全 文 ：广东林业科技
19 59 年第 z期
锡 兰 肉 桂 的 组 织 培 养
摘 要
通过组织培养直接从锡兰 肉桂 (Ci 。 , 。 -
m o 二。 : 7; : 。 y l。 : ic 。 ; , : ) 种子诱导形成芽 丛 ,
或将幼苗接种到含有不同浓度和比例的生长
素 、 细胞分裂素的 M S培养基 甲 也可诱导形
成芽丛 把芽单个切下 , 在W 士l i t 。液体培芥
基中培养生根形成小植株 把小植株 移植到
温室里的花盆上 , 最后 , 在大 田条件下正常
生长 。 把试管内生根的值株切成 带 节 外 植
体 , 在新鲜培养基 中继代培养 , 能形成新的
芽丛 。 j五过相同的培乔过程而 重折生根
果实 取出种子 , 洗去果肉 。 随后 , 所有操
作都在无菌条件下进行 。 把种子放 在 0 . 1沁
的升汞溶液中迸行表面消毒 1 3二 i n , 然 后 ,
用无菌水彻底冲洗 , 用无菌吸湿纸吸干水分 ,
再移到含有 3肠蔗糖和 。 . 8汤琼脂的 M S 培 养
基中 。 培养基分别附加细胞分裂 素 , K N 和
B A F或结合使用 。 种子在 l 周内发芽 , 把这
种具单芽或芽丛的小苗用于迸 一步繁殖 。 约
经 3 周 , 等苗戈至 5 。一 5 5 : n : 1后 , 从茎 尖 ,
茎节 , 下胚轴和子叶部分 , 取 3一 l o m m 的切
段 , 接种在培养墓里 在另一组试验中 ,把完
整植株切成带有一节或两节的茎段 、 子叶和
根 , 与上而一样接种 所有实验重复三次 。
己1 省了 ! 口 培养基
某 些农作物和园艺作物通过组织墙养进
行无性繁殖 已成为可能 , i’fl 几乎限于草本植
物, 对于木本植物则没有取得多大进展 , 仅
有几个报告论及重要的经济造林树种通过组
织培养获得器官发生和分化 , 涉及到无性系
繁殖的则更少 。
锡兰肉桂是斯里兰卡最 一占老 的 拍种 之
一 , 而且被认为是本地树种 。 引种到印度 已
达 2 0 年 。 通常用种子繁殖 ,但 由于种子寿命
短 , 因而种子收获后须尽早播种 这 `畜文章
研究锡兰 肉桂适当种质通过组织培养的快速
繁殖方法 。
采用培养基是 :
1
· 加有不同比例生长素和细胞分裂素的
M S培养基
2
. 加有不同浓度生长素的三种W hi 扮 液
体培养基 。 培养基用。 . 8沁的琼脂 凝 固 , 把
p H调到 5 · 8 , 在 : 5 土 2 ℃ , 日光灯照射 每 日
1 2 h
, 相对湿度 6口一沁 沁的条件下培养 :
把生根植株从培养管 甲取出 , 移植到花
盆 , 盆里装有经灭菌过的土 : 砂 又` ’ i )帅
混合基质 , 用烧杯盖住 , 以保特高湿条件 ,
放在培养室 三周后 ,移到温室 ,再移到大田 。
一些主根的植株再进行继代培养 。
材料和方法 结 论
从树上采集或地上捡拾充分成熟的新鲜 种子的发芽和芽丛的产生
在 所有试验的培养基中 ,加有K N ( j m ;
/ 1 ) 的M S培养基 , 种子发芽率约 95 肠 , 加有
K N和 B A P ( 各。 , 1一 1 , 。二 g l/ ) 的 M S 培养
基 , 有 10 一 15 肠的苗产生芽丛 , 只加 有K N
( l m g / : ) 的 M S培养基 , 约有 20 肠 产生 芽
丛 。
种苗外植体芽的形成
细胞分裂素对下胚轴切段芽形成的影响
简列在表 1 。
表 1 细胞分裂素对锡兰肉桂下胚轴切段芽丛形成的影响
芽丛形成 肠 芽 ` 数 士 5 . D
2 0
9 1
3 1
9 4
了1
9 1
8 3
2
.
