
酸化在15 min左右出现了短时间的降低. 而在低盐胁迫中，
DsMPK磷酸化不受影响. 在氧化胁迫中，DsMPK磷酸化在30
min左右出现了短时间的降低. DsMPK磷酸化在紫外胁迫5
min就有明显的降低，到30 min时已降到极低水平.
2.4 不同生长阶段DsMPK磷酸化水平的变化
为分析DsMPK与生长 的关 系，检 测了不同 生长 时 间
DsMPK磷酸化修饰变化，如图4所示. 在刚转接后的2 d内，
DsMPK磷酸化修饰水平明显增加，在培养8 d 后，DsMPK磷
酸化修饰水平开始出现降低. 但与之相比，DsMPK的蛋白量
却并没有明显的变化.
3 讨 论
3.1 非生物胁迫对DsMPK转录、翻译和磷酸化修饰的
影响
在前期实验中已发现在高盐和低温环境下DsMPK的表
达受到抑制. 而在氧化胁迫中DsMPK的表达同样受到抑制.
与高盐和低温不同的是，在氧化胁迫的初期，DsMPK的表达
量并未受到太大影响. 而是在90 min时出现剧烈的下降. 这
可能是由于氧化胁迫和其它胁迫性质不同引起的. 在正常细
胞中，都存在一定量的抗氧化物质，而在胁迫初期生物体内
已经存在的抗氧化物对氧化胁迫产生的活性氧（ROS）起到
了缓冲作用 [28]. 但当抗氧化物质耗尽时，ROS则对其生理代
谢产生直接影响，导致在90 min时的剧烈下降. 而在3 h左右
ROS被完全清除，从而代谢 得到恢复，表达量也随之上升.
在高温胁迫下，DsMPK表达所受影响较小. 在各个物种中，
常常对温度有一个阈值 [29]. 在温度超过该阈值时才会对其
生长产生较大影响. 而在本实验中的高温胁迫选择的37 ℃
应还未达到盐藻的阈值，所以对DsMPK表达影响不大 . 而
在前期的低温胁迫实验实验中，4 ℃明显超过了该阈值，导
致了DsMPK表达量的大幅下降. 低盐胁迫中DsMPK的表达
量维持稳定 . 据已有报道，盐藻具有较广的盐耐受性 [24]. 在
0.5 mol/L的NaCl下，盐藻能够迅速地适应盐浓度的变化，因
而对表达不产生影响. 而在紫外胁迫中，在可检测时间段内
DsMPK的表达变化也不十分明显. 由此可以看出，DsMPK
的表达不受非生物胁迫诱导，而且高强度的胁迫还会抑制
DsMPK的表达.
在对DsMPK的分析中可以看到，在低盐、高盐、氧化和
紫外胁迫的过程中其蛋白量都未见明显的变化，而在高温胁
迫中DsMPK的蛋白量在短时间内有少量的降低，在低温胁迫
中DsMPK的蛋白量出现了逐步的下降，到3 h后才开始恢复.
在高温和低温胁迫的过程中，可能由于盐藻耐受性较差或抑
制了蛋白的翻译稳定性受到温度胁迫的影响进而导致了蛋
白量的变化. 虽然在高盐和氧化胁迫中中DsMPK的转录量有
图1 非生物胁迫条件下DsMPK表达量的变化
Fig. 1 Transcription changes of DsMPK under abiotic stress
图2 DsMPK在非生物胁迫下的蛋白量变化
Fig. 2 Protein changes of DsMPK under abiotic stress
图3 DsMPK在非生物胁迫下的磷酸化变化
Fig. 3 Phosphorylation changes of DsMPK under abiotic stress
图4 DsMPK在不同培养时间蛋白和磷酸化的变化
Fig. 4 Phosphorylation and protein changes of DsMPK during cultrue
32 17 卷应 用 与 环 境 生 物 学 报 Chin J Appl Environ Biol
明显的降低，但可能由于这几种胁迫对蛋白翻译影响不大，
从而DsMPK的蛋白量保持在稳定的水平. 而在紫外胁迫中由
于时间较短，未观察到蛋白的明显变化.
