全 文 ：　　收稿日期:2010-01-04
作者简介:陈金典 , 男 , 1958年生 , 农艺师。
鸟巢蕨组织培养育苗技术研究
陈金典
(福建省厦门市集美区农业技术推广中心　361021)
摘　要:以鸟巢蕨嫩叶为外植体进行组培试验 , 结果表明:最佳诱导培养基为改良 MS+蔗糖 30
g/L+6-BA2.0 mg/L+NAA0.2mg/L+AC1g/L, 诱导率达 85%;最佳增殖培养基为改良 MS+
蔗糖 30 g/L+6-BA0.4mg/L+NAA0.2mg/L+AC1 g/L, 增殖倍率达 6.4倍;最佳生根培养基
为 1/2MS+IBA0.2mg/L+蔗糖 20 g/L+AC0.3g/L, 生根率达 100%, 根系粗壮 , 叶片舒展 , 叶
色浓绿;最佳移栽基质为 33.3%锯木屑 +33.3%泥炭土 +33.3%红心土 , 成活率为 82.67%。
关键词:鸟巢蕨;嫩叶;组织培养;移植
　　鸟巢蕨又名山苏花 、 雀巢蕨 、 雀巢养齿 , 为铁
角蕨科巢蕨属植物 , 主要分布于亚洲 、 非洲和澳
洲 [ 1] 。鸟巢蕨株形丰满 , 叶色葱绿 , 喜阴凉环境 ,
较耐低温 , 养护管理较为简单 , 抗病害能力强[ 2] ,
可连续多年栽培 , 近年来被用作高档叶菜栽培 , 已
成为道地的原生蔬菜 。其嫩叶鲜绿 , 炒食质脆爽
口 , 无苦涩味 , 颇受消费者喜爱 。鸟巢蕨主要靠孢
子繁殖 , 但要求条件高 , 自然条件下难以萌发出
苗 , 不易获得批量苗木 , 而采用植物组织培养技
术 , 可以在短期内实现鸟巢蕨的规模化生产以满足
市场需求。因此 , 本试验以嫩叶为外植体对鸟巢蕨
进行组织培养育苗试验 , 旨在为鸟巢蕨的产业化繁
育提供理论和技术支持。
1　材料与方法
1.1　材料
从厦门市同安区鸟巢蕨种植场选取长势旺盛的
3年生鸟巢蕨优良单株 20株 、 半年生优良单株 10
株 , 移栽于温室内 , 在不同的时间取未展开的嫩叶
作为培养材料 (外植体)。
1.2　方法
1.2.1　外植体处理及诱导培养 　嫩叶用中性洗衣
粉浸泡 15min, 自来水冲洗 20min, 在超净工作台
无菌条件下 , 用 75%酒精浸泡 30 s, 无菌水冲洗 3
次 , 0.1% HgCl消毒 6 ～ 8 min, 再用无菌水冲洗 5
次 , 无菌滤纸吸干外植体表面的水分 , 切成0.5cm
见方的小块 , 正面向上接入 MS+蔗糖 30 g/L基本
培养基 [附加不同浓度的 6-BA(0.5、 1.0、 2.0、
3.0mg/L)及 NAA0.2 mg/L] 中 , 为抑制褐化现
象诱导培养基中添加 1 g/L活性炭 (AC)。培养温
度为 (25±2)℃, 光照强度为 1000 ～ 1500 Lx, 光
照时间为 10 h/d[ 2] 。试验共设 4个处理 , 每个处理
接种 12瓶 , 每瓶接 5片嫩叶 , 统计每瓶诱导率 ,
取平均值。
1.2.2　增殖培养　诱导培养约 45 d后 , 待丛生芽
高 2 ～ 3 cm时即可进入继代培养与扩繁阶段 , 培养
基为改良的 MS+蔗糖 30g/L, 附加不同浓度的 6-
BA(0.2、 0.4、 0.8mg/L)、 NAA(0.1、 0.2、 0.3
mg/L)及 AC1 g/L。培养温度为 (25 ±2)℃, 光
照强度为 2500 ～ 3500 Lx, 光照时间为 10 h/d。试
验采用二因素三水平试验设计 , 每处理 50瓶 , 每
