免费文献传递   相关文献

金叶苔草标准化繁育技术研究



全 文 :上海农业学报 :
文章编号 :
金叶苔草标准化繁育技术研究
王华宇、何贵整、 陈 乃 明 、 时 群、 吕 秀立
‘ 钦州市林业科学研究所 钦州 上海市 园林科学研究所 上海
摘 要 : 以金叶苔草茎尖为外植体 , 进行不定芽诱导 、 增殖 、壮苗 、 生根 和移栽技术 研究 。 结果表 明 :不定芽
诱导和最佳增殖培养基为 最佳壮 苗培养基 为
最佳生根培养基为 生根试管苗移入泥 炭 : 珍珠岩
的混合基质 中 ,移栽成 活率可达 以上 。 增殖培养过程 中选择光 照时间 、 光照 强度 , 生根培
养选用大容器育苗 ,可 以提高生产效率降低生产成本 。
关键词 :金 叶苔草 繁殖技术 ; 试管苗 培养基 ;增殖 ;生根 ;移栽
中 图 分类号 文献标识 码

, , ,

, ,





; ; ;
; ; ;
金叶笞萆 ( ‘ ’ )为莎草科苔草属多年生草本植物 , 株高约 , 叶片线状 ,
中 间黄色两侧绿色 , 穗状花序 , 花期 月 。 金叶苔草具有抗逆性强 、耐湿耐热 、抗病虫 害等特点 , 用它
构建的草坪具有维护费用低 、观赏效果好等特点⑴ 。 苔草属 的种子多 为 深休眠类 型 , 种子不发芽或发芽
慢 , 因此用种子直接播种建植草坪难度较大 。 传统方法多采用分株繁殖 ,但繁殖速度较慢 , 满足不 了市
场需求 。 通过组织培养技术繁育种苗 ,具有繁殖速度快 、 种苗一致性好 、容易 实现产业化等特点 , 金叶
苔草的组培快繁技术 目 前已有报道 。 本试验在深入研究金叶苔草各培养环节的基础上 , 进一步优化培
养基配方和 生产流程 , 结合企业生产实际 ,调整光照时间 、 光照强度 和培养容器 , 从而降低生产成本 , 提高
生产效率 , 为金叶苔草试管苗生产的标准化和产业化提供依据 。
材料与方法
材料
选取生长健壮 、无病虫害的金叶苔草优良单株 , 以茎尖为外植体 。
收稿 日 期 :
项 目基金 : 广西林业厅林业科 技项 目 “珍稀树种培育技术推广” 桂林科字 第 号 资助
作者简介 : 王华宇 ( 男 , 硕士 , 工程师 研究方 向为生物技术和园 艺栽培学 。
通讯作者 , 〖 :
上 海 农 业 学 报
方法
外植体消 毒 切除部分叶片 和基部根系 ,保 留具有生长点的一段 , 流水冲洗 后 , 在超净工
作台上用 酒精浸泡 , 升汞 加吐温 滴 振荡消毒 再用无菌水冲洗 次洗去残留药
液 , 用无菌滤纸吸干水分后接种于不定芽诱导培养基上 。
培养基配方设计 诱导和增殖培养 以 为基本培养基 , 壮苗和 生根培养 以 为基本培养
基 。 ( 不定芽诱导培养基 单位下同 ) ; ( 增殖培养基 细胞分
裂素 和生长素 协同使用时 ,其浓度比例设为 ,具体配方如下
; ;
壮苗培养基
生 根培养基 :
; ; ;

