全 文 ：天 津 中 医 药
Tianjin Journal of Traditional Chinese Medicine
2010年 2月第 27卷第 1期
Feb． 2010, Vol．27 No．1
中药葎草为桑科植物葎草 [Humulus scandens．
（Lour．）Merr.]的全草,味甘、苦，性寒。具有清热解毒，
利尿通淋的功效，用于肺结核潮热，肠胃炎，痢疾，感
冒发热，小便不利，肾盂肾炎，急性肾炎，膀胱炎，泌
尿系结石，外用治痈疖肿毒，湿疹，毒蛇咬伤等。其
化学成分较为复杂，全草含木犀草素-7-O-β-D-葡
萄糖苷、大波斯菊苷、胆碱及天门冬酰胺，其他尚有
挥发油、鞣质及树脂。笔者对葎草中木犀草素-7-O-
β-D-葡萄糖苷和大波斯菊苷的含量同时进行测定，
并且考察葎草中木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷和
大波斯菊苷在不同季节中的含量差异。
1 仪器、试剂与药品
1.1 仪器 Waters-600型高效液相色谱仪，1901紫
外分光光度计,DL-180A超声波清洗器，120型精密
电子天平。FW100型高速万能粉碎机。
1.2 试剂 色谱纯为甲醇，其余试剂均为分析纯，
水为超纯水。
1.3 药品 木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷对照品、
大波斯菊苷对照品均为实验室自制，纯度均>99%，
葎草采自沈阳市北陵公园。
2 方法
2.1 色谱条件 kromasilC18色谱柱：（4．6mm×250 mm，
5 μm），流动相 :甲醇-0.2%磷酸溶液（45 ∶55）流速
1.0 mL/min，柱温 35 ℃，检测波长为 350 nm。色谱图
见图 1。
2.2 对照品溶液的制备 精密称取木犀草素-7-
O-β-D-葡萄糖苷对照品、大波斯菊苷对照品适量，
作者简介：陈再兴（1973-），男，博士，讲师，从事药物毒理研
究工作。
通讯作者：孟繁浩。
不同季节的葎草中木犀草素-7-O-β-D-
葡萄糖苷和大波斯菊苷的含量测定
陈再兴，陈佳琪，朱 旭，王 琳，时 牛，孟繁浩
（中国医科大学药学院，沈阳 110001）
摘要：[目的] 同时测定葎草中木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷和大波斯菊苷的含量。[方法] 采用高效液相色谱法
（HPLC）测定葎草中木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷和大波斯菊苷的含量,色谱柱 kromasilC18，以甲醇-0.2%磷酸溶液
（45∶55）为流动相，流速为 1.0 mL/min，柱温 35 ℃, 检测波长为 350 nm。 [结果] 木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷在
0.072～0.36 μg的范围内与峰面积积分值成良好的线性关系（r＝0.999 9），精密度相对平均标准差（RSD）=2.06%,平均加
样回收率为 99.3%，RSD为 2.8%；大波斯菊苷在 0.05～0.40μg的范围内与峰面积积分值成良好的线性关系（r＝0．999 7），精
密度 RSD=1.73%，平均加样回收率为 100．2％，RSD％为 2．7％。葎草中木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷的含量在 7、8月份
含量最高，大波斯菊苷在 6月份含量最高。 [结论] 该方法简单、灵敏、稳定、可靠，可用于葎草中木犀草素-7-O-β-D-
葡萄糖苷和大波斯菊苷的含量测定。葎草适宜的采收季节应在 6～8月份。
关键词：葎草；木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷；大波斯菊苷；含量测定；季节
中图分类号：R917 文献标识码：A 文章编号：1672-1519(2010)01-0074-03
图 1 高效液相色谱
Fig.1 The high-performance liquid chromatogram
A.木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷对照品
B.大波斯菊苷对照品高效液相色谱图
C.葎草药材的高效液相色谱图
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天 津 中 医 药
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加甲醇溶解制成含木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷
250 mg/L，含大波斯菊苷 180 mg/L的溶液作为对照
品储备液。取木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷储备液
1 mL加甲醇定容至 10 mL得木犀草素-7-O-β-D-
葡萄糖苷 25 mg/L作为对照品溶液，取大波斯菊苷
储备液 1 mL加甲醇定容至 10 mL得含大波斯菊苷
18 mg/L的溶液作为对照品溶液。
2.3 供试品溶液的制备 取干品葎草粉碎，过 60目
筛，取粉末约 0.1 g，精密称定，置索氏提取器中，加
入石油醚（30~60 ℃），提取 1.5 h，滤去石油醚；加入
甲醇，提取 4 h，将甲醇滤液置于蒸发皿中，蒸干甲
醇，残渣加甲醇溶解，转移至 5 mL量瓶中，并稀释至
刻度，用微孔滤膜（0．45 μm）滤过，即得。
2.4 线性范围的考察
2.4.1 木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷标准曲线的
制备 分别精密吸取木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖
苷对照品溶液 2.0，4.0，8.0，12.0，16.0 μL进样，以峰
面积积分值为纵坐标，进样量为横坐标，得出木犀草
素-7-O-β-D-葡萄糖苷进样量在 0.05～0.40 μg 呈
良好的线性关系，回归方程为Y赞 =3E+06X+153 729，
r=0.999 9。
2.4.2 大波斯菊苷标准曲线的制备 分别精密吸取
大波斯菊苷对照品溶液 4.0、8.0、12.0、16.0、20.0 μL
进样，以峰面积积分值为纵坐标，进样量为横坐标，
得出大波斯菊苷进样量在 0.072～0.360 μg呈良好的
线性关系，回归方程为Y赞=3E+06X+12 733，r= 0.999 7。
2.5 精密度实验 取样品溶液 1份，进样量为 20μL，
连续进样 5次，测定峰面积积分值，木犀草素-7-O-
β-D-葡萄糖苷和大波斯菊苷的相对平均标准差
（RSD）分别为 2.06%、1.73%。表明仪器的精密度好。
2.6 稳定性实验 取新制备的样品溶液立即进样，
进样量为 20 μL，之后每隔 2 h测定 1次，按上述色
谱条件，分别测定峰面积的积分值，结果木犀草素-
7-O-β-D-葡萄糖苷和大波斯菊苷的 RSD 分别为
2.46%、2.08%，表明供试样品溶液在放置 8 h内稳定。
2.7 重复性实验 精密称取同一试样 5份，按样品
溶液制备方法制备，按色谱条件测定，进样量为 20μL，
计算木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷含量平均值为
0.69 mg/g，RSD=2.44%，大波斯菊苷含量平均值为
0.5 mg/g，RSD=2.45%。
2.8 回收率实验 取已知含量的葎草样品粉末
0.05 g 5份，精密称定，分别准确加入木犀草素-7-
