免费文献传递   相关文献

黄精总黄酮和总酚的含量测定



全 文 :黄精总黄酮和总酚的含量测定
陈克克1,史 丽1,李 莺1,强 毅2
(1.西安文理学院 生命科学系,陕西 西安 710065;2.陕西师范大学 生命科学学院,陕西 西安 710062)
摘 要:分别采用NaNO2- Al(NO3)3- NaOH和Folin-Ciocalteu分光光度法,以芦丁和没食子酸为对照
品,首次测定了黄精样品中总黄酮和总酚的含量。结果表明,芦丁浓度在4.8-57.6μg/ml范围内线性关系
良好。没食子酸浓度在1.04-8.32μg/ml范围内线性关系良好。黄精中总黄酮含量为8.32±0.22mg/g,
总酚含量为20.37±1.40mg/g。此方法操作简单方便、稳定性好、精密度高、准确可靠,该结果不仅为黄精的
药理研究提供参考,而且为进一步开发利用黄精资源奠定基础。
关键词:黄精;总黄酮;总酚
  黄酮类和酚类化合物广泛存在于植物界,是
许多中草药的有效成分,发挥着多种药理活性,如
清除体内自由基、舒张血管、抗癌、抗病毒、抗菌消
炎、抗过敏等[1],因此具有重要的研究意义,受到
了越来越广泛的关注。
黄精,别名土灵芝、鸡头参,为百合科黄精属
多种植物的干燥块茎,中华人民共和国药典2010
版收载了黄精(Polygonatum sibiricum Red)、多
花黄精(Polygonatum cyrtonema Hua)和滇黄精
(Polygonatum kingianum Col.Et Hemsl)的干燥
根茎入药。黄精是我国传统大宗药材,其药用历
史已逾2 000a,在古代养生学家的眼中是味神奇
的延年益寿之品。现代药理学研究表明,黄精还
具有抗疲劳、抗氧化、抗肿瘤、抗菌、降血糖、降血
脂等多种活性。植物化学成分研究证明,黄精中
含有糖类、皂苷、酮及蒽醌类化合物、生物碱、微量
元素和挥发油等多种成分[2-6]。目前,对黄精的
植物化学成分研究主要集中在对其多糖及皂苷成
分的研究上,而对其总黄酮和总酚的研究尚未见
报道。考虑到黄酮类和酚类化合物可能是黄精发
挥多种药理作用的活性因子,笔者实验对黄精中
总黄酮和总酚的含量进行了测定,以期为黄精药
理活性的研究提供一定的科学依据。
 收稿日期:2011-08-07
 基金项目:西安文理学院专项科研基金资助项目(项目编号KYC201009)。
 作者简介:陈克克(1981-),女,讲师,硕士,研究方向:天然药物活性成分分析
櫨櫨櫨櫨櫨櫨櫨櫨櫨櫨櫨櫨櫨櫨櫨櫨櫨櫨櫨櫨櫨櫨櫨櫨櫨櫨櫨櫨櫨櫨櫨櫨櫨櫨櫨櫨櫨櫨櫨櫨櫨櫨櫨櫨櫨櫨櫨

表3 不同处理对甜瓜综合产量的影响
处理
产量
第一茬
产量(kg)
第二茬
产量(kg)
合计
产量(kg)
折合公顷
产量(kg)
产量对比
(kg)
处理1  1 322  1 105  2 427  36 405 +16 065
处理2  1 381  1 080  2 461  36 915 +16 575
处理3  1 295  1 530  2 825  42 375 +22 035
处理4  1 123  934  2 057  30 855 +10 515
对照 1 016  340  1 356  20 340  0
3 讨论与结论
蒲城县是陕西省的甜瓜生产基地,瓜农连年
多次使用唑类农药防治甜瓜白粉病致使甜瓜抗药
性不断增强,防效越来越差,成本不断提高,主产
区有不同程度的药害发生,表现:甜瓜茎节间明显
变短,瓜型指数变小,叶子厚硬,叶形变小,邹缩,
叶色暗绿,并伴有僵瓜裂瓜现象发生,直接影响甜
瓜的产量和品质。通过喷施朵麦可4% 水乳剂
600倍液,防治效果明显,对甜瓜营养生长和生殖
生长无不良影响,建议在蒲城甜瓜主产区可
示范应用。有关朵麦可4%的水乳剂在生长季使
用的次数和对甜瓜生长机理的影响有待进一步
