作 者 ：郑雅文
期 刊 ：浙江农林大学 2015年 06期 页码：69
关键词：周期蛋白H；蛋白纯化；热稳定性；圆二色谱；重金属；拟南芥；
摘 要 ：细胞周期蛋白H(Cyclin H)属于庞大的细胞周期蛋白家族,参与细胞周期循环的各个时相。除了在高等植物中,哺乳动物细胞周期蛋白H的生物学功能和其重要性早已是研究的热点。本工作致力于通过原核表达系统获得高纯度和高产量的拟南芥CyclinH蛋白,并检测和分析其生物物理学特性。我们在拟南芥CyclinH蛋白的N-末端部分构建入了His-标签,通过一步Ni-NTA亲和纯化获得高纯度的蛋白。蛋白亲和层析实验表明,溶液中拟南芥CyclinH蛋白表现为单体状态。圆二色谱实验结果表明拟南芥CyclinH蛋白是螺旋结构蛋白并含有较高含量的无规则卷曲结构。蛋白热稳定性实验表明拟南芥CyclinH蛋白的耐热性较差...