全 文 ：水仙花是石蒜科（Amaryllidaceae）水仙属（narcissus）
多年生草本植物， 花姿、 花色丰富， 具有重要观赏
价值。 水仙花色有黄、 白、 橙、 粉红、 红、 绿等及
其渐变色调， 以黄、 白色为主。 英国皇家园艺协会
依据花的形态特征将其分为 12大类[1]， 水仙花是中
国十大传统名花之一， 国内主栽品种为金盏银台，
属于多花水仙类型的一个栽培变种。 新通过福建省
级品种认定的黄花水仙 2号弥补了我国水仙品种匮
乏、 花色单调的不足， 是一份研究多花水仙花色形
成的优良种质材料[2]。
类胡萝卜素（carotenoid）和类黄酮（flavonoid）是
植物花的主要色素[3]， 是胡萝卜素（carotene）和叶黄素
（phytoxanthin）的统称[4]， 绝大多数类胡萝卜素赋予花
被黄色、 橙色或红色[5]。 类黄酮可分为黄酮（Flavones）、
热带作物学报 2013， 34（3）： 504-510
Chinese Journal of Tropical Crops
收稿日期 2013-01-10 修回日期 2013-03-06
基金项目 国家自然科学基金（No. 30972031）； 福建省重大专项专题子课题（No. 2010NZ0003-2）。
作者简介 何炎森（1968年—）， 男， 副研究员； 研究方向： 花卉遗传育种与生物技术。 *通讯作者： 陈晓静， E-mail:xjchen804@sina.com。
多花水仙花期类胡萝卜素物质和
类黄酮物质的含量变化
何炎森 1，2， 杨碧云 1， 李 科 1， 陈晓静 1*
1 福建农林大学园艺学院园艺植物遗传育种研究所， 福建福州 350002
2 福建省农业科学院闽台园艺研究中心， 福建漳州 363005
摘 要 为了解多花水仙在开花过程中色素物质含量的变化， 以多花水仙 ‘金盏银台’ 和 ‘黄花水仙 2 号’ 4
个花期副冠和花被为材料， 采用高效液相色谱法（HPLC）测定 2 种类胡萝卜素物质和 11 种类黄酮物质的含量。
结果表明： 多花水仙在花蕾期已经有大量色素物质积累； 黄花水仙 2 号主要色素物质是芦丁和叶黄素， 金盏银
台的主要色素物质是芦丁、 柚皮苷、 阿魏酸和叶黄素； 花期 2 个品种副冠和花被中芦丁、 柚皮苷和阿魏酸的含
量变化趋势基本一致， 均表现为花蕾期含量最高， 始花期、 盛花期有所降低， 衰败期又升高的趋势， 而叶黄素
含量变化不尽相同； 经 t 测验分析， 花期不同品种同一部位中芦丁、 柚皮苷、 阿魏酸和叶黄素的含量差异显著，
同一品种不同部位中叶黄素和阿魏酸的含量差异显著， 芦丁、 柚皮苷的含量差异不显著。
关键词 多花水仙； 花色； 类胡萝卜素； 类黄酮； 高效液相色谱法
中图分类号 S682.1 文献标识码 A
Changes of Flavonoids and Carotenoids Content
in Narcissus Tazetta Flower
HE Yansen1,2, YANG Biyun1, LI Ke1, CHEN Xiaojing1
1 College of Horticulture/Institute of Genetics ＆ Breeding in Horticultural Plants,
Fujian Agriculture and Forestry University, Fuzhou, Fujian 350002, China
2 Mintai Horticulture Research Center, Fujian Academy of Agricultural Sciences, Zhangzhou, Fujian 363005, China
Abstract In order to understand the changes of pigment content in Narcissus Tazetta flower at flowering phase,
the contents of carotenoids and flavonoids in perianth and corona of JINZHANYINTAI and YELLOWFLOWERⅡ
at flowering phase were tested by high performance liquid chromatography (HPLC). The results showed that there
were a large number of various pigmentations accumulated in perianth and corona of Narcissus Tazetta, and rutin
and phytoxanthin were the main pigmentations in YELLOWFLOWERⅡ flowers, while rutin, naringin, ferulic acid
and phytoxanthin were the main pigmentations in JINZHANYINTAI flowers. The dynamic trends of rutin, naringin
and ferulic acid contents in the two varieties above were consistent at flowering phase: the contents in perianth
and corona were the highest at flower budding period, were decreased somewhat at early flowering stage and full-bloom
stage, and further increased at decline stage. But the phytoxanthin content change was not the same. Analysis of
t -test indicated that there was a significant difference in the contents of rutin, naringin, ferulic acid and
phytoxanthin between the varieties, respectively, and there was a significant difference in phytoxanthin and ferulic
acid contents between perianth and corona in the same variety, respectively, but not significant difference for rutin
and naringin contents, respectively.
