全 文 ：中国蔬菜 2010（16）：67-73
CHINA VEGETABLES
狼毒大戟根提取物抑菌活性及其提取方法
初探
孙瑞艳 陈亚彤 范海延* 于佳霖 潘 健
（沈阳农业大学生物科学技术学院，辽宁沈阳 110161）

摘 要：以连续回流提取法从狼毒大戟根中提取得到抑菌活性物质，采用生长速率法进行离体抑菌试
验确定其对多种植物病原真菌的抑菌活性。狼毒大戟根提取物对黄瓜枯萎病菌、菜豆炭疽病菌、甜瓜枯萎病
菌等 9 种供试病原真菌菌丝生长均有一定的抑制作用。通过单因素试验和正交试验确定最优提取工艺为：以
90 %乙醇作为溶剂，料液比 1︰20，在提取温度为 65 ℃和提取溶剂 pH 为 10.0 条件下提取 90 min，提取次数
为 2 次。
关键词：狼毒大戟；有机溶剂提取物；抑菌活性；黄瓜枯萎病菌；菜豆炭疽病菌；甜瓜枯萎病菌
中图分类号：S482.2+92 文献标识码：A 文章编号：1000-6346（2010）16-0067-07
Initial Studies on the Antifungal Activities and Extraction Method of Extracts from Euphorbia fischeriana Root
SUN Rui-yan, CHEN Ya-tong, FAN Hai-yan*, YU Jia-lin, PAN Jian
（School of Biological Science and Technology, Shenyang Agricultural University, Shenyang 110161, Liaoning, China）
Abstract：In this paper，the bioactive substances obtained from Euphrbia fischeriana root were
tested for antifungal activities against plant pathogens through growth rate law. The main factors
influencing bioactive substances extraction and their best levels were confirmed by single factor analysis
and the optimum condition was confirmed by orthogonal test. The research indicates that extracts of
Euphrbia fischeriana root have inhibitory activities to many kinds of plant pathogen. In particular,
inhibitory rate of Fusarium oxysporum f. sp. cucumerinum, Colletotrichum lindemuthianum and
Fusarium oxysporum f. sp. melonis is better comparatively. The results showed that the optimal conditions
were: 1∶20 of 90 % ethanol to sample weight, extraction temperature 65 ℃, pH value 10.0, extraction
duration 90 min, and extraction for twice.
Key words：Euphrbia fischeriana; Extracts of organic solvent; Antifungal activity; Fusarium
oxysporum f. sp. cucumerinum; Colletotrichum lindemuthianum; Fusarium oxysporum f. sp. melonis

随着人们环保意识的日益增强，对高效、低毒农药的需求也日益强烈，具有抑菌、杀虫效果