研究。
·85· 陕 西 农 业 科 学 2012(1)
1 材料、试剂与仪器
1.1 材料
黄精饮片,购自北京同仁堂药店西安分店,经
粉碎,过40目孔径筛,保存备用。
1.2 主要试剂
没食子酸和芦丁标准品购自中国药品生物制
品检定所,Folin-Ciocalteu试剂购自上海荔达生
物科技有限公司,其它试剂均为国产分析纯。
1.3 主要仪器
TU-1800紫外-可见分光光度计(北京普
析通用仪器有限责任公司);电子分析天平
BS223S(北京赛多利斯仪器系统有限公司)等。
2 实验方法
2.1 黄精样品溶液的制备
准确称量黄精样品3g,加入60%乙醇水溶
液60ml,在30℃条件下于摇床上浸提24h,过
滤,分别取滤液,即得样品溶液。
2.2 总黄酮含量的测定
2.2.1 芦丁对照品溶液的配制 精确称取已烘
干至恒重的芦丁标准品(纯度≥98%)12mg,
置于50ml量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度,
摇匀,即得芦丁标准品溶液,浓度为0.24mg/ml。
2.2.2 芦丁标准曲线的制备 参照《镰形棘豆总
黄酮和总酚的含量测定》中芦丁标准曲线的制备
方法进行实验[7]。
2.2.3 样品的含量测定 取样品溶液1ml,按
照2.2.2芦丁标准曲线的制备方法进行实验,计
算样品中总黄酮的含量。
2.2.4 精密度、稳定性与重复性实验 参照《镰
形棘豆总黄酮和总酚的含量测定》中精密度、稳定
性与重复性实验进行实验[7]。
2.2.5 加样回收率实验 精密吸取1.0ml已知
浓度的样品溶液各3份,各组分别精密加入已知
含量芦丁标准品溶液1.0ml,按“2.2.2芦丁标准
曲线的制备”方法显色后,以不含样品的溶液作为
空白对照,于510nm波长处测定吸光度,重复3
次,计算回收率。
2.3 总酚含量的测定
2.3.1 没食子酸对照品溶液的配制 精确称取
已烘干至恒重的没食子酸标准品(纯度≥95%)
13mg,置50ml量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻
度,摇匀,即得没食子酸标准品溶液,浓度为0.26
mg/ml。
2.3.2 没食子酸标准曲线的制备 参照《镰形棘
豆总黄酮和总酚的含量测定》中没食子酸标准曲
线的制备方法进行实验[7]。
2.3.3 样品的含量测定 取样品溶液0.1ml,
按照2.3.2没食子酸标准曲线的制备方法进行实
验,计算样品中总酚的含量。
2.3.4 精密度、稳定性与重复性实验 参照《镰
形棘豆总黄酮和总酚的含量测定》中精密度、稳定
性与重复性实验进行实验[7]。
2.3.5 加样回收率实验 精密吸取0.1ml已知
浓度的样品溶液各3份,各组分别精密加入已知
含量没食子酸标准品溶液0.1ml,按“2.3.2没食
子酸标准曲线的制备”方法显色后,以不含样品的
溶液作为空白对照,于765nm波长处测定吸光
度,重复3次,计算回收率。
3 结果与分析
3.1 总黄酮含量的测定
3.1.1 芦丁标准曲线绘制结果 以芦丁质量浓
度(mg/ml)为横坐标,对应吸光度值为纵坐标,绘
制芦丁的标准曲线,结果见图1。实验结果表明,
芦丁标准品溶液浓度在4.8-57.6μg/ml范围内
线性关系良好。得回归方程:y= 13.294x -
0.0106,相关系数R2=0.9993。
图1 芦丁标准曲线
3.1.2 样品中总黄酮含量测定结果 根据芦丁
标准曲线的回归方程,算出样品中总黄酮的含量
为8.32±0.22mg/g(以芦丁量/干材料表示)。
3.1.3 精密度、稳定性与重复性实验结果 精密
度实验 RSD为1.75%,表明仪器精密度良好。
稳定性实验RSD为1.91%,表明样品在4h内稳
定性良好。重复性实验 RSD为2.61%,表明方