瓶接 10个芽。每代培养 35 d, 连续增殖 3代 , 统
计增殖倍率 。
1.2.3　生根培养　将具有 3片叶 、 高度达到 1.5
cm以上的增殖苗分成单株 , 置于 1/2MS+蔗糖 20
g/L[附加不同浓度的 IBA(0.1、 0.2、 0.3、 0.4
mg/L)及 AC0.3 g/L] 的基本培养基中培养。培
养温度为 (25±2)℃, 光照强度为 2500 ～ 3500 Lx,
光照时间为 10h/d。试验采用单因子试验设计 , 每
处理 50瓶 , 每瓶 10株 , 每个培养周期 30d, 重复
3次 , 每 5 d观察 1次 。
1.3　生根苗移栽及管理
1.3.1　基质选择　鸟巢蕨栽培时选用 4种不同育
苗基质 , 即 100%锯木屑 、 100%泥炭土 、 100%红
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DOI :10.13651/j.cnki.f jnykj.2010.02.033
心土 、 33.3%锯木屑 +33.3%泥炭土 +33.3%红心
土 。做单因子对比试验 , 3次重复 , 每个重复 100
袋 , 鸟巢蕨移栽后 20 d统计其存活率。
1.3.2　移栽管理　移栽至具有双层遮阳网遮盖的
温室大棚 , 湿度控制在 70% ～ 80%。瓶苗需先在温
棚内放置 3 ～ 5 d进行炼苗 , 移栽前 3 d松动瓶盖。
同时用敌克松 600倍液或高锰酸钾水 500倍液浇灌
栽培基质 , 进行消毒 。移植初期 , 要求覆盖薄膜保
湿 , 叶面要经常喷水 , 直至小苗长出新根并进入正
常生长 。每 5 ～ 7d用多菌灵 1000倍液或甲基托布
津 1200倍液杀菌施肥 1次 (复合肥 500倍液或高
乐 1200倍液), 当苗长到 7 ～ 8 cm后就可采用常规
育苗方法进行管理。
2　结果与分析
2.1　诱导培养效果比较
试验结果 (表 1)表明 , 在一定浓度范围内 ,
随着 6-BA浓度的增加鸟巢蕨嫩叶组织诱导率逐渐
提高 , 在 6 -BA浓度为 2.0 mg/L时最高 , 为
85%;但当 6-BA为 3.0 mg/L时 , 鸟巢蕨嫩叶组
织诱导率反而下降。说明 6-BA浓度为 2.0 mg/L
时比较适合鸟巢蕨嫩叶组织诱导培养 。因此 , 鸟巢
蕨产业化生产的最佳组培诱导培养基配方为改良
MS+蔗糖 30 g/L+6-BA2.0 mg/L+NAA0.2 mg/
L+AC1g/L。
表 1　不同 6-BA水平对鸟巢蕨嫩叶组织诱导的影响
序号 激素水平(mg/L)
6-BA NAA
叶片数
(个)
丛生芽数
(个)
诱导率
(%)
① 0.5 0.2 60 11 18.3
② 1.0 0.2 60 32 54.0
③ 2.0 0.2 60 51 85.0
④ 3.0 0.2 60 40 66.7
2.2　增殖培养效果比较
增殖试验结果 (表 2)表明 , 分裂素 6-BA与
生长素 NAA的比值越高 , 增殖倍率越高 , 但是当
比值达到 4倍以上时 , 诱导苗芽丛密集 、 叶片变
形 , 难以伸长;而比值为 2倍 (0.4∶0.2)时 , 诱
导苗芽的增殖率达到 6.4倍 , 且苗长势旺盛 、 叶色
翠绿 , 叶长 1.6 cm以上 , 适合生根培养。因此 ,
改良 MS+蔗糖 30 g/L+6 -BA0.4 mg/L+NAA
