全 文 ：落 叶 果 树 2014，46(5):13 － 15
Deciduous Fruits
DOI: 10． 13855 / j． cnki． lygs． 2014． 05． 005
褐黄水灰藓提取液对冬枣轮纹病菌的抑制效应
马海玲1，刘俊华2 *
(1．滨州学院生命科学系，山东滨州 256603;2．山东省黄河三角洲野生植物资源开发
利用工程技术研究中心)
摘 要:以褐黄水灰藓为试验材料，以冬枣轮纹病致病菌大茎点霉为受试菌株，以无水乙醇处理为对照，
以清水处理为空白对照，采用褐黄水灰藓配子体乙醇提取液进行抑菌作用研究。结果显示，无水乙醇对大茎
点霉菌丝生长抑制作用甚微，褐黄水灰藓乙醇提取液对大茎点霉菌具有较强的抑制作用，随着浓度的升高其
抑菌效应愈加强烈，100mg /mL浓度对大茎点霉的校正抑菌率达 53． 64% ;浓度与抑菌率呈对数式变化趋势明
显，正相关性达到极显著水平( p ＜ 0． 01) ，表明褐黄水灰藓可作为抗冬枣轮纹病的抑菌植物资源加以深入研
究和开发利用。
关键词:沾化冬枣;轮纹病;褐黄水灰藓;大茎点霉;乙醇提液;抑菌作用
中图分类号: Q948． 1 文献标识码: A 文章编号: 1002 － 2910( 2014) 05 － 0013 － 03
收稿日期:2013 － 09 － 27
基金项目:滨州学院国家级大学生创新创业训练计划项目(201210449111)资助
* 通讯作者:刘俊华(1980 － )，男，山东高唐人，滨州学院讲师，主要从事植物生态学教学与研究。
作者简介:马海玲(1990 － )，女，山东潍坊人，在读本科生，主要从事植物病虫害防治。E － mail:18769631150@ 163． com
沾化冬枣是黄河三角洲地区的一大特色产业，在地方经济发展中占有非常重要的地位。但近年来冬枣
轮纹病病害发生严重，对冬枣产量产生巨大冲击［1］。目前，对轮纹病的防治均以化学农药为主［2 － 4］，在一定
程度上稳定了冬枣的产量，但影响了冬枣的品质、枣农的经济收入和冬枣品牌。近年来，国内外学者研究发
现藓类植物体内富含香豆素、黄酮及苷类物质，倍半萜、二萜、三萜等次生代谢物质［5 － 8］，很多成分都表现出
抑菌效果。笔者以褐黄水灰藓为试材，研究了其乙醇提取液对冬枣轮纹病菌大茎点霉的抑菌作用。
1 试验材料与方法
1． 1 试验材料
褐黄水灰藓(Hygrohypnum ochraceum (Wils．)Loesk．)采自山东省邹平鹤伴山(海拔 350m 处)，生于流
动水中石上［9］;大茎点霉菌(Macrophoma kuwatsukaii Hara．)菌株，由滨州学院生物学实验教学中心从感染轮
纹病的冬枣上分离纯化获得。
1． 2 试验方法
将褐黄水灰藓植物体(配子体)洗净，在恒温箱中 50℃烘干，用电子天平称取 10g藓体，加 100mL无水乙
醇，研磨成浆状，放入 50℃恒温水浴锅内浸提 24 小时。以 5000r /min 离心 10 分钟，得上清液即为浸提液，补
加无水乙醇至 100mL，得浓度为 100mg /mL的浸提液母液。试验设褐黄水灰藓乙醇提取液 100、50、25、12． 5、
6． 25、0mg /mL 6 个浓度梯度，以无水乙醇处理为对照，以清水处理为空白对照。取大茎点霉备用菌株，在无
菌条件下用接种环取少许菌苔，接种至 PDA固体培养基平板的中央，置于恒温培养箱中进行暗培养得到活
化的菌株。用无菌打孔器在已活化的大茎点霉菌的同一生长圈上打孔，得到直径 7mm 的菌落块，移入上述
