全 文 ：50为接受液容积(mL);4.153为渗透面积(cm2)。
表 2　各组的累积渗透量 Q-t 方程(μg·cm -2 , n=5)
Tab 2 　The cumulative quantity of pe rcutaneous permeation
and Q-t equation per g roup(μg·cm -2 , n=5)
组别 2 h 4 h 6 h 8 h 10 h Q-t 方程 r
20% 81.51 125.70 311.19 626.12 924.47 Q=109.017 t-240.904 0.938 1
30% 99.57 219.25 421.33 780.931298.37 Q=147.964 t-323.894 0.930 4
40% 62.85 215.97 501.78 820.111310.75 Q=154.997t-347.69 0.963 2
空白 17.58 54.76 148.54 276.81 434.42 Q=52.1865 t-130.297 0.953 0
对照 94.75 259.87 527.04 880.931371.56 Q=158.734 t-325.574 0.962 7
　　结果显示 ,在 2 , 4 , 6 , 8 , 10 h 各个时间段 , 20%,
30%和 40%急性子原药材组与空白组比较差异均有
显著性(P<0.05)。20%组 6 h 后累积渗透量低于对
照组 ,与对照组比较差异有显著性(P<0.05);30%和
40%组与对照组比较差异均无显著性(P>0.05)。说
明 30%和 40%急性子 75%的乙醇溶液提取组具有促
进对乙酰氨基酚透皮吸收作用。且 30%和 40%组比
20%组促透皮性强。其累积渗透量在 2 ～ 10 h与时间
t基本呈直线关系。
本试验证实了急性子 75%的乙醇提取物对对乙
酰氨基酚有促透皮作用。中药作为透皮吸收促进剂已
有研究和报道 ,如樟脑[ 3] 、冰片[ 4] 、狭叶杜香中提取的
杜香萜烯[ 5] 以及丁香油[ 6]等 。急性子中主含凤仙甾醇
(balsaminastero l)、帕灵锐酸(parinaric acid)、皂苷 、脂
肪油 、多糖 、蛋白质 、氨基酸 、挥发油 ,以及槲皮素的多
糖苷和山柰酚的衍生物等黄酮类[ 1] 。其起促透皮作用
的应是其中所含的脂溶性成分 ,但究竟为何种成分 ,需
进一步研究。
参考文献:
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皮吸收的影响[ J] .药学服务与研究 , 2001 , 1(1):13.
[ 收稿日期] 2004-08-25
[作者简介] 朱蕙 ,女 ,大学 ,主管药师 ,电话:027-67813200-806 , E-mail:djk1@sohu.com
当归注射液的镇痛作用
朱蕙 ,查仲玲 ,王志勇 ,杨瑜 　(武汉大学中南医院 ,湖北 武汉 430071)
[ 摘要] 　目的:研究当归注射液的镇痛作用。方法:采用小鼠扭体法 、小鼠热板法 、大鼠电刺激鼠尾法进行镇痛实验。结果:当归注
射液可显著抑制醋酸所致小鼠扭体反应 ,作用强度呈剂量依赖性 ,且可提高热板法所致小鼠痛觉反应的痛阈及大鼠电刺激法所致
的痛阈 ,其强度与阿司匹林相当。结论:当归注射液具有镇痛作用。
[ 关键词] 　当归注射液 ;镇痛作用
[中图分类号] R285.6　　[ 文献标识码] A　　[文章编号] 1001-5213(2005)07-0614-03
The analgesic effect of Angelica Sinensis injection
ZHU Hui , ZHA Zhong-Ling , WANG Zhi-yong , YANG Yu(Zhongnan Hospital o f Wuhan Unive rsity , Hubei Wuhan
430071 , China)
ABSTRACT:OBJECTIVE　To study the Analgesic sinensis effect of angelica injection.METHODS　The analgesic effects w ere stud-
ied by w rithing , ho t plate test in mice and electric stimulation test in r ats.RESULTS　Angelica sinensis injection obviously restrained
the w rithing r eaction induced by acetic acid , its intensity wa s related to the do se , it also evalua ted pain threshold o f mice on the ho t-
plate and ra ts on electric stimulation.CONCLUSION　Ange lica sinensis injection has ana lge sia effect.
