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少“白芷中香豆素类成分的反相
高效液相色谱分析
李宏宇 . 戴跃进 谢成科
(华西医科大学药学院 成都 )
王立人
(中国科学院成都有机化学研究所 )
提要 本文用反相高效液相色谱法分离测定了川白芷的根、 茎 、 叶 、 尾根及种子巾的欧前胡素、 异欧
前胡素和氧化前胡素等三种有效成分 。 在键合相 O D S柱上 , 以甲醇一水 (7 。 : 3 0) 为流动相 , 紫外检测 ,
样品中各组分分离 良好 , 用微处理机按外标法定量 , 变异系数《 3 . 3 3 % , 回收率97 . 91 一 101 . 36 %。
关键词 白芷 欧前胡素 异欧前胡素 氧化前胡素 反相高效液相色谱 `
白芷为一常用中药 , 据 中 国 药 典 ( 19 8 5
版 ) 规定 , 中药 白芷为伞形科植物 白芷 A n g e -
l i e a d a h u r i e a ( F i s e h
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燥根 。 具有散风除湿 、 通窍止痛 、 消肿排脓的
功能 。 近年来用其制剂配合黑光化学治疗白瘫
风 、 银屑病有显著的疗效 〔 1 〕 。 有关化学成分
已有一些报道 〔 2 一 6 〕 , 主要为香豆素类化 合
物 , 并测定了它们的含量 〔 6 一 1。 , 但所报 道
的方法仅能测定其中一种或二种成分 。 应用高
效液相色谱法同时测定川 白芷的不 同加工法和
同不部位的三种有效成分 , 国内外未见报道 。
为了更好地开发利用川白芷 , 扩大药用资源 ,
我们对川白芷 (未经硫熏 ) 、 川白芷 (硫熏 )
以及川白芷的茎 、 叶 、 尾根和种子中的三种成
分进行了分析 。 本法简单 、 快速 、 准确 、 精密
度较好 。
实 验 部 分
· 现吉林省医药工业研究所
一 、 仪器与试剂
美国W at er s 高效液相色谱仪 , 包括 6 0 0 0
A 型输液系 统 , U 6 K通用进样阀 , 4 40 型 紫
外检测器 , M一 7 30 数据 处 理 机 , 色 谱 柱 为
u一 B o n d a p a k C , 。 预填充柱 ( 1 0件m , 3 0 0 x
3
.
g m m ID )
, 预柱 G u a r d p a k . 填料为 B o n d -
a p a k C ,
:
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o r a s i l
。 所用试剂均为分析纯 。
川 白 芷 A n g e l i e a d a h u r i e a 采 自 四川 遂 宁
( 1 9 5 5
.
7 )
, 药材由作者鉴定 。
二 、 色谱条件的选择
以。戈 B o n d a p a k C , 。柱为色谱分离柱 , 加
一预柱以防样品沽污分析柱 , 以不同比例的甲
醇 : 水 、 甲醇 : 水 : 乙酸乙醋 、 甲醇 : 水 : 醋酸作流
动相 , 对白芷样品中三种有效成分的分离情况
进行考查 , 用保留时间和加入标准 品的方法确
认组峰 , 用前需过滤并脱气 ,流速 1 . Om l/ m i n ,
U V 2 5 4 n m检测各组分峰 , 结果表明 , 以甲醇 ,
水 ( 70 : 30 ) 为流动相 ,样品中各组分获得满意
的分离 , 而且分析时间较 短 , 图 1 分 别 为 标
准品和样品的分离情况 。
三 、 标准曲线的绘制
准确称取标准品欧前胡素 5 . 1 3m g , 异欧前
胡素 4 . 9 9m g 、 氧化前胡素5 . 24 m g , 用 乙酸 乙
DOI : 10. 13375 /j . cnki . wcjps . 1990. 04. 005
华 西 药 学 杂 志5 卷
前 胡 素 : Y =5 2 1 1X+ 5 2 .47r =0 .9 9 9 9
Y = 195 3X+ 6 7
.
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.
