全 文 ：酸减少。
2.3.2 温度对发酵的影响:温度对 L-缬氨酸的发酵有一定
的影响 ,测定了不同温度对 L-缬氨酸发酵的影响 , 结果见
表 5。
表 5 不同温度对 L-缬氨酸发酵的影响
温度(℃) 24 28 32 36
菌体生长(OD) 0.923 1.023 1.245 0.987
L-缬氨酸(g· L -1) 33.56 37.29 46.65 32.24
　　由表 5 结果可知 , L-缬氨酸发酵的最适温度为 32℃。
在此温度下 ,菌体生长好 , 菌浓大 , L-缬氨酸产量高。温度
太低 ,菌体生长较慢 , 难以完成对原料的转化。温度太高 , 菌
体易衰老 ,不利于高产 L-缬氨酸。
2.4 L-缬氨酸发酵过程曲线　利用优化的发酵条件 ,测定了缬
氨酸高产菌 LNV270的分批发酵过程曲线,结果见图5。
图 5　分批发酵过程曲线
　　由图 5 可知 , 0 ～ 8h 为菌体生长延滞期 , 此阶段菌体耗
糖速率慢 ,基本上不产酸。 8 ～ 37h 为菌体对数生长期 , 此时
菌体的生长速率达到最大 ,耗糖速率达到最大值 , 此时产酸
开始加快。 38h～ 60h 为菌体生长稳定期 , 此时耗糖速率较
快 , L-缬氨酸大量合成 , 60 ～ 65h 为菌体衰亡期 , 耗糖速率
减慢 ,菌体浓度不再增加 , 产酸增加少。
3　讨论
最近 , 人们发现 L-缬氨酸是合成一种免疫抗生素的重
要中间体 , 其年消耗量猛增到数千吨 , 其中日本是主要生产
国[ 8] , 而国内目前尚无大批量生产厂家 , 仅配制氨基酸输液
就需进口 100 吨。随着氨基酸输液的不断增长 , L-缬氨酸
的需求也将增加。但是目前 L-缬氨酸工业化生产还存在
着一些问题 , 产酸率低 , 而 L-缬氨酸在国外已经实现大规
模工业化生产 , 产酸水平比国内高 , 我国目前的产酸水平与
国际水平尚有一定差距。在我国开展此方面的研究对于国
内缬氨酸产业化 , 促进医药行业的发展有重要的意义。
本文经过紫外线 、硫酸二乙酯诱变选育获得一株 L-缬
氨酸高产菌 , 并首次用响应面分析法对发酵培养基组成及发
酵培养条件进行了优化 , 较未优化前产量有大幅度提高 。优
化后的组合进行发酵试验验证 , 结果确实可信。对于 L-缬
氨酸大规模工业化生产具有重要的意义 。
参考文献
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大叶蛇葡萄抗高血压有效部位筛选实验研究
孙晓杰 ,沈伟 ,张秀桥1 ,张一文
(山东中医药高等专科学校 ,山东 莱阳 265200;1.湖北中医学院 , 湖北 武汉 430061)
摘要:目的　以急性肾动脉型高血压大鼠动物模型 , 筛选大叶蛇葡萄抗高血压有效部位。方法　大鼠造模后 , 分别经十
二指肠插管给予大叶蛇葡萄各部位药液 ,观察并记录各组的血压变化情况。结果　乙酸乙酯部位组给药后 , 血压在 1h 内缓
缓下降至正常范围 ,与空白对照组具有特别显著性差异(P <0.01)。结论　大叶蛇葡萄抗高血压的有效部位是乙酸乙酯部
位。
关键词:大叶蛇葡萄　抗高血压　急性肾动脉型高血压大鼠　实验研究
中图分类号:R285.5　文献标识码:A　文章编号:1672-7738(2008)12-0747-03
Experimental study of effective part of Ampelopsis.megalophyl la
Diels et.Gilg on the anti-hypertension activity
SUN Xiao-jie ,SHEN Wei ,ZHANG Xiu-qiao1 ,ZHANG Yi-wen
·747·齐鲁药事·Qilu Pharmaceutical Af f airs 2008 Vol.27 , No.12
(Shandong Co lleg e of T raditional Chinese Medicine , Laiyang 265200;1.Hubei College o f
T raditional Chinese Medicine , Wuhan 430065)
ABSTRACT:OBJECTIVE　Acute-kidney-ar te ry hyper tensiv e model rats we re used to study on the anti-hyper tension func-
tion of diffe rently ex trac ted the pa rts.METHODS　Model r ats that have been made we re g iv en emulsion of diffe rently ex tracted
the parts of Ahpclopig Mega lophg l , then observe and record the changes in blood pressur e.RESULTS　Blood pressure o f model
rats that w ere given the ethy l acetate ex trac ts fell to no rmal r ange g radua lly , and have statistically significant differ ence with the
control g roup.CONCLUSION　The ethyl ace ta te ex trac ts have the obvious anti-hype rtension function.
