全 文 ：尖叶假龙胆的凋亡作用机制提供了可靠的保证。PI
单标法检测尖叶假龙胆的抑制肿瘤细胞增殖的作用，
与把细胞阻滞于 G0 /G1 期有关，G0 /G1 期的细胞数量
增加，同时 S期细胞数量减少。综上所述，EEGA 含药
血清可以抑制 A549 细胞的增殖，这可能与其阻止肿
瘤细胞由 G0 /G1 期进入 S 期，延缓细胞周期进程及
促进肿瘤细胞凋亡有关。
参考文献:
［1］ 魏茜．尖叶假龙胆化学成分及含量测定研究［D］．北京:北京中医
药大学，2014．
［2］ 李仪奎，吴健宇．血清药理实验中采血时间的通法方案［J］．中国
药理学通报，1999，15(6):569 － 570．
［3］ 徐建国，郭素堂，乔丽娟，等． 苏木提取液抑制肿瘤作用的研
究［J］．肿瘤研究与临床，2006，18(11):726 － 727．
［4］ 苗抗立，张建中，董颖，等． 苦参的化学成分及药理的研究进
展［J］．天然产物研究与开发，2001，3(2):69 － 73．
［5］ 刘娟，刘颖．丹参药理活性成分研究进展［J］．辽宁中医药大学学
报，2010，12(7):15 － 17．
［6］ 姜峰玉，孙抒．蝙蝠葛化学成分和药理作用的研究进展［J］．辽宁
中医杂志，2013，40(12):
檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱
2612 － 2614．
尖叶假龙胆与石菖蒲配伍抗抑郁的作用机理研究
吴全娥1，高彦宇1，李在斯2，孟繁昊1，隋舒婷1，李冀1*
(1．黑龙江中医药大学，黑龙江 哈尔滨 150040;2．北京理工大学珠海学院，广东 珠海 519088)
摘 要:目的:探讨尖叶假龙胆与石菖蒲配伍(龙菖)对慢性轻度不可预计应激结合孤养模型大鼠的抗
抑郁作用。方法:雌性 Wistar大鼠 60 只，随机分为空白组、模型组、龙菖 1∶ 1 组、龙菖 1∶ 2 组、龙菖 2∶ 1
组、百忧解组。观察龙菖对大鼠行为学和海马神经递质的影响。结果:龙菖药物组较模型组比较均能提
高糖水偏爱度，缩短强迫游泳不动时间，均能提高海马 5 － HT 和 GABA 含量，降低 Glu 含量，尤以 1∶ 2
组效果明显。结论:龙菖配伍对慢性轻度不可预计应激结合孤养模型大鼠有抗抑郁作用，以 1∶ 2 组效
最好。
关键词:龙菖;抗抑郁;神经递质
中图分类号:Ｒ285． 5 文献标识码:A 文章编号:1002 － 2406(2016)03 － 0072 － 03
基金项目:国家自然科学基金项目(No． 81373536);黑龙江省自然科学
基金项目(No． H2015021)
作者简介:吴全娥(1986 －)，女，黑龙江中医药大学 2013 级方剂学专业
博士研究生，主要研究方向:方剂配伍规律及药效物质基础
研究。
通讯作者:李冀* (1960 －)，男，教授，博士研究生导师，主要从事方剂
配伍规律、作用机理及药效物质基础研究工作。
收稿日期:2015 － 12 － 01
修回日期:2015 － 12 － 20
尖叶假龙胆为龙胆科假龙胆属植物，别名苦龙胆，
全草入药，气微，味苦［1］。药理作用主要表现在保肝、
降糖、抗氧化、抗炎、抗抑郁等方面［2］。石菖蒲为天南
星科多年生草本植物石菖蒲的干燥根茎，性味辛、苦、
温，入心、胃经，豁痰开窍、醒神益智，研究也表明石菖
蒲对实验性抑郁具有抑制作用［3］。抑郁症是一种情
绪节律障碍的精神疾患，归属于中医“郁证”范畴，多
由情志不畅、忧思郁结等引起气机郁滞，脏腑功能失
调。郁证之初以气滞为主，宣泄失常，上犯清窍，则神
明失聪。气郁日久，气血交阻，瘀血停积，则心神不宁。
后期可继发血瘀、火郁、痰结、食滞等。经久不愈，由实
转虚而致不同病变。尖叶假龙胆味苦性凉入肝经，石
菖蒲辛开苦燥温通入心经，芳香走窜，豁痰辟秽，二者
配伍可疏肝解郁，宁心安神。本实验旨在通过建立慢
性轻度不可预计应激结合孤养模型探讨二者配伍抗抑
郁的作用机理。
1 材料与方法
1． 1 动物
实验动物为 SPF 级 Wistar 大鼠，雌性，体质量
180 ～ 220 g，共 70 只。由哈尔滨医科大学实验动物中
心提供，编号:2015060802，许可证号:SCXK(黑)
2013 － 021。
1． 2 仪器试剂
KDL －40 低速离心机(科大创新股份有限公司中
佳分公司);anthos 2010 酶标仪(安徽实达电脑科技有
限公司);百忧解(又名盐酸氟西汀胶囊，礼来苏州制
药有限公司);5 －羟色胺(5 － HT)、谷氨酸(Glu)和
Y －氨基丁酸(GABA)试剂盒(南京建成生物有限
公司)。
1． 3 分组给药
所有大鼠均自由饮水与进食，在光暗周期为 12 h，
温度为(23 ± 2)℃的安静环境适应性饲养两周后，采