的植物源农药是目前国内外开发新型生物农药的主要来源之一（王爱军和袁丛英，2006）。狼毒

收稿日期：2010-03-12；接受日期：2010-05-07
基金项目:“十一五”国家科技支撑计划课题（2006BAD07B02），沈阳市大型科学仪器设备共享服务专项（2007GX-05）
作者简介：孙瑞艳，女，专业方向：生物科学，E-mail：10704008.sry@163.com.cn
* 通讯作者（Corresponding author）：范海延，女，博士，副教授，硕士生导师，专业方向：植物资源开发与利用研究，E-mail：
hyfan74@163.com

68 中 国 蔬 菜 CHINA VEGETABLES 2010 年 8 月（下）
大戟（Euphorbia fischeriana Steud.）又名东北狼毒、猫眼花根、狼毒，为大戟科植物，主要分布
于黑龙江、内蒙古、吉林、辽宁、河北等地，植株全株有毒，药用部分主要为根。其根提取物主
要含橡胶（刘文粢，1997）、多种萜类、二萜内酯（刘桂芳 等，1988；刘桂芳，1989；Chen，1999）
和蒽醌类等化合物，如：大戟甙、大戟酸、羊毛甾醇、β-谷甾醇、伞形花内酯、d-松脂素、槲
皮素、三萜醇、鞣质（Lee et al.，1991）及 L-3, 4-二甲氧基苯甲酸和 L-3, 4-二羟基苯甲酸等有机
酸。植物的次生代谢产物在提高自身保护和生存竞争能力及协调与环境的关系中充当着重要的角
色（Shelton，2000）。有研究表明狼毒大戟提取物具有抗细菌、抗真菌、抗病毒、抗肿瘤、杀虫
等作用（赵奎君 等，1995；刘文粢，1997；宋友文 等，1997；刘萍和林娟，2000；鞠荣 等，
2005；苟鹏和苟静玲，2006；李伟 等，2008），但目前对于狼毒大戟提取物的研究多集中在医
学和基础生物领域。狼毒大戟产地丰富、易采集，针对狼毒大戟中具杀虫、抑菌活性的化学成
分，建立快速、高效提取分离与筛选鉴定活性物质的方法具有重要意义。本试验以狼毒大戟根
为材料，测定了其所含的生物活性物质对 9 种农业上常见植物病原真菌的抑菌活性，并通过单
因素、正交试验确定其最佳提取工艺，旨在为今后应用于植物病害的防治提供一定的理论依据。
1 材料与方法
1.1 供试材料
狼毒大戟采自吉林省辽源市。
供试提取溶剂有乙醇、丙酮、乙醇丙酮混合溶剂（乙醇︰丙酮=2V︰1V）、石油醚、乙酸乙酯、
氯仿，其浓度均为 75 %，狼毒大戟提取液质量浓度为 0.3 g·mL-1。
黄瓜枯萎病菌（Fusarium oxysporum f. sp. cucumerinum）、辣椒炭疽病菌（Vermicularia capsici）、
西瓜枯萎病菌（Fusarium oxysporum f. sp. niveum）、茄子黄萎病菌（Verticillium dahliae）、菜豆
炭疽病菌（Colletotrichum lindemuthianum）、番茄灰霉病菌（Botrytis cirnerea）、番茄叶霉病菌
（Fulvia fulva）由沈阳农业大学农业部北方农作物病害免疫实验室提供；STF 甜瓜枯萎病菌
（Fusarium oxysporum f. sp. melonis）、JSF 甜瓜枯萎病菌（Fusarium oxysporum f. sp. melonis）由
中国农业科学院蔬菜花卉研究所园艺作物病害诊断与控制研究组提供。
1.2 试验方法
试验于 2008 年 11 月～2009 年 5 月在沈阳农业大学生物科学技术学院大学生创新实验室进行。
1.2.1 狼毒大戟抑菌活性物质的制备 将狼毒大戟的根去杂洗净、烘干、粉碎。取干粉 30.0 g，
按料液比加入一定浓度的有机溶剂，用连续回流提取法提取抑菌活性物质。提取液用旋转蒸发仪
浓缩，加无菌蒸馏水定容至 0.3 g·mL-1，0～4 ℃保存备用。
1.2.2 抑菌试验 在无菌条件下，用无菌蒸馏水稀释 1.2.1 中制备的提取液至一定质量浓度，取该
质量浓度的狼毒大戟提取液 1.0 mL，加入 9.0 mL 热 PDA 培养基，摇匀，对照组中加入等量的无
