全 文 ：沙枣树被称为“百宝树”，其果、花、叶、枝均可入 药，临床上多用于治疗脾胃虚弱、消化不良、肠炎腹泻、
肺热咳嗽等疾病[1-2]。沙枣是一种具有开发利用前景的
重要资源，但目前沙枣仅有少部分在民间药用、食用或
初步加工，大部分果、叶成熟后自然落地腐烂废弃，利
用率极低，造成这一宝贵资源的极大浪费。
沙枣鞣质是沙枣发挥抗炎作用的主要成分[3]。研
究表明，沙枣中的鞣质能凝固蛋白质而且具有收敛性，
133-142
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收稿日期：2011-05-09
沙枣中鞣质的超声提取及含量测定
王新兵1，薛梅2，*，李炳奇2，韦文珍2
（1．石河子大学药学院，新疆石河子 832002；2．石河子大学化学化工学院，新疆石河子 832003）
摘 要:寻找在超声条件下从沙枣中提取鞣质的优化条件，并进行含量测定。在单因素试验的基础上，采取正交设计
法，以料液比，丙酮浓度，提取温度，超声时间为因素，每个因素3个水平,选择L9（34）正交表进行实验，用络合滴定法测
定鞣质含量作为综合评价指标。最佳提取条件：料液比为1∶10，丙酮浓度为60 %，提取温度为 35 ℃，超声时间为
35 min。最佳条件提取的鞣质含量为9.874 3 %。超声法提取沙枣鞣质操作简单,效果好而且节省时间。
关键词:沙枣;鞣质;超声提取;含量测定
Ultrasonic Extraction of Tannin in Elaeagnus Angustifolia L and their Constituents Determination
WANG Xin-bing1，XUE Mei2，*，LI Bing-qi2，WEI Wen-zhen2
（1. College of Pharmacy，Shihezi University，Shihezi 832002，Xinjiang，China；2. Chemistry ＆ Chemical Engineering
College，Shihezi University，Shihezi 832003，Xinjiang, China）
Abstract: To search for the best condition of extraction for tannin in Elaeagnus angustifolia L by ultrasonic
assistant，and determine their constituent. On the base of singly effect experiment, Via the orthogonal design, the
effects of Substance -Liquid ratio, the concentration of acetone, and the temperature of extraction, ultrasonic
extracting-time（each for 3 levels）were considered , the comprehensive evaluation was given, guided by the
result of the constituent of tannin determined by Complextitration. The best extraction conditions: material ratio
of 1∶10, acetone concentration of 60 percent, by the extraction temperature of 35 ℃, ultrasonic extraction time for
35min. The result of tannin inElaeagnus angustifolia by ultrasonic extraction from The best conditionwas 9.874 3 %.
The way that ultrasonic extraction of tannin in Elaeagnus angustifolia is efficiency and operated simply，and can
be done in few times.
