全 文 ：檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶
发油提取工艺［J］． 中国实验方剂学杂志，2008，14
(6) :25．
［4］ 张祥俊，张莉 ．乳核散结片制备工艺的研究［J］． 中国
实验方剂学杂志，2009，15(11) :25．
［5］ 张庆萍 ． β-环糊精包合川芎、独活挥发油的工艺研究
［J］．湖北中医杂志，2007，29(9) :61．
［6］ 孙兆姝，周凌，康廷国 ． 二妙胶囊中苍术挥发油提取
及包合工艺研究［J］． 中华中医药学刊，2009，27
(4) :876．
［7］ 于维萍，辛义周 ．乳香、没药挥发油 β-CD 包合物的实
验研究［J］．中国药房，2007，18(18) :1379．
［责任编辑 仝燕］
［收稿日期］ 20110831(002)
［第一作者］ 薛鹏喜，硕士研究生，从事药物化学研究，Tel:
15902839579，E-mail:sdjxpx@ 163． com
［通讯作者］ * 童志平，副教授，从事药物化学的研究，E-mail:
tzp_008@ 163． com
超临界 CO2 萃取穗花大黄中总蒽醌工艺优选
薛鹏喜，童志平 * ，谢远
(西南交通大学生命科学与工程学院，成都 610031)
［摘要］ 目的:优化超临界 CO2 萃取穗花大黄中总蒽醌的工艺条件。方法:以萃取压力、萃取温度和萃取时间为考察因
素，采用紫外-可见分光光度法测定总蒽醌含量，以大黄萃取物中总蒽醌的含量为评价指标，正交试验优选工艺条件。结果:
最佳工艺条件为萃取压力 25 MPa，萃取温度 50 ℃，萃取 2. 0 h。提取物中总蒽醌的质量分数 23. 4 mg·g － 1，总蒽醌转移率达
91. 4%。结论:该工艺稳定可行，可用于穗花大黄总蒽醌的提取。
［关键词］ 超临界 CO2萃取法;穗花大黄;总蒽醌;正交试验
［中图分类号］ R283. 6 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1005-9903(2012)09-0056-03
Optimization of Extraction Process for Total Anthraquinones
from Rheum spiciforme by Supercritical CO2 Method
XUE Peng-xi，TONG Zhi-ping* ，XIE Yuan
(School of Life Science and Engineering，Southwest Jiaotong University，Chengdu 610031，China)
［Abstract］ Objective:To optimize extraction process conditions of total anthraquinones from Rheum
spiciforme by supercritical CO2. Method:With extraction pressure，extraction temperature and extraction time as
factors， the content of total anthraquinones from extract of R． spiciforme as index， the content of total
anthraquinones was determined by UV-visible spectrophotometry， technology conditions were optimized by
orthogonal test． Result: Optimum technology conditions were as follows: extraction pressure was 25 MPa，
extraction temperature was 50 ℃，extracted 2. 0 h． The content of total anthraquinones in extract was 23. 4 mg·
g － 1，transfer rate was up to 91. 4% ． Conclusion:This process was stable and feasible， it could be used to
extracting total anthraquinones from R． spiciforme．
［Key words］ supercritical CO2 extraction method;Rheum spiciforme;total anthraquinones;orthogonal test