菌水，倒入融化的 PDA 培养基至 10.0 mL，摇匀、制成平板。接种生长一致的供试菌菌饼（Ф= 6.0
mm），使菌饼带菌丝的一面贴在培养基表面，25 ℃下培养，分别于第 4、7 天用十字交叉法测量
菌落生长直径。抑菌试验共 2 个处理（培养基+提取液和培养基+无菌水），每处理 3 次重复。
菌落生长直径=菌落直径平均值-6.0 mm
菌丝生长抑制率=（对照菌落生长直径-处理菌落生长直径）/对照菌落生长直径×100 %
1.2.3 提取工艺的优化 以抑菌率为考察指标，单因素试验料液比、乙醇浓度、回流时间、提取
温度以及提取溶剂 pH 等因素对狼毒大戟有效抑菌成分提取率的影响。
结合单因素试验，选择料液比〔狼毒大戟根粉（g）∶提取溶剂（mL）〕、乙醇浓度、回流时
间、提取温度及提取溶剂 pH 为影响因素，采用 L16（45）正交试验表设计正交试验（表 1），优化

2010（16） 孙瑞艳等：狼毒大戟根提取物抑菌活性及其提取方法初探 69
狼毒大戟有效抑菌成分的最佳提取工艺。
1.2.4 最佳提取工艺的验证试验 选定 3 种靶标菌进行离体抑菌试验，验证狼毒大戟抑菌活性物
质的最佳提取工艺。
表 1 正交试验因素水平
水平 料液比 乙醇浓度/% 回流时间/min 提取温度/℃ 提取溶剂 pH A B C D E
1 1∶18 75 45 55 8.0
2 1∶20 80 60 60 9.0
3 1∶22 85 75 65 10.0
4 1∶24 90 90 70 11.0
注：表中水平 1 是指 1 g 狼毒大戟的根粉加入 75 %的乙醇（pH 8.0）18 mL，以此类推。
2 结果与分析
2.1 狼毒大戟根不同溶剂提取物对病原菌的抑制作用
由表 2 可以看出，几种溶剂的狼毒大戟根提取物对 9 种病原真菌菌丝生长均有一定的抑制作
用。其中，75 %乙醇粗提液对 9 种病原真菌的抑菌效果均较好，确定乙醇为提取溶剂。由于 75 %
乙醇粗提液对黄瓜枯萎病菌、JSF 甜瓜枯萎病菌、菜豆炭疽病菌的抑菌率相对最高，因此选为后
续试验的靶标菌。
表 2 不同溶剂提取物对 9 种病原真菌的抑菌率
病原真菌
抑菌率/%
乙醇 丙酮 乙醇丙酮混合液 石油醚 乙酸乙酯 氯仿
4 d 7 d 4 d 7 d 4 d 7 d 4 d 7 d 4 d 7 d 4 d 7 d
黄瓜枯萎病菌 99.59 98.11 73.16 61.52 68.23 65.44 58.61 45.71 78.07 81.02 60.02 55.26
STF 甜瓜枯萎病菌 82.52 80.13 35.07 23.14 53.65 48.63 48.90 42.13 50.98 44.12 44.71 48.14
JSF 甜瓜枯萎病菌 99.20 98.62 50.01 42.18 65.65 61.08 89.37 76.63 93.76 83.55 52.46 51.50
西瓜枯萎病菌 72.16 55.10 28.82 02.26 34.19 44.89 32.72 18.73 73.89 58.41 42.56 32.68
辣椒炭疽病菌 94.66 95.18 61.45 38.52 80.23 43.19 70.45 45.64 75.00 50.29 47.20 36.76
茄子黄萎病菌 99.17 98.56 44.25 38.14 42.05 43.60 52.71 46.81 95.58 81.02 53.08 43.05
菜豆炭疽病菌 99.69 99.81 45.48 39.14 63.47 75.49 85.51 79.80 82.96 84.49 55.19 59.32
番茄灰霉病菌 93.22 78.32 59.74 77.69 84.72 32.06 69.49 62.89 84.47 81.37 41.67 68.51
番茄叶霉病菌 91.26 91.01 50.38 62.42 69.48 74.31 95.52 90.47 49.73 54.94 57.81 61.92
2.2 狼毒大戟根乙醇提取物使用浓度的确定
狼毒大戟根乙醇提取物浓度过低（0.006
g·mL-1）时，抑菌效果较差；狼毒大戟根乙