法重复性良好。
3.1.4 加样回收率实验 加样回收率实验结果
见表1,加样回收率实验RSD是1.72%,表明方
法的准确率较高。
·95·陈克克等:黄精总黄酮和总酚的含量测定
表1 总黄酮加样回收率实验结果(mg)(n=3)
序号
样品溶液中
芦丁含量
标准芦丁
加入量
测得的总量
回收率
(%)
平均回收率
(%)
RSD
(%)
1  0.410461  0.24  0.669976  103.0002
2  0.409207  0.24  0.691916  106.5786  104.9471  1.72%
3  0.428639  0.24  0.703826  105.2624
3.2 总酚含量的测定
3.2.1 没食子酸标准曲线绘制结果 以没食子
酸质量浓度(mg/ml)为横坐标,相应吸光度值为
纵坐标,绘制没食子酸标准曲线,结果见图2。实
图2 没食子酸标准曲线
验结果表明,没食子酸标准品溶液浓度在1.04-
8.32μg/ml范围内线性关系良好。得回归方程:
y=128.23x+0.0142,相关系数R2=0.9985。
3.2.2 样品中总酚含量测定结果 根据没食子酸
标准曲线的回归方程,算出样品中总酚的含量为
20.37±1.40mg/g(以没食子酸量/干材料表示)。
3.2.3 精密度、稳定性与重复性实验结果 精密
度实验 RSD为0.36%,表明仪器精密度良好。
稳定性实验RSD为1.53%,表明样品在8h内稳
定性良好。重复性实验 RSD为6.89%,表明方
法重复性良好。
3.2.4 加样回收率实验 加样回收率实验结果
见表2,加样回收率实验RSD是2.34%,表明方
法的准确率较高。
表2 总酚加样回收率实验结果(mg)(n=3)
序号
样品溶液中
没食子酸含量
标准没食子
酸加入量
测得的总量
回收率
(%)
平均回收率
(%)
RSD
(%)
1  0.100237  0.026  0.118563  93.9213
2  0.10953  0.026  0.126881  93.6186  95.0537  2.34%
3  0.095785  0.026  0.118888  97.6213
  实验采用 NaNO2- Al(NO3)3- NaOH 和
Folin-Ciocalteu分光光度法首次对黄精中总黄
酮和总酚含量进行了测定,黄精饮片中总黄酮的
含量为8.32±0.22mg/g,总酚的含量为20.37±
1.40mg/g,总酚含量明显高于总黄酮含量,前者
是后者的2倍多。该方法操作简单方便、稳定性
好、精密度高、准确可靠,该结果不仅为黄精的药
理研究提供参考,而且为进一步开发利用黄精资
源奠定基础。
参 考 文 献:
[1] 王海敏,虞海霞,董蕊,等.苕子蜜总酚酸和总黄酮
含量测定及抗氧化活性的研究[J].食品科学,2010,
31(1):54-58.
[2] 杨明河,于德泉.黄精多糖和低聚糖的研究[J].药学
通报,1980,15(7):44-45.
[3] 王彩霞,徐德平.黄精中乌苏酸型皂苷的分离与结
构鉴定[J].食品与生物技术学报,2008,27(3):33-
36.
[4] 唐翩翩,徐德平.黄精中甾体皂苷的分离与结构鉴
定[J].食品与生物技术学报,2008,27(4):34-37.
[5] 张亮.不同产地黄精中微量元素的主成分分析[J].
微量元素与健康研究,2009,26(6):19-21.
[6] 余红,张小平,邓明强,等.多花黄精挥发油 GC-
MS分析及其生物活性研究[J].中国实验方剂学杂
志,2008,14(5):4-6.
[7] 杨光明,王栋,张芳芳,等.镰形棘豆总黄酮和总酚
的含量测定[J].药学与临床研究,2009,17(5):376-
380.
·06· 陕 西 农 业 科 学 2012(1)