Key words Narcissus Tazetta; Flower color; Carotenoids; Flavonoids; High performance liquid chromatography
doi 10.3969/j.issn.1000-2561.2013.03.020
第 3 期
1.1.2 主要仪器和药剂 主要仪器： L-2000 型高
效液相色谱仪（日本日立公司）、 Sartorius BS224S
分析天平（德国赛多利斯）、 ALLEGRATM64R 高速
冷冻离心机（美国 BECKMAN公司）。
主要药剂： 11 种类黄酮化合物和 2 种类胡萝
卜素化合物的标准品（美国 Sigma 公司）， 分别为绿
原酸（chlorogenic acid）、 咖啡酸（caffeic acid）、 芦
丁（rutin）、 香豆酸（p-Coumaric acid）、 阿魏酸（ferulic
acid）、 山奈酚（kaempferol）、 柚皮苷（naringin）、 芥
子酸（sinapic acid）、 橙皮苷（hesperidin）、 新橙皮
苷（neohesperidin）、 槲皮素（quercetin）、 β-胡萝卜
素（β-carotene）、 叶黄素（phytoxanthin）； 色谱试剂
有乙腈（德国 Merck公司）、 甲醇、 二氯甲烷、 乙酸
等（国产色谱纯）。
1.2 方法
1.2.1 样品溶液的制备 类黄酮样品溶液的制备：
参照陈源[16]方法提取类黄酮， 略有改动。 称取新鲜
材料， 加液氮充分研磨后， 转入 15 mL 离心管中，
用甲醇-DMSO（V/V＝50 ∶ 50）冲洗研钵 2 次 ， 共加
提取液 5 mL， 振荡 15 min（室温， 190 r/min）， 离心
15 min， 4 ℃， 8 000 r/min）， 取上清于 50 mL 离心
管中； 残渣重复浸提 4次（至样品颜色泛白）， 合并
上清液， 用提取液定容至 25mL， 取 4mL用 0.22μm
微孔滤膜过滤至色谱瓶中备用。
类胡萝卜素样品溶液的制备： 参照张慧平 [15]方
法提取类胡萝卜素， 略有改动。 称取新鲜材料， 加
液氮充分研磨， 在研磨过程中加入适量的 CaCO3
和 BHT。 研磨后用提取液甲醇 ∶ 乙酸乙酯 ∶ 石油醚
（1 ∶ 1 ∶ 1）约 5 mL， 冲洗研钵 2次， 转入 15 mL离心
管中， 置于-40 ℃中浸提 1~2 h； 离心 10 min（4 ℃，
8 000 r/min）， 取上清。 残渣重复浸提 3 次（至样品
颜色泛白）， 合并 3 次上清； 将上清转入分液漏斗
中萃取， 先加入蒸馏水洗涤使其分层， 留取上相，
重复 2次； 用饱和氯化钠进行洗涤， 同样重复 2次。
把洗涤后的液体转到旋转蒸发仪上于 30 ℃减压蒸
发至干， 后加入 4 mL 石油醚 ∶ 异丙醇（V/V=3 ∶ 1）
进行溶解， 用 0.22 μm 针头过滤器过滤至棕色瓶中
备用。
图 1 黄花水仙 2 号和金盏银台 4 个时期的花色变化
hu1 hu2 hu3 hu4 zh1 zh2 zh3 zh4
黄酮醇（Flavonols）、 黄烷酮（Flavanones）、 异黄酮
（Isoflavones）、 黄烷醇（Flavanols）及花色素（Anthocyanidins）
等6类[6]， 其中黄酮、 黄酮醇的颜色变化幅度从象牙
白色至浅黄色， 大多数在花色形成过程中充当辅助
色素， 而花色素苷控制着花的红色、 紫色和蓝色[7]。