Key words: Elaeagnus angustifolia；tannin；ultrasonic extraction；determination
基金项目：教育部“春晖计划”（Z2006-1-83003）
作者简介：王新兵（1975—），男（汉），讲师，硕士，主要从事天然药物
化学、药物化学和药物分析等方面的研究工作。
*通信作者：薛梅（1964—），女（汉），教授，主要从事主要从事天然产
物化学、有机合成等方面的研究工作。
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检测分析
2011年 8月
第 32卷第 8期
食品研究与开发
Food Research And Development 83
王新兵，等：沙枣中鞣质的超声提取及含量测定
1
2
3
表 1 因素水平表
Table 1 Factor standard
A料液比/（g/mL）
1∶8
1∶10
1∶12
D超声时间/min
25
30
35
B丙酮浓度/%
40
50
60
C提取温度/℃
30
35
40
水平
因素
内服可用于治疗胃肠道出血，溃疡和腹泻等症状。外用
可保护创伤，灼热的创面，以减少分泌和血浆的损失，
还可以防止细菌感染。除此之外，因为鞣质具有较多邻
位羟基的结构，所以具有较强的还原性[4]。在植物体内
有很强的清除超氧自由基的作用。目前国内外对鞣质
药理活性的研究已成为天然产物领域的热点之一。因
鞣质含有多个酚羟基使其具有较强极性及不稳定性，
因此将它从药材中分离出来比较困难。在溶剂的选择
方面，传统的方法采用95 %的乙醇[5]，通过对提取率及
其自身性质的比较，改用丙酮较多，因丙酮沸点低，易
于回收，与鞣质无溶剂化作用，且对鞣质提取率较高，
故用一定比例丙酮和水作溶剂较为理想。伴随着新技
术在动、植物活性成分提取中的研究和应用，其新方法
不断出现，其中超声提取法备受人们的关注[6]。
通过试验设计，寻找在超声条件下从沙枣中提取
鞣质的优化条件，用络合滴定法测定鞣质含量并作为
综合评价指标。可以通过提高沙枣的应用价值和相应
成分的提取效率，使新疆这一宝贵资源得到充分利用，
具有一定应用和推广价值。
1 仪器与试药
赛多利斯Alc-4型电子天平：德国Sartorius；DL-
360A型超声波清洗器：上海之信仪器有限公司；SHZ-C
型循环水泵：巩义市英峪予华仪器厂；HH-S型恒温水
浴锅：陕西太康生物科技有限公司；R-200型旋转薄膜
蒸发器：瑞士BUCHI；海尔215-DK型冰箱：青岛海尔股
份有限公司。
实验用沙枣果产自新疆本地，所用的试剂丙酮、
氨水、盐酸均为分析纯，而固体化学试剂醋酸锌、碳酸
钙、氯化铵、乙二胺四乙酸二钠（EDTA-Na）均为化学纯。
2 方法
2.1 提取用的沙枣处理流程
沙枣果实→去核→沙枣果实粉末→烘干→粉碎
（过40目筛，取筛出粉末）→加入丙酮→超声提取（分别
按单因素试验和正交试验条件进行超声提取）→减压
过滤（取滤液）→50 ℃以下减压蒸馏→含量测定（选用
络合滴定法测定提取液中鞣质的含量）
2.2 样品溶液的制备
精密称取样品（粉碎后干燥的沙枣果肉粉末）
2.00 g，按照单因素或正交实验设计的条件，加入设定
浓度的丙酮水溶液20.0 mL，在设定温度下超声提取
35 min，过滤，滤液在 50 ℃以下减压蒸馏除去丙酮，得
到鞣质水溶液。
2.3 样品溶液中鞣质含量的测定
用移液管准确移取20.00 mL经标定的准确浓度为
1.033 mol/L醋酸锌标准溶液于500 mL容量瓶中，加
12.00 mL氨水,摇匀使白色沉淀完全溶解。将上述制得
的每1组沙枣鞣质样品溶液分别加蒸馏水稀释到
400 mL，于水浴锅中温热至（35±2）℃，然后移入容量
瓶中，并不断振荡摇匀，再在（35±2）℃的水浴中温热
30 min（间歇振摇数次），取出后冷却至室温并用蒸馏
水稀释至容量瓶刻度线，摇匀后用干滤纸过滤，收集滤
液。用移液管准确移取上述滤液 10.00 mL于锥形瓶
中，20 mL氨-氯化铵缓冲液（pH＝10），再加少量铬黑 T
指示剂，摇匀后用经标定的准确浓度为0.053 mol/L的
EDTA-NA标准溶液滴定，当溶液由红色变为蓝色即为
滴定终点,由以下公式计算鞣质含量。
鞣质含量/%=（0.155 6×N）/W×100
式中：0.155 6为由试验求得的比例常数；N为1mol/L
