全 文 ：第 17卷第 1期 湖南省环境生物职业技术学院学报 Vol.17No.1
2011年　3月 JournalofHunanEnvironment-BiologicalPolytechnic Mar.2011
收稿日期:2011-02-10
基金项目:湖南环境生物职业技术学院院长基金资助项目(编号:ZZ2010-01)
作者简介:刘伟才(1984-),男 ,湖南衡阳人 ,硕士 ,研究方向:环境植物多样性.
　　文章编号:1671-6361(2011)01-0005-04
液体培养下三种培养液对大灰藓配子体生长的影响
刘伟才
(湖南环境生物职业技术学院科研处 ,湖南衡阳 421005)
摘　要:采用 MS、Knop和 White三种培养液 , 对大灰藓配子体进行液体培养 , 研究不同培养液及不同 pH处
理对大灰藓配子体生长的影响 ,对配子体茎的增长长度进行了方差分析.结果表明:3种培养液不同 pH处理
对大灰藓配子体生长有着较大的影响 , 不同培养液下正常生长的 pH范围有差异 ,其中 4个处理能促进大灰
藓配子体的生长 ,分别为 White培养液 pH值为 5.5、 6.0和 6.5处理 , Knop培养液 pH值为 6.5处理 , 而以
White培养液 pH值为 5.5处理下增长长度最大.表 3, 参 4.
关键词:液体培养;大灰藓;增长长度;生长状况
中图分类号:S795.73　　　　文献标识码:A
　　大灰藓(HypnumplumaeformeWils.)为灰藓科
(Hypnaceae)常见藓类 , 全国多省均有分布 [ 1] ,生
于阔叶林 、针阔混交林等腐木 、树干 、树基 、岩面薄
土 、草地 、砂土及黏土上 [ 2-3] ,且具有药用功效 ,用
于治疗烧伤 、鼻衄 、咯血 、吐血 、血崩等[ 4] .目前对
于苔藓配子体培育方面的报道尚少 ,藓类配子体
在室内人工培育方面至今未见报道 ,本试验是针
对大灰藓植物的配子体在温棚培育方面进行的基
础性研究 ,以期为深入开展苔藓的人工栽培 、开发
和利用提供依据.
1　材料与方法
1.1　实验材料
试验苔藓为灰藓科(Hypnaceae)大灰藓(H.
plumaeformeWils.),采集于贵州省雷公山国家级
自然保护区.实验培养液采用 MS、Knop和 White
三种培养液 ,具体配方见表 1.
1.2　试验设计
为了比较三种培养液液体培养条件下对大灰
藓生长的影响 ,将 MS、White、
Knop三种培养液分别配制为 pH3.0-12.0,
pH值梯度为 0.5 ,每种培养液共 19个处理.用不
同 pH值的培养液对大灰藓配子体进行培养 ,另设
一组为对照 ,采用蒸馏水作为培养液 ,每组设置 3
个重复.将苔藓种植在高 6 cm,底径 3.5 cm,
口径 5 cm的塑料杯内 ,在每个塑料杯内垫一
层脱脂棉.种植时将大灰藓按每个塑料杯 2 cm×2
cm的规格平铺在脱脂棉上 ,对苔藓测量后将不同
pH值处理的培养液倒如塑料杯内 ,其液面刚好盖
住脱脂棉 ,每隔一个星期更换一次培养液.pH值
测量仪器为:雷磁 PHS— 3C型精密 pH计.
1.3　培养条件
1.3.1 　温度 控制 　温 棚的 温度 控制 在
(25±1)℃范围内 ,于每天 8∶00、12∶00、14∶00、
17∶00、21∶00时各记录 1次大棚内的温度 ,如果发
现温度超过设定的范围 ,则打开温棚的通风口进
行通风降温 ,必要时打开喷淋装置喷水降温.
1.3.2　湿度控制　设定温棚内的相对湿度为
85%,当相对湿度低于或高于设定值时 ,进行调
控.于每天的 8∶00、12∶00、14∶00、17∶00、21∶00时
各测定一次温棚内的空气湿度 ,并进行校正.
