全 文 ：第 22卷　第 1期 　　　　　　　　　　　　　　云南农业大学学报　　　　　　　 Vol.22　No.1
2007年　2月 　　　　　　　　　　JournalofYunnanAgriculturalUniversity　　　　　 Feb.2007
　收稿日期:2006-05-11　
＊基金项目:云南省科技攻关项目(2003NG01);云南省自然科学基金重点项目(2004C0007Z);昆明市科技局项目
(200201009)。 　　　　＊＊通讯作者
　作者简介:王辉(1979-), 女 ,湖北宣恩人 , 在读硕士 ,主要从事花卉病害研究。
香石竹枯萎病菌室内药剂筛选＊
王　辉 1 , 孔宝华 1 , 李　凡1 , 范静华 1 , 陈海如1＊＊ , 杨泮川 2
(1.云南农业大学 ,教育部生物多样性植物病理重点实验室 ,云南 昆明 650201;
2.云南英茂花卉产业有限公司 , 云南 昆明 650000)
摘要:在室内选用了 9种药剂对香石竹枯萎病菌进行了毒力测定。结果显示:在所供试的药剂中 , 甲基托布津
在 50μg/mL的浓度条件下能够起到完全抑制病原生长的作用。 其次抑菌效果比较好的分别是世高 、杀毒钒 、
根宁 , 在浓度为 1 000μg/mL情况下很好的抑制病原菌生长 , 生物农药类根腐净和根腐消的抑菌效果不如化学
类农药。水剂农药类 5%丙恶甲(SL)在浓度为 500μg/mL时能起到很好的抑菌效果 , 3%的广枯灵水剂抑菌效
果不如丙恶甲。灭菌星对病原菌几乎没有抑制作用。
关键词:香石竹;枯萎病菌;药剂试验
中图分类号:S436.8　　文献标识码:A　　文章编号:1004-390X(2007)01-0057-04
FungicidesScreeningforthePathogen
ofCarnationWiltDiseaseinLaboratory
WANGHui1 , KONGBao-hua1 , LIFan1 ,
FANJing-hua1 , CHENHai-ru1 , YANGPan-chuan2
(1.KeyLaboratoryforAgriculturalBiodiversityforPestManagementofChinaEducationMinistry, YAU,
Kunming650201, China;2.YunnanYingmaoFlowerIndustryLitCompany, Kunming650000, China)
Abstract:9 kindsoffungicidesforcontrolingcarnationwiltwastestedunderlaboratoryexperiment.
Theresultsshowedthatciopsin-M70%zenewpat50μg/mLhadgoodcontrolefecttothethispatho-
gen.Score10 WGandSandDuFanM8WPandGenninghavenextefectsonpathogenat1 000μg/
mL.ThecontrolofbiologicalfungicidesislessthanchemicalFungicides.Bingejiacanefectivelycon-
trolthepathogenat500μg/mL.TheefectofGuangkulinginferiortoBingejia.Miejunxinghardlyhave
noefectsonpathogen.
Keywords:carnation;Fusariumoxysporumf.sp.Dianthi;fungicidestest
　　香石竹又称为康乃馨(Dianthuscaryophylus),
是石竹科 、石竹属的宿根性草本植物 ,切花中常作
1年或 2年生种植。香石竹原产于西西里岛 、南
欧 、北美 、西亚等地中海沿岸区域 。中国自从欧美
引入该花以后 ,已有 80多年的栽培历史 。香石竹
枯萎病是香石竹上最严重的病害之一 ,世界上各香
石竹种植区均有不同程度的发生[ 1, 2] ,我国发生也
比较普遍 ,上海 、天津 、广州 、杭州 、昆明等市均有发
生 ,除杭州外 ,其它城市危害较为严重[ 3] 。近 10年
来香石竹在云南省的一些地区大规模连年种植 ,香
石竹枯萎病发生越来越严重。 1993 ～ 1995年 ,昆
明地区的香石竹枯萎病发病面积占总栽培面积的
45%,其中露地栽培的发生面积达 100%[ 4] 。据笔
者调查 , 2004年昆明地区有些品种如绿夫人的发