不同色素种类及其含量的时空组合最终决定花色[8]。
有关水仙花色素的提取及测定的研究已有报
道[9-10]， 不同花色品种水仙花中类胡萝卜素成分不
同[11-12]。 洋水仙花的黄色和橙色受到叶黄素和 β-胡
萝卜素成份和含量的影响 [13-14]， 国内水仙主栽品种
金盏银台橙色副冠含有大量的叶黄素， 而白色花被
中基本上不含类胡萝卜素物质[15]。 水仙花色素研究
主要集中在盛花期， 涉及整个花期主要色素物质
含量的变化还未见报道。 本研究以 2 个多花水仙
为材料， 测定花期副冠和花被中类黄酮物质和类
胡萝卜素物质的含量变化， 为进一步了解水仙色
素含量与花色的关系以及开展水仙呈色机理研究
提供参考。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 测试样品 多花水仙类型 2 个品种： 金盏
银台（代号zh）和黄花水仙2号（代号 hu）， 种球由福
建农林大学园艺植物遗传育种研究所提供。 2011
年 10 月下旬种植， 2012 年 2 月下旬分别取花蕾期
（代号 1）、 始花期（代号 2）、 盛花期（代号3）及衰败
期（代号4）的花被（代号p）及副冠（代号c）为测定材
料。 2个品种 4个花期颜色变化和取样部位如图 1，
每个样品称取 2份（0.50~1.00 g， 精确至 0.01 g）， 每
个样品做好记号和记录。
何炎森等： 多花水仙花期类胡萝卜素物质和类黄酮物质的含量变化 505- -
第 34 卷热 带 作 物 学 报
保留时间/min
0 10 20 30 40 50 60 70
a
b
c
a. 金盏银台样品； b. 黄花水仙 2 号样品； c. 混合标样。
图 2 盛花期花被类黄酮化合物的色谱图
标准样品 回归方程 线性相关系数 线性范围/μg
绿原酸 chlorogenic acid Y=7.166X-0.05 0.999 9 5~50
咖啡酸 caffeic acid Y=3.013X-0.05 0.999 0 5~50
香豆酸 p-Coumaric acid Y=2.165X-0.05 0.999 1 5~50
阿魏酸 ferulic acid Y=3.208X-0.05 0.999 8 5~50
芥子酸 sinapic acid Y=8.350X-0.05 0.999 6 5~50
芦丁 rutin Y=1.401X-0.04 0.999 4 5~50
柚皮苷 naringin Y=5.952X-0.05 0.998 7 5~50
橙皮苷 hesperidin Y=6.870X-0.05 0.999 4 5~50
新橙皮苷 neohesperidin Y=5.785X-0.05 0.999 3 5~50
槲皮素 quercetin Y=1.246X-0.04 0.999 5 5~50
山奈酚 kaempferol Y=3.967X-0.05 0.999 1 5~50
β-胡萝卜素 β-carotene Y=1.209X-0.05 0.999 6 10~100
叶黄素 phytoxanthin Y=3.089X-0.06 0.999 7 10~100
表 1 标准样品的工作曲线、 相关系数和线性范围
1.2.4 样品测定和计算 供试溶液按 1.2.2 项色谱
条件测定， 类黄酮物质和类胡萝卜素物质能够得到
较好的分离， 混标和样品的高效色谱图见图 2和图 3
（仅给出盛花期花被的色谱图）。 测试样品所分离出
的物质的出峰时间与标准样品一致， 采用外标定量