已制备好 6 个浓度乙醇提液和清水对照处理的平皿中央，每皿 1 块为 1 个浓度处理，重复 3 次。置于 28℃恒
落 叶 果 树 第 46 卷
温培养箱中暗培养 48 小时，观察大茎点霉的生长情况，以十字交叉法测量菌落直径。依下式计算抑菌率:抑
菌率(%)=［(清水对照菌落直径 －菌饼直径)－(处理菌落直径 －菌饼直径)］/(清水对照菌落直径 －菌饼
直径)× 100。
1． 3 数据处理与分析
试验结果采用 Excel 2003 进行数据整理，并运用 SPSS12． 0 进行相关统计与分析;组间差异性检验采用
LSD多重比较及 Duncan检验。
2 结果与分析
由表 1 褐黄水灰藓乙醇提液对大茎点霉的抑制作用看出，与对照组(清水处理)相比，无水乙醇处理
(0mg /mL)菌落直径略有减小，但不明显(p ＞ 0． 5)，表明乙醇本身对大茎点霉菌无明显抑制作用。褐黄水灰
藓乙醇提液 100、50、25、12． 5、6． 25mg /mL 5 个浓度处理对大茎点霉菌丝的生长均有一定的抑制作用，在较
低浓度下即已表现出较强的抑菌效应，且浓度越高其抑制菌丝生长的效力越强，以 2． 5mg /mL 以上浓度的抑
菌作用强，抑菌率大于 35． 91%。此外，经褐黄水灰藓乙醇提液处理的大茎点霉菌，除菌落直径明显减小外，
还表现为菌丝稀疏、纤细，菌丝密度减小，菌丝的生长量减少，且菌丝易老化。
表 1 褐黄水灰藓乙醇提液对大茎点霉菌的抑制作用
乙醇提液浓度(mg /mL) 菌落直径(mm) 抑菌率(﹪)
CK(清水) 7． 3 ± 0． 21 a 0
0(无水乙醇) 7． 1 ± 0． 15 a 2． 73
6． 25 6． 6 ± 0． 42 b 9． 55＊＊
12． 5 6． 1 ± 0． 46 b 16． 82 ＊＊
25． 0 4． 7 ± 0． 20 c 35． 91 ＊＊
50． 0 4． 1 ± 0． 25 d 44． 55 ＊＊
100． 0 3． 2 ± 0． 36 e 56． 36 ＊＊
注:表中数据为平均值 ±标准误;不同小写字母表示差异显著(p ＜ 0． 05)，＊＊表示与清水对照间差异极显著(P ＜ 0． 01)。
从抑菌率分析，褐黄水灰藓对大茎点霉的抑制效果呈现明显的浓度效应，校正抑菌率(乙醇提液抑菌率
－无水乙醇抑菌率)随褐黄水灰藓醇提液浓度变化趋势明显，但未表现为简单的直线相关，而呈极显著的对
数式变化趋势(p ＜ 0． 01)，拟合回归方程为 y = 17． 509Ln(x)－ 26． 45，相关系数 Ｒ2 = 0． 9826(图 1)。
图 1 褐黄水灰藓乙醇提液对大茎点霉菌抑制作用的浓度效应
3 小结与讨论
轮纹病多在冬枣近成熟期或贮藏期发病，开始发病一般在 9 月中上旬。初期以果实表面皮孔为中心产
生水渍状近圆形斑点，以后逐渐扩大，在常温下，几天内即可使全果腐烂，失水干缩后成为黑色僵果［2 － 4］;冬
枣叶片发病较少，枝干发病主要在结果枝上，大茎点霉是冬枣轮纹病的病原菌［1］，还危害苹果、梨、桃、杏、
李、海棠等多种果树。利用植物源制剂防治冬枣果实轮纹病具有重要意义。
41
第 5 期 马海玲等:褐黄水灰藓提取液对冬枣轮纹病菌的抑制效应
苔藓植物是植物界的一大类群，全世界已知有苔藓植物约 24000 种［10］。山东省内鹤伴山区的褐黄水灰
藓在林下溪边石生或半水生，为优势苔藓植物物种。褐黄水灰藓配子体乙醇提液 25mg /mL以上对大茎点霉
表现出较强的抑制作用，且抑菌强度与浸提液浓度呈显著对数式正相关关系。但褐黄水灰藓提取液的有关
抑菌成分及对大茎点霉的抑菌机理还有待进一步的研究。
参考文献:
