全 文 ：安徽农业大学学报 , 2006, 33(1):105-107
Jou rna l of Anhui Agricultura l Un ive rsity
6-BA浓度对离体多花黄精不定芽增殖的影响①
徐忠传1, 2 ,何俊蓉 3 ,周静亚1 ,徐　晖 2
(1.常熟理工学院生物科学与工程系 ,常熟 215500;2. 浙江科技学院生物与化学工程系 , 杭州 310023;
3.四川省农科院生物技术和核技术研究所 ,成都 610066)
摘　要:为了筛选出有利于离体多花黄精不定芽增殖的最佳 6-BA浓度 , 研究几种不同 6-BA浓度对离体多花
黄精不定芽增殖的影响 。结果表明 ,当 6-BA浓度为 4 mg L - 1时 , 离体多花黄精的不定芽数量 、重量和综合质量等
效果最好 , 对不定芽增加最为有利。
关键词:6-BA;多花黄精;不定芽增殖;组织培养
　　中图分类号:Q813.12 文献标识码:A 文章编号:1672-352X(2006)01-0105-03
E ffects of d ifferent concentrations of 6-BA on adventitious bud proliferation
ofPolygonatum cyrtonema Hua in vitro
XU Zhong-chuan1, 2 , HE Jun-rong3 , ZHOU Jing-ya1 , XU Hui2
(1. Depterm ent of B io logy, Changshu Institute of Technology, Chang shu 215500;　　　　　　　　　　　　　　　　　　
2. Depterm ent of B io log ical and Chem ica l Eng ineering, Zhe jiang University of Science and Techno logy, H angzhou 310023;
3. Institu te o f B iologica l＆ Nuc lea r Technology, Sichuan Academy o f Agricultura l Sc iences, Chengdu 610066)
Abstract:To se lect the optimum 6-BA concentration fo r adventitious bud proliferation, the e ffects o f d ifferen t
concentrations of 6-BA on adventitious bud pro liferation o fPolygonatum cyrtonemaHua in vitrowere studied. The
resu lt show s that the 6-BA concentration of 4 mg L- 1 ismore favou rab le to the quantity, weigh t and qua lity of the
adven titious buds pro lifera tion ofPolygona tum cy rtonemaHua in v itro.
Key words:6-BA;Polygona tum cyrtonema Hua;adventitious bud pro life ration;tissue cultures
　　黄精是百合科黄精属多年生宿根性草本药用植
物 ,其根茎是传统中药[ 1] ,以多花黄精 Polygonatum
cyrtonemaHua为贵 。黄精含多糖 、氨基酸 、蒽醌类
化合物等成分 ,具有抗菌 、降压 、抗衰老及治疗风湿
痛等作用 [ 2] 。随着黄精的药用价值和保健价值越
来越被人们所认识 ,黄精原料的需求量也越来越大 ,
价格不断上扬 ,从而导致山区农民加剧对野生黄精
的大量掠夺性采集 ,使黄精自然资源迅速枯竭 ,给黄
精植物的开发利用和可持续发展带来不利影响 。因
此 ,对保证黄精原料来源 、实行产业化种植的呼声越
来越高 。李世 [ 3] 等人对黄精的野生变家种栽培进
行了研究 ,而且有些地方也开始人工种植黄精[ 4, 5] ,
但由于生产上多采用分根繁殖 ,其繁殖系数低 ,种根
茎用量大 ,既不经济 ,又限制了黄精的产量潜力 ,不
便栽植管理与推广 ,而且长期的分根无性繁殖很容
易引起黄精品种退化 [ 6] ,故黄精种苗问题成了人工
大面积种植的瓶颈 。
利用植物组织培养技术建立黄精快速繁殖体系