DOI :10.16211/j.issn.1004-390x(n).2007.01.013
病率达到 90%以上 ,一般品种的发病率为 30% ～
50%。云南省其它地区随机调查的品种发病率在
10% ～ 40%之间 ,目前所推广种植的品种中绝大多
数是不抗枯萎病 [ 5] 。枯萎病的病原是尖孢镰刀菌
石竹专化型(Fusariumoxysporumf.sp.Dianthi)。
在香石竹的各个生育期都可能发生 ,苗期发病引起
死苗 ,开花期影响花朵的正常开放 ,品质下降 ,该病
害给香石竹生产带来了严重的损失 。对于该病的
防治 ,一直是生产上比较棘手的问题[ 6] 。目前 ,化
学防治仍是香石竹枯萎病综合防治的关键措施。
关于该病原菌室内药剂筛选工作国外报道的不多 ,
而国内尚未报道 。所以 ,对香石竹枯萎病菌室内药
剂筛选进行了研究 ,旨在为大田生产中枯萎病的防
治药剂提供科学依据 。现将结果报道如下 。
1　材料与方法
1.1　供试菌株
采自于田间具有典型症状的香石竹枯萎病病
株 ,按照柯赫氏法则对病原菌分离 、鉴定及致病性
测定 ,鉴定为香石竹枯萎病病原(Fusariumoxyspo-
rumf.sp.Dianthi),经单孢分离后的病菌置于 4℃
冰箱下短期保存备用 。
1.2　供试药剂
供试药剂品种有丙恶甲(5%SL, 贵州贵大科
技责任有限公司)、广枯灵(3%恶.甲水剂)、根宁
[ 20%的丙硫咪唑可湿性粉剂(广西弘润农业有限
公司总经销)] 、杀毒钒 [ 64%可湿性粉剂(先正达
(中国)投资有限公司上海分公司)] 、甲基托布津
(日本曹达株式会社 ,分装单位:天津市中农化农
业生产资料有限公司)、世高 [ 10%水分散粒 ,先正
达(中国)投资有限公司上海分公司 ] 、根腐消(10
亿活芽孢 /克枯草芽孢杆菌 ,荧光假单孢杆菌可湿
性粉剂 ,昆明沃霖生物工程有限公司)、根腐净(昆
明沃霖生物工程有限公司)、灭菌星(50%甲羟鎓
AS,张家口长城农化集团有限责任公司)。
1.3　测定方法
采用生长速率测定方法 ,将所选农药按有效成
分计算配成 0.1g/mL的母液 ,如药剂本身浓度非
常小的水剂就按一定倍数稀释 。配置好 PDA后 ,
用移液枪按比例分别取母液 1mL, 0.1 mL, 0.05
mL, 0.01mL, 0.001 mL与 PDA相混合后 (混合液
的总体积为 100mL)制成平板 ,以不含任何药剂的
PDA作为对照 ,每个处理设置 4个重复 , 6d后用十
字交叉法测量菌落的平均直径 。抑制率 =CK净生
长量 -处理净生长量 / CK净生长量 ×100%,净生
长量 =菌落平均直径 -菌饼平均直径。
2　结果与分析
(1)选用了 9种不同药剂的 5个浓度梯度对
Fusariumoxysporumf.sp.Dianthi的菌丝进行毒力
测定。从表 1中可以看出 ,在有效成分浓度相同的
情况下 , 70%甲基托布津可湿性粉剂的浓度在不
低于 50μg/mL时完全抑制菌的生长 ,浓度低于 50
μg/mL时菌丝体开始生长 。其次分别是世高 、杀
毒钒 、根宁 ,在浓度为 1 000 μg/mL情况下较好的
抑制病原菌的生长 , 抑菌率为 85.9%, 78.4%和
68.0%。抑菌效果较差的是根腐净和根腐消 ,在浓
度为 1 000 μg/mL时抑菌率分别是 51.3%和
39.6%。水剂农药 5%丙恶甲 (SL)在浓度为 500
μg/mL时能起到很好的抑菌效果 , 抑菌率为
93.2%, 3%的广枯灵水剂在浓度 300μg/mL时抑
菌率为 68.8%。灭菌星对病原菌得抑菌效果最
差 ,其浓度 1 000μg/mL时抑菌率仅为 25.4%,其
余浓度下几乎没有什么抑制作用(见表 1)。
(2)EC50的分析:药剂 EC50值是用来衡量药剂
间毒力大小的重要指标 , EC50值越小 ,即浓度越小 ,
说明该药剂对病菌的反映越灵敏 ,抑制作用越强 ,
反之抑制作用越差。在供试的 9种药剂中 ,对菌的
EC50值各不相同 ,毒力大小有很大差异 。对病原菌
的毒力大小依次为世高 >甲基托布津 >丙恶甲 >
杀毒矾 >根宁 >广枯灵 >根腐消 >根腐净 >灭菌
星。毒力最强的是世高 , 对病原菌的 EC50值是
0.001 279μg/mL,抑菌效果也最好 。其次毒力较
强的是甲基托布津 ,对病原菌的 EC50值是 1.271 6
μg/mL。生物农药类根腐消和根腐净的 EC50值较
大 ,抑菌效果不如化学类药剂 。灭菌星的 EC50值
