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第 9卷 第 5 期
2007 年 9 月
辽 宁 中 医 药 大 学 学 报
JOURNAL OF LIAONING UNIVERSITY OF TCM
Vol. 9 No. 5
Sep . ，2007
灰绿黄堇（Corydalis adunca Maxim.）是罂粟科
Papaveraceae紫堇属Corydalis植物的干燥块根。味
苦，性凉，有清热解毒止血的功能，在民族医药方面
被广泛用于消炎，利胆，排石，止痛。从灰绿黄堇中分
离得到的生物碱有四氢巴马亭，1 、2、3 、4-四氢-6-
甲氧基-1-[4-羟基苯基]甲基-7-异喹啉醇，黄连
碱，巴马亭，二氢血根碱，四氢非洲防己胺，1，2，3，4-
四氢-7-甲氧基-1-[4-甲氧基苯基]甲基-8-异喹
啉醇，原阿片碱，6-丙酮基-5，6-二氢血根碱[1-2]。据
报道从灰绿黄堇中提取出的总生物碱具有镇痛、抗
炎作用[3]。而延胡索乙素是灰绿黄堇起药理活性的
成分之一，因此，对灰绿黄堇中的延胡索乙素的含量
测定是规范灰绿黄堇用量的有力措施之一。本文用
高效液相色谱法测定民族药灰绿黄堇中延胡索乙素
的含量，以期为该药材及其制剂质量标准规范化研
究提供科学依据。
1 仪器 样品和试剂
依利特P230高效液相色谱仪，UV230紫外、可
见检测器。
灰绿黄堇购自成都市五块石市场， 经四川省
绵阳药品检验所聂盛贤主任药师鉴定为为罂粟科植
物灰绿黄堇Corydalis adumca Maxim的干燥块根。延
胡索乙素对照品（批号：110726-200409，供含量测定
用）购自中国药品生物制品检定所。甲醇为色谱纯
[上海医药（集团）化学试剂公司]；高效蒸馏水（实验
室制备）；其它试剂均为国产分析纯。
2 方法与结果
2.1 色谱条件 Sinochrom ODS-BP（4.6 mm×200
mm，5μm）色谱柱；流动相：甲醇-0.1%磷酸（75∶
25）（用三乙胺调pH值6.0）；检测波长：280nm；流速：
1.0mL·min-1。上述色谱条件下，延胡索乙素的保留
时间为10min左右，对照品及供试品色谱图，见图1。
A
B
A.对照品 B.供试品 1.延胡索乙素
图1 延胡索乙素HPLC色谱图
2.2 对照品溶液的制备 精密称取延胡索乙素对照
品约6mg，置10mL容量瓶中，加入甲醇适量，在涡旋
混合器上充分混合溶解，加甲醇稀释至刻度，摇匀，
作为对照品溶液。
2.3 供试品溶液的制备 取灰绿黄堇细粉约5g，精
密称定，置于索氏提取器中，加甲醇100 mL，水浴上
回流提取3h，将提取液蒸干，残渣用甲醇溶解并定溶
至50mL容量瓶中，摇匀，用微孔滤膜（0.45μm）滤
过，取续滤液作为供试品溶液。
2.4 标准曲线的绘制 配制延胡索乙素对照品溶
HPLC法测定灰绿黄堇中延胡索乙素的含量
龙晓燕
（西南科技大学生命科学与工程学院，四川 绵阳 621000）
摘 要：目的：建立测定灰绿黄堇药材中延胡索乙素含量的HPLC方法。方法：用甲醇回流提取灰绿黄堇中延
胡索乙素，以 Sinochrom ODS-BP（4.6mm×200mm，5μm）为色谱柱;流动相为甲醇-0.1%磷酸（用三乙胺调pH值
6.0）（75∶25）；检测波长:280 nm；流速：1.0mL·min-1。结果：在此色谱条件下，灰绿黄堇药材延胡索乙素可以得到
很好的分离，延胡索乙素在6.7~133.6μg·mL-1，间呈线性关系（r =0.9998）。回收率为98.2%，RSD为1.51%。结论：
本方法简便、结果准确可靠，适合灰绿黄堇中延胡索乙素的含量测定。
关键词：灰绿黄堇；延胡索乙素；HPLC
中图分类号：R284.1 文献标识码：B 文章编号：1673-842X (2007) 05- 0163- 02
Determination of Tetrahydropalmatine in Corydalis adunca Maxim by HPLC Method
LONG Xiao-yan
（School of Life Science and Engineering of Southwest University of Science
and Technology，Mianyang 621000，Sichuan，China）
Abstract：Objective：To establish the HPLC method for determining the contents of tetrahydropalmatine
in Corydalis adunca Maxim. Method：Tetrahydropalmatine was extracted by methanol reflux method.
The separation was performed on Sinochrom ODS-BP（4.6mm×200mm，5μm）. The mobile phase was
methanol:0.1% phosphoric acid（75:25）（adjusted to pH 6.0 with triethylamine）.The UV detector was set
at 280nm. Results：The calibration curve of tetrahydropalmatine was linear between 6.7~133.6 μg·mL-1
with being r =0.9998. The average recovery was 98.2% with RSD1.51%. Conclusion：The HPLC method for
determining tetrahydropalamtine in Corydalis adunca Maxim is simple and reliable.