醇提取物质量浓度为 0.300 g·mL-1 时，抑菌
效果最好，但抑菌率过高或过低均不利于最
佳提取条件试验的确定，为了后期试验的有
序进行，故选择 0.150 g·mL-1 为后续试验浓
度（表 3）。
2.3 单因素试验
2.3.1 乙醇浓度对狼毒大戟根提取物抑菌效果的影响 取狼毒大戟根的粉末 6.0 g，加入料液比为
1∶10 的不同浓度的乙醇在提取温度 75 ℃以及提取溶剂 pH 6.0 下提取 90 min，提取 2 次。由表 4
表 3 不同浓度的狼毒大戟根乙醇提取物的抑菌率
提取物浓
度/g·mL-1
抑菌率/%
黄瓜枯萎病菌 JSF 甜瓜枯萎病菌 菜豆炭疽病菌
4 d 7 d 4 d 7 d 4 d 7 d
0.300 92.59 92.59 86.18 74.81 99.69 99.81
0.150 47.31 39.91 40.35 42.66 45.48 39.14
0.060 33.49 37.51 34.86 28.31 63.47 75.49
0.030 18.99 27.54 25.46 28.10 85.51 79.80
0.015 15.93 26.53 30.77 27.76 82.96 84.49
0.006 15.82 24.99 27.60 25.46 55.19 59.32

70 中 国 蔬 菜 CHINA VEGETABLES 2010 年 8 月（下）
可见，乙醇浓度为 85 %时，狼毒大戟根提取物
对 3 种靶标病原真菌的抑菌效果最佳。
2.3.2 料液比对狼毒大戟根提取物抑菌效果的
影响 取狼毒大戟根的粉末 6.0 g，加入不同料
液比的 85 %乙醇在提取温度 75 ℃以及提取溶
剂 pH 6.0 下提取 90 min，提取 2 次。由表 5 可
见，料液比为 1︰22 时，狼毒大戟根提取物对
3 种靶标病原真菌的抑菌效果最佳。
2.3.3 回流时间对狼毒大戟根提取物抑菌效果
的影响 取狼毒大戟根的粉末 6.0 g，加入料
液比 1︰22 的 85 %乙醇在提取温度 75 ℃以
及提取溶剂 pH 6.0 下提取一定时间，提取 2
次。由表 6 可知，回流时间为 90 min 时，狼
毒大戟根提取物对黄瓜枯萎病菌抑菌效果较
好；回流时间为 60 min 时，狼毒大戟根提取
物对 JSF 甜瓜枯萎病菌、菜豆炭疽病菌抑菌
效果最佳。
2.3.4 提取温度对狼毒大戟根提取物抑菌效果
的影响 取狼毒大戟根的粉末 6.0 g，加入料
液比为 1︰22 的 85 %乙醇，提取溶剂 pH 为
6.0，在一定提取温度下提取 60 min，提取 2
次。由表 7 可知，提取温度为 65 ℃时，狼毒
大戟根提取物对 3 种靶标病原真菌的抑菌效
果最佳。
2.3.5 提取溶剂 pH 对狼毒大戟根提取物抑菌
效果的影响 取狼毒大戟根的粉末 6.0 g，加入
料液比为 1︰22 的 85 %乙醇，在提取温度
65 ℃以及一定 pH 下提取 60 min，提取 2 次。
由表 8 可知，pH 为 10.0 时，狼毒大戟根提取
物对 3 种靶标病原真菌的抑菌效果较好。
2.4 狼 毒 大 戟 根 抑 菌 活 性 物 质 的 提 取 工 艺
优化
2.4.1 对 黄 瓜 枯 萎 病 菌 抑 菌 效 果 的 正 交 试
验 由极差分析可以看出（表 9），针对黄瓜
枯萎病菌，各因素影响狼毒大戟抑菌活性物质
抑菌效果的主次顺序为：乙醇浓度、提取溶剂
pH、料液比、提取温度、回流时间，即乙醇浓
度影响最大，回流时间影响较小。针对黄瓜枯
萎病菌提取狼毒大戟抑菌活性物质的最佳提
取工艺为 A2B4C4D3E1，即料液比为 1︰20、乙
醇浓度为 90 %、提取时间为 90 min、提取温度
表 4 不同乙醇浓度的提取物对 3 种病原真菌的抑菌率
乙醇浓
度/%
抑菌率/%
黄瓜枯萎病菌 JSF 甜瓜枯萎病菌 菜豆炭疽病菌
4 d 7 d 4 d 7 d 4 d 7 d
55 61.80 49.27 53.30 47.87 50.44 36.43
65 66.13 56.45 50.04 41.70 59.01 49.31