法计算含量。
1.2.2 色谱条件 测定类黄酮的色谱条件： 参照
Wang 等 [17]的方法， 略有改动。 以 MerckLiChrospher_
100RP18e（250 mm×4.0 mm）为色谱柱； 流动相： 2％
乙酸溶液为流动相 A， 乙腈-0.5％乙酸（v/v ＝1 ∶ 1）
为流动相 B； 梯度洗脱程序： 0min， 95％ A， 5％ B；
10％min， 90％ A， 10％ B， 40min， 60％ A， 40％ B；
55min， 45％ A， 55％ B； 60min， 20％ A， 80％ B；
65 min， 0％ A， 100％ B； 70 min， 95 min， 5％ B；
80 min， 95％ A， 5％ B， 柱温： 35 ℃； 检测波长：
280 nm； 流速： 1.0 mL/min； 进样量： 10 μL。
测定类胡萝卜素的色谱条件： 参照张慧平 [15]的
方法 ， 略有改动 。 以色谱柱为 Luna（C18）反相柱
（5μm， 4.6×250mm）； 流动相的溶剂为乙腈 ∶甲醇 ∶二
氯甲烷的体积比 70 ∶ 15 ∶ 15； 采用等度洗脱； 柱温：
25℃； 检测波长： 445 nm； 流速： 1.0 mL/min； 进样
量： 8 μL。
1.2.3 线性范围考察 配制一系列不同含量的标
准溶液， 按选定的色谱条件进样， 测定其相对峰面
积， 以进样浓度为横坐标， 峰面积积分值为纵坐标，
得出标样的线性回归方程、 相关系数与线性范围
（表 1）。 结果表明， 13种标准化合物均能得到很好
的分离， 线性方程的相关系数达到 0.998 7～0.999 9，
能够满足水仙花被和副冠中黄酮类物质和类胡萝卜
素定量分析的需要。
506- -
第 3 期
2 结果与分析
2.1 类黄酮物质和类胡萝卜素物质含量的测定结果
以峰面积积分值求得样品中 11 种类黄酮物质
和 2种类胡萝卜素物质的含量， 根据单标保留时间
出峰顺序列于表 2。 从表 2可以看出， 在花蕾期， 黄
花水仙 2号花被中芦丁含量最高， 为 45.38 mg/g， 金
盏银台副冠中柚皮苷含量最高， 为 10.21 mg/g， 金盏
银台花被中绿原酸含量最高， 为 0.998 mg/g。 金盏银
台副冠中叶黄素含量第 2， 为 0.246 2 mg/g， 仅比黄
花水仙 2号凋萎期的橙黄色副冠（0.275 5 mg/g）略低
一点。 说明在花蕾期水仙花副冠和花被中已积累大量
的各种色素物质。
在花色最为稳定的盛花期， 金盏银台白色花
被中类黄酮物质主要为柚皮苷（2.83 mg/g）、 芦丁
（1.45 mg/g）、 绿原酸（0.438 mg/g）， 金盏银台橙黄
色副冠中类黄酮物质主要为柚皮苷（2.325 mg/g）、 芦
丁（1.133 mg/g）。 黄花水仙 2 号黄色花被中类黄酮
物质主要为芦丁（20.18 mg/g）， 黄花水仙 2 号橙黄
色副冠中类黄酮物质主要为芦丁（9.316 mg/g）。 在
盛花期， 金盏银台白色花被中类胡萝卜素物质含量
保留时间/min
c
b
a
5 10 15 20 25 30
a. 黄花水仙 2 号样品； b. 混合标样； c. 金盏银台样品。
图 3 盛花期花被类胡萝卜素化合物色谱图
表 2 金盏银台和黄花水仙 2 号 4 个时期花被和副冠中类黄酮物质和类胡萝卜素物质的含量 单位：mg/g FW
组份 绿原酸 咖啡酸 香豆酸 阿魏酸 芥子酸 芦丁 柚皮苷 橙皮苷 新橙皮苷 槲皮素 山奈酚 β-胡萝卜素 叶黄素