大黄具有泻热通肠、凉血解毒、逐疲通经等功
效，其主要有效成分为蒽醌类物质［1］。目前对大黄
系统性研究主要集中在正品大黄，而对穗花大黄中
的蒽醌类有效成分提取工艺研究尚未见报道。
超临界 CO2 萃取具有提取效率高、几乎无有机
溶剂残留、适于热敏性物质提取等优点，已被广泛应
用于医药、食品、化工等领域［2］。但该技术应用在
大黄蒽醌类提取的报道不多见［3-4］。本文以穗花大
黄中总蒽醌的量为考察指标，对影响蒽醌萃取率的
压力、温度和时间 3 个主要因素进行优化，以确定最
·65·
第 18 卷第 9 期
2012 年 5 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol． 18，No． 9
May，2012
DOI:10.13422/j.cnki.syfjx.2012.09.066
佳工艺条件，为进一步工业化生产提供参考，为穗花
大黄等非正品大黄资源的合理开发提供理论依据。
1 材料
Shimadzu LC-10A 型高效液相色谱仪(日本岛
津) ，UV-2450 型紫外-可见分光光度计(日本岛津) ，
SC5 + 1 L 型超临界萃取装置(德阳四创科技有限公
司) ，BS110S 型电子天平(北京塞多利斯天平有限
公司)。
大黄(购自成都荷花池中药材市场，经西南交
通大学童志平副教授鉴定为穗花大黄 Rheum
spiciforme Royle) ，1，8-二羟基蒽醌(批号 110829-
97)、芦荟大黄素(批号 110795-200806)、大黄素(批
号 110756-200110)、大黄酚(批号 110796-200716)
对照品均购于中国药品生物制品检定所，大黄酸、大
黄素甲醚对照品购于成都思科华生物技术有限公
司。实验用高纯 CO2(成都世茂气体有限公司，纯
度 ＞ 99. 9%) ，其余试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2. 1 总蒽醌含量测定 按 2005 年版《中国药
典》［5］中方法进行测定，试验用大黄药材总蒽醌含
量为 2. 56%。色谱图见图 1。
A．混合对照品;B．样品;1. 大黄酸;2. 芦荟大黄素;
3. 大黄素;4. 大黄酚;5. 大黄素甲醚
图 1 穗花大黄中总蒽醌 HPLC
2. 1. 1 测定方法选择［6］ 采用 HPLC 可对蒽醌类
化合物进行精确定量分析，但操作繁琐，在工业生产
中采用 HPLC 测定蒽醌类化合物的含量，运行费用
太高且费时。故选择紫外-可见分光光度法直接测
定总蒽醌含量。
2. 1. 2 对照品溶液制备 精密称取 1，8-二羟基蒽
醌 5 mg，甲醇溶解并定容于 50 mL 量瓶中，即得质
量浓度为 0. 1 mg·L － 1的对照品溶液。
2. 1. 3 供试品溶液制备 精密量取样品液 1 mL，
95%乙醇稀释，定容于 50 mL 量瓶中，精密吸取 1
mL，挥去溶剂，加 8% 盐酸溶液 10 mL 超声处理 2
min，加三氯甲烷 10 mL，加热回流 1 h，冷却，置分液
漏斗中，用少量三氯甲烷洗涤容器，并入分液漏斗
中，分取三氯甲烷层，水层用三氯甲烷提取 3 次，每
次 10 mL，合并三氯甲烷液，水浴蒸干，残渣加 0. 5%
乙酸镁甲醇溶液使溶解，转移至 10 mL 量瓶中，加
0. 5%乙酸镁甲醇溶液至刻度，摇匀，滤过，取续滤
液，即得。
2. 1. 4 最大吸收波长确定 取 1，8-二羟基蒽醌对
照品溶液 1 mL，挥去甲醇，加 0. 5%乙酸镁-甲醇溶
液定容于 10 mL 量瓶中，在 300 ～ 600 nm 扫描，结果
在 512 nm 处有最大吸收，故测定波长为 512 nm。
2. 1. 5 线性关系考察 分别精密量取 1，8-二羟基
蒽醌对照品溶液 0. 5，1. 0，1. 5，2. 0，2. 5，3. 0 mL，挥
去甲醇，加 0. 5%乙酸镁-甲醇溶液定容于 10 mL 量
瓶中，0. 5%乙酸镁-甲醇溶液作为空白对照，在最大
吸收波长处测定其吸光度，以吸光度(A)对质量浓
度(C)做标准曲线并拟合出线性回归方程 A =
30. 834C + 0. 001 7 (r = 0. 999 9) ，结 果 表 明 在
0. 005 ～ 0. 03 mg·L － 1呈良好的线性关系。
2. 1. 6 精密度试验 取同一对照品溶液 2 mL，挥
去甲醇，加 0. 5%乙酸镁-甲醇溶液定容于 10 mL 量
瓶中，重复测定 5 次。结果 RSD 0. 182%，说明所建
方法精密度良好。
2. 1. 7 稳定性试验 取供试品溶液，分别于 0，1，
2，3，4 h 在 512 nm 处分别测定吸光度，计算 A 的