Keywords：Corydalis adunca maxim；tetrahydropalmatine；HPLC
收稿日期：2007-04-14
作者简介：龙晓燕（1974-），女，四川岳池人，讲师，硕士，主要从事天然产物的研究与开发。
DOI：10.13194/j.jlunivtcm.2007.05.165.longxy.091
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液 成 浓 度 为133.6、66.8、33.4、13.4、6.7μg·mL-1
的溶液，在上述色谱条件下，注入高效液相色谱
仪，注入量为20μL，记录色谱图，以浓度(X) 为
横坐标，峰面积（Y）为纵坐标进行线性回归，得
回 归 方 程 为Y=-3.3219 +12.4592X，r =0.9998，在
6.7~133.6μgmL-1范围内，线性关系良好。
2.5 精密度实验 精密吸取对照品溶液20μL，
连续进样5次，测得峰面积平均积分值的RSD为
1.84%，表明该系统有较好的精密度。
2.6 稳定性实验 取同一份供试品溶液，分别于0、4、
8、16、24h及48h进行分析，结果峰面积积分值的RSD
为3.02 % ，表明供试品溶液在48h 内稳定性较好。
2.7 重复性试验 取同一批灰绿黄堇样品共5份，
按“样品测定”项下方法制备供试品溶液，分别测定
样品中延胡索乙素的含量，RSD为1.54%。结果表
明重复性较好。
2.8 加样回收率试验 精密称定已知含量的灰绿
黄堇药材粉末5份，每份约5.0g，精密加入一定量的
延胡索乙素对照品，按样品的制备方法制备及上述
色谱条件测定，计算。结果见表1。
表1 灰绿黄堇中加延胡索乙素的加样回收率（n=5）
样品中含量
（mg）
加入量
（mg）
测得量
（mg）
回收率
（%）
平均值
（%）
RSD
（%）
1.08 0.66 1.75 100.6
1.05 0.66 1.67 97.6
1.08 1.32 1.38 96.6 98.2 1.51
1.06 1.32 2.31 97.1
1.06 0.66 1.67 97.1
2.9 样品含量测定 按2.3项下方法制备样品溶液，精
密吸取20μL，注入色谱仪，在上述色谱条件下进行测
定，根据回归方程计算延胡索乙素的含量，结果见表2。
表2 灰绿黄堇中加延胡索乙素的含量测定结果（n=5）
样品量 含量（mg/g） 平均值（mg/g） RSD（%）
1 0.22
2 0.27
3 0.24 0.25 8.49
4 0.25
5 0.27
3 讨 论
高效液相色谱法测定延胡索乙素的含量已有
文献报道[4]。在本试验过程中，我们对该流动相的
比例进行了选择，比较了甲醇-0.1%磷酸（用三乙胺
调pH值6.0）（60∶40，70：30：75：25，80：20），结 果
甲醇-0.1%磷酸（用三乙胺调pH值6.0）（75∶25）比
例较佳。保留时间在10min左右，与其他成分有较
好的分离。
通过试验发现灰绿黄堇中延胡索乙素的含量
不是很高，其镇痛作用可能与灰绿黄堇中延胡索乙
素和其它的生物碱的协同作用有关。下一步工作应
该对灰绿黄堇中其它的生物碱进行研究。◆
参考文献
[ 1 ] 唐艳丽，杨爱梅，张樱，等.灰绿黄堇生物碱化学成分的研究[ J ] .
中国中药杂志，2005，30 ( 3 )：195
[ 2 ] 赵东保，唐艳丽，汪汉卿.灰绿黄堇生物碱化学成分研究Ⅱ[ J ] .
中国中药杂志，2005，30 ( 22 )：1756
[ 3 ] 王继生，张莉，邱宗荫，等.灰绿黄堇镇痛抗炎作用研究[ J ] .中
药药理与临床，2005，21 ( 5 )：33
[ 4 ] 陈旭，陆兔林，张先洪. HPLC 测定延胡索不同炮制品中延胡索
乙素含量[ J ] .中成药，2003，25 ( 9 )：726
丹参为治疗心律失常的常见中药，在众多治疗
心律失常的中成药中丹参均为主药之一。丹参所含
活性成分提取工艺是否合理，将对药物的临床疗效
产生较大影响，故笔者对丹参的提取工艺进行了优
正交设计优化丹参渗漉工艺
李 威1，2，杜文彬2，张勇钢2
（1.武汉大学药学院，湖北 武汉 430000；2.武汉生物工程学院制药工程系，湖北 武汉 430415）
摘 要：通过对丹参的乙醇渗漉工艺进行正交试验。以丹参酮ⅡA的提取率及渗提物得率为考察指标研究丹
参乙醇冷渗的合理工艺条件。试验结果表明：最佳工艺为乙醇浓度为90%、乙醇用量为药材的12倍量、药材的粉碎
度为一号筛及渗漉速度为3mL·min-1（以倍量关系表示）。
关键词：丹参；正交试验；高效液相谱；丹参酮ⅡA
中图分类号：R283 文献标识码：A 文章编号：1673-842X (2007) 05- 0164- 02
Study on the Percolate Technique of Salvia miltiorrhiza
LI Wei1，2，DU Wen-bin2，ZHANG Yong-gang2
（1.Wuhan University Pharmacy College，Wuhan 430000，Hubei，China；
2.Wuhan Bioengineering Institute，Wuhan 430415，Hubei，China）
Abstract：To optimize the extraction process of percolate technique of Salvia miltiorrhiza. Methods：The
optimum extraction process was investigated by the orthogonal design. Results：The chief factor influencing
the extraction efficiency was the concentration of alcohol. Conclusion：Optimal program was to use 90%
alcohol, this optimized process was pledged by the extracting ratio of extract and TanshinoneⅡA using
HPLC as the examination standard.
Keywords：Salvia miltimhiza；orthogonal design；HPLC；TenshinoneⅡA
收稿日期：2007-04-10
基金项目：武汉市市属高等学校2006年度教学研究项目（武教高[2006]4）
作者简介：李威（1981-），男，湖北武汉人，助教，学士，研究方向：药剂学。