全 文 ：第 32 卷第 6 期
2013 年 12 月
中 国 野 生 植 物 资 源
Chinese Wild Plant Ｒesources
Vol． 32 No． 6
Dec． 2013
收稿日期:2013 － 04 － 12
基金项目:山东中医药大学 SＲT项目资助。
作者简介:庞荣(1989 －)，女，中药学本科生在读。
* 通讯作者:张颖颖，男，讲师，研究方向:微生物学。E-mail:zhangyy19@ aliyun． com
doi:10． 3969 / j． issn． 1006 － 9690． 2013． 06． 007
有柄石韦不同提取物半数抑菌浓度初探
庞 荣1，高德民1，王 萍2，张颖颖2*
(山东中医药大学 1．药学院;2．基础医学院，山东 济南 250355)
摘 要 对有柄石韦活性成分的抑菌作用做了初步探讨。以不同有柄石韦提取物作用于临床常见的 8 种病原菌，
测定其半数抑菌浓度( IC50 ) 。结果证明有柄石韦不同粗提物对多种病原菌均有不同程度的抑制作用，其中黄酮类
化合物抑菌效果尤为显著。
关键词 有柄石韦; 抑菌活性;黄酮类化合物
中图分类号:Ｒ962 文献标识码:A 文章编号:1006 － 9690(2013)06 － 0019 － 02
Primary Study of 50% Inhibitory Concentration(IC50)
of Pyrrosia Extracts
Pang Ｒong1，Gao Demin1，Wang Ping2，Zhang Yingying2
(1． School of Pharmacy，Shandong University of Traditional Chinese Medicine (TCM);2． School of
Basic Medical Science，Shandong University of TCM，Jinan 250355，China)
Abstract The study had investigated the antibacterial activity of Pyrrosia petiolosa(Cirst)Ching． Dif-
ferent extracts was used against 8 kinds of bacteria，and their 50% inhibitory concentration values was
tested． The results prove that crude extracts showed inhibitory activity against multiple bacterias，and fla-
vonoids antibacterial effect is particularly significant．
Key words Pyrrosia petiolosa(Cirst)Ching;inhibitory activity;flavonoids
有柄石韦［Pyrrosia petiolosa(Cirst)Ching］为水
龙骨科植物。具有利尿、通淋、清湿热之功效［1］。
临床上用于热淋、血淋、石淋、小便不通，主治肺炎水
肿、膀胱炎、泌尿系结石、尿血、崩漏、肺热喘咳［2］。
国内外研究证明，石韦的主要活性成分为黄酮类物
质，如槲皮素、山柰酚、异槲皮苷、三叶豆素、芒果苷、
异杧果苷等，另外尚含 β －谷甾醇、绿原酸、多糖等
成分［3 － 4］。国内外对有柄石韦等的抑菌作用已做了
部分研究，但对其半数抑菌浓度(IC50)尚未见报道，
影响了人们对石韦效果的评价。为进一步评价石韦
的抑菌效果，我们对其进行了体外 IC50的研究。
1 材料与方法
1． 1 仪器与试剂
海菁华 754PC紫外 －可见光分光光度计，菏泽
鑫源 ＲE52AA 旋转蒸发器，KO － 250E 医用超声波
清洗器。所有试剂均为分析纯。
1． 2 药液制备
有柄石韦采自山东蒙山，经山东中医药大学药
学院高德民副教授鉴定。取干燥的有柄石韦粉末
50 g置于烧杯中以料液比 1∶ 8加入石油醚浸泡3 h，
药渣抽滤均分为 5 份以料液比 1∶ 20 分别用石油醚、
乙酸乙酯、正丁醇、60% 乙醇、蒸馏水回流加热提取
4 h，用双层滤纸抽滤，将滤液以 55℃旋转蒸发至其
成为浸膏，干燥称重。将以上 5 种浸膏提取物分别
用蒸馏水溶解为母液，稀释至 10． 00 mg /mL 置于无
菌试管中储存在 4℃冰箱中作为药液备用。
1． 3 供试菌株与培养基
金黄色葡萄球菌(ATCC 25923)、大肠埃希菌
(ATCC 25922)、铜绿假单胞菌(ATCC 10104)、普通
变形杆菌 (ATCC 13315)、福氏志贺菌 (ATCC