KEY WORDS:Ampelopsis.megalophylla ;anti-hypertension;acute-kidney-artery hypertensive model rat;experimental study
　　大叶蛇葡萄(A.megalophy lla Diels et.Gilg)为葡萄科蛇
葡萄属植物 ,味酸涩 ,性平 ,具有清热利湿 、活血化瘀的功能 ,
用于高血压病 、痢疾 、泄泻、小便淋痛 、头昏目胀等[ 1] 。在我国
主要分布于湖北、陕西、甘肃、福建 、四川 、贵州 、云南等[ 2] 。张
汉萍等从大叶蛇葡萄中分离出蛇葡萄素 , 并进行了初步药效
学研究 ,结果表明蛇葡萄素对脱氧皮质酮盐性等高血压模型
大鼠有降压作用[ 3] 。为了更好的开发大叶蛇葡萄这味具有湖
北地方特色的药材 , 本课题组对大叶蛇葡萄进行了一系列的
研究工作 ,包括生药学研究[ 4] 和指纹图谱研究[5] 。本试验采
用急性肾动脉型高血压大鼠动物模型(2K1C), 以收缩压和舒
张压为考察指标, 对大叶蛇葡萄抗高血压有效部位进行了筛
选研究 ,为该植物进一步的研究奠定了基础。
1　试验材料
1.1 药材　大叶蛇葡萄产于湖北恩施地区 , 经湖北中医学院
中药鉴定教研室张秀桥副教授鉴定为葡萄科蛇葡萄属植物
大叶蛇葡萄(A.megalophy lla Die ls et.Gilg )的干燥茎叶。
1.2 实验动物　健康 Wistar 大白鼠 , 体重 230 ～ 280g , 购自
华中科技大学同济医学院动物房(批号:060921)。
1.3 阳性对照液的制备　复方罗布麻片Ⅰ , 山西亚宝药业集
团股份有限公司生产 , 批号 060634 , 临用时用蒸馏水 、食用
花生油和 Span-80 研磨制成 12mg ·mL -1的乳浊液。
1.4 供试品乳浊液的制备　将大叶蛇葡萄茎叶粉碎过 10 目
筛 ,用 95%、75%乙醇分别渗漉提取一次(每次 10 倍量), 合
并提取液 ,减压浓缩至小体积 , 加适量水分散 , 依次用石油
醚 、乙酸乙酯萃取 , 得到石油醚部位 、乙酸乙酯部位 、水液部
位。将各部位回收溶剂后 60℃减压干燥至干膏 , 临用时配
成乳浊液 2.468mg · g-1(转化为生药的浓度)。
1.5 试验仪器　BL-410 生物机能实验系统(成都泰盟科技
有限公司)、电子天平(上海精密仪器仪表有限公司)、血压测
量仪(温州东方医疗器械有限公司)。
2　试验方法
取健康 Wistar 大鼠 , 称重 , 随机分为 6 组 , 即总提取液
组 、石油醚部位组 、乙酸乙酯部位组 、水液部位组 、阳性对照
组 、空白对照组 ,适应性喂养 1 周后进行试验。按陈氏[ 6] 的
方法建立急性肾动脉型高血压动物模型。 用戊巴比妥钠
40mg ·mL-1麻醉 , 仰卧固定 , 手术分离气管 、气管插管 、结
扎固定。然后分离颈总动脉 , 结扎固定 , 另一端连接传感器
输入 BL-410 生物机能实验系统 , 描记血压。 从腹正中线
打开腹腔 , 找到十二指肠 ,将配有 5mL 注射器的尖头细塑料
管(十二指肠插管)直接插入十二指肠并用细线固定之 ,然后
关闭腹腔。待血压平稳后 , 记录血压值;然后放开肾蒂部的
结扎线 , 大鼠血压在数分钟内可逐渐升高至坪值 ,记录坪值
血压。由十二指肠插管给药 , 体积 1mL/ 100g , 观察并记录
1h 的血压变化和稳定后的血压值。
3　试验结果
详细记录实验中放夹前、放夹后及给药后的血压值 ,并分