最大 , 值是 632 994.592 5 μg/mL, 说明其毒力最
弱。对病原菌几乎没有抑制作用。
(3)截距和斜率分析:从回归方程来分析 ,斜
率越大 ,药剂随着浓度的提高抑菌效果增加的越
多。在 9种农药中 , 斜率值最小的是世高 , 值为
0.178 7 ,说明该种药剂随着浓度的升高抑菌效果
增加的最少。其次较大的是根腐净 、根腐消 、灭菌
星 、杀毒矾 、根宁 、广枯灵 、丙恶甲 ,斜率值最大的是
甲基托布津 ,值为 2.442 6,即药剂随着浓度升高抑
菌效果增加的越多 ,香石竹枯萎病菌对这些药剂反
58 云南农业大学学报 　　　　　　　　　　　　　　第 22卷
应敏感 ,药剂用量或浓度稍有变化就可以使药效直
线上升或下降。在 9种农药中 , 截距的范围为
2.814 6 ～ 5.516 9。截距最大的是世高 ,截距值为
5.516 9,较小的是甲基托布津 、杀毒矾 、丙恶甲 、根
宁 、根腐净 、根腐消 、广枯灵 ,截距值最小的是灭菌
星 ,截距值为 2.814 6(见表 2)。
表 1　不同的药剂对菌丝的抑制作用
Tab.1　Efectsofdiferentfungicidesonthemyceliumrestraining
药剂名称
fungicidesname
不同浓度的处理 diferentconcentration
　　　1 000μg/mL　　　 　　　100μg/mL　　　 　　　50μg/mL　　　 　　　10μg/mL　　　 　 　　1μg/mL　　 　
平均值
/mm
average
抑菌率
restraining
rate
平均值
/mm
average
抑菌率
restraining
rate
平均值
/mm
average
抑菌率
restraining
rate
平均值
/mm
average
抑菌率
restrainingng
rate
平均值
/mm
average
抑菌率
restraining
rate
对照 CK 78.9 0.0% aA 78.9 0.0% aA 78.9 0.0% aA 78.9 0.0% aA 78.9 0.0% aa
灭菌星Miejunxing 58.8 25.4% bB 75.9 3.8% aA 76.1 3.5% aA 76.3 3.2% aA 76.7 2.7% aA
根宁 Gernning 25.3 68.0% eE 36.9 53.2% dD 44.1 34.7% cD 47 31.2% dD 60.9 17.9% dD
杀毒矾Sandofan 16.9 78.4% fF 33.3 57.9% eE 35 55.5% cD 42.5 46.1% eE 53.3 32.5% eE
世高 Score 11.1 85.9% gG 15.4 80.5% fF 17.5 77.9% eF 18 77.1% fF 24 69.6% fF
甲基托布津 Topsin 0.0 100% iI 0.0 100% gG 0.0 100% fG 19.9 76.1% fF 53.1 32.5% eE
根腐消 Genfuxiao 38.4 51.3% dD 68 13.7% bB 67.2 14.4% bC 67.5 14.4% bB 68.3 13.6% cC
根腐净Genfujing 48.6 39.6% cC 60.2 23.6% bC 62.9 20.5% bC 66.9 15.2% bB 68.1 13.6% cC
丙恶甲 500μg/mL 50μg/mL 25μg/mL 5μg/mL 0.5μg/mL
Bingejia 5.4 93.2% hH 29.8 62.3% eE 26.5 66.4% dE 51.3 35.0% cC 54.9 30.4% eE
广枯灵 300μg/mL 30μg/mL 15μg/mL 3μg/mL 0.3μg/mL
Guangkuling 24.7 68.8% eE 57.3 27.4% cC 62.4 20.9% bC 70.3 11.0% bB 72.6 7.8% bB
　　(经 Ducan新复极差测验 ,表中大小写字母分别表示显著性差异(P=0.05)和极显著性差异(P=0.01)。
表 2　不同药剂的毒力回归方程和 EC50
Tab.2　ToxicityregressionequationsandEC50 ofdifferentfungicides
药剂名称
fungicidesname
毒力回归方程
Y=a+bxToxicityregressionequations EC50 /(μg· mL
-1) R2