1 士 0 . 5 6
2
.
9 土 0 . 7 3
2
.
3 土 0 . 6 7
3
.
2 土 0 . 6 3
2
.
7 土 1 . 0 5
4
.
1 士 0 . 9 9
3 、 2 士 0 . 7 8
.
5
.
、乙八八é `,
鸿万一nùé .曰呀夕浦汀J 动ù`` 一.之声嘛御谓.0)]淤叭丫讹(J少少凡蜘细娇叭.(0a.(z
卜少争又
在没有加进任何激素的 M S培养基中 ,外
植体保持绿色而不形成芽丛 , 分别加有 K N
或 B A P ( 1 . o m g I/ ) 的培养基 , 茎尖 , 带节
茎段 , 下胚轴切段 , 完整植株部 分 , 在 2一 3
周后 , 产生 2一 3个芽 。 在完整植株部分情况
下 , 芽形成于节和子叶与植株接触的地方 。
当 K N和 D A P同时加入 , 含量各 0 . 1一 1 m g 1/
时 , 、外植体和完整植株部分 ,在 10 一 15 天后 ,
有 3一 4个芽形成 , 有时 , 在单独加有 K N 和
B A F或它们结合的 M S培养基中 , 可观察 到
根的形成 。
生长素 N A A 、 J A 一A 、 2 , 4一 D 和细胞分
裂素 B A P 、 K N 的不 同结合 , 对下胚轴切段
芽丛形成的影响简列在表 2 。
表 2 生长素和细胞分裂素对锡兰肉桂下胚轴切段芽丛形成的影晌
编 号 } M S 培 养 基 芽丛形成肠 { 芽数 士 S . D 观察到的现象
2
.
4一 D ( 1 . 0 )
N A A ( 。
.
5 )
N A A ( 1
.
0 )
I A A ( 1
.
0 )
2
.
4一 D ( 1 . 0 ) + K N ( 1 . 0
2
.
4 ,
一
D ( 1
.
0 ) + B A P ( 1
.
0
N A A
N A A
N A A
/
N A A
0
.
5 ) + B A P ( 0
.
5
1
. 。 ) + B A (P 工
. 。
0
.
5 ) + K N ( 0
.
5
o ) + K N ( 1
.
0 )
3
.
9 士 1 . 0
3
.
6 士 0 . 6 9
3
.
0 土 0 。 6 6
2
.
9 土 0 . 5 6
形成愈伤组织
形成愈伤组织
形成愈伤组织
形成少量愈伤组织
形成 愈伤组织
形成 大量愈伤组织
形成芽丛
形成芽丛
形成芽丛
形成芽丛
n冲左火今白qOU00门￡
、吵八é、 ,产)、J了
了.、了声了`、
2
·
4 一 D和 N 八人分别可诱导形成愈伤 组
织 。 与只加有 2 , 4一 D 或2 . 4一 工)和 K N 结合使
用比较 , 在加有 2 . ” 一 D 和 B A P 的 扮巧 培 养
基 , 愈伤组织的形成更加旺盛 。 当子叶放在
有 2 · 4一 D + K N或 2 . 婆一 D + B 一气 r 的培 养 基
培养时 , 除形成愈伤组织外 , 有时还可以看
到根的形成 。 只加工A A , 外植体切口处的愈
伤组织形成慢且差 每 3 周继代培 养一次 ,
可保持愈伤组织的生长 。 单独使用多 4一 D 或
B A F 和 K N结合使用时 . 芽丛形成受抑制 (表
2 )
。
加有 N A 八和 B A 尸 ( 。 . 5一 1 . 〔〕。 g / l) 的
M S培养基 , 茎节 、 下胚轴切段和完整 植 株
