全 文 ：＊药品检验＊
基金项目:四川省科技厅资助项目 ,课题名称:川白芷规范化种植(GAP)研究
作者简介:贾敏如 ,男 ,教授 ,博士生导师 ,从事中药的品种质量与资源开发研究。
HPLC测定 13种白芷中欧前胡素和异欧前胡素的含量
贾敏如 ,王梦月 ,金曲嫫 ,马逾英 ,唐声武 ,熊 英 ,蒋桂华
成都中医药大学药学院 , 四川 成都 610075
摘要:目的 建立一种控制白芷药材质量的方法。方法 采用 HPLC 法 ,甲醇-水(70∶30)为流动相 , 检测波长 254 nm。结果
欧前胡素在 0.974 ～ 3.896 μg范围内线性关系良好;异欧前胡素在 0.360 ～ 2.640 μg范围内线性关系良好。精密度及加样回
收率良好。结论 该方法准确 、迅速 、重复性好 ,可用于白芷药材的质量控制。
关键词:白芷;欧前胡素;异欧前胡素;含量测定;HPLC
中图分类号:R917 文献标识码:A 文章编号:1006-0103(2003)05-0361-02
Determination of imperatorin and isoimperatorin in Radix Angelicae dahuricae by HPLC
JIA Min-ru ,WANG Meng-yue , JIN Qu-mo ,MA Yu-ying ,TANG Sheng-wu ,XIONG Ying , JIANG Gui-hua
School of Pharmacy , Chengdu University of Traditional Chinese Medicine , Chengdu 610075 , China
Abstract:OBJECTIVE To establish an HPLC method for determination of imperatorin and isoimperatorin in Radix Angelicae dahuricae.
METHODS The method was chromatographed on petruim C18 column(5μm , 250 mm×4.6 mm)and the mobile phase was methanol-water
(70∶30).Imperatorin and isoimperatorin were detected at 254 nm.RESULTS The standard curve was linearwithin the concentration range of
0.974-3.869 mg imperatorin and 0.360-2.640 mg isoimperatorin , respectively.The precision was 2.85%(n =5).The recovery was
99.59% imperatorin and 98.14% isoimperatorin , respectively.CONCLUSION This method is rapid , reproducible and accurate.It could be
used for quality control for Angelila dehurica as a commodity.
Key words:Angelica dahurica ;Imperatorin;Isoimperatorin;Assay;HPLC
CLC number:R917 Document code:A Article ID:1006-0103(2003)05-0361-02
白芷为一常用中药 ,始载于《神农本草经》 。主
要成分为香豆素类。具有抗炎 、抗菌 、解痉 、平喘等
多种生理活性。商品白芷主要有祁白芷 、禹白芷 、杭
白芷和川白芷 。由于产地不同和不同产区采收季
节 、加工方法的差异 ,导致市场上白芷质量良莠不
齐。为了优选白芷的生产 、加工方法及为不同产地
白芷的质量评价提供一定的依据 ,并配合正在从事
白芷规范化种植(GAP)的研究 ,现采用高效液相色
谱法测定白芷中欧前胡素和异欧前胡素的含量。
1 实验部分
1.1 仪器 、试剂及材料
高效液相色谱仪(HP1100),包括 petruim C18柱
(250 mm×4.6 mm)、DAD检测器;电子分析天平(BP
-211D)。甲醇(色谱纯);水(重蒸馏水);乙醚(分析
纯);欧前胡素 、异欧前胡素对照品(中国药品生物制
品检定所)。白芷药材由贾敏如教授鉴定。
1.2 方法与结果
1.2.1 色谱条件的选择 据文献[ 1] 用不同比例的
甲醇-水和甲醇-水-乙酸乙酯作为流动相 ,检测
波长 254 nm ,进样量 10μl ,对样品中成分的分离情
况进行考察 。结果以甲醇-水(70∶30)为流动相 ,各
组分获得满意的分离效果。
1.2.2 样品的制备 精密称取白芷粉末 2 g ,置于
Soxhelt提取器中 ,用乙醚回流提取 9 h ,挥干乙醚 ,残