是生产优质黄精种苗的有效途径 ,其关键技术之一
在于黄精根茎上不定芽的增殖数量和质量。不同激
素组合及其浓度对此影响很大 。徐红梅等 [ 7] 报道
了植物生长调节剂对多花黄精芽体外发生过程中性
① 收稿日期:2005-08-10
基金项目:浙江省自然科学基金项目(302312)资助。
作者简介:徐忠传(1956 -), 男 ,博士 , 教授。 E-m ail:xuzc18@ cslg. edu. cn
DOI牶牨牥牣牨牫牰牨牥牤j牣cnki牣牨牰牱牪牠牫牭牪x牣牪牥牥牰牣牥牨牣牥牪牬
状的影响 ,认为激素组合 TDZ 1. 5mg L -1 +2, 4-D
1. 0mg L -1对黄精根茎芽增殖最有利。但采用激
素 6-BA与 NAA组合对黄精离体根茎进行快速增殖
的组培技术尚鲜见报道 ,为此 ,作者进行了研究 。
1　材料和方法
1. 1　材料
多花黄精 (P.cy rtonema )的根茎采集于浙江省
天台县天台山山区;氯化汞以及其他配制培养基所
需的常用化学试剂均为分析纯 。
1. 2　方法
刷掉黄精根茎泥土 ,用洗洁精溶液浸泡 10 m in
后洗净 ,再用 0. 2%氯化汞(内含 0. 05%的吐温 20)
等处理 10m in,灭菌之后 ,用无菌水清洗 5次 ,将暴
露在消毒液中的根茎组织切除 ,接种于 MS+6-BA 5
mg L -1 +NAA 0. 2 mg L - 1 +0. 8%琼脂 +3%蔗
糖的培养基 (pH5. 8)上 [ 8] ,封口后培养 。经过 2次
相同培养基的继代培养 ,再把单芽的黄精根茎接入
前述的 6-BA浓度分别为 1. 0、2. 0、3. 0、4. 0和 5. 0
mg L -1的培养基上培养。每瓶接种根茎 3 ～ 4个 ,
重复 5次。不同时间观察并统计每个根茎上不定芽
的增殖数量和增殖重量等 ,取平均值。黄精根茎的
培养条件均为:温度 18 ～ 20℃(夜 )、22 ～ 24℃(昼);
光照 12 h L- 1 ,光照度 1 500 lx。
2　结果与分析
2. 1　6-BA浓度对黄精根茎不定芽增殖数量的影响
黄精组织培养中不定芽的增殖数量直接影响到
组培效率和繁殖系数 ,而 6-BA浓度对不定芽增殖
数量和繁殖系数的影响则是关键 ,其结果见图 1。
随着 6-BA浓度增高 ,每个外植体上不定芽增殖的
数量也随之增加 , 6-BA浓度为 4 mg L- 1时不定芽
的增殖数量最大 ,平均每块外植物体上可长出 8. 3
个芽。当 6-BA浓度增高到 5mg L -1时 ,不定芽增
殖的数量反而下降(图 1),这说明高浓度的 6-BA对
黄精不定芽的增殖有抑制作用 。
2. 2　6-BA浓度对黄精根茎不定芽增殖重量的影响
不同浓度 6-BA对黄精根茎不定芽增殖的重量
有不同影响 (图 2)。图 2结果表明 ,随着 6-BA浓度
增高 ,每个外植体上不定芽增殖的重量也增加 ,但以
6-BA 4 mg L -1时不定芽增加最为显著;6-BA
5 mg L- 1时不定芽增殖重量则下降 。这个结果的
趋势与 6-BA浓度对黄精根茎不定芽增殖数量的影
响趋势基本相一致 。这也说明 ,黄精根茎不定芽增
殖的数量和重量是基本同步的。但当 6-BA浓度为
1mg L -1时 ,不定芽在数量上几乎没变化(图 1),只
是单个黄精根茎不定芽即外植体本身的重量增加而
长大 (图 2)。因此 ,对于以根茎为药用部位的黄精
中药材来说 ,也可以通过 6-BA 4 mg L - 1培养基这
一条途径来实现工厂化试管内直接繁殖其药用
器官 。
图 1　黄精不定芽在不同 6-BA浓度培养基中生长 90 d的
数量变化
F igure 1 　 Change s of adventitious buds quantity of P.
cy rtonem aHua grew in culture m ed ium w ith dif-
feren t concen tra tions of 6-BA fo r 90 day s
图 2　黄精不定芽在不同 6-BA浓度培养基中生长 90 d
的重量变化
F igure 2　 Changes o f adventitious buds w e ights o f P.
cy rtonema Hua grew in cu ltu re m edium w ith
differen t concen tra tions of 6-BA fo r 90 day s
A:6-BA 4. 0 mg L- 1;B:6-BA 5. 0 mg L- 1;NAA:0. 2 mg
L- 1.