灭菌星 Miejunxing Y=0.376 7x+2.814 6 632 994.592 5 0.634 4
根宁 Genning Y=0.464 5x+4.034 0 120.226 0.944 0
杀毒矾 Sandofan Y=0.399 8x+4.499 2 17.889 6 0.974 0
世高 Score Y=0.178 7x+5.516 9 0.001 279 0.966 6
甲基托布津 Tosin Y=2.442 6x+4.745 0 1.271 6 0.775 4
根腐消 Genfuxiao Y=0.332 4x+3.631 0 13 137.124 9 0.894 0
根腐净 Genfujing Y=0.277 8x+3.785 4 34 777.631 4 0.560 6
丙恶甲 Bingebing Y=0.679 6x+4.424 0 7.038 80 0.908 4
广枯灵 Guangkuning Y=0.627 5x+3.648 5 142.495 1 0.887 7
3　讨论
(1)Fusariumoxysporumf.sp.Dianthi引起的
病害是香石竹上重要的病害之一 ,在适宜的条件
下 ,枯萎病大面积发生造成了严重的经济损失 。对
于该病的防治 ,一直是生产上比较棘手的问题 ,一
些预防性的措施只能在病害发生之前使用 ,在病害
大面积发生和流行时 ,化学防治仍是香石竹枯萎病
综合防治的关键措施 。有必要筛选和推广新型的
一些化学农药来控制病害的发生和蔓延 。在所供
试的药剂中甲基托布津在 50μg/mL以上的浓度条
件下能够完全抑制病原生长。水剂农药如丙恶甲
在浓度为 500μg/mL能很好的控制病原菌的生长 ,
抑菌率为 93.2%。其次抑菌效果比较好的是杀毒
矾和世高。目前 ,根腐净和根腐消等生物类农抑菌
药的效果不如化学类农药明显。对于枯萎病生物
防治研究不多 ,今后还应在这方面做大量的深入细
致研究工作 ,找出最有效的生物防治药剂 。
(2)本试验是在室内的情况下进行 ,是药剂筛
选的基础。从花卉公司和农户的访问和调查结果
看 ,目前生产上使用的一些农药如甲基托布津等广
谱性药剂在田间防治效果也比较好。本次试验毒
力测定的结果也表明 ,甲基托布津在低浓度(50μg
/mL)有完全抑菌的作用 ,这类药剂可继续用于防
59第 1期　　　　　　　　　　　　王　辉 ,等:香石竹枯萎病菌室内药剂筛选
治香石竹枯萎病 。其它供试药剂还需在毒力测定
的基础上进一步深入做小区和田间药剂防治试验 ,
以便获得防治效果好的新型农药。
[参考文献 ]
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2003.
(上接第 48页)
3　讨论
在苗盘中加入 TMV病苗和接种 TMV病叶汁液
1.0×10-6试验表明 ,在存在毒源时 ,剪叶传播 TMV
的速度很快 ,传播速度因病苗体内 TMV浓度高低而
不同 。TMV浓度高 ,传播速度快。人工气候箱内和
自然条件下接种 ,烟苗在接种后 20 ～ 24d显症 ,按
此推算 ,生产上移栽前发现 1棵普通花叶病苗时 ,该
苗可能在 20 ～ 24d前感染 TMV,在 11 ～ 12d前体内
TMV浓度达到 TAS-ELISA检出限点以上。剪一刀
TMV病叶 ,连续剪叶 10棵苗后 ,约有 12.7%的苗被
传染 。按正常剪叶时间间隔推算 ,在带毒苗体内
TMV浓度达到 TAS-ELISA检出限点后 ,该盘苗被剪
叶 1 ～ 2次。因此 ,该盘苗被 TMV感染的数量较高 ,
高于 TAS-ELISA的检测带毒率。因此 ,生产上发现
1棵花叶病苗即废弃整池苗是必要的 。
生产上带 TMV漂浮苗一般在移栽后 20d左右
发病 ,移栽过程农事操作环节较多 ,烟苗被接触的机
会多(包括起苗 、运输 、苗分装 、移栽 、盖膜和浇水等
环节),云南移栽至伸根期平均气温 20℃,光照时数
225h,与本文人工气候箱条件接近。若健康烟苗通
过移栽环节感染 TMV,推测潜伏期为 20 ～ 24d。漂
浮苗剪叶接种低浓度 TMV病叶汁液(接种量约几
μL)从检测阳性到显症平均间隔约 10 ～ 14d,因此 ,
采用 TAS-ELISA检测烟苗早期带毒率 ,避免带毒烟
苗移栽到大田技术上是可行的。最佳检测时期为最
后一次剪叶至移栽前 ,历时 5 ～ 7d。
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60 云南农业大学学报 　　　　　　　　　　　　　　第 22卷