别以收缩压及舒张压两个指标进行考察,结果见表 1和表 2。
将各组大鼠的放夹前血压与放夹后血压进行自身前后
配对 t检验 ,结果显示各组大鼠的放夹前与放夹后血压都具
有特别显著性差异(P <0.01), 表明制造的急性肾动脉型
高血压大鼠模型是成功的。
将总提取液组 、石油醚部位组 、乙酸乙酯部位组 、水液部
位组的放夹后血压与给药后血压 , 分别与空白对照组采用成
组资料两样本均数比较的 t检验方法进行分析 , 结果显示总
提取液组 、乙酸乙酯部位组与空白对照组具有特别显著性差
异(P <0.01),表明总提取液和乙酸乙酯部位具有明显的
降压作用。
将上面判断出的有明显降压作用的总提取液组和乙酸
乙酯部位组的放夹后血压与给药后血压 , 分别与阳性对照组
进行统计分析 , 结果显示没有显著性差异(P >0.05),表明
它们的降压效果与阳性药物没有明显差异。
　　表 1 大叶蛇葡萄各部位对急性肾动脉型高血压大鼠血压的影响(收缩压)
组别 放夹前
Kpa(mmH g) 放夹后Kpa(mmHg) 给药后Kpa(mmHg) 放夹后-放夹前K pa(mmHg) 放夹后-给药后Kpa(mmHg)
空白对照组 17.1±1.0 21.3±2.2 20.8±2.2 4.2±1.9 0.5±0.6(128.1±7.4) (159.5±16.2) (155.7±16.4) (33.0±14.4) (6.9±4.2)
总提取液组 18.4±1.4 23.0±2.2 17.5±1.3 4.7±2.4 5.5±2.2(137.8±10.5) (172.8±16.4) (131.3±9.5) (35.5±18.0) (41.9±17.1)
石油醚部位组 18.3±1.7 20.5±2.0 20.1±1.8 2.2±1.2 0.4±0.8(137.3±12.9) (153.9±14.6) (151.1±13.7) (16.0±9.1) (2.1±6.0)
乙酸乙酯部位组 17.6±1.3 20.8±3.13 16.9±1.8 3.3±2.0 3.9±2.0(131.7±9.4) (156.3±23.5) (126.9±13.4) (25.0±12.6) (31.1±14.6)
水液组 18.9±0.8 22.8±1.5 22.6±1.5 3.9±1.4 0.2±0.1(141.6±5.9) (170.7±11.0) (169.3±10.9) (29.1±10.5) (1.5±0.6)
·748· 齐鲁药事 Qilu Phar maceu tical Af f ai rs 2008 Vol.27 , No.12
　　表 2 大叶蛇葡萄各部位对急性肾动脉型高血压大鼠血压的影响(舒张压)
组别 放夹前
Kpa(mmH g) 放夹后Kpa(mmHg) 给药后Kpa(mmHg) 放夹后-放夹前K pa(mmHg) 放夹后-给药后Kpa(mmHg)
空白对照组 12.2±1.5 15.5±2.1 15.0±1.8 3.3±1.2 0.6±0.5(91.5±11.4) (116.5±15.8) (112.7±13.7) (25.0±9.2) (4.7±3.8)
总提取液组 15.4±1.7 18.9±2.0 15.6±1.5 3.5±1.2 3.3±1.1(115.7±12.5) (141.7±15.3) (117.0±11.3) (26.0±9.3) (24.6±8.4)
石油醚部位组 15.4±2.8 17.5±3.1 17.6±3.3 2.1±1.0 0.0±0.6(115.5±21.2) (131.5±23.0) (131.8±24.5) (16.0±7.3) (0.2±4.3)