0.2mg/L+AC1 g/L可作为产业化生产的增殖培养
基配方 。
表 2　不同激素配比对鸟巢蕨丛生芽增殖的影响
序号 激素水平(mg/L)
6-BA NAA 增殖率(倍) 生长情况 叶长(cm)
① 0.2 0.1 3.7 叶色翠绿 ,长势正常 ,基部无褐化 1.5
② 0.2 0.2 2.3 叶色绿 ,增殖率低 ,生根较多 ,苗徒长 2.3
③ 0.2 0.3 1.8 叶色绿 ,增殖率低 ,生根较多 ,苗徒长 2.8
④ 0.4 0.2 6.4 叶色翠绿 ,长势旺盛 ,基部无褐化 1.6
⑤ 0.4 0.3 5.1 叶色绿 ,长势旺盛 ,基部无褐化 2.1
⑥ 0.4 0.1 8.8 叶色绿 ,部分玻璃化 1.2
⑦ 0.8 0.3 6.1 芽密集 ,出现玻璃化 0.7
⑧ 0.8 0.1 16.7 芽丛密集 ,叶片变形 ,难以伸长 ,玻璃化严重 0.4
⑨ 0.8 0.2 6.8 芽丛密集 ,叶片变形 ,难以伸长 ,玻璃化严重 1.1
2.3　生根培养效果比较
生根试验结果 (表 3)表明 , IBA对鸟巢蕨生
根苗生长具有明显的促进作用 , 当 IBA浓度≥0.2
mg/L时 , 生根率均为 100%, 但 >0.2 mg/L的处
理根系细长 、叶片卷曲 、 叶片偏黄 、 生长缓慢;而
浓度在 0.2 mg/L时 , 根系粗壮 、 叶片舒展 、 叶色
浓绿。因此 , 鸟巢蕨产业化生产的最佳生根培养基
为 1 /2MS+IBA 0.2 mg/L+蔗糖 20 g/L+AC
0.3g/L。
2.4　移栽基质栽培效果比较
由表 4可以看出 , 不同移栽基质对鸟巢蕨移植
苗的成活率有明显影响 , 其中以 33.3%锯木屑 +
33.3%泥炭土 +33.3%红心土为基质的平均成活率
达 82.67%, 明显高于其他 3种基质。因此 , 生产
中可采用 33.3%锯木屑 +33.3%泥炭土 +33.3%红
心土作为鸟巢蕨组培苗的移植基质 。
452010年第 2期
表 3　不同 IBA水平对鸟巢蕨生根培养的影响
序号 IBA(mg/L)
生根率
(%) 生长情况
① 0.1 97.8 根系粗壮 ,叶片舒展 ,叶色浓绿
② 0.2 100 根系粗壮 ,叶片舒展 ,叶色浓绿
③ 0.3 100 根系细长 ,叶片卷曲 ,生长缓慢
④ 0.4 100 根系细长 ,叶片卷曲 ,叶色偏黄 ,生长缓慢
表 4　不同移栽基质对鸟巢蕨移植苗成活率的影响
序号 移植基质 成活率(%)
① 100%锯木屑 71.67
② 100%泥炭土 66.67
③ 100%红心土 74.33
④ 33.3%锯木屑+33.3%泥炭土 +33.3%红心土 82.67
3　讨论与小结
3.1　外植体选择
蕨类植物组织培养的外植体可采用孢子和孢子
体 (根状茎 、匍匐茎 、 嫩叶)两种材料[ 3] 。但是采
用孢子作为外植体受到季节的限制 , 不利于产业化
生产 , 因此 , 本研究采用孢子体作为外植体进行试
验 。
3.2　移栽管理
组培瓶苗在恒温 、 空气相对湿度达 100%的培
养室 (无菌环境)内抗病 、抗逆性较差 , 因此 , 移
出培养室前需先将瓶苗移至室温 、空气相对湿度为
70% ～ 80%的封闭温室大棚放置 3 ～ 5 d, 并在移栽
前 3 d松动瓶盖 , 使瓶内苗木逐步适应外界环境。
炼苗时间不宜太长 , 否则瓶内培养基易被污染 , 影
响移栽成活率。小苗移植后需精心管理 , 尤其在植
后前 15 d, 小苗处于移植初期 , 需要用薄膜保湿 ,