图 3　黄精不定芽在两种 6-BA浓度培养基中生长 90 d
比较
F igure 3　Comparisons of adven titious buds o fP. cyrtonema
Hua g rew in culture medium w ith two concentra-
tions of 6-BA fo r 90 day s
106 安 徽 农 业 大 学 学 报 2006年
2. 3　6-BA浓度对黄精根茎不定芽综合质量的影响
6-BA浓度不同 ,对黄精根茎不定芽综合质量的
影响也明显 。试验中观察到 ,当 6-BA浓度为 4 mg
L
- 1时黄精根茎上增殖的不定芽饱满 、健壮 、整体质
量最好 (图 3和图 4),而且不定芽上的叶形成正常 、
发育健壮 、生长旺盛(图 5);能形成正常的地上茎和
自然根 (图 6);6-BA浓度低于 4mg L- 1时则增殖的
不定芽小 、叶子也小 、没形成地上茎;当 6-BA浓度
为 5 mg L -1时增殖的不定芽不仅小 ,而且很瘦弱
(图 3)。因此 , 6-BA 4 mg L - 1时可以有效地促进黄
精根茎上不定芽增殖及其综合质量。
图 4　6-BA 4. 0mg L -1培养基中 90 d黄精根茎不定芽
F igure 4　Adventitiou s bud o fP. cyrtonemaH ua grew in cul-
ture m edium w ith 4 m g L- 1 6-BA fo r 90 days
图 5　6-BA 4. 0 mg L - 1培养基中 60 d黄精不定芽的叶
F igu re 5　 Leaves o f adventitious bud ofP. cyrtonema Hua
g rew in culture m edium w ith 4 m g L- 1 6-BA for
60 days
图 6　6-BA 4. 0 m g L - 1培养基中 180 d黄精植物
F igu re 6　P. cyrtonem a H ua g rew in culture m ed ium w ith
4 mg L -1 6-BA fo r 180 day s
3　讨论
徐红梅 [ 7] 等采用 TDZ 1.5 mg L- 1 + 2, 4-D
1.0 mg L - 1激素组合来繁殖多花黄精 ,并认为它对
黄精不定芽增殖最有利 ,而且对多花黄精不定芽的
增殖优于 BA 2.0 mg L - 1 +2, 4-D 1.0 ～ 2.0 mg
L
-1或与 NAA 1.0 ～ 2.0 mg L -1的组合效果 , 但没
有表明 TDZ对不定芽增殖的综合质量有何影响 ,只
是说明 TDZ对不定芽的进一步生长不利 ,导致畸形
叶片的产生。本研究结果表明 , 6-BA 4.0 mg L -1与
NAA 0.2 mg L -1的激素组合不仅能够使黄精不定
芽快速增殖 ,而且不定芽增殖的综合质量好 ,无畸形
叶片产生 。这也说明 ,采用不同激素组合都能有效
地诱导黄精不定芽的增殖数量。因为多花黄精的再
生过程中 ,首先是在外植体上形成一些球形颗粒 ,之
后在这些球形颗粒上再分化出芽 ,故属于器官发生
途径 。器官发生与植物生长调节剂的种类及浓度都
有关系[ 7] ,故要从多花黄精不定芽增殖的数量和质
量等方面综合考虑 ,选择合适的植物生长调节剂的
种类及浓度。所以 ,对于多花黄精不定芽增殖的组
织培养中 , 6-BA 4. 0 mg L -1与 NAA 0. 2 mg L - 1
的激素组合则是一个值得参考和运用的参数 。
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10733卷 1期 徐忠传等　6-BA浓度对离体多花黄精不定芽增殖的影响