切割 方 法 增殖培养采用丛芽接种的方法 , 即用手术刀和镊子顺着丛芽中间的缝隙分为 株 丛 ,
以丛芽的形式转接 , 培养 后统计增殖率 、增殖系 数 。 试验设 次重复 。
壮苗阶段采用丛芽的方式进行壮苗培养 , 培养 后 , 继续以丛芽的形式进行生根培养 , 培养 周后
统计生根率 、生根系数 。 试验设 次重复 。
培养条件 除特别说明外 ,上述培养基均添加 蔗糖和 琼脂粉 , 。 试管苗培
养温度为 ( ± 。 , 光照时间 , 光照强度 。
光照 时 间 和光 照强 度的 筛 选 选取 瓶增殖苗 ,分为 组 , 每组 瓶 , 设置光照时间 为 、
光照强度为 、 , 以散射光状态下 (约 生长的增殖苗为对照 ,观察记录不 同光照
时间 和光照强度对金叶苔草生长的影响 , 相同的条件连续观察记录 个生长周期 。
不 同培养容器对接种效率的 影 响试验 用玻璃容器 底面直径 、容量 和大塑料容器
底面直径 , 容量 进行接种操作 。 分别统计 内 的接种数量 , 培养 周时统计污染率 , 培
养 周时观察种苗的生根情况 。
数据统计 每种处理调查 个 , 统计诱导率 、增殖率 、 芽增殖 系数 、生根率 、生根系数 。 诱导率
出芽外植体数 接种数 ) ; 增殖率 增殖株数 接种数 ) ; 芽增殖系数 增殖芽数 出 芽株
数 生根率 生根株数 接种数 ) ; 生根系数 生根数量 接种株数 。
统计数据使用 统计分析软件 , 对试验数据进行单因素方差分析 , 采用
新复极差法统计各处理显著性水平 。
结果与分析
无 菌材料获得试验
外植体接种于不定芽诱导培养基 周时 , 污染率约 为 周 时 ,再次剔除污染材料和 消 毒死亡 的
外植体 , 总体消毒成功率接近 。 培养 周时 , 消毒成功 的外植体已 有明显 的绿色突起 , 并开始有新 叶
抽 出 , 叶色偏黄 培养约 时 株高可达 左右 , 可进行继代培养 。
不同植物 生长调节剂组合对金叶苔草增殖的影响
挑选生长健壮的丛生芽转人不 同 的增殖培养基 , 接种株数均为 株 ,培养 时观察生长情况并进
行统计 。 结果显示 不同植物生长调节剂组合诱导 的增殖率均可达 ,但对金叶苔草 的增殖系 数和长
势影响不同 (表 。 随着 浓度 的增加 ( , 增殖系 数 随之增加 , 当 浓 度达到
时 ,再添加 时 , 增殖系数可达 到 , 且丛生芽长势 良 好 ( 图 、 当
浓度提高 到 时 , 增殖系数达到 ,芽点虽多 ,但丛生芽矮化成团状 , 影响正常生长 。 因此 , 选用
培养基 为金叶苔草继代增殖的最佳培养基 。 吕 秀立等 筛选的最佳诱导和
增殖培养基为 ,增殖系数可达到 , 与本试验结果略有差异 。
不 同植物生长调节剂组合对金叶苔草壮苗的影响
在不同 的壮苗培养基中 , 每瓶接种 丛试管苗 , 每种组合接种 株 , 培养 周时进行观察统计。 如
表 所示 , 不同的壮苗培养基具有不同 的增殖系数 , 随着壮苗培养基中 浓度的升高增殖系数随之增
加 , 各处理间差异显著 , 而丛生芽的株高则逐渐降低 。 综合丛生芽的株高和长势情况 , 选取
6 6

王华宇 ,等 : 金叶 苔草标 准化 繁育技术研究
为金叶苔草的壮苗培养基 。 研究发现 , 通过壮 苗 阶段可 以 提高金叶苔草种苗的质量和
一致性 , 便于后期 生根 。
表 不 同植物生长调节剂配比对 金叶 苔草组培苗增殖的彩响 表 不同 植物生长调节剂配 比 对金叶苔草组培苗壮苗 的影 响
培养基 增 殖系数 芽生长状 况

培养基 」 增殖系 数 株高 生 长状况
芽点 多 , 丛芽成 团状 苗矮小 , 小芽 多
芽点 多 , 丛芽成 团状 苗较矮 ,小芽较 多
芽点 多 , 长势好 , 生长快 , 。
” 太 夕 乂 抽 灶於 芽丛较均匀 , 有小芽芽 点多 , 长势较好
芽点少 , 长势较好 】 长 势好 芽丛均 匀
芽点 少 , 生长缓慢 有黄叶 ,有根 生出
注 : 同列不同 字母表示差异 显著 ( 〉 ; 下同 。
金叶苔草丛芽增殖 ; 金叶苔草增殖苗 ; 玻璃容器 中的生根苗 ;
塑料容器 中 的生根苗 ; 包装发货 的试管苗 ; 金叶苔草组培苗花池栽培
图 金 叶苔草组织培 养及移栽

