全 文 ：基金项目:辽宁省教育厅 (编号 L2010709)资助科研项目
作者简介:陈再兴 , 博士生 , 讲师;研究方向:中药毒理研究;E-mail:zaixingchen@sina.com
通讯作者:孟繁浩 , 博士生导师
葎草不同部位中木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷和大波
斯菊苷的含量测定
陈再兴 , 孟　舒1 , 朱　旭 , 王　琳 , 孟繁浩＊ (中国医科大学药学院 , 沈阳　110001;
1辽宁省计划生育科学研究院)
摘要:　目的 测定葎草的根 、茎 、叶 、叶柄不同部位所含的木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷和大波斯菊苷的
含量 。方法采用 HPLC 法测定葎草中木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷和大波斯菊苷的含量 , 色谱柱为 Dikma
Diamonsil C18柱 , 以甲醇-0.2%磷酸溶液 (45∶55)为流动相 , 流速为 1.0mL·min-1 , 柱温为 35℃, 检
测波长为 350nm 。结果木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷在 0.05 ～ 0.40μg 的范围内与峰面积积分值成良好的线
性关系 (r=0.9999);大波斯菊苷在 0.072 ～ 0.36μg 的范围内与峰面积积分值成良好的线性关系 (r=
0.9997)。根与叶中主要含有木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷和大波斯菊苷 , 且叶中的含量最高。茎与叶柄中
含有较多的其他成分 。结论 该方法可用于葎草中木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷和大波斯菊苷的含量测定。
葎草的叶与其他部位应分别药用。
关键词:　葎草;木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷;大波斯菊苷;含量测定;不同部位
中图分类号:R284;R927.2　　文献标识码:A 　　文章编号:1002-7777 (2011)06-0547-03
Determination of Luteolin-7-O-β-D-glucoside and Cosmosiin of Different Parts in Humulus Scandens
Chen Zaixing , Meng Shu1 , Zhu Xu , Wang Lin and M eng Fanhao＊(School of Pharmaceutical Science ,
China Medical Universi ty , Shenyang 110001;　1 Liaoning Institute of Family P lanning)
ABSTRACT:　Objective To determine the content of Luteolin-7-O-β-D-g lucoside and Cosmosiin of roo ts ,
stems , leaves and petio les in Humulus Scandens.Methods The Dikma Diamonsil C18 column w as used.
The mobi le phase consisted of me thanol-0.2%pho spho ric acid (45 ∶55). The f low rate w as 1.0
mL ·min-1.T he column temperature w as 35℃, and the UV detection w aveleng th w as 350nm.Results
Luteolin-7-O-β-D-gluco side and Cosmosiin show ed a good linear range wi thin 0.072 ～ 0.36μg (r=0.9999)
and 0.05 ～ 0.40μg (r =0.9997) respectively. Roo ts and leaves mainly contained Luteo lin-7-O-β-D-
gluco side and Cosmosiin.The content w as the highest in leaves.The stems and petioles contained more
other components.Conclusion The method can be used to determine the content of Luteolin -7-O-β-D-
gluco side and Cosmosiin by HPLC.The leaves and stems should be separately medicined.