zh1p 0.998 0.010 5 0.000 7 0.006 0.048 3.76 6.99 0.15 0.1 0.002 1 0.001 2 0.003 3 0.028 4
zh2p 0.598 0.015 5 0.001 0 0.003 4 0.032 1.98 4.15 0.085 0.055 0.003 7 0.000 9 0.000 1 0.002 2
zh3p 0.438 0.034 7 0.002 1 0.002 5 0.026 1.45 2.83 0.057 0.025 0.002 7 0.000 7 0.000 0 0.000 4
zh4p 0.787 0.021 3 0.001 1 0.004 9 0.03 2.14 4.03 0.073 0.027 0.005 2 0.001 1 0.000 0 0.000 2
hu1p 0.047 0.034 4 0.011 7 0.035 5 0.032 7 45.38 0.007 0.176 0.028 3 0.010 5 0.001 1 0.000 3 0.038 5
hu2p 0.054 0.045 8 0.011 8 0.000 8 0.047 6 28.72 0.025 0.125 0.031 2 0.004 7 0.001 0.000 2 0.042 6
hu3p 0.067 0.094 2 0.012 9 0.007 9 0.037 8 20.18 0.016 0.095 0.037 3 0.001 8 0.01 0.000 4 0.032 9
hu4p 0.043 0.002 2 0.000 5 0.053 1 0.079 3 43.69 0.011 0.185 0.039 9 0.005 8 0.011 6 0.000 9 0.031 4
zh1c 0.21 0.013 0.002 0.008 8 0.050 5.11 10.21 0.159 0.155 0.001 2 0.004 6 0.019 0 0.246 2
zh2c 0.06 0.019 0.002 0.003 5 0.024 1.959 3.691 0.068 5 0.055 3 0.012 7 0.002 5 0.014 6 0.1876
zh3c 0.04 0.082 0.000 7 0.001 9 0.019 1.133 2.325 0.054 7 0.024 6 0.002 5 0.000 9 0.010 1 0.151 6
zh4c 0.14 0.136 0.002 9 0.003 2 0.027 1.605 3.702 0.076 3 0.033 6 0.003 4 0.001 2 0.009 3 0.137 4
hu1c 0.010 0.069 2 0.001 9 0.020 4 0.011 8 30.34 0.009 6 0.070 3 0.024 9 0.002 8 0.002 0.002 1 0.191 1
hu2c 0.011 0.051 7 0.006 3 0.011 8 0.027 7 19.17 0.032 6 0.062 1 0.025 0.013 7 0.015 3 0.001 8 0.129 9
hu3c 0.012 0.227 0.001 9 0.003 1 0.014 9.316 0.0114 0.0346 0.011 9 0.006 4 0.018 2 0.002 7 0.242 8
