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显微及薄层技术在毛冬青药材鉴别中的应用



全 文 :两者可根据茎横切面四周是否有狭长脊状突起,表皮外侧是否有
表皮毛,皮层纤维群的排列情况,髓部的发达程度来有效区别。
也可根据叶主脉处下表皮是否有表皮毛,叶片栅状细胞的列数及
粉末中星状非腺毛的形态特征等加以区别。
1.星状非腺毛 2.腺毛 3.石细胞 4.导管 5.纤维
图 6 巴东醉鱼草(茎、叶)粉末特征图
醉鱼草是我国许多地区广泛应用的植物药,巴东醉鱼草虽在
国内主要药物专著上未见记载,但在湖北西部地区与同属另一种
植物大叶醉鱼草 Buddleja davidii Franch. 同为著名民族民间药
“吊扬尘”的来源,疗效肯定,有深入研究和开发的潜力。本文研
究结果为两种植物药的深入研究、应用及质量标准的制定提供了
可靠的参考依据。
参考文献:
[1] 中国科学院中国植物志编辑委员会. 中国植物志,第 61 卷[M].
北京:科学出版社,1992:266.
[2] 李 楠,庾石山. 醉鱼草化学成分的研究[J]. 中草药,2003,34
(8) :693.
[3] 方志先,赵 晖,赵敬华. 土家族药物志,下册[M]. 北京:中国
医药科技出版社,2007:756.
收稿日期:2011-04-06; 修订日期:2011-10-22
基金项目:国家“十一五”科技支撑计划子课题(No. 2006BAI06A01 - 01)
作者简介:袁海铭(1982-) ,女(汉族) ,江西南昌人,现任江西省药物研究
所助理研究员,学士学位,主要从事新药开发和质量标准的研究工作.
显微及薄层技术在毛冬青药材鉴别中的应用
袁海铭,陈新菊,曾宪仪
(江西省药物研究所,江西 南昌 330029)
摘要:目的 建立毛冬青药材的显微鉴别和薄层鉴别方法。方法 采集不同地区的毛冬青药材,对药材粉末进行显微鉴
别,发现其共同的显微特征;采用薄层方法对毛冬青药材进行薄层鉴别,用其特征性对照品及对照药材来进行比较。结
果 显微鉴别显示多批药材粉末中均有淀粉粒、具缘纹孔导管、石细胞及晶纤维;薄层鉴别显示多批毛冬青药材在对照药
材及 IlexgeninA、毛冬青皂苷甲、毛冬青皂苷 B1 和毛冬青皂苷 B2 对照品相应位置上,显相同颜色的斑点。结论 所建立
方法适用于毛冬青药材的鉴别及质量控制。
关键词:毛冬青; 显微鉴别; 薄层鉴别
DOI标识:doi:10. 3969 / j. issn. 1008-0805. 2012. 03. 089
中图分类号:R282. 5 文献标识码:A 文章编号:1008-0805(2012)03-0708-02
Application of Micro - indentification and Thiner - layer Chromatograph in Ilex pubescen
YUANG Hai-ming,CHEN Xin-ju,ZENG Xian-yi
(Jiangxi Medicinal Research Institute,Nanchang 330029,China)
Abstract:Objective To establish the method of micro - character identification and thin - layer chromatograph of Ilex Pu-
bescen.Methods The roots of Ilex Pubesens were collected from different places and the common micro characters of the com-
pound were observed and identifid by TLC. Results The micro - identification showed the same characters:starch grains,bordered
pits vessels,stone cells and crystal fiber. The thin - layer chromatograph showed that the Ilex Pubescens had the similar spots with
the mixed reference substance and the reference medicine at the same position. Conclusion The method can be used to identify
and control the quality of Ilex Pubescen
Key words:Ilex Pubescen; Micro - identification; Thin - layer chromatograph
毛冬青药材来源于冬青科冬青属植物毛冬青 Ilex pubescens
Hook. et Arn.的干燥根。毛冬青的药材及制剂被广泛应用于心脑
血管系统疾病,如冠状动脉粥样硬化性心脏病、血栓闭塞性脉管
炎、中心性视网膜炎、小儿肺炎等。在原毛冬青药材标准[1]中无显
微鉴别和薄层鉴别,我们在对毛冬青药材的研究过程中,完善了药
材的质量标准[2,3],并增加了显微鉴别和薄层鉴别的方法。
1 材料
1. 1 毛冬青药材 毛冬青植物广泛分布于我国长江以南各省,课
题组在不同时间、不同地区采集了多批毛冬青药材。结果
见表 1。
表 1 毛冬青药材采集地点及时间
编号 采集地点 采集时间