渣用甲醇溶解 ,过滤 ,定容成 10 ml ,备用 。
1.2.3 标准曲线的绘制 精取欧前胡素和异欧前
胡素对照品 ,用甲醇分别配制成 0.0974 、0.1200 mg·
ml
-1的溶液 ,按色谱条件以不同体积进样 ,以进样量
(μg)为横坐标 ,峰面积为纵坐标回归 ,其方程为:
欧前胡素 Y =4.161×103X -94.28(r=0.9999),在
0.974 ～ 3.896μg 内线性关系良好;
异欧前胡素 Y =3.92×103 X -13.23(r=0.9999),
在 0.360 ～ 2.640μg 内线性关系良好。
1.2.4 精密度的考察 取 20μl(97.4μg·ml-1)欧前
胡素对照品溶液连续进样 6次 , RSD =0.38%,表明
华西药学杂志
W C J · P S 2003 , 18(5):361～ 362
DOI :10.13375/j.cnki.wcjps.2003.05.016
进样及色谱检测精密度良好。
1.2.5 稳定性实验 样品溶液 10 μl连续 3 d进样
6次 ,RSD=1.7%,表明样品在 3 d内稳定性良好。
表 1 样品的含量测定结果(n=3)
Table 1 Analytical results of four kinds of commodity Baizhi(n=3)
Producing area Harvest time
Processing
method
Imperatorin
content %
Isoimperatorin
content %
Sichuan Suilin 2001.7 Smoked by SO2 0.0913±1.91 0.0555±1.44
Sichuan Suilin 2001.7 Drying in the sun 0.1478±1.30 0.1000±0.95
Sichuan Nanchong 2001.7 Drying in the sun 0.2516±0.76 0.0846±1.83
Sichuan Quxian 2001.7 Drying in the sun 0.1554±1.24 0.0720±0.66
Sichuan Daxian 2001.7 Drying in the sun 0.1338±1.26 0.0561±1.22
Zhejiang Pan an 2001.8 Smoked by SO2 0.0492±0.58 0.0115±1.67
Zhejiang Pan an 2001.8 Drying in the sun 0.1110±1.39 0.0261±0.72
HenanYuxian 2001.8 Smoked by SO2 0.1788±0.93 0.0852±1.58
HenanYuxian 2001.8 Drying in the sun 0.1910±1.14 0.0998±0.91
Hebei An guo 2000.8 Smoked by SO2 0.0696±0.89 0.0729±1.70
Hebei An guo 2000.8 Drying in the sun 0.1642±1.11 0.0540±1.69
Hebei An guo 2000.8 Smoked by SO2 0.0413±1.86 0.0282±0.85
Hebei An guo 2000.8 Drying in the sun 0.1063±1.49 0.0535±1.37
1.2.6 重复性实验 按“1.2.2”方法制备样品 5
份 ,平行测定 , RSD =2.85%,表明方法精密度良好。
1.2.7 回收率实验 精取白芷粉末 1 g ,精密加入
已知浓度的对照品液 ,按“1.2.3”项下操作 ,欧前胡
素的平均回收率为 99.59%, RSD =1.02(n =5);异
欧前胡素为 98.14%, RSD =0.73%(n=5)。
1.2.8 样品的测定 对不同产地 、不同加工方法的
13种白芷进行测定 ,结果见表 1。
2 讨论
不同产地的商品白芷中欧前胡素 、异欧前胡素
含量有差别 , 5个川白芷样品中欧前胡素含量以南
充样品中含量最高 ,而异欧前胡素以遂宁产白芷中
含量最高。
不同加工方法对这两种成分含量有影响 ,硫熏
后含量明显降低 ,与文献[ 2] 一致 。但河南产禹白芷
硫熏过后含量下降较少 ,可能是硫未熏透的原因 ,这
与我们在河南白芷产区调查的结果一致。
文中同时测定了欧前胡素 、异欧前胡素的含量。
方法简单快速 ,结果准确。
参考文献
1 王立人 ,李宏宇 ,谢成科.白芷中香豆精类成分的反相高效液相
色谱测定[ J] .药学学报 , 1990 , 25(2):131
2 赵恒 ,周斌 ,孔英华 ,等.产地加工方法对白芷化学成分的影响
[ J] .中药材 , 1996, 19(3):134
收稿日期:2002-12
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362 华 西 药 学 杂 志 第 18卷