RSD 0. 419%，表明样品溶液在 4 h 内稳定。
2. 2 正交试验 将大黄药材粉碎，过 40 目筛，称取
粉末 100 g 装入萃取釜中，以 95%乙醇 100 mL 作为
夹带剂。调整好萃取压力和萃取温度后开始萃取，
至规定时间后停止萃取。收集萃取产物，按 2. 2 项
下方法计算萃取物中总蒽醌的含量。选取萃取压力
(A)、萃取温度(B)和萃取时间(C)3 个影响超临界
CO2 萃取的主要因素进行考察，每个因素选 3 个水
平(表 1)。按表 2 安排试验，以萃取物中总蒽醌转
移率为考察指标进行分析，方差分析见表 3。
表 1 穗花大黄中总蒽醌超临界萃取工艺正交试验因素水平
水平
A
萃取压力 /MPa
B
萃取温度 /℃
C
萃取时间 / h
1 15 40 1. 0
2 20 45 1. 5
3 25 50 2. 0
由表 2，3 中总蒽醌转移率的直观分析与方差分
析可知，各因素对工艺的影响顺序为萃取压力 ＞ 萃
取时间 ＞萃取温度。优选试验方案为 A3B3C3，即萃
取压力为 25 MPa，萃取温度 50 ℃，萃取时间 2. 0 h。
2. 3 验证试验 称取大黄粗粉 3 份，每份 100 g，
装入萃取釜中，按照正交设计优选的工艺参数条件
·75·
薛鹏喜，等:超临界 CO2 萃取穗花大黄中总蒽醌工艺优选
进行验证试验 3 次，结果 3 次试验中总蒽醌质量分
数分别为 23. 1，23. 3，23. 7 mg·g － 1;总蒽醌转移率分
别为 90. 2%，91. 0%，92. 6%;萃取物得率分别为
3. 63%，3. 92%，3. 85%。表明本工艺稳定可行。
3 讨论
对于蒽醌苷等极性较强的物质，不加夹带剂
萃取效果不理想，故本试验对夹带剂种类和用量
进行了考察，综合考虑发现以 95% 乙醇作为夹带
剂，料液比 1 ∶ 1时萃取效果较好。本试验所用的超
临界萃取设备只配备有 5 L 和 1 L 萃取釜，因而还
需要进一步的放大验证试验才能应用实际工业
生产。
表 2 穗花大黄中总蒽醌超临界萃取工艺正交试验安排
No． A B C D
总蒽醌
/mg·g － 1
总蒽醌转移率
/%
萃取物得率
/%
1 1 1 1 1 15. 2 59. 4 2. 94
2 1 2 2 2 16. 8 65. 6 3. 68
3 1 3 3 3 18. 3 71. 5 3. 21
4 2 1 2 3 20. 6 80. 5 3. 81
5 2 2 3 1 21. 4 83. 6 3. 00
6 2 3 1 2 19. 8 77. 3 3. 75
7 3 1 3 2 22. 1 86. 3 3. 54
8 3 2 1 3 21. 8 85. 1 3. 85
9 3 3 2 1 23. 2 90. 6 3. 92
K1 65. 500 75. 400 73. 933 77. 867
K2 80. 467 78. 100 78. 900 76. 400
K3 87. 333 79. 800 80. 467 79. 033
R 21. 833 4. 400 6. 534 2. 633
注:萃取物得率 =萃取物质量 /药材质量 × 100%;总蒽醌转移率 =萃取物中总蒽醌质量分数 /药材中总蒽醌质量分数 × 100%。
表 3 总蒽醌转移率方差分析
方差来源 SS f F P
A 747. 847 2 71. 585 ＜ 0. 05
B 29. 540 2 2. 828 ＞ 0. 05
C 69. 807 2 6. 682 ＞ 0. 05
D(误差) 10. 45 2
注:F0. 05(2，2)= 19. 00。
［参考文献］
［1］ 未作君，林立，倪晋仁 ． 超临界 CO2 流体萃取大黄游
离蒽醌的研究［J］． 高校化学工程学报，2006，20
(2) :197．
［2］ 霍鹏，张清，张滨，等 ． 超临界流体萃取技术的应用与
发展［J］．河北化工，2010，33(3) :25．
［3］ 肖飞，李卫民，李其凤 ． 正交试验法优化 SFE-CO2 萃
取大黄总蒽醌工艺探讨［J］． 中国实验方剂学杂志，
2009，15(4) :33．
［4］ 谢伟雪，刘孝敏，谢伟敬，等 ． 超临界 CO2 萃取大黄蒽
醌类成分工艺的优化［J］． 安徽农业科学，2011，39
(6) :3319．
［5］ 中国药典 ．一部［S］． 2005:17．
［6］ 魏玉辉，武新安，陈岚，等 ． 大黄蒽醌类成分含量测定
方法实验研究［J］． 兰州大学学报:医学版，2005，33
(1) :13．
［责任编辑 仝燕］
·85·
第 18 卷第 9 期
2012 年 5 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol． 18，No． 9
May，2012