KEY WORDS:Angelica sinensis injection;analg esia effect
　　当归系伞形科植物当归 Angelica sinensis(oliv)
diels的干燥根 ,具有补血活血 、调经止痛之功效[ 1] 。
由当归经水煮醇沉后制得的当归静脉注射液 ,具有多
种药理活性 ,对腰腿痛 、高血压 、冠心病等有防治作
用[ 2] 。本研究通过不同疼痛模型 ,观察当归注射液的
镇痛效果 ,以期为临床应用提供理论依据。
1　材料
G L-8402 型热板测痛仪(浙江宁海医药仪器
厂);当归注射液(本院自制 ,每100 mL注射液含生药
50 g ,批号 20030810);阿司匹林肠溶片(ASP ,江苏淮
阴制药厂 ,批号 20010321 ,临用时以0.9%氯化钠注射
液配成所需浓度);0.9%氯化钠注射液(武汉双鹤药
·614· 中国医院药学杂志 2005年第 25卷第 7期 Chin Hosp Pharm J , 2005 Jul , Vol 25 , No.7
业 ,批号 20021217);其余试剂均为分析纯;昆明种小
鼠♀,体重(18±2)g(湖北实验动物中心);大鼠♀,体
重(200±20)g(湖北实验动物中心)。
2　方法
2.1　小鼠扭体法[ 3] 　小鼠随机分成 10 组 ,对照组
(0.9%氯化钠注射液),阳性对照组(ASP),当归注射
液 8组 ,其剂量按生药量计 ,分别是12.5 ,25.0 ,37.5 ,
50.0 , 62.5 , 75.0 , 87.5 , 100.0 g·kg-1·d-1 ,每组 10
只。阳性对照组0.2 mL ASP 灌胃(ig),对照组 、当归
注射液组腹腔注射(ip),连续给药3 d。第 3天用药后
1 h , ip给予每只小鼠0.6%醋酸溶液 0.2 mL ,观察给
药小鼠扭体反应潜伏期及15 min内扭体反应次数 ,计
算扭体抑制率 ,观察其镇痛作用 ,见表 1。
抑制百分率%=
对照组平均扭体数-用药组平均扭体数
对照组平均扭体数 ×100%
2.2　小鼠热板法[ 4] 　预先以(55±0.5)℃热板对♀
小鼠进行筛选 ,在 10 ～ 30 s内出现舔足反应的为合格
小鼠 ,实验分 3组进行 ,药物剂量参考量-效关系制定 ,
见表 2。以疼痛反应潜伏期为痛阈指标 ,给药前测 2
次(间隔5 min),以其均值为基础痛阈。阳性对照组 ig
给药 ,对照组 、当归注射液组 ip给药 ,连续给药3 d ,第
3天用药后1 h测定其痛阈值 。记录各组痛阈的变化 ,
并按以下公式计算痛阈提高百分率 。若60 s内未出现
舔足反应 ,痛阈计为60 s。
痛阈提高百分率%=给药后痛阈-基础痛阈基础痛阈 ×100%
2.3　电刺激大鼠鼠尾法[ 5] 　大鼠随机分成 3组 ,对照
组(0.9%氯化钠注射液),阳性对照组(ASP),当归注
射液组(87.5 g·kg-1·d-1),每组 10 只。以串脉冲方
波刺激其尾尖 1/3 处 ,强度20 V , 波宽 0.5 ms , 频率
100 Hz ,测 3次均值作基础痛阈 。阳性对照组 ig 给
药 ,对照组 、当归注射液组 ip给药 ,连续给药3 d ,药物
剂量与小鼠热板法实验一致 ,见表 3。第 3天用药1 h
后测其痛阈值 ,计算镇痛百分率。
镇痛百分率%=给药后痛阈-给药前痛阈给药前痛阈 ×100%
表 1　当归注射液对醋酸所致小鼠扭体反应的影响( x±s, n=10)
Tab 1　Effects of Ange lica sinensis injection on mice w rithing
induced by acetic acid( x±s , n=10)
组别 剂量/ g·kg -1
扭体反应
潜伏期/min 15 min扭体次数 抑制率/ %
对照组 等容量 2.1±1.1 23.5±7.0 -
ASP 0.2 4.9±1.2 6.8±4.3 71.1
当归注射液 12.5 2.9±0.8 25.8±5.8 -
25.0 1.8±0.8 25.5±4.0 -
37.5 2.2±1.1 24.1±5.3 -
50.0 3.9±1.7 18.5±7.9 21.2
62.5 4.3±1.5 12.9±7.8 b 45.1
75.0 3.9±2.1 4.9±6.8 a 79.1
87.5 4.0±2.3 4.4±2.0 a 81.2
100.0 3.7±1.9 4.6±3.2 a 80.4
注:与对照组比较 , a P<0.01 , bP<0.05
表 2　当归注射液对小鼠热板法镇痛的影响( x±s , n=10)
Tab 2 　 Effects of Angelica sinensis injection on the pain
thresho ld of the mice on hot pla te( x±s, n=10)