O-β-D-葡萄糖苷标准液（250 mg/L）140 μL和大波
斯菊苷标准液（180 mg/L）170 μL，依法测定，计算回
收率。结果见表 1。
2.9 不同季节的样品含量测定 采集 5~10月的葎
草，在上述色谱条件下进样，样品进样 3次，测定木
犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷与大波斯菊苷的含量，
测定结果见表 2。
3 讨论
3.1 提取方法的选择 在实验过程中，分别采用超
声提取法、回流提取法、索式提取法测定葎草中木犀
草素-7-O-β-D-葡萄糖苷与大波斯菊苷的含量，结
果显示用索式提取法所提取的葎草中木犀草素-7-
O-β-D-葡萄糖苷与大波斯菊苷的含量最高，超声
提取法提取的含量最低，故选择索式提取法作为葎
草的提取方法。
3.2 流动相的选择 实验过程中考察了不同配比
的流动相，最终选用甲醇-0.2%磷酸溶液（45∶55）使
得杂质峰与木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷的峰型
分离。
表 1 木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷和大波斯菊苷
加样回收率结果
Tab.1 The sample recovery rate of Luteolin-7-O-β-D-
glucoside and cosmosiin
名称
木犀草素
-7-O-β-D-
葡萄糖苷
大波斯菊苷
含量(mg)
0.037 8
0.031 4
0.036 6
0.037 3
0.034 9
0.026 0
0.024 6
0.023 9
0.025 8
0.026 3
加入量(mg)
0.035
0.031
测得量(mg)
0.072 6
0.064 7
0.072 0
0.073 1
0.069 2
0.056 0
0.054 6
0.053 9
0.055 8
0.056 3
回收率(%)
99.6
95.2
101.2
102.3
98.2
98.5
99.2
97.5
101.4
104.3
平均值(%)
99.3
100.2
RSD(%)
2.8
2.7
表 2 不同季节样品分析结果(n=3)
Tab.2 The analysis result of sample product in different
season(n=3)
季节
5月份
6月份
7月份
8月份
9月份
10月份
11月份
木犀草苷-7-O-β-D-葡萄糖苷
0.886
1.060
2.158
1.523
0.690
0.277
-
大波斯菊苷
1.061
2.131
1.258
0.945
0.500
0.157
-
mg/g
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3.3 波长的选择 由于木犀草素的检测波长在
350 nm，大波斯菊苷的检测波长在 345 nm，综合考
虑检测波长设置在 350 nm。
4 结论
采用反相高效液相色谱法同时测定葎草药材中
木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷与大波斯菊苷含量，
样品分析结果良好，建立了一个快速、准确的方法。
葎草中木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷的含量在 7、8月
份含量最高，大波斯菊苷在 6 月份含量最高。而
11月份采集的样品中均未检测出此两种成分。该实
验为葎草的采摘季节提供了理论依据。
参考文献：
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类物质[J].时珍国医国药,2007,18(8):1850-1851.
（收稿日期：2009-06-24）
Determination of Luteolin-7-O-β-D-glucoside and cosmosiin in Humulus scandens in different seasons
CHEN Zai-xing, CHEN Jia-qi, ZHU Xu, et al
（The Pharmacy College of Chinese Medical University， Shenyang 110001， China）
Abstract: [Objective] To determine the content of Luteolin-7-O-β-D-glucoside and cosmosiin in Humulus scandens. [Methods] The
content of humulus by Soxhlet was extracted and using high-performance liquid chromatography (HPLC) Humulus scandens in Luteolin-
7-O-β-D-glucoside and cosmosiin content were determined. The column was kromasilC18 and the mobile phase was methanol-0.2%
phosphoric acid (45∶55), the flow rate was set at 1.0 mL/min, the column temperature was 35 ℃, and the UV detector was set at 350 nm.
[Results] Luteolin-7-O-β-D-glucoside content showed a good linear relationship within 0.05～0.40 μg （r＝0．9997）， the precision RSD=
2.06%, and the average recovery was 99.3%，RSD was 2.8%; cosmosiin content showed a good linear relationship within 0.072～0.36 μg
（r＝0．999 9）， the precision RSD=1.73%, and the average recovery was 100.2%，RSD was 2.7%. The content of Luteolin-7-O-β-D-gluco-
side was the highest in July and August, and the cosmos was the highest in June. [Conclusion] The method is simple, sensitive, stable,
reliable, and it can be used in the determination of Humulus scandens luteolin-7-O-β-D-glucosidase and the cosmos by HPLC. The ap-
propriate harvesting season of Humulus scandens is from June to August.
Key words: Humulus scandens; Luteolin-7-O-β-D-glucoside; cosmosiin, content determination; season
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《天津中医药大学学报》2010年征稿启事
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