hu4c 0.006 5 0.229 0.001 1 0.015 3 0.015 3 10.35 0.0803 0.0504 0.014 7 0.003 8 0.011 9 0.003 2 0.275 5
何炎森等： 多花水仙花期类胡萝卜素物质和类黄酮物质的含量变化 507- -
第 34 卷热 带 作 物 学 报
2.2.1 花期柚皮苷含量变化分析 在金盏银台花
朵中， 除了花蕾期副冠高于花被， 后 3个花期花被
和副冠差别不大； 副冠和花被花期均表现为： 花蕾
期最高， 始花期有所下降， 盛花期与始花期相差不
大， 衰败期上升的趋势。 在黄花水仙 2 号花朵中，
4 个花期花被和副冠差别不大， 副冠和花被花期均
表现为： 花蕾期、 始花期、 盛花期、 衰败期差异不
明显。 t 试验分析结果表明： 同一品种不同部位之
间差异不显著， 不同品种花被之间差异显著、 副冠
之间差异不显著。
2.2.2 花期芦丁含量变化分析 在金盏银台花朵
中， 4 个花期花被和副冠差别不大； 副冠和花被花
期均表现为： 花蕾期最高， 始花期有所下降， 盛花
期与始花期相差不大， 衰败期上升的趋势。 在黄花
水仙 2 号花朵中， 4 个花期花被都比副冠高， 副冠
和花被花期均表现为： 花蕾期最高， 始花期有所下
降， 盛花期与始花期相差不大， 衰败期上升的趋
势。 t 试验分析结果表明： 同一品种不同部位之间
极微， 金盏银台橙黄色副冠中类胡萝卜素物质主要
为叶黄素（0.151 6 mg/g）， 黄花水仙 2 号黄色花被
中类胡萝卜素物质主要为叶黄素（0.032 9 mg/g），
黄花水仙 2号橙黄色副冠中类胡萝卜素物质主要为
叶黄素（0.242 8 mg/g）。 从色谱图 2 和图 3 可以看
出， 尽管存在一些类胡萝卜素物质和类黄酮物质没
有标定， 但它们的峰值比较小。 可见， 不同品种主
要色素物质不同： 金盏银台主要色素物质为柚皮
苷、 芦丁、 绿原酸和叶黄素， 黄花水仙 2号主要色
素物质为芦丁和叶黄素。
2.2 花期主要色素物质含量的变化趋势
把 4个花期上述 4种主要色素含量做成折线图
（图 4、 5、 6、 7）， 以便观察花期主要色素含量的
变化趋势。 对同一品种不同部位、 不同品种同一部
位的 4 种主要色素含量进行成对法 t 试验分析， 结
果列于表 3。
图 4 花期黄花水仙 2 号和金盏银台的芦丁含量变化
50
45
40
35
30
25
20
15
10
5
0
花蕾期 始花期 盛花期 衰败期
黄花副冠
黄花花被
金盏副冠
金盏花被
芦
丁
含
量
/（
m
g/
g）
图 5 花期黄花水仙 2号和金盏银台的柚皮苷含量变化
黄花副冠
黄花花被
金盏副冠
金盏花被
花蕾期 始花期 盛花期 衰败期
12
10
8
6
4
2
0
柚
皮
苷
含
量
/（ m
g/g
）
图 6 花期黄花水仙 2 号和金盏银台的绿原酸含量变化
黄花副冠
黄花花被
金盏副冠
金盏花被
花蕾期 始花期 盛花期 衰败期
绿
原
酸
含
量
/（
m
g/
g）
1.2
1
0.8
0.6
0.4
0.2
0
图 7 花期黄花水仙 2 号和金盏银台的叶黄素含量变化
黄花副冠
黄花花被
金盏副冠
金盏花被
花蕾期 始花期 盛花期 衰败期
叶
黄
素
含
量
/（
m
g/
g）
0.3
0.25
0.2
0.15
0.1
0.05
0
zhp zhc zhp zhc zhp zhc zhp zhc hup
zhc 0.281 5 0.527 7 -7.171 0** 9.569 2** -