12022)、酿酒酵母(ATCC 26785)、枯草芽胞杆菌
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中 国 野 生 植 物 资 源 第 32 卷
(ATCC6633)、藤黄微球菌(ATCC9341)。由山东中
医药大学实验中心微生物实验室提供。
营养琼脂和沙保弱琼脂均购自北京奥博星生物
技术有限公司。所用培养基均经高压蒸汽灭菌后备
用。
1． 4 抑菌实验方法
抗菌活性实验采用平板稀释法［5］。首先测定
最小抑菌浓度，在此基础上计算半数抑菌浓度。
37 ℃ 培养上述各种细菌 24 h，酿酒酵母以
28 ℃培养，以无菌生理盐水将菌苔洗下，稀释成
106 cfu /mL的菌液备用。以倍比稀释法将有柄石韦
不同 提 取 物 稀 释 成 40 mg /mL、20 mg /mL、
10 mg /mL、5 mg /mL、2． 5 mg /mL、1． 25 mg /mL 共 6
组浓度，然后以无菌吸管将稀释液 1 mL分别加入到
无菌培养皿中，倒入 15 mL对应培养基摇匀，待其凝
固后，制备成不同浓度的药液平板备用。用移液管
吸取 0． 1 mL上述菌液，以涂布棒无菌操作均匀涂于
平板上，置于适宜温度下培养后，观察其生长情况，
进行菌落计数，以肉眼观测完全无菌落生长的最低
石韦提取物浓度为最小抑菌浓度。每一浓度重复 3
次实验。记录结果按数据以 Ｒeed － Muench 方法计
算半数抑菌浓度［6］。
2 结果及分析
有柄石韦不同提取物半数抑菌浓度如表 1 所
示。有柄石韦的石油醚提取物对上表中各菌种均有
抑菌活性，尤以酿酒酵母菌最为明显;乙酸乙酯提取
物对铜绿假单胞菌无抑菌活性，对普通变形杆菌抑
菌活性明显;正丁醇对上述菌种均有抑菌活性，尤以
铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌作用明显;60%乙醇对
福氏志贺菌、枯草芽孢杆菌无抑菌活性;水提取物对
大肠埃希菌、藤黄微球菌抑菌效果明显，但对普通变
形杆菌、福氏志贺菌、枯草芽孢杆菌无抑菌活性。
表 1 有柄石韦不同提取物半数抑菌浓度
菌株 PE EAE BE EE AE
铜绿假单胞菌 Pseudomonas aeruginosa 5 － 10 2． 5 5
金黄色葡萄球菌 Staphylococcus aureus 2． 5 5 2． 5 5 5
大肠杆菌 Escherichia coli 2． 5 5 5 5 10
普通变形杆菌 Proteus vulgaris 5 10 5 5 －
福氏志贺菌 Shigella fiexneri 5 5 5 － －
酿酒酵母菌 Saccharomyces cerevisiae 10 5 5 2． 5 5
枯草芽胞杆菌 Bacillus subtilis 5 5 10 － －
藤黄微球菌 Sarcina lutea 5 2． 5 5 2． 5 10
注:“－”表示无显著抑菌效果，故未计算其半数抑菌浓度。
其中，PE为石油醚提取物，EAE为乙酸乙酯提取物，BE为正
丁醇提取物，EE为 60%乙醇提取物，AE为蒸馏水提取物。
该结果显示有柄石韦活性成分具有较好的抑菌效
果，其中石油醚、正丁醇抑菌效果较好，对上述 8 种
细菌均有效;而水提取物抑菌效果稍弱，分析其原因
可能在于有柄石韦活性成分多为黄酮类，该类物质
易溶于非极性溶剂，如使用水提取物则有可能有效
成分溶解度较低，因而影响其抑菌效果。
3 讨 论
近年来国内外研究表明，石韦属植物具有广泛
的药理作用，其提取物往往具有抑菌、抗病毒等多方
面活性［3］。本研究的结果显示，有柄石韦对常见的
革兰氏阳性细菌如金黄色葡萄球菌、藤黄微球菌、枯
草芽胞杆菌及革兰氏阴性菌如大肠埃希菌、普通变
形杆菌、福氏志贺菌等均有一定的抑菌效果。相关
文献显示有柄石韦的活性成分多为黄酮类，因此，可
认为黄酮类化合物为有柄石韦的主要抑菌活性物
质。另外，大部分种类的类黄酮对金黄色葡萄球菌、
大肠埃希菌和枯草芽胞杆菌等细菌的抑制作用较明
显，对霉菌和酵母菌等真菌的抑制作用相对较
弱［7］，这与本研究基本符合，但其中有柄石韦的抗
酵母菌效果较为明显，说明其抗真菌作用较强，值得
进一步深入研究。
总之，今后深入开展有柄石韦抑菌活性的研究，
可从以下几个方面入手:①对黄酮类成分进一步分
离纯化，精确分析其结构成分;②继续研究其抑菌作
用，扩大研究范围;③开展其他方面药理学研究。有
柄石韦资源分布较广，具有较好的开发潜力，如能继
续研究，详细分析其药理作用，探讨配伍规律，阐明
其作用机制，对于开发新型中药制剂必将大有裨益。
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