醋酸锌标准溶液的络合沉淀消耗量（mL）=20×Mzn-25×
Me×Ve；Mzn为醋酸锌标准溶液的摩尔浓度，1.033mol/L；Me
为乙二胺四乙酸二钠标准溶液的摩尔浓度，0.052mol/L；
Ve为乙二胺四乙酸二钠标准溶液滴定消耗量，mL；W为
沙枣样品重量，g。
2.4 单因素试验
称取经过预处理的沙枣粉末2.00 g 18份，改变料
液比、丙酮浓度、提取温度、超声时间等因素进行单因
素试验。每组提取试验均做3组平行试验。因素水平设
置见表1。
2.5 正交试验
根据单因素试验结果，以液料比、丙酮浓度、提取
温度、超声时间为影响因素，鞣质提取量为判断指标，
选用L9（34）正交表进行正交试验，其因素水平设置见
表1。
3 结果与讨论
3.1 单因素试验结果与讨论
3.1.1 液料比对鞣质提取量的影响
料液比对鞣质提取量的影响见表2及图1。
由图1可以看出，随着料液比的增加，鞣质的提取
量x曲线先升高后降低，当料液比为1∶10（g/mL）时，鞣
检测分析
84
超声时间/min
图4 超声时间—鞣质含量x的关系
Fig.4 Relationship of ultrasonic extracting -time and tannin
Extraction x
X/
%
图1 料液比—鞣质提取量的关系
Fig.1 Relationship of Substance-Liquid ratio and tannin
Extraction
料液比/(g/mL)
EDTA-Na用量/mL
含量 x/%
表 2 料液比对鞣质提取量的影响
Table 2 Effect of the Substance-Liquid ratio on tannin extraction
1∶6
7.01
8.943 7
1∶12
6.81
9.149 9
1∶8
6.96
8.995 2
1∶10
6.67
9.304 5
1∶14
7.06
8.892 2
1∶16
7.21
8.737 5
料液比/（g/mL）
质的提取量x达到最大值。由此确定，以料液比（g/mL）
为1∶8、1∶10、1∶12的料液比进行正交试验。
3.1.2 丙酮浓度对鞣质提取量的影响
丙酮浓度对鞣质提取量的影响见表3及图2。
由图2可以看出，当丙酮浓度增加时，鞣质提取量x
呈曲线变化。当丙酮浓度为50 %时鞣质提取量达到最
大值。由此可确定用，40 %、50 %、60 %的丙酮进行正
交试验。
3.1.3 提取温度对鞣质提取量的影响
提取温度对鞣质提取量的影响见表4及图3。
由图3可以看出，随着提取温度的逐渐升高，鞣质
提取x逐渐升高，当提取温度为35℃时，鞣质的含量达
到最大。由此可确定正交试验的提取温度为30、35、
40 ℃。
3.1.4 超声时间对鞣质提取量的影响
提取时间对鞣质提取量的影响见表5及图4。
由图4可以看出，当超声时间为30 min时，EDTA-N
用量减少，鞣质的含量x达到最大值。由此可确定正交
试验的超声时间为25、30、35 min。
3.2 正交试验结果与讨论
在讨论单因素影响的基础上，为探讨各条件参数
间的相互影响，试验中设计了四因素三水平正交试验，
确定应用L9（34）进行正交实验设计。结果见表6。
由表6极差分析可知，正交试验中各因素对提取结
果的影响和前面的单因素试验结果趋势相同。由R值
可知4种因素对提取结果影响大小依次为：提取温度
C>料液比A>超声时间D>丙酮浓度B, 其中因素提取温
图2 丙酮浓度—鞣质提取量x的关系
Fig.2 Relationship of acetone-concentration and tannin
extraction x
丙酮浓度/%
EDTA-NA用量/mL
鞣质含量 x/%
表 3 丙酮浓度对鞣质提取量的影响
Table 3 Effect of acetone-concentration on tannin Extraction
40
6.70
9.263 3
70
6.84
9.118 9
50
6.27
9.706 5
60
6.72
9.242 6
80
6.99
8.964 3
90
7.04
8.912 8
浓度/%
图3 提取温度—鞣质提取量x的关系
Fig.3 Relationship of extract-temperature and tannin Extraction x
提取温度/℃