通 过DsMPK特 异性 抗体免 疫 共 沉 淀 后，利用 磷 酸化
TEY特异性抗体分析发现DsMPK的磷酸化是持续性的. 也
就 是说 DsMPK的 磷 酸化 是 正常生长 过 程中所 需的，推 测
DsMPK参与了盐藻生长或其他生长中所需的生理 过程 . 由
于 低 盐 胁 迫 对 盐 藻 的生长没有影 响，在 整 个 胁 迫 过 程中
DsMPK磷酸化没有变化 . 在高盐和高温胁迫中DsMPK在10
min左右出现小幅短暂的降低，而在氧化胁迫中则出现在30
min左右. DsMPK磷酸化水平的降低表明在这一时间内盐藻
出现了在胁迫条件下生长的被抑制和生理上的一个调节转
变过程. 在D. viridis也发现了胁迫对细胞分裂相关MAPK磷
酸化的抑制 [23]. 氧化胁迫下时间的滞后说明其对盐藻产生影
响的时间比高温和高盐较晚，而且影响也较小. 但在低温胁
迫中可以看到DsMPK磷酸化逐步降低到很低的水平而后恢
复，说明低温对生长的强烈抑制. 而在适应胁迫环境之后，恢
复生长的同时DsMPK磷酸化也会增加. 在非持续性胁迫中，
如氧化胁迫，DsMPK的磷酸化水平能恢复到正常水平. 与之
不同的是，在高盐、高温、低温的持续性胁迫中，虽然DsMPK
在适应胁迫后磷酸化有增加，但在胁迫环境中的磷酸化水平
明显低于正常培养条件下的磷酸化水平. 这说明在胁迫环境
中生长速率降低. 在紫外胁迫5 min时DsMPK磷酸就有降低，
表明紫外胁迫虽然在短时间内没有完全破坏蛋白和核酸，但
对盐藻的生长已产生直接影响. 在高剂量的紫外胁迫下最终
导致了细胞的凋亡，DsMPK的磷酸化水平也随之降低.
3.2 生长与DsMPK磷酸化的关系
在不同的生长阶段DsMPK磷酸化出现了明显的变化. 在
刚接种到新鲜培养基中时，盐藻会有一个适应的过程，生长
有一定时间的延迟，相应的DsMPK磷酸化也较低. 而在培养
2 d后，盐藻适应后进入对数生长期，DsMPK磷酸化也明显增
高. 在培养8 d后盐藻生长进入生长的平台期，DsMPK磷酸化
也随之降低. 这说明DsMPK磷酸化水平和盐藻的生长有一定
的一致性. 这也与D. viridis中调控生长相关的MAPK趋势一
致 [21]. 综合胁迫对DsMPK的影响，可以初步认为，DsMPK参
与了盐藻生长相关的调控过程.
References
1 Qi M, Elion EA. MAP kinase pathways. J Cell Sci, 2005, 118: 3569~3572
2 Andreasson E, Ellis B. Convergence and specificity in the Arabidopsis
MAPK nexus. Trends Plant Sci, 2010, 15: 106~113
3 Chen RE, Thorner J. Function and regulation in MAPK signaling
pathways: Lessons learned from the yeast Saccharomyces cerevisiae.
Biochim Biophys Acta, 2007, 1773: 1311~1340
4 Nakagami H, Pitzschke A, Hirt H. Emerging MAP kinase pathways in
plant stress signalling. Trends Plant Sci, 2005, 10: 339~346
5 Mishra, NS, Tuteja, R, Tuteja N. Signaling through MAP kinase
networks in plants. Arch Biochem Biophys, 2006, 452: 55~68
6 MAPK Group. Mitogen-activated protein kinase cascades in plants: A
new nomenclature. Trends Plant Sci, 2002, 7: 301~308
7 Liu Q, Xue Q. Computational identification and phylogenetic analysis of
the MAPK gene family in Oryza sativa. Plant Physiol Biochem, 2007,
45: 6~14
8 Agrawal GK, Iwahashi H, Rakwal R. Rice MAPKs. Biochem Biophys
Res Commun, 2003, 302: 171~180
9 Ahlfors R, Macioszek V, Rudd J, Brosche M, Schlichting R, Schee
D, Kangasjarvi J. Stress hormone-independent activation and nuclear
translocation of mitogen-activated protein kinases in Arabidopsis
thaliana during ozone exposure. Plant J, 2004, 40: 512~522
10 Mizoguchi T, Irie K, Hirayama T, Hayashida N, Yamaguchi-Shinozaki
K, Matsumoto K, Shinozaki KA. A gene encoding a mitogen-activated
protein kinase kinase kinase is induced simultaneously with genes for
a mitogen-activated protein kinase and an S6 ribosomal protein kinase
by touch, cold, and water stress in Arabidopsis thaliana. Proc Natl Acad
Sci USA, 1996, 93: 765~769
11 Koo SC, Yoon HW, Kim CY, Moon BC, Cheong YH, Han HJ, Lee SM,
Kang KY, Kim MC, Lee SY, Chung WS, Cho MJ. Alternative splicing
of the OsBWMK1 gene generates three transcript variants showing
differential subcellular localizations. Biochem Biophys Res Commun,
2007, 360: 188~193
12 Ichimura K, Mizoguchi T, Yoshida R, Yuasa T, Shinozaki K. Various
abiotic stresses rapidly activate Arabidopsis MAP kinases ATMPK4
and ATMPK6. Plant J, 2000, 24: 655~665
13 Beckers GJ, Jaskiewicz M, LiuY, Underwood WR, He SY, Zhang S,
Conratha U. Mitogen-activated protein kinases 3 and 6 are aequired
for full priming of stress responses in Arabidopsis thaliana. Plant Cell,
2009, 21: 944~953
14 Droillard M, Boudsocq M, Barbier-Brygoo H, Laurière C. Different
protein kinase families are activated by osmotic stresses in Arabidopsis
thaliana cell suspensions: Involvement of the MAP kinases AtMPK3
and AtMPK6. FEBS Lett, 2002, 527: 43~50
15 Ortiz-Masia D, Perez-Amador MA, Carbonell J, Marcote MJ. Diverse
stress signals activate the C1 subgroup MAP kinases of Arabidopsis.