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Y = 19 03X+ 5 3
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图 1标准品和样品的高效液相色谱分离
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图 2标准曲线
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, 均用乙酸乙 醋
定溶 至 I Om l , 制得 6 个不同浓度的标准 溶液 ,
进样 1 0川 , 按上述条件进行色谱分析 : 以峰面
积为纵坐标 , 各成分浓度为横坐标作图 (图 2 ) ,
得三条通过原点的直线 , 其回归方程如下 :
四 、 回收率实验
精密称取白芷根粉 50 0 m g , 将标准溶 液加
至生药样品中 , 挥干 , 按生药分析方法测定 ,
结果见表 1 。
五 、 样品分析
见参考文献 ( 8 )精密称取实验材料 ( 40 目 )
表 1 , 化 合 物 回 收 率
T a b l e 1 R e e o v e r y o f e o m P o u n d s l 一 l ( n 二 耳)
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2 5
98 9 1
2 克 , 置 S o x hl et 抽提器 中 , 用乙醚提取 9 小 时 , 回收 乙醚 , 真空干燥 , 残渣溶于乙酸乙醋
4 期 2 3 3
二二二 ,一二 : 二二二二 二二一一` ` 二二 `二 二 ~ ` = 二二二二= = 二 二二二二二二二二二二二= 二二二二二二=一之二= 二二二二二二二二二二二二二二二二二二二二二二二之二二二 二二二二二二二二二二二二二二二二咒二二二巴一 二二二二二二二 , 二二二二二并定容至25 0 1 , 经 M il 三p 。 : 。样品过滤器过滤 , 按前色谱条件进行分析 。 结果见表 2 。
表2 . 各 种 白 芷 中 香 豆 素 含 量— .一- -一卫鱼匕几卫丝竺些且目旦鱼型些丝 旦鱼 鱼塑您坐愁业 ,塑些气 ;巴绝乙一 - . -一S a m P le C o u m a r i n e o n t eO x y p eu c e d a r in Im P e r a to r i n 少 .S U工 U l t S( % ) T o ta l
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0 2 1
讨 论
1
、 由表 2 可见 , 不同部位的白芷 , 三种
成分差异较大 , 种子含量高达 1 . 02 1% , 茎的含
量最低 , 尾根的含量比粗根多近一倍 。
2
、 川 白芷用硫熏后 , 有效成 分 损 失 较
大 , 其三种成分的总量仅为未用硫熏的白芷的
含量的近二分之一 , 这对川 白芷的质量影响较
大 , 应引起注意 。
3
、 用反相高效液相色谱法 , 同时测定 白
芷中三种有效成分的含量 , 可获 得 满 意的 结
果 。 标准曲线在 0 . 0 05 一 0 . 05 m g /。 1范围内线性
良好 , 样品中各成分测定值变异系数簇 3 . 3 % ,
平均回收率 97 . 91 一 101 3 6% , 方法简单快速 ,
结果准确 。
4
、 白芷中三种有效成分的最大紫外吸收
波长虽然都不在 2 5 4n m , 但它们的吸收峰谱带
较宽 , 而 且 紫 外 检测器在 2 5 4 n m 处灵敏度最
高 , 因此 , 将 U V 2 54 n m定为检测波 长 。 实 验
表明 , 它能很好地满足样品中各组 分 峰 的检
测 。
参 考 文 献
1 周继铭 , 等 。 中成药研究 1 9 8 0 , ( 4 ) : 33。
2
. 张如意 , 等 。 北京医学院学报 19 8 5 ; 1 7 : 1 0 4。
3
. 周继铭 , 等。 中草药 1 98 7 , 1 8 : 2 。
峨. 张涵庆 , 等 。 药学通 报 198 。 , 拓 : 2 。
5
. 小泽贡 , 他 ( 日 ) 。 生药学杂志 19 8 1 ) 3 5: 9 0。
6
,
T 云梅 , 等 。 药学通报 19 8 2 , 1 6: 26。
?
. 鲁灵思 , 等。 药物分析杂志 1 98 2 , 2 : 34 8。
8
. 陈燕祥 , 等 。 中成药研究 1 9 8吐, ( 6 ) 2 6。
9 韩娟 , 等 。 中草药 1 95 6 , 27 : 1 3。
10
. 黄新生 , 等 。 ,扣成药研究 19 8 6 ; ( 10 ) 3 0。
J l
. 三三健 , 等 。 药物分析杂志 1 98 8 , 8 : 8 7。
R E V E R S E 一 P H A S E H P L C D E T E R M I N A T I O N O F C O U M A R I N S
I N T H E T R A D I T I O N A L C H I N E S E D R U G C H U A N B A I Z H I
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m P e r a t o r i n ( l ) i n 七ho r o o t
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,
l e a t
, a n a l y s e 七1飞e c o n t e n t s o f t h r o c c o -
3 m a l l r o o t
, s e d o 尘 e h u a n b a ihz i s im u l t a 一 m P o即 n t s .
K e y W o r d s A l l罗 I i e a d a hu r i e a O x y lP ce d a r还 I m P e r a 无a t o r加 I s o i m eP r a 七o r il飞
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