全 文 ：作者简介:倪奎(1980-),男 ,安徽桐城人 ,教师 ,从事生物科学教学与研究。收稿日期:2006-01-19
不同浓度的 6-BA 、NAA 对大岩桐不定芽发育的影响
倪 奎
(安徽新闻出版职业技术学院 ,安徽合肥 230061)
摘 要:大岩桐在MS+6-BA2.0 mg/L+NAA0.01 mg/L+2 , 4-D0.3mg/L和 MS+6-BA2.0 mg/L+NAA0.2 mg/L培养基上能形成愈
伤组织;在MS+6-BA1.0mg/ L+NAA0.1 mg/L上能形成愈伤组织和较少的不定芽;在MS+6-BA0.5 mg/L+NAA0.1mg/ L培养基
上很少或不形成愈伤组织 ,而直接形成不定芽。
关键词:大岩桐;不定芽;6-BA;NAA
中图分类号 Q945 文献标识码 B 文章编号 1007-7731(2006)01-21-01
大岩桐(sinningia speciosa)原产于南美洲巴西 ,又称巴
西芙蓉 。是多年生肉质草本植物。春末至秋初开花。有
紫 、红 、粉 、白等色 ,花期 7-8个月[ 1] 。已有大岩桐组培报
道中是利用外植体先诱导出愈伤组织(MS+6-BA2.0 mg/L
+NAA0.01mg/ L +2 ,4-D0.3 mg/ L),再从愈伤组织诱导出不定
芽(MS+6-BA2.0mg/L +NAA0.01 mg/ L)[ 2] 。植物生长素和植
物细胞分裂素是广泛应用于植物组织培养 ,促进高等植物
生长发育的两类激素 ,由于培养基中两种激素的加入的不
同对培养物有明显的影响[ 3] ,本实验以大岩桐为材料 ,通
过改变培养基中的细胞分裂素和生长素的施加量 ,观察大
岩桐外植体(叶片)不定芽分化的情况。
1 材料与方法
1.1 材料 实验室盆栽大岩桐第 3 ,4 片幼叶[ 4] 。初代培
养采用 4种处理:①MS+6-BA2.0 mg/ L +NAA0.01 mg/ L +2 , 4
-D0.3 mg/ L;②MS+6-BA2.0 mg/ L +NAA0.2 mg/ L;③MS+6-
BA1.0 mg/ L+NAA0.1mg/L ;④MS+6-BA0.5 mg/ L+NAA0.1 mg/ L丛
芽分化培养基:MS+6-BA2.0mg/L +NAA0.01 mg/L
1.2 培养方法 取幼叶用自来水冲洗后 ,加用洗衣粉水
浸泡 5min ,再用清水冲洗干净 。用 0.1%升汞(加吐温 2
滴)消毒 8min ,再用无菌水清洗 8 次 ,每次 2min ,然后放入
盛有无菌纱布的培养皿吸干水分 ,切取 1cm×1cm 左右小
块接种于培养基中 ,每种处理接种 10瓶 ,每瓶接 3块外植
体。在温度(25±1)℃,光强 1500LX ,光照:12h/d下培养 。
2 结果与讨论
培养 20d以后 ,处理①中的叶片开始从切口处形成愈
伤组织;而处理②、③、④号中的叶片只是有些弯曲。25d
后 ,处理①中的愈伤组织逐渐增大 ,颜色淡绿;处理②中的
叶片开始从切口处形成愈伤组织;处理③中的叶片开始隆
起。30d后 ,处理①愈伤组织块继续增大;处理②中愈伤组
织逐渐增大;处理③中外植体开始有愈伤组织形成;处理
①开始从叶片边缘分化少数不定芽 ,几乎看不到愈伤组
织。第 50d后 ,处理①②培养物转至丛芽分化培养基;处
理③的愈伤组织开始增大 ,有很少量不定芽形成;处理④
不定芽增多 ,先形成的不定芽生长至 0.5 -0.8cm 。第
60d ,处理③中的愈伤组织连同少量不定芽转至丛芽分化
培养基;处理④中的不定芽约长 1.5cm ,可移至生根培养
基。处理①的培养物在丛芽分化培养基上开始形成绿色
不定芽点。第 61d ,在丛芽分化培养基上的①处理②的愈
伤组织开始形成绿色不定芽点 ,第 68d ,处理③的愈伤组织
在丛芽分化培养基上分化形成绿色不定芽。
对实验材料不定芽形成所需的平均时间和形成的不
定芽平均数进行统计 ,结果如下表 1 。
表 1 初代培养基中添加不同 6-BA、NAA对不定芽形成的影响
处理 不定芽形成的方式 不定芽形成时间(d)
不定芽平均
数量(外植体)
① 通过愈伤组织形成 62 12.3
② 通过愈伤组织形成 64 11.7
③ 通过愈伤组织形成(很少量直接形成) 70 9.8
④ 基本直接形成 30 5.9
从表 1可知 ,在培养基中加入不同浓度的 6 -BA 和
NAA ,不仅影响不定芽的形成方式 ,而且影响形成时间和
数量 。采用处理④培养基进行培养 ,可从外植体直接形成
不定芽 ,缩短时间出苗 ,但是数量较少 ,要得到大量的苗 ,
需经过多次增殖 。当在培养基中加入 6-BA和 NAA的浓
度分别为 2.0 mg/L和 0.01 mg/L , 2.0 mg/L和 0.2 mg/L及
1.0 mg/L和 0.1 mg/L时 ,先形成愈伤组织 ,再由愈伤组织
分化出不定芽 ,出苗时间较长 ,但数量多。可见培养基中
细胞分裂素和生长素的比例有一定的关系 ,培养基中加入
2 , 4-D有利于愈伤组织形成。
观赏园艺育苗 ,应尽快出苗尽量少发生愈伤组织 ,以
免在长期的培养过程当中细胞分裂不正常。如染色体倍
数发生变化 ,影响无性系后代的遗传性状 ,失去观赏价值
或失去再生成苗的能力。通过对以上实验得出结论 ,如果
要得到大岩桐大量的愈伤组织选用①号培养基最好 ,如果
要得到大岩桐的大量的不定芽可选用④号培养基①。(责
编:夏慧敏)
21安徽农学通报, Anhui Agri.Sci.Bull.2006, 12(1):21
DOI :10.16377/j.cnki.issn1007-7731.2006.01.013