并用遮阳网遮阴 , 同时叶面要经常喷水 , 中午高温
时要淋水降温 , 并打开薄膜两头通风 , 将温度控制
在 30℃以内。移植 3 d后 , 需喷施 1次杀菌剂 , 以
后每 5 ～ 7 d喷 1次杀菌剂及叶面肥。移植 15 d后
逐步通风 , 确保小苗能逐渐适应棚内环境 , 从打开
苗床两头薄膜开始 , 由一边透气到打开两边通风直
至完全揭开薄膜为止 。
3.3　试验小结
本试验表明 , 以鸟巢蕨嫩叶组织为外植体 , 其
最佳诱导培养基为改良 MS+蔗糖 30 g/L+6 -BA
2.0mg/L+NAA0.2 mg/L+AC1 g/L, 诱导率达
85%;最佳增殖培养基为改良 MS+蔗糖 30 g/L+6
-BA0.4 mg/L+NAA0.2 mg/L+AC1 g/L, 增殖
倍率达 6.4倍;最佳生根培养基为 1 /2MS+IBA0.2
mg/L+蔗糖 20g/L+AC0.3g/L, 生根率达 100%,
根系粗壮 , 叶片舒展 , 叶色浓绿。
由于鸟巢蕨是附生蕨类植物 , 栽培时一般不能
用普通的培养土 , 而要用透气性及排水良好的基
质。试验结果表明 , 33.3%锯木屑 +33.3%泥炭土
+33.3%红心土作为移植基质 , 成活率最高 , 为
82.67%。
参考文献:
[ 1] 秦廷豪 , 邹宗兰.鸟巢蕨的组织培养 [ J] .植物生理学通讯 ,
2004, 40 (3):349.
[ 2] 杨广瑜.鸟巢蕨植物组织培养工厂化育苗技术农业工程技术
[ J] .农业工程技术 , 2006 (8):58-59.
[ 3] 曾霞 , 庄南生.蕨类植物组织培养研究进展 (综述) [ J] .亚
热带植物科学 , 2002, 31 (增刊): 37-43.
(责任编辑:林树文)
福建省清流县实施国家级土壤有机质提升示范推广紫云英项目效益显著
　　2009年清流县被列入国家级土壤有机质提升补贴项目
县。全县实施国家级土壤有机质提升示范推广紫云英面积
2333 hm2 , 其他绿肥作物 333 hm2。 选择在国道省道公路沿
线 、 实施标准农田片区和旅游风景区周边建立县级中心示
范片 3片 , 示范面积 160 hm2。全县 13个乡镇选择山垅田 、
山排田 、 河边溪边的沙质田 , 建立 13片 6.7 ～ 20.0 hm2 示
范点 , 示范面积 193.3hm2。相对集中连片以点带面 , 辐射
带动面积 2333 hm2。于 2010年 3月 22 ～ 24日清流县组织农
业 、 财政技术专家对实施国家级土壤有机质提升项目紫云
英高产创建县级中心示范片 3片共 160 hm2 , 进行现场实割
测产验收。紫云英品种:闽紫 2号 、 皖江大叶青 , 每片采
取随机选取 5个点 , 每点实割面积为 6.0 m2 、 实割面积共
为 30.0 m2 , 每点实收鲜草分别为 13.9 kg、 14.22 kg、
13.77kg、 14.05 kg、 13.53 kg, 折成每 667 m2产鲜草分别
为 1543.41 kg、 1580.05 kg、 1530.04 kg、 1561.56 kg、
1502.29 kg, 5点平均每 667 m2产鲜草 1543.47 kg, 效益显
著。
(信息来源:福建农业信息网 [ 2010-04-09] )
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