全 文 ：福 建 农 学 院 学 报 , : ( 3 ): : 、 6一 2 、 s , 9 5 5
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多 花 水 仙 胚 珠 离 体 培 养
吕柳新 朱秀英 欧 静
( 福建农学院 )
摘 要
对多花水仙 4 个品种类型进行胚珠离体培养 , 结果表明品种的倍性起着重要作用 。 三倍体难
以培养成功 . 胚珠的发育状况亦有很大影响 。 用作离体培养的胚珠 , 以授粉后 15 一20 天 , 正值球
形胚或心脏形胚形成期为最适宜 , 未经授粉 、 受精的胚珠未能培养成功 . 适宜的培养条件可以打
破种子的休眠 , 直接在试管中发芽成苗 。
关键词 : 多花水仙 , 胚珠培养
从 30 年代开始 , 一些学者开展胚珠培养 的研究 ; 试图缩短植物从授粉到种子 成 熟 的 时
间 , 克服远缘杂交胚胎的中途败育 , 为离体控制受精提供研究基础等 。 但其研究的深度和广
度 , 远不及花粉或其它组织的培养 , 到目前为止 , 仅有 10 余种植物获得成功 ( 中国科 学 院
上海植物生理研究所细胞室 1 9了8 , B h o j w a n i 等 1 9 8 3 ) 。
水仙属 ( N a cr `S su : L . ) 植物 , 通常采用无性繁殖 。 为加速繁殖 , 近年来利用 鳞茎盘 、
幼嫩叶片等营养器官进行离体培养的研究 已有不少报道 , 但有关胚珠离体培养的研究报道甚
少 。 捷克的 V . B a l a t k o v a 等 ( 1 9了了 ) 曾利用黄水仙 ( N a r c `S s u s 夕s e u d o n a r e `S S u S L . ) 的
一个栽培品种 “ C ar l ot n ” ( 单花类型 ) 进行 了胚珠的离体授粉试验 , 在试 管中 获 得 了 种
子 。 作者对多花 水仙的若干品种类型进行了胚珠的离体培养研究 , 其中二个类型不仅得到了
种子 , 且有一部分胚珠经培养一段 时间后 , 能在试管中发芽成苗 。 这一结果 , 在理论上以 及
在水仙育种实践中均具有一定参考价值 。
1 材料与方法
供试材料包括二个开白色花 的二倍体品种 ( 编号 I 一 1 和 I 一 2 , Z n 一 2 ) 以及二个开
两色花的三倍体 品种 ( 其 中一个是副冠橙黄色的漳州水仙 , 编号 l 一 1 , Z n 一 30 ; 另 一 个
是副冠浅黄 色的外地引进品种 , 编号 l 一 3 , Z n 一 32 ) 。 材料 由我院漳州分部提供 。
对 以上 四个 品种类 型未经授粉的成熟胚珠 以及授粉 后 1 周和授粉后 15 ~ 20 天的 胚珠 ,
带胎座或不带胎座 , 在无菌条件下 , 接种于 M s 十 K t 1 m g / L + N A A o . s m g / L + 蔗糖 2 %
的培养基上 , 培养温度控制在 15 ~ 2 0 ℃ , 经暗培养 1D 天后 , 每天加光 1 0 小时继续培养 。
2 结果与讨论
多花水仙成熟胚珠的长度约 1 m m 。 各品种类型未授粉的成熟胚珠离体培养 , 经 20 天左
右 , 胚珠稍有膨大 , 呈乳白色半透明状 。 其 中带胎座的胚珠膨大较为明显 , 长可达 2 m m左
右 。 但是 , 经 3D 天 之后 , 胚珠逐渐变成淡灰色并枯萎坏死 , 四个品种类型的 状 况 基 本 相
同 。
授粉后 1 周的胚珠 , 接种时未见胚珠大小有差别 。 但经 2。 天培养之后 , 在 白花 水仙 I
基, 8 7牟 4 月 6 日收到,
DOI : 10. 13323 /j . cnki . j . f af u( nat . sci . ) . 1988. 03. 006
3 期 吕柳新等 : 多花水仙胚珠离体 培养 7 1 2
一 l 和 I 一 2两个二倍体类型 中 , 可 见到少数胚珠较明显的膨大 , 并 目种脐处颜色 开 始 转
绿 , 随着培养时间的推移 , 色泽逐渐加深 , 由淡绿 。 绿 ) 黑 色 , 并遍及整个种子 , 但种子较
小 , 长约 2 ~ 3 m m , 继续培养未能发芽成苗 。 而三倍体类型的漳少! {水仙和副冠浅黄色 的水
仙未出现上述现 象 。
授粉后 15 ~ 2 0 天 , 三倍体 的漳州水仙和副冠 浅黄色的水仙 , 其胚珠与未授粉的成 熟 胚
珠在大小上仍无 明显差别 , 而 白花水仙 I 一 1 和 I 一 2 两个二倍体类型 , 则在每个子房 内有
3 ” 6 粒的胚珠膨大成圆形 , 直径 1 . 5 、 Z m m , 与未受精胚珠明显地不同 。 将 上述 各品 种
类型授粉后 15 ~ 20 天的胚珠取下离体培养 , 其 中两个三倍体类型的表现与未授粉胚珠 的 培
养状况无明显差异 。 两个二倍体类型则在接种 1 周之后 , 胚珠开始迅速膨大 , 经 20 天 培 养
之后 , 直径可达 3 ~ 4 m m 。 此后停止膨大 , 从种脐处开始逐渐转绿加深 , 最终形成黑 褐 色
的种子 。 经培养 30 天后多数种子仍处于休眠状态 , 发现有一粒种子在试管中发芽 ( 图 1 ) ,
以后又陆续有部分种子相继萌发形成小苗 ( 图 2 ) 。
图 1 培养胚珠形成种子并发芽成苗
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一 r t h 。 r ` e r m i n a t i n g a n d f o r m i n g s e e d l i n g .