用 Willner P 慢性轻度不可预计性应激动物模型
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Information on Traditional Chinese Medicine
2016 年 5 月第 33 卷第 3 期
Vol. 33，No. 3，May． 2016
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(CUMS)［4］改良后进行实验。大鼠的应激包括:电击
加声光刺激、禁食、禁水、昼夜颠倒、4 ℃冰水游泳、潮
湿垫料、40 ℃环境。期间训练饮用蔗糖水，测定糖水
消耗和开场实验。选择评分相近大鼠 60 只，随机分为
6 组:空白组(不施加任何刺激)、慢性轻度不可预计应
激模型组、龙菖 1∶ 1 组、龙菖 1∶ 2 组、龙菖 2∶ 1 组、阳性
药(百忧解)组，除空白组外，其余各组每只鼠均孤养。
每只鼠给药 0． 3 g /kg。
1． 4 行为学观察
1)糖水偏爱度实验:应激前先进行测试，选用糖
水偏爱度相近的大鼠实验。应激第 21 天再测试。大
鼠先接受双瓶训练，一瓶是 1%蔗糖水，一瓶是纯水，
训练 48 h。然后所有大鼠禁食禁水 23 h 后，进行 1 h
糖水消耗实验。在整个应激进程的第 21 d 再进行一
次糖水消耗实验，计算糖水偏爱度。糖水偏爱度 =糖
水消耗量 /给水总量 × 100%。
2)强迫游泳实验:在应激第 22 d 测试。实验装
置:直径 20 cm，高 40 cm的玻璃缸，内装 22 ℃温水，水
深 20 cm。实验前预游 15 min，筛选不动时间过短的
大鼠。正式实验，灌胃 1 h后把大鼠放入缸中，观察并
记录 5 min内累计不动时间。实验时保持安静，保持
水的清洁度，测试两只鼠后换水，温度保持在 25 ℃。
1． 5 理化指标检测
21 天后取大鼠海马，用 ELISA法测中枢单胺类神
经递质 5 －羟色胺(5 － HT)、谷氨酸(Glu)和 Y －氨基
丁酸(GABA)。
1． 6 统计学处理
采用 SPSS 16． 0 软件，结果均以(珋x ± s)表示，组间
均数的两两比较采用 t 检验，P ＜ 0． 05 或 P ＜ 0． 01 认
为有统计学意义。
2 结果
2． 1 糖水偏爱度实验结果
第 21 天各组糖水偏爱度测试，与空白组比较，模
型组糖水偏爱度下降，有显著性差异(P ＜ 0． 05);1∶ 1、
2∶ 1 组与模型组比较有所提升，有显著性差异(P ＜
0. 05);1∶ 2、阳性组与模型组比较有非常显著性差异
(P ＜ 0. 01)。结果见表 1。
表 1 对 CMUS大鼠糖水偏爱度的影响(珋x ± s)
组别 n 第 21 天糖水偏爱度(%)
空白组 10 60． 13 ± 4． 05
模型组 10 40． 97 ± 2． 52*
1∶ 1 组 10 55． 17 ± 2． 25＊＊
1∶ 2 组 10 58． 03 ± 5． 45#
2∶ 1 组 10 54． 23 ± 3． 66＊＊
阳性组 10 61． 14 ± 4． 79#
注:与空白组比较，* P ＜ 0． 05;与模型组比较，＊＊ P ＜ 0. 05，# P ＜
0. 01。
2． 2 强迫游泳实验结果
第 22 天强迫游泳实验，与空白组比较，模型组强
迫游泳不动时间明显缩短，有非常显著性差异(P ＜
0. 01);药物组、阳性组与模型组比较有显著性差异
(P ＜ 0. 05)。结果见表 2。
表 2 CMUS大鼠强迫游泳不动时间(珋x ± s)
组别 n 不动时间(s)
空白组 10 40． 17 ± 3． 34
模型组 10 70． 13 ± 5． 42*
1∶ 1 组 10 42． 03 ± 2． 15#
1∶ 2 组 10 44． 25 ± 4． 18#
2∶ 1 组 10 38． 09 ± 2． 07#
阳性组 10 40． 85 ± 3． 93#
注:与空白组比较，* P ＜ 0． 01;与模型组比较，#P ＜ 0． 05。
2． 3 5 － HT含量的测定
21 天建模后，与空白组比较，模型组 5 － HT 明显
下降，有非常显著性差异(P ＜ 0． 01);1∶ 1、2∶ 1 组与模
型组比较有所提高，有显著性差异(P ＜ 0． 05);1∶ 2、阳
性组与模型组比较有非常显著性差异(P ＜ 0． 01)。结
果见表 3。
表 3 对 CMUS模型大鼠海马单胺类神经递质
5 － HT的影响(珋x ± s)
组别 n 5 － HT(ng /ml)
空白组 10 120． 54 ± 12． 42
模型组 10 82． 03 ± 10． 15*
1∶ 1 组 10 116． 74 ± 14． 11#