不 同植物生长调 节剂 组合 对金 叶苔草生根 的影 响
壮苗培养 周 日寸 , 以丛芽 的形式转接 表 植物生长调节剂对 金叶笞草组培苗生 根的 影响
■ 士 必 八 丄士入生根培养基进行生根培养 , 每种组合接 培养基 — 生根 系 数 生根率 根系生长状况种 株 。 由 表 可 以看 出 , 当选择 ““一致性好 , 根粗壮 , 长势好
和 配合使 用 时 , 金 叶 苔草根 系发达 , —致性较好 , 根较粗壮
士 、丄 …… 门 、 故士 丨 抽 占 响
—致性较差 ’根 细长生根率 达 。 , 且试 目 苗 长 势 良 好 ( 图 一致性较差 , 基部产生 愈伤
。 单独添加 时 , 生根系 数与 添加 一致性差 根细长
的配方均呈显著差异 ,且生根一致性 — 歴■田 长
较差 , 根细 长 。 当单独添加 时 , 与配方 的效果差异
不显著 。 综合考虑生根系数 、 生根率 、 根系一致性等情况 , 选择 为金 叶 苔草
的 最佳生根培养基 。 本研究结果所得的生长素浓度低于 吕 秀立等 的 报道 , 可 能与本试验增加 了 壮苗环
节有关 。 壮苗环节降低 了培养基 中 的激素浓度 , 有利于试管苗后期生根 。
包装 、移 栽
金叶苔草生根培 养 周 后 , 根系长达 , 根据订单需要 , 可 进行包装发货或者洗苗移栽 。 包装
发货时 ,将试管苗基部培养基清洗干净 , 整齐地放人垫有 吸水纸 的塑料容器 内 , 试管苗 的根部朝 向 吸水纸
的一侧 ( 图 。 夏季高温时 , 包装箱 内 视发货距离远近放 块冰袋以降低箱 内 温度 。 温室移栽时 , 须
洗净根部培养基 ,再移植人草炭 : 珍珠岩 的穴盘 中 。 控制 温度 和湿度 , 并定斯喷施杀菌剂 ,成活 率可
上 海 农 业 学 报
达 以上 。 穴盘苗生长 个月 后移栽人花池或苗圃 , 可形成整齐的地被景观 ( 图 。
不同光照时 间和光照强度组合对金叶荅草生长的 影响
从表 可以看 出 , 在完全散射光条件 下 , 丛生芽 叶片较嫩叶色较浅 ; 光照太强或光照时间太
长 , 不利于金叶苔草的伸长生长 。 选择光照强度 、光照时间 作为培养条件 , 可 以实现试管苗
的正常生长 , 并能够达到相对较大的生长量 。 据测算 , 水 电费约 占组培成本 的 ,其 中主要是 电费 。
降低光照强度 、减少光照时间可降低生产成本 。
表 不同 光照时间和光照强度组合对金叶苔草生长的影响
‘ ’
光照强度 光照时间 试管苗生长情况
株高 , 叶色和芽点颜色较 浅 , 叶片较嫩
株高 , 叶片黄绿分明 ,植株较健壮
株高 左右 , 叶片黄绿分明 , 植株较健壮
株髙 , 叶片卷曲 比较明显
株高 , 大多卷曲 成团 状
不 同培养容器对接种效率的影响
生产中用不 同容器接种的效果显示 : 用较大塑料盒接种速度为 株 , 比用玻璃瓶接种 ( 株
的速度提高 了约 , 而污染率差别不明显 ,均为 左右 。 在两种容器内 , 金叶苔草 的增殖率和生根率
几乎无差别 , 但在塑料容器内植株相对较高 , 这可能与塑料容器生长空 间较大有关 ( 图 。
表 不 同培养容器对金 叶苔草接种效率的影响
容器类型 接种速度 株 接种密度 株 瓶 ― 污染率 生长状况
玻璃瓶 ■ 生长健壮 , 根系 良好
圆 形塑料盒 生长健壮 , 植株相对较高 , 根系 良好
结论与讨论
金叶苔草生长点多靠近土 壤甚至埋人 土壤 , 感染 土壤病 害 的 机会多 , 表 面消 毒处 理困 难 , 污染 率
高 ,本试验通过严格控制消毒程序 , 成功率可达 。 大规模组培生产 中 , 可 以通过增加外植体数量和
消毒批次 , 获得大量无菌起始材料 。
相对之前关于金叶苔草的组培快繁技术研究 , 本试验进一步优化 了培养流程 和培养基 的激素组
合 , 增加了壮苗环节 , 提高 了增殖系数和种苗质量 结合金叶苔草的生长情况 ,对培养条件进行了优化 , 缩
短了光照时间 、 降低了光照强度 ;对生根阶段的大容器组培育苗进行 了试验 , 能够有效地降低生产成本 ,
提高生产效率 ,有利于进行金 叶苔草的标准化生产 。
大容器育苗在提高接种效率方面具有重要作用 ,但 因为大容器的单瓶接种数量较多 、操作时间较长 ,
污染风险相对较高 所以大容器接种适用于硬件设施和环境控制较好的组培室 。 另外 , 生根阶段时 间相
对较短且生根培养后试管苗直接 出库 , 而增殖培养是一个循 环的过程而且对材料 的无菌性要求高 ,所 以
大容器育苗技术应首先应用于生根阶段 。 关于大容器育苗在其他植物种类组培快繁上 的应用 以及实际
生产 中存在的问题 , 还有待更广泛更细致的研究 。
参 考 文 献
丁世 民 观赏植物的另类观赏草 北京农业 ,
王俊强 , 吕会刚 , 方 唯 , 等 苔草属种质资源的研究与应用 北京园林 , ,
吕 秀立 , 张冬梅 张春英 等 金叶苔草离体培养和快速繁殖技术 杂草科学 ,
谢玲玲 , 王尔惠 工厂化生产组培苗的成本控制技术 丨 湖北农业科学