75 47.31 36.91 40.35 42.66 38.06 42.08
85 82.59 96.01 79.85 85.51 78.93 71.70
95 65.43 45.51 66.56 67.19 58.14 35.42
表 5 不同料液比的提取物对 3 种病原真菌的抑菌率
料液比
抑菌率/%
黄瓜枯萎病菌 JSF 甜瓜枯萎病菌 菜豆炭疽病菌
4 d 7 d 4 d 7 d 4 d 7 d
1∶6 58.80 58.55 46.21 40.69 47.69 53.98
1∶10 47.31 39.91 40.35 42.66 38.06 42.08
1∶14 61.53 50.54 41.93 42.13 50.35 44.49
1∶18 56.39 47.95 41.71 42.43 46.49 30.66
1∶22 87.75 85.18 81.83 77.46 84.42 78.63
表 6 不同回流时间的提取物对 3 种病原真菌的抑菌率
提取时
间/min
抑菌率/%
黄瓜枯萎病菌 JSF 甜瓜枯萎病菌 菜豆炭疽病菌
4 d 7 d 4 d 7 d 4 d 7 d
60 76.38 71.24 80.65 72.67 70.96 63.60
90 80.44 65.54 79.62 68.32 66.50 60.78
120 62.58 52.31 71.50 51.92 46.14 38.07
150 55.83 47.43 43.41 39.42 42.03 35.00
180 47.31 39.91 40.35 42.66 38.06 42.08
表 7 不同提取温度的提取物对 3 种病原真菌的抑菌率
提取温
度/℃
抑菌率/%
黄瓜枯萎病菌 JSF 甜瓜枯萎病菌 菜豆炭疽病菌
4 d 7 d 4 d 7 d 4 d 7 d
65 73.17 63.57 66.76 60.36 71.49 71.14
70 59.42 61.69 54.84 42.25 51.82 43.92
75 62.49 51.73 48.71 39.51 54.53 24.37
80 47.31 39.91 40.35 42.66 38.06 42.08
85 55.39 38.02 66.76 60.36 71.49 71.14
表 8 不同提取溶剂 pH的提取物对 3种病原真菌的抑菌率
pH
抑菌率/%
黄瓜枯萎病菌 JSF 甜瓜枯萎病菌 菜豆炭疽病菌
4 d 7 d 4 d 7 d 4 d 7 d
2.0 38.64 42.93 66.76 33.51 26.02 51.13
4.0 60.68 52.76 54.84 45.87 48.62 43.63
6.0 47.31 39.91 48.71 42.66 38.06 42.08
8.0 53.53 46.58 40.35 46.47 36.78 39.48
10.0 74.55 73.85 63.28 69.43 68.34 63.49

2010（16） 孙瑞艳等：狼毒大戟根提取物抑菌活性及其提取方法初探 71
表 9 L16（45）对黄瓜枯萎病菌抑制作用的正交试验结果分析
序号 料液比 A
乙醇浓度
B
回流时间
C
提取温度
D
提取溶剂 pH
E
抑菌率/%
4 d 7 d
1 1 1 1 1 1 30.90 18.08
2 1 2 2 2 2 20.73 35.17
3 1 3 3 3 3 44.90 36.56
4 1 4 4 4 4 19.14 17.38
5 2 1 2 3 4 20.58 11.19
6 2 2 1 4 3 29.80 23.26
7 2 3 4 1 2 70.62 80.19
8 2 4 3 2 1 86.33 87.85
9 3 1 3 4 2 20.54 9.01
10 3 2 4 3 1 24.31 72.09
11 3 3 1 2 4 65.42 28.54
12 3 4 2 1 3 49.95 39.03
13 4 1 4 2 3 36.26 13.69
14 4 2 3 1 4 28.56 21.79
15 4 3 2 4 1 24.44 16.85