［1］ 季延平，吴玉柱，刘慇等．冬枣轮纹病病原菌的研究［J］．山东林业科技，2005，2:22 ～ 24．
［2］ 尚子焕．沾化冬枣优质栽培管理及贮藏保鲜技术［J］．中国果菜，2006，1:39 ～ 40．
［3］ 徐康乐，刘哲宁，杜磊等．鲁北冬枣的主要病虫害［J］．落叶果树，2000，5:45 ～ 46
［4］ 高计辰，冯庆革，牛玉堂等．冬枣主要病虫害的发生及综合防治［J］．河北果树，2005，2:25．
［5］ 周江煜．苔藓植物的化学活性成分研究概况［J］．广西中医学院药学院学报，2002，5(4):84 ～ 87．
［6］ 娄红祥．苔藓植物化学与生物学［M］．北京:北京科学技术出版社，2006．
［7］ 吴鹏程．苔藓植物生物学［M］．北京:科学出版社，1998．
［8］ 刘俊华．山东昆嵛山药用苔藓植物资源的研究［J］．滨州学院学报，2009，25(6):57 ～ 60．
［9］ 赵遵田，曹同．山东苔藓植物志［M］．济南:山东科学技术出版社，1998．
［10］ Asakawa Y． Biologically active compounds from bryophytes［J］． Pure and Applied Chemistry，2007，79 (4):
櫥櫥櫥櫥櫥櫥櫥櫥櫥櫥櫥櫥櫥櫥櫥櫥櫥櫥櫥櫥櫥櫥櫥櫥櫥櫥櫥櫥櫥櫥櫥櫥櫥櫥櫥櫥櫥櫥櫥櫥櫥櫥櫥櫥櫥櫥
557 ～ 580．
樱桃树叶螨类害虫的发生及防治
危害樱桃树的叶螨类害虫主要有山楂叶螨(山楂红蜘蛛)和二斑叶螨。
山楂叶螨以刺吸式口器刺吸叶片汁液，叶片被害初期呈灰白色失绿小斑点，随后扩大，以致全叶呈灰褐
色，至焦枯脱落。严重年份，7 ～ 8 月份树叶大部分变焦脱落，造成二次开花，影响翌年樱桃产量。山楂叶螨 1
年发生 5 ～ 9 代，以受精雌成虫在树皮及近树干基部的土块缝隙中越冬。在生长季内，各种虫态都有，用药防
治困难。防治方法:①人工防治。秋季清除落叶，刮除老树皮，消灭越冬雌虫。春季发芽前，在主干、主枝基
部涂胶粘剂一圈，粘着出蛰的雌成虫。②出蛰期(樱桃树发芽前)喷 3 ～ 5°Be 石硫合剂。③生长季发生红蜘
蛛可用 1． 8%阿维菌素乳油 5000 倍或 25%杀螨净 500 倍或尼素朗乳剂 1500 倍液等防治。6 月上中旬以后，
如虫口密度较大，除喷布上述药剂外，还可喷 20%杀螨酯可湿性粉剂 800 倍液防治。④草把诱杀。8 月上
旬，在树干上束草把，诱集越冬叶螨，冬季取下草把烧毁。
二斑叶螨体色灰绿、黄绿或深绿色，温度高时黄白色，体背两侧各有 1 个明显褐斑，繁殖力强，对常用杀
螨剂表现较强的抵抗力，防治比较困难。该螨主要危害叶片，6 ～ 7 月螨口密度大时也到果上危害。受害叶
片主脉两侧先出现黄白色至灰白色小斑点，随害螨数量增加，危害加重，叶片呈灰白色，迅速枯焦并早期脱
落。发生密度高时大量个体垂丝拉网，危害状与山楂叶螨相似。越冬雌螨橙黄色，在枝干树皮裂缝内、老翘
皮下或树干基部周围土缝中越冬。翌年 5 月前后开始陆续出蛰，集中在树干和内膛叶片上危害。6 月为盛
发期。进入雨季后螨口密度开始下降，维持低密度直到越冬。干旱年份 8 月份仍可危害。防治方法:①消灭
越冬虫源。秋末冬初，刮除樱桃树老翘皮、清除树下杂草，进行 1 次翻地，可以压低螨口数量。②采果后用爱
福丁、三唑锡防治均效果良好。但爱福丁残效期较短，喷药后 45 天螨口数量迅速回升。三唑锡、螨死净和尼
索朗残效期较长，严重发生时，可将残效期长的杀螨剂和速效杀螨剂爱福丁混合使用，防治效果佳。
贾士龙
(山东省枣庄市山亭区农业学会，277200)
51