KEYWORDS:　Humulus Scandens;Luteolin-7-O-β-D-glucoside;Cosmosiin;determination;different parts
　　中药 葎草 为 桑科 植 物 葎草 [ Humulus
scandens.(Lour.)Mer r.] 的全草 , 有 3个栽培
种[ 1] 。味甘 、苦 , 性寒。具有清热解毒 、 利尿消肿
之功效。用于肺结核潮热 、肠胃炎 、痢疾 、 感冒发
热 、小便不利 、肾盂肾炎 、 急性肾炎 、膀胱炎 、泌
尿系结石;外用治痈疖肿毒 、 湿疹 、 毒蛇咬伤
等[ 2] 。葎草生命力极强 , 资源非常丰富 , 主要生长
在海拔 500 ～ 1500m 的荒山 、 荒沟边 、 林地等处。
547中国药事 2011年第 25卷第 6期
DOI :10.16153/j.1002-7777.2011.06.015
葎草喜阴耐湿 , 生存竞争能力极强 , 能适应多种土
壤质地和气候条件的生态环境[ 3-4] 。其化学成分较
为复杂[ 5-9] , 全草含木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷 、
大波斯菊苷 、胆碱及天门冬酰胺 , 其他尚有挥发
油 、 鞣质及树脂 。本文对葎草不同部位中木犀草素
-7-O-β-D-葡萄糖苷和大波斯菊苷的含量同时进行
测定 , 并且考察其含量差异。
1　仪器 、 试剂与药品
Waters-600型高效液相色谱仪;1901紫外分
光光度计 , DL-180A 超声波清洗器 , 120型精密电
子天平。FW100型高速万能粉碎机。
木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷 、大波斯菊苷对照
品 [实验室自制 , 纯度均>99% (HPLC归一化法
测定)] , 葎草于 2010年 6月采自沈阳市北陵公园。
甲醇为色谱纯 , 其余试剂均为分析纯 , 水为超纯水。
2　方法[ 10]
2.1　色谱条件
色谱柱:Dikma Diamonsil Cl8柱 (4.6mm ×
200mm , 5μm), 流动相:甲醇-0.2%磷酸溶液
(45 ∶55), 流速:1.0mL · min-1 , 柱温:35℃,
检测波长:350nm , 进样量:20μL。理论板数不
低于 2000 , 分离度 R>1.5。色谱图见图 1。
2.2　对照品溶液的制备
精密称取木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷 、 大波
斯菊苷对照品适量 , 加甲醇溶解分别制成 25 、
18μg ·mL-1的溶液作为对照品溶液 。
2.3　供试品溶液的制备
分别取葎草根 、 茎 、 叶 、 叶柄药材粉碎 , 过
60目筛 , 取粉末约 1g , 精密称定 , 置索氏提取器
中 , 加入石油醚 (30 ～ 60℃), 提取 1.5h , 滤去石
油醚 , 加入甲醇 , 提取 4h , 将甲醇滤液置于蒸发
皿中 , 蒸干甲醇 , 残渣加甲醇溶解 , 转移至 50mL
量瓶中 , 并稀释至刻度 , 用微孔滤膜 (0.45μm)
滤过 , 即得。
2.4　线性关系考察
2.4.1　木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷标准曲线的制备
分别精密吸取木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷对
照品溶液 2.0 、 4.0 、 8.0 、 12.0 、 16.0μL 进样 ,
以峰面积积分值为纵坐标 , 进样量为横坐标 , 得出
木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷进样量在 0.05 ～
0.40μg 范围内呈良好的线性关系 , 回归方程:
Y =3.068143×106 X +1.53729×105 　r=0.9999
2.4.2　大波斯菊苷标准曲线的制备
分别精密吸取大波斯菊苷对照品溶液 4.0 、
8.0 、 12.0 、 16.0 、 20.0μL进样 , 以峰面积积分值
为纵坐标 , 进样量为横坐标 , 得出大波斯菊苷进样
量在 0.072 ～ 0.360μg 范围内呈良好的线性关系 ,
回归方程:
Y =2.6700226×107X +1.2733×104 　r=0.9997
2.5　精密度试验
取供试品溶液 1份 , 进样量为 20μL , 连续进
样 6次 , 测定峰面积积分值 , 木犀草素-7-O-β-D-葡
萄糖苷和大波斯菊苷的峰面积平均值分别为
675927和 508011 , RSD分别为 2.32%和 1.64%。
表明仪器的精密度良好 。
2.6　稳定性试验
取新制备的供试品溶液 20μL 立即进样 , 之后
每隔 2h进样 1次 , 按上述色谱条件 , 分别测定峰
面积的积分值 , 结果木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷
和大波斯菊苷的峰面积平均值分别为 692903 和
518369 , RSD分别为 2.46%和 2.08%, 表明供试
品溶液在室温放置 8h内稳定 。
2.7　重复性试验
精密称取同一试样 6份 , 按供试品溶液制备方
法制备 , 按上述色谱条件测定 , 进样量为 20μL ,
计算木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷含量平均值为
0.69mg · g-1 , RSD=2.23%, 大波斯菊苷含量平
均值为 0.5mg ·g-1 , RSD=2.17%。
2.8　回收率试验
取已知含量的葎草样品粉末 0.05g , 共 6 份 ,
精密称定 , 分别准确加入木犀草素-7-O-β-D-葡萄
糖苷对照品溶液 (0.25mg ·mL-1)140μL 和大波
斯菊苷对照品溶液 (0.18mg · mL-1)170μL , 按
“2.3” 项下方法制备 , 并按上述色谱条件测定 , 计
算回收率。结果见表 1。
表 1　加样回收率
　 样品含量(mg)
加入量
(m g)
测得量
(mg)
回收率
(%)
平均回收率
(%)
RSD
(%)
A ＊ 0.0378 0.035 0.0726 99.6
　 0.0314 0.035 0.0647 95.2
　 0.0366 0.035 0.0720 101.0 99.1 2.5
　 0.0373 0.035 0.0731 102.2
　 0.0349 0.035 0.0692 98.2
　 0.0341 0.035 0.0684 98.0
B＊ 0.0255 0.031 0.0560 98.5
　 0.0238 0.031 0.0546 99.2
　 0.0237 0.031 0.0539 97.4 100.7 2.7
　 0.0244 0.031 0.0558 101.5
　 0.0240 0.031 0.0563 104.4
　 0.0264 0.031 0.0584 103.2
　注:A 为木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷;B为大波斯菊苷。
548 中国药事 2011年第 25卷第 6期
a.木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷和大波斯菊苷对照品;
b.葎草根;c.葎草叶柄;d.葎草茎;e.葎草叶;
1.木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷峰;2.大波斯菊苷峰。
图 1　葎草 HPLC 色谱图
2.9　葎草不同部位样品的含量测定
采集 6月的葎草 , 按 “2.3” 项下方法制备供
试品溶液 , 在上述色谱条件下进样 , 连续进样 3
次 , 测定木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷与大波斯菊
苷的含量 , 结果见表 2。
表 3　葎草不同部位样品分析结果 mg· g-1
部位 木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷 大波斯菊苷
根　 0.068 0.077
茎　 0.982 0.451
叶　 1.305 0.912
叶柄 0.184 0.287
3　讨论与结论
3.1　葎草样品采摘季节的选择
从以往研究来看[ 10-12] , 6 ～ 8月是葎草中木犀
草素-7-O-β-D-葡萄糖苷和大波斯菊苷含量较高的
季节 。故采集 6月份的葎草样品进行测定。
3.2　葎草药用部位有效成分含量的差异
本试验对葎草根 、茎 、叶 、叶柄等不同部位中
所含的木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷和大波斯菊苷
的含量进行了测定。从试验结果可知 , 这 2种成分
在叶中的含量最多 , 其含量由高到低的次序为叶>
茎>叶柄 >根 。叶中的木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖
苷和大波斯菊苷的含量分别是根中的近 20倍和 50
倍 。从高效液相色谱图可知 , 根 、叶中所含的成分
种类相对较少 , 茎及叶柄中所含的成分种类相对较
多 , 可能为黄酮类成分 。
3.3　葎草药用部位的选择
葎草作为药用植物因其所含成分有较大的差异 ,
不同部位应该分开药用 , 其主要的药用部位为叶。
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(上接第 546页)大部分药材或饮片随着存放时间
的延长 , 其药效成分或指标成分均会有一定的下
降 , 故建议对药材或饮片应加强包装材料的选择研
究及稳定性考察研究 , 以确定保质期;另一方面 ,
除了用现代的测定手段控制主要成分的含量外 , 药
材及饮片直观质量的优劣也应进行量化 , 作为质量
评价的重要指标 。
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