全 文 ：文章编号: 0258-879X ( 1999) 09-0614-03
玄参提取物的抗炎和抗氧活性*
曾华武△　李医明　贺　祥▲　姜远英□　蒋山好■　朱大元■
摘要　目的:研究玄参提取液和玄参中 4种单体成分的抗炎和抗氧活性。 方法:应用 ( l)角叉菜胶及眼镜蛇毒致大鼠脚趾肿
胀实验 ; ( 2) Fe2+ /半胱氨酸诱导肝微粒体脂质过氧化 ; ( 3) AAPH诱导红细胞氧化性溶血实验 ,观察玄参提取液以及玄参中环
烯醚萜甙类成分哈帕酯甙、哈帕甙和苯丙素甙类成分安格洛甙 C、阿格托甙的作用。 结果:玄参提取液具有较好的抗肿胀作
用。 在相应剂量 ,其苯丙素甙类成分具有较强的抗氧活性 ,环烯醚萜甙类成分作用较弱。 结论: 玄参的抗炎、抗氧化作用可能
主要与其苯丙素甙类成分有关。
关键词　玄参 ;抗炎药 ;抗氧化药
中图分类号　 R 282. 71　　　　文献标识码: A
Antiinf lammatory and antioxidant ef fects of the extracts from Scro-
phularia ningpoensis Hemsl.
Zeng Huawu, Li Yiming , He Xiang, Jiang Yuanying , Jiang Shanhao , Zhu Dayuan ( Depart-
ment of Natural Medicinal Chemis try, College of Pharmacy , Seco nd Military Medical Uni-
v ersi ty, Shanghai, 200433)
ABSTRACT　 Objective: To eva luate the antiinf lamma to ry and antiox idant effects of the ex t racts o f Scro-
phularia ningpoensis Hemsl. ( SN) in vivo and in v itro. Methods: ( 1) Ca rrag eenan and cobra venom in-
duced ra t paw edema; ( 2) Fe
2+ /cy stine induced ra t liv er microsomal lipid peroxidation and ( 3) 2, 2′-azobis
( 2-amidinopropane) dihydro chlo ride ( AAPH) induced oxida tiv e hemolysis w ere used to study the ef fects
o f the ex t racts f rom SN. Results: The crude ex t ract of SN had mo re po tent antiinf lamma to ry ef fect in v i-
vo. At a do se co rresponding to the quantity contained in the crude ex t racts, the phenylpropanoid glyco-
sides had potent antiox idant effects, w hi le the iridoid g lycosides of SN had low er antioxidant activi ties.
Conclusion: The antiinf lamma to ry activi ty of SN appears to have some relationship wi th the antioxidant ef-
fect of phenylpropanoid g lycosides.
KEY WORDS　 Scrophularia ningpoensis Hemsl. ; a ntioxidants
[ Acad J Sec Mil Med U niv , 1999, 20( 9): 614～ 616 ]
⒇
　 玄参 ( Scrophularia ningpoensis Hems1. )为我国
特有的传统中药。 依据中医理论 ,它主要以醒神、凉
血、败毒、利咽等作用应用于临床。研究表明其具有
抗炎、抗菌、保肝等作用 [ 1～ 3] ,但其抗炎成分尚有争
议。 近年来 ,炎症与反应性氧类物质 ( reactive oxy-
gen species)之间的紧密联系逐渐为人们所认识 [4 ]。
我们利用玄参提取物对其抗炎及抗氧活性进行了研
究。
1　材料和方法
1. 1　动物　雄性 Wista r大鼠体质量 ( 210± 43) g ,
由第二军医大学实验动物中心提供。
1. 2　药物和试剂　玄参提取液: 8 kg玄参根粗粉
用 96% , 60%乙醇各提取 2遍 ,合并煎液约 20 L,减
压浓缩至原体积的 l /4,静置过夜 ,过滤除去沉淀 ,
滤液再次浓缩即可 (生药材质量浓度为 10 g /ml ,环
烯醚萜甙类和苯丙素甙类成分的质量分数约为原药
材的 0. 1% ( 0. 2% )。 哈帕酯甙 ( harpagoside, XS-
6) ,哈帕甙 ( harpag ide, XS-7)、安格洛甙 C( angoro-
side, XS-8)和阿格托甙 ( acteoside, X S-10)均由中
·614· 第 二 军 医 大 学 学 报Acad J Sec Mi l M ed Univ　 1999 Sept; 20( 9)