组别 剂量/ g·kg -1
给药前
痛阈/ s
给药后
痛阈/ s
痛阈
提高/ s
痛阈提
高率/ %
对照组 等容量 14.2±3.4 14.6±3.0 0.4±0.9
ASP 0.2 15.2±3.9 21.3±3.1 6.3±3.1a 41.4
当归注射液 87.5 13.9±4.3 19.8±6.1 5.8±3.2a 41.7
注:与对照组比较 , a P<0.01
表 3　当归注射液对大鼠鼠尾法镇痛的影响( x±s , n=10)
Tab 3 　 Effects of Angelica sinensis injection on the pain
thresho ld of the ra ts on electric stimulation( x±s , n=10)
组别 剂量/ g·kg -1
给药前
痛阈/mA
给药后
痛阈/mA
痛阈提高
值/mA
镇痛
百分率/ %
对照组 等容量 4.5±0.7 4.5±0.7 0.02±0.20
ASP 0.2 4.9±0.5 8.8±2.3 4.0±2.20 a 79.6
当归注射液 87.5 4.8±1.1 8.0±2.7 3.1±2.3 a 66.7
注:与对照组比较 , a P<0.01
3　结果
3.1　当归注射液对醋酸所致小鼠扭体反应的影响　
由表 1可见 ,当归注射液明显延长小鼠扭体反应潜伏
期 ,减少扭体反应次数 ,作用强度与剂量有关 。当归注
射液剂量为62.5 g·kg-1时可减少小鼠的扭体反应次
数(P<0.05),其剂量增加至 75.0 , 87.5 g·kg-1时可
显著减少小鼠的扭体反应次数(P <0.01),与阿司匹
林的扭体抑制率相当 , 其剂量 75.0 , 87.5 , 100.0 g·
kg
-1时 ,对小鼠扭体反应差异无显著性(P>0.01)
3.2　当归注射液对小鼠热板镇痛作用的影响　由表
2可见 ,当归注射液可显著延长小鼠热板舔足反应时
间(P<0.01),痛阈提高百分率为41.7%,与阿司匹林
痛阈提高的时间及痛阈提高率相似 。
3.3　当归注射液对大鼠鼠尾法镇痛作用的影响　当
归注射液可提高大鼠甩尾反应的电流强度 ,镇痛百分
率为66.7%,痛阈提高值与阿司匹林相近 ,镇痛百分率
相似 。
4　讨论
本研究通过不同的疼痛模型 ,观察了当归注射液
的镇痛作用。实验结果表明其能明显抑制小鼠扭体反
应 ,延迟小鼠热板舔足反应时间 ,提高大鼠电刺激法所
致的鼠尾痛阈 ,表明当归注射液具有一定的镇痛作用 ,
且呈剂量依赖性 ,根据小鼠扭体实验结果 ,小剂量当归
注射液无镇痛作用 ,当剂量为62.5 g·kg-1时 ,产生镇
痛效应 ,随着剂量的增加 ,镇痛效应增强 ,至 87.5 g·
kg -1时量效曲线走平 ,镇痛效应不再随剂量的加大而
增强 ,说明当归注射液镇痛作用具有一定的量效关系。
当归的化学组分包括挥发油和水溶性组分两大部
分。当归挥发油部分有抗炎镇痛作用 ,其发挥作用的
主要成分是藁本内酯和丁烯基呋内酯[ 6] ;当归注射液
是当归经水煮醇沉后的灭菌水溶液 ,为水溶性成分 ,同
样具有一定的镇痛效果 ,其作用与阿司匹林相当 ,可见
水溶性成分和挥发油共同具有镇痛效果 。日本学者曾
·615·中国医院药学杂志 2005年第 25卷第 7期 C hin Hosp Pharm J , 2005 Jul , Vol 25 , No.7
通过药理实验证明日本东产当归水提物有镇痛作用 ,
镇痛活性成分为聚乙炔化合物 falcarindiol和 falcari-
nolone ,且中国产当归与东当归镇痛作用相近[ 7] 。本
实验也证实当归注射液有镇痛作用 ,有关其活性物质
及作用机理 ,正在进一步探讨中。
参考文献:
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[ 收稿日期] 2005-01-18
[作者简介] 顾蔚华 ,女 ,学士 ,副主任药师 ,电话:0512-68223525
高效液相色谱-质谱联用法测定人血浆中非那雄胺的浓度
顾蔚华1 ,马仁玲2 　(1.苏州市药品检验所 , 江苏 苏州 215002;2.中国药科大学 ,江苏 南京 210009)
[ 摘要] 　目的:建立一种用高效液相色谱-电喷雾离子化质谱(HPLC-MS)联用技术测定非那雄胺血药浓度的方法。 方法:以
0.01 mo l·L-1醋酸铵水溶液-甲醇(25∶75)为流动相 , 烯酮二醇为内标。血浆样品经用醋酸乙酯萃取后上样 , 经 C18柱分离后 , 以质
谱为检测器 ,采用选择性离子检测(SIM)测定人体血浆中非那雄胺的浓度。结果:非那雄胺的线性范围0.491 ～ 98.2 μg·L-1(r=
0.999 9),平均相对回收率在 90%～ 110%之间 , 日内和日间 RSD 均<5%, 非那雄胺的最低定量限为 0.49 μg·L-1 , 提取回收率>