1.3.3　遮光率　通过对前一阶段光照强度对苔
藓生长的情况分析 ,得出 25%遮阳条件下最有利
于苔藓的生长 ,因此在试验中采用最适合生长的
光照强度即 25%遮光率.通过对遮阳网叠加 、抽丝
等工序 ,用照度计反复测定其透光度后 ,建成 25%
遮光率的遮阴棚.光照强度测量仪器为:上海嘉定
学联仪表长 JD-3型照度计.
表 1　三种培养液配方
Tab.1　Theformulaofthreemediums
培养液 配　　　　方
Knop Ca(NO3).4H2O 1000mg KNO3 250mg
KH2PO4 250mg FeSO4.7H2O 3mg
MgSO4.7H2O 250mg 蒸馏水 1 000mL
MS NH4NO3 1650mg KH2PO4 170mg
KNO3 1900mg MgSO4.7H2O 370mg
CaCl2.2H2O 440mg 蒸馏水 1 000mL
White Ca(NO3)4H2O 300mg Na2SO4 200mg
KNO3 80mg Fe2(SO4)3 2.5mg
KCl 65mg H3BO3 1.5mg
KI 0.75mg ZnSO4.7H2O 3mg
MgSO4.7H2O 720mg CuSO4.5H2O 0.001mg
NaH2PO4 16.5mg MnSO4.4H2O 7mg
蒸馏水 1 000 mL
1.4　观测记录
采用大灰藓的净增长长度为观测指标 ,具体
方法为:每个塑料杯内随机选取 4枝生长良好茎 ,
在每条茎上系 1种颜色的细线对其标记 ,每次测
量标记处至生长顶端的长度.由于塑料杯开口较
小 ,每次测量时需将苔藓拿出 ,影响苔藓的生长 ,
所以只进行两次测量 ,第一次为将苔藓放入塑料
杯开始培育时 ,第二次为试验结束时 ,并定期进行
拍照 , 2个月后进行统计分析 , 长度测量采用精度
为 0.5mm刻度尺.
1.5　数据处理
采用 SPSS11.5分析软件 ,对各组苔藓茎的净
增长长度进行方差分析 ,并进行方差齐性检验.
2　结果与分析
3种培养液不同 pH值处理对大灰藓茎增长
长度的影响见表 2.从中可以看出 ,在 pH值为 3.0
处理下 ,大灰藓在 MS培养液中培育一个星期后 ,
植株枯萎死亡;在 Knop、White培养液下虽然能够
存活 ,但增长长度远低于对照组 ,与对照组之间有
显著性差异 (P=0.03 <0.05).同样在 pH值为
3.5处理下 , 3种培养液与对照组相比有显著性差
异(P=0.000<0.05),但增长长度都低于对照组.
pH值 4.0-9.0处理之间 White培养液下 ,大灰藓
增长长度大于对照组 , pH值 5.5 -9.0处理之间
Knop培养液下 ,大灰藓增长长度大于对照组 ,而
MS培养液 pH值 5.5-6.5处理之间大灰藓增长
长度大于对照组.培养液 pH值超过 9.0后 , 3种
培养液下大灰藓增长长度都低于对照组 ,虽然 pH
值为 10.0和 10.5处理下与对照组存在显著性差
异(P<0.05),但培养液对大灰藓的生长并无促进
作用.在 MS培养液下 pH值达到 8.5, White培养
液下 pH值达到 10.5, Knop培养液下 pH值达到
11.0后大灰藓无法生长 ,在培育一个星期后死亡.
对于增长长度超过对照组的处理采用 LSD法
进行进一步的分析 ,具体结果见表 3.从中可以看
出 , pH值为 4.0处理下 ,虽然 White培养液下大灰
藓增长长度大于对照组 ,但与对照组之间并无显
著性差异(P=0.100>0.05).pH值为 5.0处理
下 , MS培养液与对照组存在显著性差异 (P=
0.008<0.05),但其增长长度低于对照组 , Knop、
White培养液下与对照组均无显著性差异 (P=
0.529>0.05).pH值为 5.5处理下 , White培养液
与对照组存在显著性差异(P=0.003<0.05),且
增长长度大于对照组 , Knop、MS培养液下与对照
组均无显著性差异(P>0.05).pH值为 6.0处理
下 , White培养液与对照组存在显著性差异(P=
0.026<0.05),且增长长度大于对照组 , Knop、MS
培养液下与对照组均无显著性差异(P>0.05).
pH值为 6.5处理下 , Knop培养液与对照组存在显
著性差异(P=0.004<0.05),且增长长度大于对
照组 , White培养液与对照组存在显著性差异(P=
6 湖南环境生物职业技术学院学报　　　　　　　　　　　　　　2011年 3月
0.002<0.05),且增长长度大于对照组 , MS培养 液下与对照组均无显著性差异(P>0.05).