乙酸乙酯部位组 13.5±0.7 16.3±2.0 13.3±1.0 2.8±1.6 3.0±1.3(101.5±5.2) (122.3±15.0) (99.8±7.5) (20.8±11.8) (22.5±9.9)
水液组 16.0±0.9 19.4±1.7 19.0±1.7 3.4±1.8 0.4±0.5(120.0±6.5) (145.5±12.8) (142.5±12.8) (25.7±13.7) (3.2±3.8)
阳性对照组 14.9±2.1 18.8±1.2 15.9±2.0 3.9±1.7 2.9±1.5(111.8±15.8) (141.0±8.9) (119.3±15.1) (29.3±4.3) (21.8±11.3)
4　讨论
大叶蛇葡萄为湖北恩施地区的民间药用植物 ,当地人夏
季采摘嫩枝叶 ,置沸水中稍烫一下 , 即时捞起 , 沥干水分 , 摊
放于通风处吹干 ,至表面出现星点白霜时即可烘干收藏 , 开
水泡茶服 ,治疗高血压[ 7] 。本研究结果表明大叶蛇葡萄总提
取液具有明显的降压作用 , 并明确了其抗高血压的有效部
位———乙酸乙酯部位。对该有效部位进行深入系统的化学
成份和药理活性筛选研究 ,可望从大叶蛇葡萄中分离得到一
系列活性成分 ,这对于探讨大叶蛇葡萄抗高血压活性的物质
基础具有重要意义 , 也为该植物的开发利用提供了科学依
据。
参考文献
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·合理用药 ·
尼美舒利颗粒剂用于骨科手术后病人 60例效果观察
尹淑英 ,赵爱荣 ,韩业坤 ,王庆玲
(滨州医学院附属医院 ,山东 滨州 256603)
中图分类号:R969.4　文献标识码:A　文章编号:1672-7738(2008)12-0749-02
　　尼美舒利颗粒(Nimesulide , NIM),其化学名为 4-硝基
-2-苯氧基甲磺酰苯胺 , 为一种非甾体抗炎药。该药的生
物利用度高 ,抗炎作用强 , 并具有解热和镇痛作用 , 且毒性
低 ,治疗指数高。特别对术后疼痛及发热病人有很好的治疗
作用。为此笔者自2008 年5 月～ 8 月对我科 60 例骨科手术
后发热疼痛病人用尼美舒利颗粒剂进行治疗 , 取得满意效
果 ,现报告如下:
1　临床资料
本组病人 60 例 , 其中男 38 例 , 女 22 例 , 四肢骨折 40
人 ,其余 20 人为:锁骨骨折 10 人 ,髌骨骨折 4 人 , 腰椎骨折 6
人。年龄 7～ 79岁 , 平均 43岁 , 用药时间均为手术后 6 小时
～ 5 天的病人 ,且无服用尼美舒利颗粒的禁忌症。
2　治疗方法
成人尼美舒利颗粒口服 100mg , 每日 2 次 , 儿童剂量为
5mg/ kg/天 , 分 2 至 3 次服用。疗程不超过 3 天。服药后 1h
测量体温与服药前进行对照 、按 Budzynsk [1]分级标准评估
疼痛程度 , 观察用药后不良反应。 疼痛 Budzynsk 标准分级
为:Ⅰ 级无疼痛;Ⅱ级有疼痛 , 但可被轻易忽视;Ⅲ级有疼痛 ,
无法忽视 , 不干扰日常生活;Ⅳ级有疼痛 , 无法忽视 , 干扰注
意力;Ⅴ级有疼痛 ,无法忽视 , 所有日常活动都受影响 , 但能
完成基本生理需要 , 如进食和排便等。 Ⅵ 级存在剧烈疼痛 ,
无法忽视 , 需休息或卧床休息。
·749·齐鲁药事·Qilu Pharmaceutical Af f airs 2008 Vol.27 , No.12