1∶ 2 组 10 123． 14 ± 17． 03##
2∶ 1 组 10 100． 82 ± 11． 48#
阳性组 10 134． 15 ± 13． 89##
注:与空白组比较，* P ＜ 0． 01;与模型组比较，# P ＜ 0． 05，## P ＜
0. 01。
2． 4 Glu的测定
21 天建模后，与空白组比较，模型组明显升高，有
非常显著性差异(P ＜ 0． 01);各给药组与模型组比较
有显著性差异(P ＜ 0． 05)。结果见表 4。
表 4 对 CMUS模型大鼠海马 Glu的影响(珋x ± s)
组别 n Glu(ng /ml)
空白组 10 19． 22 ± 7． 16
模型组 10 42． 03 ± 10． 05*
1∶ 1 组 10 28． 64 ± 4． 11#
1∶ 2 组 10 29． 14 ± 8． 03#
2∶ 1 组 10 25． 72 ± 11． 68#
阳性组 10 25． ． 35 ± 8． 19#
注:与空白组比较，* P ＜ 0． 01;与模型组比较，#P ＜ 0． 05。
2． 5 GABA的测定
21 天建模后，与空白组比较，模型组明显下降，有
非常显著性差异(P ＜ 0． 01);其他组与模型组比较有
显著性差异(P ＜ 0． 05)。结果见表 5。
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表 5 对 CMUS模型大鼠海马 Glu的影响(珋x ± s)
组别 n GABA(ng /ml)
空白组 10 98． 37 ± 12． 03
模型组 10 52． 33 ± 8． 07*
1∶ 1 组 10 81． 98 ± 12． 65#
1∶ 2 组 10 92． 36 ± 30． 12#
2∶ 1 组 10 103． 47 ± 18． 16#
阳性组 10 100． 09 ± 22． 35#
注:与空白组比较，* P ＜ 0． 01;与模型组比较，#P ＜ 0． 05。
3 讨论
抑郁症临床表现为情绪低落、抑郁、焦虑、消沉、恐
惧、多疑，沉默寡言，精神萎靡，悲观厌世等。慢性轻度
不可预计应激模型是通过模拟人们在日常生活中所遇
到的“困境”，使动物长时间地接受温和的不可预见的
应激刺激所表现出的兴趣丧失、快感缺乏、求食行为抑
制、木僵状态和记忆障碍等也与抑郁症临床表现极为
相似［5 － 8］。目前，慢性轻度不可预计应激结合孤养建
立的慢性不可预计应激模型已成为抑郁症发病机制及
抗抑郁药作用机理研究的重要模型。
对奖赏的反应性下降是抑郁症的重要特征。目前
多采用液体消耗实验中糖水消耗量、糖水偏爱度作为
衡量 CUMS抑郁模型动物快感缺乏的有效客观指标。
研究表明孤养结合慢性不可预见性应激复制抑郁症模
型后大鼠糖水消耗量及糖水偏好度降低［9］。强迫游
泳试验是利用动物不能逃出恶劣环境，导致动物产生
绝望行为而设计的一种负性应激试验，这种现象与人
类负性心理应激刺激诱导的抑郁发生和加重机理十分
相似。因此，模型动物不动状态持续时间可以作为抑
郁症行为学的评价指标。研究表明氟西汀治疗能显著
减轻抑郁模型动物强迫游泳的类抑郁样行为［10］。本
实验通过给予大鼠 21 天不可预计性应激结合孤养造
模，造模后模型组大鼠糖水偏爱度和强迫游泳实验均
支持了模型建立的成功。
大脑海马区是情绪整合和学习记忆中枢，也是介
导应激反应的重要脑区，最近研究表明应激或抑郁症
动物模型中海马神经元新生有极大降低［11］。动物实
验发现 CUMS 抑郁模型大鼠海马区的 5 － HT 水平显
著降低［12］。本实验中，模型组与空白组比较，大鼠海
马 5 － HT浓度显著降低，治疗后 1:2 组和阳性组浓度
显著升高，效果明显，二者配伍可能抗抑郁。提示龙菖
1∶ 2 组和百忧解一样可提高大鼠海马 5 － HT含量。
Glu和 GABA 是体内重要的神经递质，参与神经
生理活动，二者代谢紊乱参与了抑郁症的发生发展。
Glu是体内重要的兴奋性神经递质，GABA是体内重要
的抑制性神经递质，实验显示，抑郁症患者枕叶皮质
Glu浓度明显升高，而 GABA 浓度显著降低且在同一
脑区内 Glu 与 GABA 水平成反比［13］。氟西汀可通过
影响受体的表达和功能结构调节 Glu 和 GABA 的水
平。氟西汀是 GABAA受体的变构调节剂，可增加 PFC
区 GABA 的水平和 GABAB 受体数量，二者均有利于
改善患者的抑郁症状［14］。本实验中，模型组与空白组
比较，大鼠海马 Glu浓度显著升高，GABA 浓度显著降
低，表明 CUMS 结合孤养的抑郁模型大鼠海马 Glu 能
递质系统的功能亢进，GABA 能递质系统功能减退。
与模型组比较，1∶ 1、1∶ 2、2∶ 1 组大鼠海马 Glu 浓度显
