全 文 ：安徽农学通报，Anhui Agri.Sci.Bull.2014，20（07）
褐黄水灰藓2种提取液抑菌作用比较研究
马海玲 1 刘俊华 2*
（1滨州学院生命科学系，山东滨州 256603；2滨州学院 山东省黄河三角洲野生植物资源开发利用工程技术研究中心，山东滨州 256603）
摘 要：测定褐黄水灰藓配子体提取液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的抑菌活性，比较分析了2种提取液对受
试菌的最小抑菌浓度。结果表明:褐黄水灰藓无菌水、80%乙醇2种溶剂提取液对受试菌均有一定的抑制效
果，且其醇提液抑菌活性更强。质量浓度为100g/L的乙醇提取液，对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的抑制率分
别达69.98%、71.04%，乙醇提取液对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的MIC分别为12.5g/L、25g/L。
关键词：褐黄水灰藓提取液；抑菌作用；最小抑菌浓度；分光光度法
中图分类号 S482.7 文献标识码 A 文章编号 1007-7731（2014）07-31-02
The Inhibitory Effects of Two Kinds Extract from Hygrohypnum ochraceum
Ma Hailing1 et al.
（1Department of Life Sciences，Binzhou University，Binzhou 256603，China）
Abstract:The inhibition effects of different extracts of the bryophyte species Hygrohypnum ochraceum on
Escherichia coli and Staphylococcus aureus were tested by spectrophotometric method. The results showed
that the extracts had a certain inhibitory effects on Escherichia coli and Staphylococcus aureus，and the eth⁃
anol extract had stonger inhibitions activities. At the concentration of 100g/L，its inhibition rate on Esche⁃
richia coli and Staphylococcus aureus were 69.98% and 71.04%，and its MIC were 12.5g/L、25g/L.
Key words:Extract of Hygrohypnum ochraceum；Inhibitory effect；MIC；Spectrophotometric method
褐黄水灰藓（Hygrohypnum ochraceum），又称黄色水
灰藓，系柳叶藓科（Amblystegiaceae）水灰藓属（Hygroyp⁃
num Lindb.）植物，广泛分布于我国各省区[1]。已有研究表
明，苔藓植物能够产生如萜类、黄酮类、脂肪酸等次生代
谢产物及一些生物活性物质[2-3]，且多种苔藓植物亦被证
明有抑制微生物活性的作用[3-5]。本文以褐黄水灰藓配子
体为试材，以大肠杆菌、金黄色葡萄球菌为受试菌株，测
定其抑菌活性，并比较不同溶剂提取液的抑菌效应与最
低抑菌浓度。
1 材料与方法
1.1 材料 苔藓样品为褐黄水灰藓，采自山东省境内鹤
伴山区。供试菌株为大肠杆菌（Escherichia coli）、金黄色
葡萄球菌（Staphylococcus aureus），均由滨州学院生物学
实验教学中心提供。
1.2 仪器 立式蒸汽灭菌器、LH系列层流洁净工作台、
生化培养箱、FA1004N型电子天平、双列六孔电热恒温水
浴锅、紫外-可见光分光光度计、可调万用电热炉、电冰
箱、气浴恒温振荡器等。
1.3 方法
1.3.1 母液的制备 用电子天平准确称取 2份褐黄水灰
藓配子体干粉（各 10g），分别用无菌水、80%乙醇置于
50℃恒温水浴锅内浸提 24h后，过滤，重复提取 1次，将 2
次浸提所得滤液合并，分别加入相应提取溶剂定容至
100mL，得浓度为100g/L的提取母液。
1.3.2 最小抑菌浓度（MIC）的测定 以上述所得提取
液母液，依次 2倍稀释得到质量浓度为 50g/L、25g/L、
12.5g/L、6.25g/L、3.125g/L的褐黄水灰藓水提液和醇提
液，分别加入 0.1mL菌悬液，同时设生长对照（菌悬液+
培养基），培养 12h后观察，无菌生长的最小处理浓度即
为MIC。
1.3.3 提取液抑菌作用测定 采用分光光度计法[6]测定
褐黄水灰藓水浸提液对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌的抑
制作用。取装有 5mL已灭菌 LB液体培养基试管，放入
超净工作台中，紫外灭菌 30min。在无菌室内，准确量取
3mL褐黄水灰藓水浸提液加入上述试管中，再用移液枪
准确量取 200μL菌悬液，另取 1支装有 5mL已灭菌LB液
体培养基试管，加入 3mL褐黄水灰藓提取液、200μL LB
液体培养基，不接任何菌作为空白对照，置于 37℃恒温
基金项目：滨州学院国家级大学生创新创业训练计划项目（201210449111）资助。
作者简介：马海玲（1990-），女，山东潍坊人，在读本科生，从事植物病虫害防治工作。*通讯作者 收稿日期：2014-03-27
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DOI:10.16377/j.cnki.issn1007-7731.2014.07.003
安徽农学通报，Anhui Agri.Sci.Bull.2014，20（07）
培养箱中摇床培养 24h。然后分光光度计 600nm下比色
测定。每一个的梯度做 3次重复。另取 1支装有 5mL已
灭菌 LB液体培养基试管，加入 200μL金黄色葡萄球菌
菌悬液，3mL已灭菌 LB液体培养基，作为含菌对照，同
样条件下培养24h后，分光光度计600nm下比色测定。
提取液抑菌率：抑菌率（%）=（1-处理组吸光值/对照
组吸光值）×100。
2 结果与分析
2.1 最小抑菌浓度的测定 由表 1、表 2可知，不同提取
液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度不同：水
提液对大肠杆菌的MIC为50g/L，而对金黄色葡萄球菌的
MIC为25g/L；醇提液对2种受试菌的MIC分别为12.5g/L、
25g/L。总体来看，本试验中褐黄水灰藓醇提液的抑菌效
果较优。
表1 褐黄水灰藓提取液对大肠杆菌MIC测定结果
质量浓度（g/L）
醇提液
水提液
1.563
+
+
3.125
+
+
6.25
+
+
12.5
-
+
25.0
-
-
50.0
-
-
100.0
-
-
注：“+”表示有菌生长，“-”表示无菌生长；下同。
表2 褐黄水灰藓提取液对金黄色葡萄球菌MIC测定结果
质量浓度（g/L）
醇提液
水提液
1.563
+
+
3.125
+
+
6.25
+
+
12.5
+
+
25.0
-
+
50.0
-
-
100.0
-
-
2.2 2种提取液抑菌作用的比较 由图1可知，褐黄水灰
藓2中提取液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌生长均有一定
的抑制效果，但均在较高质量浓度下表现出较强的抑菌
效果。从最终的抑菌效果来看，褐黄水灰藓 80%乙醇提
取液的抑菌能力优于其水提液，在质量浓度为100g/L时，
醇提液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的抑制水平分别为
69.98%和71.04%。
提取液质量浓度（g/L）
抑
菌
率（
%）
图1 褐黄水灰藓2种提取液抑菌活性比较
3 结论
本研究结果初步表明，作为尚无药用记载的褐黄水
灰藓，其水提液、醇提液均对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌
生长具有一定的抑制作用，且抑菌活性与提取液质量浓
度间呈正相关关系；与水提液相比，其配子体乙醇提取液
具有更强的抑菌能力。该藓分布广且生物量大，但若作
为抑菌植物资源加以开发利用，仍需围绕其抑菌机理及
主要抑菌活性成分开展进一步研究。
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（责编：施婷婷）
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（责编：施婷婷）
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