EDTA-NA用量/mL
鞣质含量 x/%
表 4 提取温度对鞣质提取量 x的影响
Table4 Effect of the extract-temperatureon tanninextractionx %
20
7.05
8.902 5
35
6.73
9.232 3
25
7.01
8.943 7
30
6.83
9.129 3
40
7.08
8.860 1
45
7.11
8.840 6
提取温度/℃
超声时间/min
EDTA-NA用量/mL
鞣质含量 x/%
表 5 超声时间对鞣质提取量 x的影响
Table 5 Effect of the ultrasonic extracting-time on tannin
Extraction x
20
6.83
9.129 2
35
6.41
9.562 2
25
6.63
9.335 4
30
6.32
9.655 0
40
6.81
9.144 9
45
6.82
9.139 6
X/
%
X/
%
X/
%
检测分析 王新兵，等：沙枣中鞣质的超声提取及含量测定
85
试验号
1
2
3
4
5
6
7
8
9
X1
X2
X3
R
表 6 L9（34）正交试验结果
Table 6 Orthographic experiment result of L9（34）
A
1
1
1
2
2
2
3
3
3
9.153 3
9.304 5
8.775 3
0.53
D
1
2
3
3
1
2
3
2
1
8.795 9
9.160 2
9.277 0
0.48
B
1
2
3
1
2
3
1
2
3
8.974 6
9.057 1
9.201 4
0.23
C
1
2
3
2
3
1
3
1
2
9.026 2
9.414 4
8.792 5
0.62
鞣质提取量 x/%
8.716 9
9.551 9
9.191 1
9.737 4
8.716 9
9.459 1
8.469 5
8.902 5
8.954 0
RC>RA>RD>RB
样品
鞣质提取量 x/%
表 7 验证试验结果
Table 7 Result of Verify- experiment
1
9.871 5
平均
9.874 3
2
9.878 3
3
9.873 1
度对鞣质的含量影响最大，其次是液料比，从表可以看
出60 %丙酮，1∶10（g/mL）的料液比，提取温度为35 ℃，
35 min的超声时间为最佳的条件组合，即A2B3C2D3为最
佳组合。
3.3 验证试验结果
称取沙枣粉末2.00 g 9份，同组编号的样品做3组
平行试验，根据筛选得到的最佳提取条件A2B3C2D3平行
提取3次，采用络合滴定法测定沙枣中鞣质的含量。结
果见表7。
经验证试验，根据最佳提取条件所测得的鞣质的
含量均大于正交设计中的含量，所得的结果正确。
4 结论
首先进行单因素试验，对影响沙枣中鞣质提取的
4个因素（液料比、丙酮浓度、提取温度、超声时间）进行
研究。然后在单因素试验的基础上，用正交试验对沙枣
鞣质的提取工艺进行优化设计。单因素试验避免了正
交试验中各水平数选择的盲目性。
正交试验设计采用四因素三水平的正交表
L9（34），确定沙枣中鞣质的超声辅助提取的最佳提取
工艺：料液比1 ∶10（g/mL），丙酮浓度60 %，提取温度
35 ℃，超声时间35 min。按照最佳条件提取的鞣质含量
为9.874 3 %。4个因素中因素C（提取温度）对鞣质的提
取效率影响最大，其次是A（料液比），再次是D（超声时
间），最后是B（丙酮浓度）。
超声波法主要是利用超声波的振动力破碎细胞
壁和细胞器，加速植物有效成分的浸出提取，同时超声
波的次级效应，如乳化、扩散、化学效应等作用加速细
胞内有效成分的溶出。超声技术广泛应用于植物有效
成分的提取，其优点是可以大幅度地提高有效成分的
提取率,缩短提取时间，提高工作效率，节省溶剂，简化
提取操作步骤。而通过试验设计，可以将沙枣中的鞣质
的提取条件进一步优化，使沙枣中的活性成分的综合
利用及药理学研究等有了更好的基础。
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收稿日期：2010-11-26
检测分析王新兵，等：沙枣中鞣质的超声提取及含量测定
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