hup 5.660 1* -5.073 4* -5.206 2* 4.407 8* -
huc 3.681 5* -3.123 4 -2.782 6 1.098 6 -2.587 3 -9.964 0** 0.579 0 5.047 1*
hup hup hup
色素
芦丁 柚皮苷 绿原酸 叶黄素
部位
说明： t0.05=3.182 446， t0.01=5.840 909。 * 表示差异 5％水平显著， ** 表示差异 1％水平显著。
表 3 花期 4 种主要色素含量的 t 试验分析
508- -
第 3 期
差异不显著， 不同品种同一部位之间差异极显著。
2.2.3 花期绿原酸含量变化分析 在金盏银台花
朵中， 4 个花期花被都比副冠高很多； 副冠和花被
花期均表现为： 花蕾期最高， 始花期有所下降， 盛
花期与始花期相差不大， 衰败期上升的趋势。 在黄
花水仙 2 号花朵中， 4 个花期花被和副冠差别不
大， 副冠和花被花期均表现为： 花蕾期、 始花期、
盛花期、 衰败期差异不明显。 t 试验分析结果表
明： 同一品种不同部位之间差异极显著， 不同品种
花被之间差异显著、 副冠之间差异不显著。
2.2.4 花期叶黄素含量变化分析 在金盏银台花
朵中， 4个花期副冠都比花被高很多； 副冠花期表现
为： 花蕾期最高（0.246 2 mg/g）， 始花期、 盛花期、
衰败期逐渐下降的趋势， 衰败期含量为 0.137 4mg/g；
花被花期表现为： 花蕾期最高（0.028 4 mg/g）、 始
花期、 盛花期、 衰败期逐渐下降的趋势， 衰败期最
低（0.000 2 mg/g）。 在黄花水仙 2 号花朵中， 4 个花
期副冠都比花被高； 花被在花蕾期、 始花期、 盛花
期、 衰败期差异不明显， 副冠花期表现为： 花蕾期
最低、 始花期、 盛花期、 衰败期呈现逐渐上升的趋
势。 t 试验分析结果表明： 同一品种不同部位之间
差异显著， 不同品种花被之间差异显著、 副冠之间
差异不显著。
3 讨论与结论
3.1 提取技术的选择
有机溶剂提取法对黄酮类化合物的提取率高，
是目前使用最广泛的方法 [18]。 本试验借鉴陈源 [16]方
法提取， 用甲醇-DMSO（V/V＝1 ∶ 1）提取， 得到满意
的结果。 醇类可以作为提取菊花类胡萝卜素的理想
溶剂[19]。 本试验参考张慧平的方法 [15]， 用提取液为
甲醇 ∶乙酸乙酯 ∶石油醚体积比为 1 ∶ 1 ∶ 1， 进行充
分的提取， 直至看到花瓣提取溶液变白。 由于植物
色素遇光、 酸、 氧及高温时都不稳定， 容易降解，
提取过程应尽量在低温和避光环境下进行， 如采用
液氮研磨并加入 BHT 防止花瓣氧化， 待测溶液置
于棕色瓶内、 4℃冰箱保存等措施。
3.2 色谱条件的选择
在类黄酮物质的液相分析过程中， 采用 2％乙
酸和 100％乙腈作为流动相进行分离检测， 发现峰
形拖尾严重、 对称性差， 基线不易走平， 而采用
2％乙酸跟乙腈-0.5％乙酸作为流动相进行检测 ，
可使供试品色谱峰中基线平稳， 分离度良好， 因此，
最后选择 2％乙酸和乙腈-0.5％乙酸进行梯度洗脱，
并采用能耐受酸性环境的 MerckLiChrospher_100RP18e
（250 mm×4.0 mm）色谱柱。 在类胡萝卜素的液相分
析过程中， 首先参照张慧平的方法用乙腈 ∶甲醇 ∶二
氯甲烷=70 ∶ 25 ∶ 5 进行洗脱 [15]， 发现分离效果不好，
后来改用乙腈 ∶甲醇 ∶二氯甲烷=70 ∶ 15 ∶ 15 作为流