部分 , 在 场一 2 0天内 ,通常有 3一 4个芽形成 。
加有 K N 、 B A P 或卜八人 、 B 八 P 又各。 . s m g / 1)
的扮巧培养基 , 单 个外植体最 高可生 成 6一 7
个芽 , N 八 A 和 B A F 含量 ( 各 :一 : 厅 g ;1/ )
较高时 , 形成愈伤组织 。
` 植株的生根
把长达句一 4 o m 二、的芽单个小心切 下 ,
大一移到洲有不问浓度生长素的W h l 亡。 液体培
乔基 。 在单独那有 I A 一从工B八 、 N 、 一 、或 I P A
( 口· `一 l · 。 m幻 1 ) 的培养基里不生根 。 加有
1 气 \ 、 工弓八 和 口 八 ` 各 。 . , 1、 g / 1 )或 ( 各
1
· 。 1 封 1少的 , V il 比培养基诱导生根的百 分
率很溉 ( 场一 20 帕 ) 加有 卜气八 、 工B A 和
I P A ( 各。 . : m g / 1 )的 W工1讨 。液体培养 基 ,
在 2。一 2 5天内 , 可观察到 8 6 肠的芽生根 。 田
间成活率为功一 8 。肠 。
大量繁殖
上接第 3理页
试管 内生根的植株在定植到土壤前可用
于进一步繁殖 。加有 K N和 B 八 P (各。 . s m g 1/ )
的培养基 , 可观察到每个 外 植 体 产 主 两
个芽 , 把它们切下 , 移到加有 I A A 、 I B A和
工P 一入 ( 各 。 . 1 、: 1 9 / 1 ) 的 W il et 液体培 养基
培养 , 3一 4同后 , 有洲吩的植株 生根 , 其中
一些移到花盆 , 保留下来的用于 进 一 步 繁
殖 。
讨 论
从锡兰肉桂种子诱导形成芽丛是 这个树
种 无性系繁殖的有价值手段之一 。 然而 , 还
须努力提高芽丛形成的百 分率 。 类似的芽丛
形成 , 在板栗 , 扁桃拟其它植物己有报导 。
本研究如同其它 讨种研究所 阐 明 的 那
样 , 低水平的 6 人子`与叹卜或 ` \ 八 入结合 , 证明
能够成功地诱导出芽丛 。 关于芽丛形成的数
量 和百分率 , B八于证明比 K N较 优 , 退 芽的
生长 , K 丫则 比较壮 。 由于在完整植株 部 分
切下的根 , 通过提高矿质氮的含量 一扣生长调
节 , 芽的形成容易而且健壮 , 因此 , 对于加
速踢兰肉桂的繁殖和再建立已成为可 能 。 然
而 , 这种方法只沉在加 K 河 、 B 人 P或汉 A 八和
B人 P 的 M s 培养基 中 , 用无菌苗作外植体 而
获得 。
张华通译 自 《 兴 : n t : 。 n , T i s : 。 “
: n d O f g a :
、
C ; h u : e 》 V o l . 9 , N O .
1
,
1 9 8了 P S I一 8 8
翟应昌校
四 、 问题与讨论
不同的杉木类型 , 对立地条件的要求以
及生长情况各异 , 因此 , 应根据不同的立地
条件和经营的 目的 , 选择不同的杉木类型造
林很有必要 。 如在肥力 中等的立地 , 以培育
中 、 小径材为 目的的 , 则宜选择猪笼杉 、 白
蕊正衫和黄毛头杉 。 而在 土壤肥 力 高 的 立
地 , 以培育大 、 _ 中径材为目的的 , 则宜选择
白蕊衫 。 在 比较干早 、 瘦瘩的立地 , 以培育
小径材为 目的的 , 则宜选择黄毛头杉 。