FEBS Lett, 2007, 581: 1834~1840
16 Doczi R, Brader G, Pettko-Szandtner A, Rajh I, Djamei A, Pitzschke
A, Teige M, Hirt H. The Arabidopsis mitogen-activated protein kinase
kinase MKK3 is upstream of group C mitogen-activated protein kinases
and participates in pathogen signaling. Plant Cell, 2007, 19: 3266~3279
17 Cheong YH, Moon BC, Kim JK, Kim CY, Kim MC, Kim IH, Park
CY, Kim JC, Park BO, Koo SC, Yoon HW, Chung WS, Lim CO, Lee
SY, Cho MJ. BWMK1, a rice mitogen-activated protein kinase, locates
in the nucleus and mediates pathogenesis-related gene expression by
activation of a transcription factor. Plant Physiol, 2003, 132: 1961~1972
18 Jammes F, Song C, Shin D, Munemasa S, Takeda K, Gu D, Cho D, Lee
S, Giordo R, Sritubtim S, Leonhardt N, Ellis BE, Murata Y, Kwak JM.
MAP kinases MPK9 and MPK12 are preferentially expressed in guard
cells and positively regulate ROS-mediated ABA signaling. Proc Natl
Acad Sci USA, 2009, 106: 20520~20525
19 Berman SA, Wilson NF, Haas NA, Lefebvre PA. A novel MAP kinase
regulates f lagellar length in Chlamydomonas. Curr Biol, 2003, 13:
1145~1149
331 期 雷高鹏等：非生物胁迫对盐生杜氏藻DsMPK转录、翻译和磷酸化修饰的影响
20 Yuasa T, Muto S. Activation of 40-kDa protein kinases in response to
hypo- and hyperosmotic shocks in a halotolerant green alga Dunaliella
tertiolecta. Plant Cell Physiol, 1996, 37: 35~ 42
21 Chitlaru E, Seger R, Pick U. Activation of a 74 kDa plasma membrane
protein kinase by hyperosmotic shocks in the halotolerant alga
Dunaliella salina. J Plant Physiol, 1997, 151: 429~436
22 J i menez C, Be r l T, R iva rd CJ, Edel s t e i n CL , Capa sso J M.
Phosphorylation of MAP kinase-like proteins mediate the response of
the halotolerant alga Dunaliella viridis to hypertonic shock. Biochim
Biophys Acta, 2004, 1644: 61~69
23 Jimenez C, Cossio BR, Rivard CJ, Berl T, Capasso JM. Cell division in
the unicellular microalga Dunaliella viridis depends on phosphorylation
of extracellular signal-regulated kinases (ERKs). J Exp Bot, 2007, 58:
1001~1011
24 Garcıa F, Freile-Pelegrın Y, Robledo D. Physiological characterization
of Dunaliella sp. (Chlorophyta, Volvocales) from Yucatan, Mexico.
Bioresour Technol, 2007, 98: 1359~1365
25 Oren A. A hundred years of Dunaliella research: 1905~2005. Saline
Syst, 2005, 1: 2
26 Chitlaru E, Pick U. Regulation of glycerol synthesis in response to
osmotic changes in Dunaliella. Plant Physiol, 1991, 96: 50~60
27 Tao Y, Zhang X, Au DWT, Mao X, Yuan K. The effects of sub-lethal
UV-C irradiation on growth and cell integrity of cyanobacteria and
green algae. Chemosphere, 2010, 78: 541~547
28 Droge W. Free radicals in the physiological control of cell function.
Physiol Rev, 2002, 82: 47~95
29 Wahid A, Gelani S, Ashraf M, Foolad MR. Heat tolerance in plants: An
overview Environ. Exp Bot, 2007, 61: 199~223