动相， 并采取等度洗脱， 使得 β-胡萝卜素与叶黄
素得到较好的分离。
3.3 水仙花的主要色素组分和花期含量变化
近年来， 水仙花类黄酮代谢途径相关的酶基因
已被克隆并陆续登录在 NCBI 上 [20-21]， 从分子水平
上说明水仙的花色形成不仅受类胡萝卜素代谢的影
响[22-23]， 还可能与类黄酮代谢有关。 从本测定结果
可以看出， 多花水仙花朵中含有丰富的类胡萝卜素
和类黄酮化合物， 黄花水仙 2号主要色素物质为芦
丁和叶黄素， 金盏银台主要色素物质为柚皮苷、 芦
丁、 绿原酸和叶黄素。 从生理的角度说明， 水仙花
可能与菊花、 酢酱草等植物一样 [24-25]， 花色的形成
同时受到类胡萝卜素、 类黄酮代谢途径的调控。
花期 2个品种的副冠和花被中柚皮苷、 芦丁和
绿原酸的含量变化趋势基本一致， 都表现为： 花苞
期含量最高， 始花期和盛花期有所降低， 衰败期又
升高的趋势。 水仙在花朵开放之前的花蕾期已有大
量的色素物质合成， 始花期和盛花期色素含量有所
下降， 可能发生色素物质降解的原故， 草原龙胆、
迎红杜鹃、 洋桔梗等花朵中色素含量的变化也有类
似的现象 [26-27]。 而叶黄素含量在不同品种、 不同部
位的变化趋势不同。 可见， 多花水仙不同品种、 不
同部位、 不同色素物质在花期的含量变化趋势不尽
相同， 说明花色形成的复杂性。
3.4 水仙主要色素物质与花色的关系
植物花呈现橙色或黄色取决于所包含的类胡萝
卜素种类、 最主要成分以及类胡萝卜素总量， 有时
取决于其它非类胡萝卜素色素的存在 [14]。 黄花水仙
2 号和金盏银台的副冠和花被呈现不同颜色与其主
要色素组分含量及其理化性状有密切关系。 t 试验
分析结果表明： 4 种主要色素物质含量在不同品种
同一部位之间差异都达到显著水平； 在同一品种不
同部位之间芦丁、 柚皮苷含量差异不显著， 说明大
量芦丁、 柚皮苷参与水仙花色的形成， 但是芦丁为
浅黄色针状结晶， 柚皮苷为白色至浅黄色结晶， 可
能不是水仙橙黄色和黄色产生的关键因素。 而在同
一品种不同部位之间叶黄素、 绿原酸含量差异极显
著， 说明大量叶黄素、 绿原酸参与水仙花色的形
成， 而且叶黄素为棱格状黄色晶体， 绿原酸半水合
物为白色或微黄色针状结晶， 推测叶黄素可能与水
仙副冠橙黄色和花被黄色的呈色有直接相关， 而绿
何炎森等： 多花水仙花期类胡萝卜素物质和类黄酮物质的含量变化 509- -
第 34 卷热 带 作 物 学 报
原酸在白色花被呈色过程起到重要的辅助色素功
能。 从生理的角度看， 金盏银台水仙白色花被中并
非没含色素， 而是含白色或者浅黄色的色素， 花被
颜色描述为 “乳白色” 或 “淡黄色” 可能比 “白
色” 更加确切。
本研究测定的 2个品种中， 橙黄色副冠和黄色
花被中的 β-胡萝卜素都很低， 白色花被中基本上
不含 β-胡萝卜素， 似乎 β-胡萝卜素对国内多花水
仙呈现黄色与橙色没有太大影响。 β-胡萝卜素是
洋水仙红色副冠中的主要色素， 红色的深浅与其含
量相关[11]。 国内水仙花色单一， 没有红色， 可以探
索通过基因工程调控 β-胡萝卜素的代谢来培育红
花品种。 Heursel [28]发现映山红杂交后代中， 出现
了独特的带蓝色调的花色， 是由于黄酮醇的存在产
生了花色偏蓝的效果， 多花水仙中含有丰富的芦
丁， 为尝试以改变黄酮醇代谢的办法来培育水仙
花色新品系提供了新的思路。
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