16 4 4 1 3 2 51.43 42.46
T1 107.19 51.97 112.34 159.09 194.87
T2 202.49 152.31 102.24 162.30 166.83
T3 145.67 162.14 155.21 165.25 112.54
T4 94.79 186.72 183.35 66.50 78.90
T1′ 26.80 12.99 28.09 39.77 48.72
T2′ 50.62 38.08 25.56 40.58 41.71
T3′ 36.42 40.54 38.80 41.31 28.14
T4′ 23.70 46.68 45.84 16.63 19.73
Ri 26.92 33.69 20.28 24.68 28.99
注：表中 T1 指某一因素 1 水平时抑菌率总和，依此类推 T2、T3、T4；T1′，为 T1 除以某一因素 1 水平出现次数的值，依此类
推 T2′、T3′、T4′，某一因素中 T1′、T2′、T3′、T4′值最高代表这一因素水平最佳；Ri 指某一因素的 T1′、T2′、T3′、
T4′中最大值与最小值之差，Ri 大小与某一因素影响度高低成正比；下表同。
为 65 ℃、pH 为 8.0。
2.4.2 对 JSF 甜瓜枯萎病菌抑菌效果的正交试验 由极差分析可以看出（表 10），针对 JSF 甜瓜
枯萎病菌，各因素影响狼毒大戟抑菌活性物质抑菌效果的主次顺序为：回流时间、提取温度、乙
醇浓度、料液比、提取溶剂 pH，即回流时间影响最大，提取溶剂 pH 影响较小。针对 JSF 甜瓜枯
萎病菌提取狼毒大抑菌活性物质的最佳提取工艺为 A2B4C4D2E3，即料液比为 1︰20、提取液乙醇
浓度为 90 %、提取时间为 90 min、提取温度为 60 ℃、pH 为 10.0。
2.4.3 对菜豆炭疽病菌抑菌效果的正交试验 由极差分析可以看出（表 11），针对菜豆炭疽病菌，
各因素影响狼毒大戟抑菌活性物质抑菌效果的主次顺序为：乙醇浓度、回流时间、料液比、提取
温度、提取溶剂 pH，即乙醇浓度影响最大，提取溶剂 pH 影响较小。针对菜豆炭疽病菌提取狼毒
大抑菌活性物质的最佳提取工艺为 A3B4C3D2E4，即料液比为 1︰22、提取液乙醇浓度为 90 %、提
取时间为 75 min、提取温度为 60 ℃、pH 为 11.0。
2.5 验证试验
比较单因素最佳组合提取工艺与上述 3 种提取工艺的抑菌效果（表 12），提取工艺 A2B4C4D2E3

72 中 国 蔬 菜 CHINA VEGETABLES 2010 年 8 月（下）
表 10 L16（45）对 JSF 甜瓜枯萎病菌抑制作用的正交试验结果分析
序号 料液比 A
乙醇浓度
B
回流时间
C
提取温度
D
提取溶剂 pH
E
抑菌率/%
4 d 7 d
1 1 1 1 1 1 4.79 16.78
2 1 2 2 2 2 21.80 19.42
3 1 3 3 3 3 52.34 36.48
4 1 4 4 4 4 26.46 45.76
5 2 1 2 3 4 26.45 16.27
6 2 2 1 4 3 39.33 35.14
7 2 3 4 1 2 61.32 83.94
8 2 4 3 2 1 96.78 89.74
9 3 1 3 4 2 28.16 25.26
10 3 2 4 3 1 22.06 47.23
11 3 3 1 2 4 53.22 73.81
12 3 4 2 1 3 54.99 42.29
13 4 1 4 2 3 97.04 96.42
14 4 2 3 1 4 24.65 29.37
15 4 3 2 4 1 30.48 17.38
16 4 4 1 3 2 71.44 61.75
T1 118.44 154.73 187.48 172.38 171.13
T2 225.09 131.16 95.36 279.39 190.37
T3 188.59 211.61 180.85 161.73 210.33
T4 204.92 239.54 273.35 123.54 165.21
T1′ 29.61 38.68 46.87 43.10 42.78