1 江西德兴大茅山 2000 - 12
2 江西德兴大茅山黄柏阳山 2007 - 10
3 江西安远镇岗掌牛山 2007 - 10
4 江西安远镇岗仙会山 2007 - 10
5 江西安远鹤子枫树景上 2007 - 10
6 江西遂川左安红裕棚下前山 2007 - 11
7 江西安福太平谷口外柏山 2007 - 11
8 湖南邵东县 2008. 11
9 广西南宁武鸣双桥 2008 - 10
10 广西桂林荔浦溪江 2008 - 11
对所采集的药材进行鉴定,均符合 1977 年版《中国药典》标
准,为毛冬青药材。
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时珍国医国药 2012 年第 23 卷第 3 期 LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2012 VOL. 23 NO. 3
1. 2 仪器与试药 手提式粉碎机;2XCII 显微镜;KQ - 250 型超
声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。毛冬青对照药材(批
号:121140 - 200502) ,由中国药品生物制品检定所提供。毛冬青
皂苷甲对照品(批号:081211) ,自制;毛冬青皂苷 B1 对照品(批
号:080706)自制;毛冬青皂苷 B2 对照品(批号:080709)自制;Il-
exgenin A对照品(批号:050804)自制。乙醇、氯仿、甲醇、醋酸乙
酯、甲酸、硫酸均为分析纯。
2 方法与结果
2. 1 毛冬青药材粉末显微鉴别研究
2. 1. 1 方法 取毛冬青药材粉碎,过四号筛,取细粉适量置载玻
片上,滴加稀甘油 2 ~ 3 滴加盖玻片,照显微鉴别法[4],置显微镜
下观察。
2. 1. 2 结果 10 批药材共有显微鉴别特征为:淀粉粒多见,单粒
或复粒,具缘纹孔导管多见,直径 5 ~ 15 μm。石细胞单个散在或
2 ~ 3 个成群,呈长方形、类圆形、类三角形或类方形,直径 14 ~
5 0μm,层纹及孔沟明显。纤维束周围的细胞含草酸钙方晶,形
成晶纤维。草酸钙方晶呈类双锥形或不规则形状。结果见
图 1 ~ 4。
图 1 毛冬青药材粉末 图 2 毛冬青药材粉末
显微鉴别中淀粉粒的图片 显微鉴别中具缘纹孔导管的图片
2. 2 薄层鉴别研究
2. 2. 1 鉴别方法 取本品粉末 1 g,加乙醇 20 ml,超声处理 30
min,滤过,滤液蒸干,残渣加乙醇 1 ml 使溶解,作为供试品溶液。
另取毛冬青对照药材 1 g,同法制成对照药材溶液。另取毛冬青
皂苷甲对照品、毛冬青皂苷 B1 对照品、毛冬青皂苷 B2 对照品和
IlexgeninA对照品适量,用乙醇制成每毫升各含 1 mg 的混合溶
液,作为对照品溶液。照薄层色谱法[4]试验,吸取上述 3 种溶液
5 μl,分别点于同一硅胶 G 薄层板上,以氯仿 -甲醇 -醋酸乙酯
-水 -甲酸(20∶ 20∶ 40∶ 10∶ 2)下层溶液为展开剂,展开,取
出,晾干,喷以 10%的硫酸乙醇溶液,在 105℃加热至斑点显色清
晰。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,与对照品
色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
2. 2. 2 结果 对 10 批不同产地的毛冬青药材进行了测定,结果
在与对照药材色谱相应的位置上,与对照品色谱相应的位置上,
显相同颜色的斑点。结果见图 5。
图 3 毛冬青药材粉末 图 4 毛冬青药材粉末
显微鉴别中石细胞的图片 显微鉴别中纤维束的图片
6、对照品混合溶液(从上起依次为:IlexgeninA,
毛冬青皂苷甲,毛冬青皂苷 B1,毛冬青皂苷 B2)
12、毛冬青对照药材,1、2、3、4、5、7、8、9、10、11、为毛冬青药材样品
图 5 毛冬青药材 TLC色谱图
3 讨论
薄层鉴别提取方法中,我们对比了 95%,70%乙醇等不同浓
度的提取物,结果以 95%乙醇提取物的信息较多,而且斑点较清
晰,因此选用 95%乙醇为提取溶剂。
对不同展开剂的选择进行了研究,以氯仿 -甲醇 -醋酸乙酯
-水(2∶ 2∶ 4∶ 1)下层溶液为展开剂时,斑点散开,加入甲酸后
斑点较集中,又对展开剂氯仿 -甲醇 -醋酸乙酯 -水 -甲酸的不
同比例进行了试验,其中以氯仿 -甲醇 -醋酸乙酯 -水 -甲酸
(20∶ 20∶ 40∶ 10∶ 2)下层溶液为展开剂效果最好。
参考文献:
[1] 国家药典委员会.中国药典,I部[S].北京:人民卫生出版社,1977:
107.
[2] 陈新菊,利家平,袁海铭,等,HPLC - ELSD 法测定毛冬青药材中
Ilexgenin A的含量[J].时珍国医国药,2009,20(6) :1337.
[3] 陈新菊,利家平,袁海铭,等. HPLC - ELSD 法同时测定毛冬青药材
中毛冬青皂苷甲和毛冬青皂苷 B2 的含量研究[J].时珍国医国药,
2010,21(8) :1880.
[4] 国家药典委员会.中国药典,I部[S].北京:中国医药科技出版社,
2010:附录 3.
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LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2012 VOL . 23 NO. 3 时珍国医国药 2012 年第 23 卷第 3 期