⒇ * 国家自然科学基金资助项目 ,批准号 29632050
作者单位　第二军医大学药学院天然药物化学教研室 ,上海 ,
200433;△海军第 411医院药物研究中心 ; ▲第二军医大学科研
处 ;□第二军医大学药学院药理学教研室 ;■中科院上海药物所
曾华武 ,男 , 1968年 4月生 ,硕士 ,主管药师
国科学院上海药物研究所从玄参中提取、分离和鉴
定。上述单体成分用二甲基亚砜溶解备用。角叉菜
胶、丙二醛和硫代巴比妥酸钠 ( TBA)均购自美国
Sigma公司。 2, 2′-azobis ( 2-amidinopropane) dihy-
drochlo ride ( AAPH)系日本 Wako Pure Chemical
公司产品。眼睛蛇毒由第二军医大学军队卫生教研
室惠赠。 依布硒 ( ebselen,纯度> 99% )由第二军医
大学药学院化学合成教研室合成。其余试剂均为分
析纯试剂。
1. 3　方法
1. 3. 1　对角叉菜胶及眼镜蛇毒素诱导的大鼠脚趾
肿胀的抑制实验　大鼠用玄参提取液连续给药 7 d,
每天灌胃 1次 ( 10 ml /kg ) ,对照组用生理盐水灌胃 ,
末次给药后 l h,用 50μl角叉菜胶 ( 4 mg /kg )或眼
镜蛇毒 ( 0. 025 mg /kg )溶液注入大鼠右后脚趾皮
下 ,分别于注射前及注射后相应时间用毛细管放大
测量装置测定脚趾肿胀体积 [ 5]。用给药后的体积减
去给药前的体积即为大鼠脚趾肿胀度 ,观察达到高
峰时间和消退时间 ,比较给药组和对照组差异。
1. 3. 2　大鼠肝微粒体制备　依文献 [6 ]方法制备大
鼠肝微粒体悬浮液 ,置于冰浴中备用 ,测定蛋白
含量。
1. 3. 3　 Fe2+ /半胱氨酸诱导的肝微粒体脂质过氧化
的测定 [ 7]　微粒体反应体系中加入药液或对照品 5
μl, 37℃温育 30 min,用比色法测定硫代巴比妥酸钠
反应物质的含量。
1. 3. 4　红细胞溶血率实验　依文献 [8]方法制备红
细胞悬液。取 lm l红细胞悬液加入不同浓度药物或
对照液。再加入 1 ml 80 mmo l /L AAPH。 37℃温育
30 min,离心 ,取上清测定 403 nm的吸收度 ,与单用
AAPH组比较 ,计算溶血抑制率。
1. 4　统计学处理　所有数据均表示为 x-± s ,显著
性分析用 t检验。
2　结　果
2. l　玄参提取液对角叉菜胶和眼睛蛇毒诱导的大
鼠脚趾肿胀的抑制作用　角叉菜胶和眼镜蛇毒局部
皮下注射 5 min后 ,大鼠脚趾均开始肿胀 ,体积逐渐
增大 ,分别于 300和 60 min后达高峰。玄参提取液
口服组与角叉菜胶对照组相比 ,在 240～ 360 min有
显著性差异 (图 1A) ,抑制率分别为 ( 29. 4± 7. 5)% ,
( 31. 7± 4. 5)%和 ( 28. 7± 5. 3)%。 在眼镜蛇毒诱导
组 ,玄参提取液口服组于 60～ 120 min处显著低于
眼镜蛇毒对照组 (图 1B) ,抑制率分别为 ( 34. 2±
9. 7)%和 ( 20. 0± 6. 6)% 。
图 1　玄参粗提物对角叉菜胶和眼镜蛇毒诱导的大鼠脚趾肿胀的作用
Fig 1　 Effect of the crude extract of SN ( 10 ml· kg- 1· d- 1 ) on the rat paw edema
induced by carrageenan 4 mg /kg (A) or cobra venom 0. 025 mg /kg ( B)
n= 6, x-± s;○: SN; ●: Carrageenan; △: Cob ra v enom
2. 2　玄参单体对 Fe2+ /半胱氨酸诱导的肝微粒体
脂质过氧化的抑制作用　 40μmol /L XS-8, XS-10,
X S-6和 X S-7均能显著抑制 Fe2+ /半胱氨酸诱导的
肝微粒体脂质过氧化 ,抑制率分别为 ( 36± 10)%
(P < 0. 01) , ( 43± 13)% ( P < 0. 01) , ( 12± 5 )%
(P < 0. 05)和 ( 15± 9)% ( P < 0. 05)。抗氧剂依布硒
10μmo l /L抑制率为 ( 67± 6)% ( P < 0. 01)。
2. 3　玄参单体对红细胞氧化性溶血的影响　 40
μmol /L XS-8, XS-10, XS-6和 XS-7均能抑制 40
μmol /L AAPH诱导的红细胞氧化性溶血 ,抑制率
分别为 ( 47. 0± 6. 8)% ( P < 0. 01) , ( 55. 0± 10. 9)%
( P < 0. 01) , ( 17. 0± 2. 7)% ( P < 0. 01)和 ( 20. 0±
3. 6)% (P < 0. 01)。抗氧剂依布硒 10μmo l /L抑制
率为 ( 61. 0± 7. 2)% ( P < 0. 01)。
·615·第 9期 . 曾华武 ,等 . 玄参提取物的抗炎和抗氧活性
3　讨　论
在炎症发生和发展的病理过程中 ,大量的证据
表明 ,反应性氧类物质 (· OH, O·-2 和 H2O2等 )在炎
症处的产生加剧了组织的损伤。同时 ,试验表明许多
非甾体类抗炎药都具有抗氧化作用 ,能同反应性氧
类物质发生作用。 依布硒作为抗氧剂已经进入Ⅱ期
临床研究 , 具有高效的抗炎作用。因此 ,除影响花生
四烯酸代谢产物途径外 ,抗氧化作用正成为非类固