著降低，GABA 浓度显著升高。提示龙菖配伍组可下
调抑郁模型大鼠海马 Glu，增强 GABA 而达到抗抑郁
作用。
总之，龙菖可提高慢性轻度不可预计应激结合孤
养模型大鼠的海马 5 － HT 含量，下调 Glu，增强 GA-
BA，其对中枢神经递质的影响可能是龙菖抗抑郁的作
用机理之一，有待进一步研究。
参考文献:
［1］ 郑淑芳，黄兆宏． 尖叶假龙胆的生药学研究［J］． 黑龙江医药，
1997，10(1):14 － 16．
［2］ Baez DH，QQuintero M，Beatriz N． Toxicity，antimicrobial activity and
detection of xanthones in Gentianella nevadensis［J］． Ciencia(Mara-
caibo) ，1997，7(2) :111 － 117．
［3］ 季宁东，李娟好，李明亚，等． 柴胡皂昔对石昌蒲醇沉液抗抑郁作
用的影响［J］．江苏医药，2006，32(11):1049 － 1051．
［4］ 徐叔云，卞如濂，陈修．药理实验方法学［M］．北京:人民卫生出版
社，2002．
［5］ Paul Willner，David Benton，Emma Brown，et． al． Depression． increa-
ses craving for sweet rewardsin animal and human models of depres-
sion and craving［J］． Psychopharmacology，1998，136:272 － 283．
［6］ 王文凯，孙雯，李廷利．生、炒酸枣仁配伍抗抑郁作用研究［J］．中
医药学报，2014，42(2):13 － 15．
［7］ 张华军，毛晓薇．天然抗抑郁药物促进海马神经发生的研究进展［J］．
中医药学报，2014，42(1):99 － 102．
［8］ 杨书彬，杨绍杰，卢春雪，等． 中药开心散抗抑郁症的机制研究进
展［J］．中医药学报，2016，44(1):79 － 81．
［9］ 许晶，李晓秋．慢性应激抑郁模型的建立及其评价［J］．中国行为
医学科学，2003，12(1):14 － 17．
［10］ Martin AL，Brown ＲE． The lonely mouse;verification of a separation －
induced model of depression in female mice［J］． Behav Brain Ｒes，
2010，207(1) :196 － 207．
［11］ Warner － schnidt JL，Duman ＲS． Hippocampal neurogenesis:oppo-
sing effects of stress and antidepressant treatment［J］． Hippocampus，
2006，16:239 － 249．
［12］ Dulawa SC，Holick KA，Gundersen B，et al． Effects of chronic fluox-
etine in animal models of anxietyand depression［J］． Neuropsycho-
pharmacology，2004，29(7) :1321 － 1330．
［13］ Bhagwagar Z，Wylezinska M，Jezzard P，et al． Ｒeduction in occipital
cortex gamma － aminobutyric acid concentrations in medication － free
recovered unipolar depressed and bipolar subjects［J］． Biol Psychia-
try，2007，61(6) :806 － 812．
［14］ Derry JM，Paulsen IM，Davies M，et al． A single point mutation of the
GABA (A)receptor alphas － subunit confers fluoxetine sensitivity［J］．
Neuropharmacology，2007，52(2) :497 － 505．
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中 医 药 信 息
Information on Traditional Chinese Medicine
2016 年 5 月第 33 卷第 3 期
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