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、 培养3 。天后的胚 珠形成种子并直接发芽
T h e o 丫 u l e s e u l t u r e d f o r 3 0 d a y s f o r m i n g s e e d s a n d d i r o e t l y 风e r皿 i n a 七i n g i n v i t r o .
b
、 发芽种子进一步形成 小苗
T h e g e r m i 公 a t i n g s e o d f u r t h e r f o r也 i n g s e e d l i 红 9 .
以上 结果 表 明 :
( l ) 品种的倍性差异 , 对培养的成 败起着最为重要的作用 。 本试验 中 , 只有两个二倍
体类型的胚珠培养得到了种子和小苗 , 三倍体品种即使在授粉后 15 ~ 20 天进行培养 , 也 未
获得成功 。 这可能与三倍体品种不能进行正常的受精有关 。 对于三倍体类型的胚珠的离体培
养能否取得成功 , 还有待进一步研究探讨 。
( 2 ) 胚珠的发育时期对培养的成败亦有重要影响 。 即使是二倍体类型 , 未经授粉受精
的胚珠 , 培养未能获得成功 ; 授粉后 1 周 的胚珠 , 经培养后仅仅形成少量较小的种子 ; 而授
粉后 15 ~ 2 0 天的胚珠 , 正值球形胚或心脏形胚形成时期 , 这样的胚珠在离体培养条件 下 ,
不仅能形成正 常种子 , 有一部分还能在试管内发芽成苗 。 说明水仙也与其它许多 植 物 一 样
( 中国科学院上海植物生理研究所 细胞室 1 9了8 ) , 培养受精后 不 久的胚珠 , 得到成熟种子
比较困难 , 而培养已发育到球形胚 , 心形胚期的胚珠 , 能得到较多成熟的种子 , 且能直接在
试管内发芽成苗 。
吃3 ) 适宜的培养条件 , 可以打破水仙种子的休眠 。 据 T h o m p “ 。 n P . A · ( 1 9 7 7 ) 报
2 8 1福 建 农 学 院 学 报 17卷
道 , 在 田间经人工授粉后获得水仙种子 , 必须经过夏季休眠 , 到秋冬季才能 萌发 。 作 者 于
1 9 8 6 年亦播种 了若干田 间 人工授粉获得的利卜子 , 直至次年 1 月严冬季 竹才开始萌发 。 以 !几
事例说明水仙种子确实存在高温季节休眠的特性 。 对于在试管中培养形成的水仙种子 , B a l -
at k o v a V
. 等 ( 1 9 7 7 ) 也认为存在着明显的休眠期 , 不能在培养过程 中直接萌发 。 然而 , 木
试验的结果表 明 , 在试管中培养水石1胚珠 , 尽竹有相当部分形成休眠种子 , 但有一部分种 子
却能打破休眠 , 直接在试管中发芽成 苗 。 因此 , 进一步孑开究适宜的培养条件 , 将可能提高它
在试管 中的萌发率 , 这对加速水仙的育种具有一定意义 。
( 4 ) 水仙带胎座的胚珠培养 , 对于幼小胚珠初期的膨大有一定的影响 , 而对于种子的
形成 以及能否在试管中直接发育成苗则无直接影 响 。
参 考 文 献
中国科学院上海植物生理研究所 细胞室 . 植物 咐织 培养和细胞 J告养 。 上 海 : 全海科技 出版社 。 1 9 7 8 : 2 2 5一 2 2 了
B a l a t戈o v a V . P l a n t 5 0 1弓 n e e L e t t e r s . l o 7 7 , s : 1 7一 2 1
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