表 2　大灰藓在液体培养条件下增长长度方差分析结果
Tab.2　HypnumplumaeformegrowthinliquidcultureconditionsthelengthofANOVA
培养液 培养液pH值 平均增长长度 /cm 标准差 方差齐性检验概率 P值 方差分析概率 P值
MSKnopWhiteCK
3.0
3.0
3.0
6.98
--
0.600 0
0.537 5
1.187 5
--
0.091 29
0.065 75
0.259 92
0.075　　　
0.003　　　
MSKnopWhiteCKMS
3.5
3.5
3.5
6.98
4.0
0.350 0
0.862 5
0.825 0
1.187 5
0.450 0
0.020 41
0.110 87
0.104 08
0.259 92
0.291 55
0.138　　　
0.784
0.000　　　
0.001
KnopWhiteCK
4.0
4.0
6.98
1.150 0
1.600 0
1.187 5
0.273 86
0.406 20
0.259 92
MSKnopWhiteCKMSKnopWhiteCKMSKnopWhiteCK
4.5
4.5
4.5
6.98
5.0
5.0
5.0
6.98
5.5
5.5
5.5
6.98
0.625 0
1.087 5
1.575 0
1.187 5
0.337 5
1.012 5
1.362 5
1.187 5
1.783 3
1.629 2
2.629 2
1.187 5
0.344 41
0.314 58
0.423 99
0.259 92
0.125 00
0.143 61
0.466 30
0.259 92
0.298 32
0.460 22
0.564 69
0.259 92
0.219　　　
0.106　　　
0.054　　　
0.097　　　
0.013　　　
0.004　　　
MSKnopWhiteCKMSKnopWhiteCKMSKnopWhiteCK
6.0
6.0
6.0
6.98
6.5
6.5
6.5
6.98
7.0
7.0
7.0
6.98
1.725 0
1.450 0
2.112 5
1.187 5
1.437 5
2.383 3
2.437 5
1.187 5
0.962 5
1.487 5
1.500 0
1.187 5
0.429 12
0.550 41
0.559 76
0.259 92
0.138 17
0.441 31
0.365 23
0.259 92
0.393 54
0.483 54
0.554 98
0.259 92
0.112　　　
0.148　　　
0.645　　　
0.017　　　
0.000　　　
0.620　　　
MSKnopWhiteCKMSKnopWhiteCKMS
7.5
7.5
7.5
6.98
8.0
8.0
8.0
6.98
8.5
0.808 3
1.595 8
1.695 8
1.187 5
0.512 5
1.775 0
1.812 5
1.187 5--
0.571 48
0.345 78
0.514 10
0.259 92
0.262 92
0.150 00
0.319 83
0.259 92-
0.369　　　
0.065　　　
0.432
0.552　　　
0.834　　　
0.386
KnopWhiteCK
8.5
8.5
6.98
1.412 5
1.687 5
1.187 5
0.525 00
0.576 45
0.259 92
MSKnopWhiteCKMSKnopWhiteCKMSKnopWhiteCK
9.0
9.0
9.0
6.98
9.5
9.5
9.5
6.98
10.0
10.0
10.0
6.98
--
1.487 5
1.262 5
1.187 5--
0.975 0
0.800 0
1.187 5--
0.725 0
0.762 5
1.187 5
--
0.292 62
0.370 53
0.259 92--
0.144 34
0.122 47
0.259 92--
0.264 55
0.388 75
0.259 92
0.963　　　
0.069　　　
0.159　　　
0.678　　　
0.086　　　
0.027　　　
MSKnopWhiteCK
10.5
10.5
10.5
6.98
--
0.587 5--
1.187 5
--
0.125 00--
0.259 92
0.444　　　
0.046　　　
注:表中 ck表示对照组
7第 17卷第 1期　　　　　　　　刘伟才:液体培养下三种培养液对大灰藓配子体生长的影响
表 3　液体培养条件下部分pH处理培养液对大灰藓配子体茎增长长度差异多重检验比较结果(LSD法)
Tab.3　TheresultofmultipletestcomparisononpartliquidculturewithdiferentpHtreatmentstothelengthofgametophytestemincreased(LSDmethod)
(I)培养液 (J)培养液 pH值 MeanDiference(I-J) Std.Eror Sig.
