全 文 ：华西药学杂志W CJ· PS　2008, 23(6)：683 ～ 684 　　
基金项目:国家 “十一五 ”科技支撑计划重点项目(编号 2007BAQ00161)
作者简介:郑翠英(1983-),女 ,正攻读中药学专业的硕士学位。 E-mail:zhengcuiying2006@163.com
＊通讯作者(Correspondentauthor), E-mail:chaoqun xu@sina.com
白芷中香豆素类成分的提取
郑翠英 1 ,夏艳姣 2 ,徐超群3＊
(1.成都中医药大学 ,四川 成都 610075;2.四川大学华西药学院 , 四川 成都 610041;3.四川省中医药科学院 , 四川 成都
610041)
摘要:目的　优选白芷中香豆素类成分的提取工艺。方法　以欧前胡素转移率为指标 , 采用单因素 、正交试验的方法 , 优化
提取工艺参数。结果　选用渗滤法提取 , 60%乙醇浓度 、浸泡 6 h、6倍量溶媒提取的提取效果最佳。结论　渗滤法简单且效
率高 , 适用于白芷中香豆素类成分的提取。
关键词:白芷;欧前胡素;香豆素;渗滤法
中图分类号:R284　 文献标识码:A　 　文章编号:1006-0103(2008)06-0683-02
ExtractionofcoumarinsinRadixAngelicaeDahuricae
ZHENGCui-ying1 , XIAYan-jiao2 , XUChao-qun2＊
(1.ChengduUniversityofTraditionalChineseMedicine, Chengdu610075, China;2.WestChinaSchoolofPharmacy, SichuanUniversi-
ty, Chengdu610041, China;3.SichuanAcademyofChineseMedicineSciences, Chengdu610041, China)
Abstract:OBJECTIVE　TooptimizetheextractiveprocessofcoumarinsinRadixAngelicaeDahuricae.METHOD　Peulustrin
translationeficiencywaschosenasindex.Theoptimalconditionswerestudiedusingone-factorexperimentaltestaswelasorthogonal
design.RESULTS　Theoptimalparametersofpercolationmethodwere60% asthealcoholconcentration, 6 hoursasdippingtime, 6
timesassolventconsumption.CONCLUSION　ThepercolationmethodwassuitableforextractionofRadixAngelicaeDahuricaeforits
simpleandhigheffectiveness.
Keywords:RadixAngelicaeDahuricae;Peulustrin;Coumarinspercolationmethod
CLCnumber:R284　　　 Documentcode:A　 　ArticleID:1006-0103(2008)06-0683-02
　　白芷为伞形科植物白芷 Angelicadahurica
(Fisch.exHofm.)Benth.etHook.f.或杭白芷 Angel-
icadahurica(Fisch.exHofm.)Benth.etHook.f.var.
formosana(Boiss.)ShanetYuan的干燥根;具有散
风除湿 、通窍止痛 、消肿排脓的功效;临床上用于感
冒头痛 、眉棱骨痛 、鼻塞 、鼻渊 、牙痛 、疮疡肿痛的治
疗 。白芷中主要成分为香豆素类 、挥发油类成分 。
其中香豆素类成分如白欧前胡素 、氧化前胡素 、异欧
前胡素等的含量约为 0.221% ～ 1.221%[ 1] 。白芷
的提取方法常采用 95%乙醇提取[ 2] ,提取工艺设计
水平不太合理 ,提取成本较高。因此 ,采用 HPLC测
定含量 [ 3, 4] ,并对提取工艺进行了优化。
1　实验部分
1.1　仪器与试药
1200高效液相色谱系统(美国 Agilent);CQ-
25超声波清洗仪(中船总公司)。欧前胡素对照品
(中国药品生物制品检定所 , 批号:110826 -
200511);白芷药材(四川省遂宁市白芷药材 GAP生
产基地);乙腈为色谱纯;水为纯净水;其余试剂为
分析纯。
1.2含量测定方法
1.2.1　色谱条件　采用 AgilentC18色谱柱(150 mm×
4.6 mm, 5 μm);检测波长为 300 nm;流动相为乙腈 -
水(57：43);流速为 1 ml·min-1;柱温为 25℃。理论
板数应不低于 3×103。
1.2.2　溶液的制备　精密称取 8.49 mg欧前胡素
对照品 ,加甲醇溶解并定容至 25 ml量瓶中 ,作为贮
备液 。精密量取此液 2 ml于 10 ml量瓶中 ,加甲醇
定容 ,作为对照品溶液 。精密吸取 2 ml各乙醇浓度
的提取液置 10 ml量瓶中 ,加相应提取溶剂定容 ,过
滤 ,作为供试品溶液 。
1.2.3　测定方法　分别精密吸取 2、4、6、 8、10 μl
对照品溶液 ,进样测定 ,记录峰面积。以峰面积为纵
坐标 、进样量为横坐标进行回归 , 得回归方程为:
Y=357.27X+1.03(r=0.9999), 其线性范围为
0.1363 ～ 0.6816 μg。精密吸取 5 μl供试品溶液 ,按
“1.2.1”项色谱条件连续进样 6次 ,测定欧前胡素
DOI :10.13375/j.cnki .wcjps.2008.06.019
的峰面积积分值 。计算得 RSD=0.17%(n=6),表