醇类抗炎药发挥抗炎作用的又一重要的作用途
径 [4 ]。
玄参作为传统抗炎药应用由来己久。 哈帕酯甙
和哈帕甙作为主要的环烯醚萜甙类物质被认为是抗
炎的主要成分。但近来对玄参属植物的研究发现 ,环
烯醚萜甙类物质单用的有效剂量远大于原生药中的
相应含量 [9 ] ,这表明环烯醚萜类物质并非主要的抗
炎活性物质。
本研究表明: 在两个急性抗炎模型上 ,玄参提取
物的确均有较强的抗炎活性。而玄参中两大类成分
苯丙素甙类 ( XS-8, XS-10)和环烯醚萜甙类 ( XS-6,
X S-7)具有明显不同的抗氧活性 ,前者明显强于后
者。从结构上分析苯丙素甙类的酚羟基具有对自由
基的直接清除作用。随后的实验表明 ,苯丙素甙成分
X S-10、 XS-8具有较好的抗自由基损伤和 DN A修
复作用。环烯醚帖甙 XS-6、 XS-7无此作用 (另文报
道 )。我们的研究提示:玄参的抗炎活性可能与其苯
丙素甙类成分的抗氧化作用有密切关系。
参 考 文 献
1　 Bhandari S P, Roy R, Agraw al PK. Scrok oelzi side A, a t ri ter-
pen e glycoside f rom Scropularia k oelzii [ J ] . Ph ytoch emist ry,
1996, 41( 3): 879
2　 Fernand ez M A, Garcia MD, Saen z M Z. An tibacterial activity of
the ph enolic acid s f ractions of Scrop hula ria f ru tescens and Scro-
phularia sambucifolia [ J] . J Ethnophamacol , 1996, 53( l ): 11
3　 Hough ton PJ, Hikino H. An tihepato toxic activi ty of ex t racts and
cons ti tuen ts of Buddleja species [ J] . Plan ta M ed, 1989, 55( 2):
123
4　 Hal liw el l B, Hoult JR, Blak e DR. Oxidants, inf lammation and
antiinf lammatory drugs [ J] . FASEB J, 1988, 2( 3) : 2867
5　 Eth sch enb erg L E, Hadding U, W ink elmann J. A new mod el of
acute inf lammation: cobra venom factor induced paw edema [ J].
Agents Actions, 1983, 13( 5 /6): 437
6　Wil ls ED. Lipid peroxide formation in micros omes [ J]. Biochem
J, 1969, 113(2) : 315
7　 Placer ZA, Cushman LL, Johnson BC. Es timation of p rod uct of
lipid peroxidation ( Malonyldiald ehyde) in biochemical s ystems
[ J] . Anal Biochem, 1966, 16( 2): 359
8　 Galet V, Bernier JL, Henich art JP. Benzos elenazolinon e deriva-
tiv es design ed to be glu tathione peroxidas e mim etics featu re inhi-
bition of cyclooxyg enase /5-lipoxygenas e pathw ays and antiin-
flammatory activi ty [ J ]. J M ed Chem, 1994, 37( 18): 2903
9　 Garcia D, Fernandez A, Saenz T, et al . Antiinf lammato ry ef-
fects of di ff eren t ext ract s and harpagoside isolated f rom Scrophu-
laria f ru tescens L [ J ]. Farmaco, 1996, 51( 6): 443
( 1999-02-25收稿 , 1999-05-31修回 )
(本文编辑　姚春芳 )
第二军医大学科技论文被引频次名列全国医药院校第三位
据国家科学技术部科技信息研究所中国科技论文统计 1997年年度报告 ( 1998年报告尚未公布 ) ,第二军医大学科技论文
被引频次名列全国医药院校的第三位 ,具体见下表。
1997年我国高等医药院校科技论文被引频次前 10名名次表
名次 校　　　名 被引频次 名次 校　　　名 被引频次
1 北京医科大学 1 106 6 中山医科大学 517
2 上海医科大学 801 7 第三军医大学 488
3 第二军医大学 692 8 同济医科大学 461
4 第四军医大学 574 9 华西医科大学 457
5 上海第二医科大学 569 10 第一军医大学 410
·616· 第二军医大学学报　 1999年 9月 ,第 20卷