90%。结论:该方法快速 、准确 、灵敏 , 可用于非那雄胺的药动学研究。
[ 关键词] 　高效液相色谱-质谱联用;非那雄胺;血药浓度
[中图分类号] R927.2　　[ 文献标识码] A　　[文章编号] 1001-5213(2005)07-0616-03
Determination of finasteride in human plasma by HPLC-MS
GU Wei-hua1 ,MA Ren-ling2(1.Suzhou Institute for Drug Cont rol , Jiang su Suzhou 215002 , China;2.China Pharmaceutical Uni-
versity , Jiang su Nanjing 210009 , China)
ABSTRACT:OBJECTIVE　To develop an high-per formance liquid chr omatog r aphy and electro spray ioniza tion mass spectrometry
(H PLC-ESI-M S)me thod fo r determina tion o f finasteride in human pla sma.METHODS　The mobile phase w as composed of 0.01mol
·L -1 ammonium acetate/ w ater:methano l(25∶75).Plasma samples w ere ex trac ted with ethyl acetate and separa ted by C18 column.
The sing le quadrapo le MS was used as detector.Selected ion monito r(SIM)w as used for determination o f finasteride in human plas-
ma.RESULTS　Standard curve was linea r in the range of 0.491-98.2μg·L-1(r=0.999 9), the rela tive recovery w as between 90%
-110%.Relative standa rd devia tion (RSD)of intr a-day and inter-day a ssay s we re a ll less than 5%.The quantitation limit w as
0.49 μg·L-1 .The ex traction recove ry w as more than 90%.CONCLUSION　The method pro ves to be a stable and reliable me thod for
determina tion of finasteride in human plasma as w ell as fo r pharmacokinetic studie s.
KEY WORDS:H PLC-MS;finasteride;concentration in plasma
　　非那雄胺(finasteride)是一种治疗良性前列腺增
生的药物[ 1] 。本实验采用高效液相色谱-电喷雾离子
化质谱(HPLC-MS)联用技术 ,以质谱为检测器 ,采用
选择性离子检测(SIM)测定人血浆中的非那雄胺浓
度 ,大大提高了检测灵敏度 ,最低定量限可达0.49 μg·
L-1 。本实验对 HPLC-MS法测定非那雄胺血药浓度
的方法学进行了研究 ,并测定了 20名健康志愿者口服
非那雄胺片剂后的血药浓度 ,为临床用药提供了依据。
1　仪器与试药
1100 LC/MSD 液相色谱/质谱联用仪:具二元梯
度泵 、在线真空脱气机 、自动进样器 、恒温柱箱 、电喷雾
(ESI)接口 、MSD检测器 、Agilent 化学工作站(美国
Agilent公司)。非那雄胺对照品(南京圣和科技有限
公司);内标:烯酮二醇(常州医药原料厂);非那雄胺受
试片剂(南京圣和科技有限公司 ,批号 20030826 ,规格
5 mg/片);非那雄胺参比片剂(保列治美国默沙东药
厂 ,规格 5 mg/片);甲醇为色谱纯 ,其他试剂均为市售
分析纯 ,水为注射用水。
2　方法与结果
2.1　色谱与质谱条件　色谱柱:A lltima C18(150 mm
×4.6 mm , 5μm , All tech 公司);流动相:0.01 mol·
L-1醋酸铵水溶液-甲醇(25∶75);柱温:25 ℃;流速:
·616· 中国医院药学杂志 2005年第 25卷第 7期 Chin Hosp Pharm J , 2005 Jul , Vol 25 , No.7