明仪器精密度良好 。精密称取欧前胡素对照品适
量 ,加入已知欧前胡素含量的样品中 ,按照样品测定
方法测定 ,回收率为 99.65% ～ 104.48%,平均回收
率为 102.13%。
1.3　白芷的提取方法与结果
1.3.1　乙醇浓度的考察　分别称取约 2 g白芷细
粉 ,共 5份 , 精密称定 , 置 25 ml量瓶中 , 分别加
20%、40%、60%、80%、95%乙醇至近刻度处 ,超声
1 h,冷至室温 。以同浓度乙醇稀释至刻度 ,测定含
量 ,计算转移率。各乙醇浓度的欧前胡素转移率分
别为 27.79%、74.92%、85.35%、87.14%、85.66%。
提取率随乙醇浓度的增加而增加 ,但当乙醇浓度达
60%后 ,提取率变化不大。
1.3.2　提取方法的考察　分别称取约 50 g白芷细
粉 2份 ,精密称定 。 1份采用 12倍量 60%乙醇回流
提取(4 h×3)。另 1份采用 12倍量 60%乙醇超声
1 h。另取约 50 g白芷粗粉 1份 ,加 60%乙醇浸泡 6
h,以 3 ml·min-1速度进行渗滤提取 ,得 12倍量渗滤
液 。测定提取液的含量 ,计算转移率。在上述条件
下 ,欧前胡素的转移率分别为 84.94%、80.62%、
92.66%,以渗滤法提取率最高。
1.3.3　溶媒用量的考察　取约 50 g白芷粗粉 ,加
60%乙醇浸泡 6 h,进行渗滤。当渗滤量到达 2、4、
6、8、10、12倍量时 ,分别取样测定。上述条件下 ,欧
前胡 素 的 转 移 率 分 别 为 60.79%、 85.26%、
91.78%、92.58%、94.71%、94.99%,可见提取率随
溶媒量的增加而增加。当溶媒量达到 6倍量时 ,溶
媒用量增加 ,提取率增加不显著 。
1.3.4　正交试验设计　以白芷中欧前胡素的转移
率为考察指标 ,取白芷粗粉进行正交试验 。主要因
素为乙醇浓度(A)、浸泡时间(B)、溶媒用量(C),选
择 L9(34)正交表进行试验。因素水平见表 1。
查方差分析表 ,得 F0.01(2, 11)=7.21,因素 A
与因素 C有显著性差异 ,因素 B无显著性差异 ,其
影响因素大小为 A>C>B。由直观分析可以看出 ,
最佳提取工艺为 A3B1C3(表 2),方差分析见表 3。
1.3.5　验证试验　按 “1.3.4”项下确定的优化工艺
参数 ,进行3次重复试验 ,得欧前胡素的平均转移率为
表 1　因素水平表
Table1　Factorsandlevelsoftheorthogonaldesign
Levels A/% B/h C/times
1 20 6 2
2 40 12 4
3 60 24 6
表 2　正交试验结果
Table2　ResultsofOrthogonaltest
No. A B C D Translation/% Sum/%
1 1 1 1 1 3.25 3.22 6.47
2 1 2 2 2 6.06 6.06 12.12
3 1 3 3 3 8.44 8.44 16.88
4 2 1 2 3 43.87 44.00 87.87
5 2 2 3 1 68.15 68.10 136.25
6 2 3 1 2 26.38 26.43 52.81
7 3 1 3 2 91.28 91.40 182.68
8 3 2 1 3 53.45 53.50 106.95
9 3 3 2 1 87.70 87.72 175.42
Ⅰ 35.47 277.02 166.23 318.14 777.45
Ⅱ 276.93 255.32 275.41 247.61
Ⅲ 465.05 245.11 335.81 211.70
(Ⅰ 2 +Ⅱ 2 +Ⅲ 2)
3×K 49036.64 33667.88 36.41.91 34556.78
l 15457.28 88.52123 2462.545 977.4157
表 3　方差分析
Table3　Analysisofvariance
Source l v MS F P
A 15457.28 2 7728.64 86.97941 <0.01
B 88.52123 2 44.26062 0.498116
C 2462.545 2 1231.273 13.85695 <0.01
D(relativeaccuracy)977.4157 11 88.85597
94.17%, RSD=1.4%(n=3)。说明此工艺稳定可行。
2　讨论
提取方法的考察结果表明 ,渗滤法优于超声和
回流提取法 ,渗滤法提取的工艺参数采用正交试验
进行优化 。
含量测定时 ,曾采用精密量取提取液 、低温蒸干
后甲醇溶解残渣的方法制备供试品溶液 。结果显
示 ,在甲醇溶解 、转移过程中会造成有效成分的损
失。因此 ,采用提取液稀释后进行测定 ,操作简便 、
结果可靠 。
文中试验将白芷细粉进行回流法与超声法提
取 ,目的在于提高欧前胡素的提取率;而采用渗滤
法 ,细粉则易堵塞渗滤筒 ,因此 ,采用粗粉进行提取 ,
方便操作 ,也符合渗滤法的提取特点和要求 。
参考文献:
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京中医药大学学报 , 2002 , 18(3):190 -192.
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究 [ J] .中成药 , 2000, 22 (12):829-831.
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化学工业出版社 , 2005.89.
[ 4] 　 刘萍.HPLC法测定白芷中提取挥发油前后欧前胡素含量
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收稿日期:2008-01
684 　 华 西 药 学 杂 志　　　 第 23卷