95% ConfidenceInterval
LowerBoundUpperBound
Ck Ms 4.0 0.737 5＊ 0.231 11 0.008 0.234 0 1.241 0knop 4.0 -0.362 5 0.231 11 0.143 -0.866 0 0.141 0
white 4.0 -0.412 5 0.231 11 0.100 -0.916 0 0.091 0Ck Ms 5.0 0.850 0＊ 0.269 84 0.008 0.262 1 1.437 9
knop 5.0 0.175 0 0.269 84 0.529 -0.412 9 0.762 9white 5.0 -0.175 0 0.269 84 0.529 -0.762 9 0.412 9
Ck Ms 5.5 -0.595 8 0.447 19 0.191 -1.502 8 0.311 1knop 5.5 -0.441 7 0.447 19 0.330 -1.348 6 0.465 3
white 5.5 -1.441 7＊ 0.447 19 0.003 -2.348 6 -0.534 7Ck Ms 6.0 0.462 5 0.365 22 0.229 -0.333 2 1.258 2
knop 6.0 -0.262 5 0.365 22 0.486 -1.058 2 0.533 2white 6.0 -0.925 0＊ 0.365 22 0.026 -1.720 7 -0.129 3
Ck Ms 6.5 -0.250 0 0.383 87 0.519 -1.028 5 0.528 5knop 6.5 -1.195 8＊ 0.383 87 0.004 -1.974 4 -0.417 3
white 6.5 -1.250 0＊ 0.383 87 0.002 -2.028 5 -0.471 5＊ Themeandiferenceissignificantatthe0.05level.
3　讨论与结语
通过初步的试验得知 ,大灰藓在 MS培养液下
正常生长的 pH值范围为 3.5-8.0;在 Knop培养
液下 pH值低至 3.0时能正常生长 ,但增长长度远
低于对照 , pH值达到 11.0时不能生长;在 White
培养液下 pH值低至 3.0能正常生长 , pH值达到
10.5时死亡.从增长长度来看 ,只有 White培养液
在 pH值为 5.5、6.0和 6.5处理下大灰藓增长长
度超过对照组 ,且与对照组存在显著性差异.Knop
培养液在 pH值为 6.5处理下大灰藓增长长度超
过对照 ,与对照存在显著性差异.说明在这 4个处
理下培养液对大灰藓的生长产生了影响 ,而且能
够促进大灰藓的生长 ,其中以 White培养液 pH值
为 5.5处理下增长长度最大.通过实验可知 ,对于
大灰藓配子体的液体培养 ,培养液的 pH值对其生
长有重要影响 ,在弱酸性条件下更有利于生长.本
实验采用的是 3种常见培养液 ,其它培养液下大
灰藓配子体生长情况还有待开展进一步实验 ,而
目前这方面的报道尚少.
参考文献:
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1998.
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及展望 [ J] .安徽农业科学 , 2007, 35(28):9 000-9
001.
[ 4] 丁恒山.中国药用孢子植物志 [ M] .上海:上海科学技
术出版社 , 1990.
TheefectofthreekindsofliquidculturemediumonHypnum
plumaeformegametophytegrowth
LIUWei-cai
(ScienceResearchDepartment, HunanEnvironmental-BiologicPolytechnic, Hengyang421005, China)
Abstract:TheinfluenceofHypnumplumaeformegametophytegrowthwerestudiedunderthreekinds
ofliquidculturemedium.thegrowthofgametophytestemlengthanalysisofvariance.Theresults
showedthatmediumwithMS, Knop, andWhitewithdiferentpHtreatmentstothegrowthofga-
metophytestemlengthhasgreatinfluence, underdiferentmediumpHrangeofnormalgrowththere
arediferences, ofwhichfourtreatmentcanpromoteHypnumplumaeformegametophytegrowth, The
pHforWhitemediumwas5.5, 6.0and6.5, KnopmediumpHwas6.5, whiletheWhitemedium
topH5.5withthelargestgrowthinlength.3tabs., 4refs.
Keywords:liquidculture;Hypnumplumaeforme;growthinlength;growthstatus
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