T2′ 56.27 32.79 23.84 69.85 47.59
T3′ 47.15 52.90 45.21 40.43 52.58
T4′ 51.23 59.89 68.34 30.89 41.30
Ri 26.66 27.10 44.50 38.97 11.28
表 11 L16（45）对菜豆炭疽病菌抑制作用的正交试验结果分析
序号 料液比 A
乙醇浓度
B
回流时间
C
提取温度
D
提取溶剂 pH
E
抑菌率/%
4 d 7 d
1 1 1 1 1 1 5.18 11.52
2 1 2 2 2 2 13.30 16.49
3 1 3 3 3 3 71.13 68.77
4 1 4 4 4 4 58.95 69.54
5 2 1 2 3 4 16.45 14.27
6 2 2 1 4 3 33.41 25.19
7 2 3 4 1 2 11.67 18.51
8 2 4 3 2 1 99.88 97.58
9 3 1 3 4 2 24.97 19.73
10 3 2 4 3 1 20.50 40.34
11 3 3 1 2 4 69.94 82.22
12 3 4 2 1 3 62.19 59.11
13 4 1 4 2 3 4.09 6.07
14 4 2 3 1 4 29.14 24.47
15 4 3 2 4 1 14.28 14.23
16 4 4 1 3 2 62.18 61.02
T1 166.32 51.59 179.95 113.61 163.67
T2 155.55 106.49 104.30 202.36 115.75
T3 201.40 183.73 210.55 184.40 159.14
T4 105.79 287.25 134.46 128.69 190.50
T1′ 41.58 12.90 44.99 28.40 40.92
T2′ 38.89 26.62 26.08 50.59 28.94
T3′ 50.35 45.93 52.64 46.10 39.79
T4′ 26.45 71.81 33.62 32.17 47.63
Ri 23.90 58.91 26.56 22.19 18.69

2010（16） 孙瑞艳等：狼毒大戟根提取物抑菌活性及其提取方法初探 73
的狼毒大戟根提取物对黄瓜枯萎病菌、JTF 甜
瓜枯萎病菌、菜豆炭疽病菌的 4、7 d 抑菌效果
均最佳；确定狼毒大戟生物活性成分的最佳提
取工艺为 A2B4C4D2E3，即料液比为 1︰20、提取
液乙醇浓度为 90 %、提取时间为 90 min、提取
温度为 60 ℃、pH 为 10.0。
3 结论与讨论
随着人类对环境保护意识的增强，当前很多国家已采取措施减少化学合成农药的使用，我国
目前亦已撤销十几种化学农药的登记（功能，2001）。近十年来，从天然资源（即生物界包括微生
物到昆虫、动植物）中寻找活性物质代替化学农药已成为植物保护研究的热点。我国有丰富的植
物及中药资源，是植物源农药的理想来源。
本试验表明，狼毒大戟根提取物对供试 9 种植物病原真菌均具有较好的抑菌作用，通过单因
素试验和正交试验确定连续回流提取法提取狼毒大戟抑菌活性物质的最佳条件为 A2B4C4D2E3，即
液料比为 1∶20、提取液乙醇浓度为 90 %、提取时间为 90 min、提取温度为 60 ℃、提取溶剂 pH
为 10.0、提取次数为 2 次。本试验仅针对狼毒大戟根提取物对蔬菜病原真菌的抑菌活性及其提取
方法方面进行了初步探索，后续的试验应在活性追踪指导下对抑菌活性成分分离、结构阐明及构
效关系等方面进行深入研究。
参考文献
功能．2001．生物农药发展的机遇与挑战．中国生物防治，17（4）：184-185.
苟鹏，苟静玲．2006．五种中草药提取物及其复方对犬细小病毒的影响．中国比较医学杂志，16（6）：356-358.
鞠荣，徐汗虹，周利娟．2005．大戟科杀虫植物生物活性的研究及应用．广东农业科学，（6）：56-59.
李伟，蔡霞，胡正海，王永健．2008．大戟属药用植物的研究进展．中国野生植物资源，27（5）：1-4.
刘桂芳，付玉琴，杨志强，赵慧庆，范雪梅．1988．狼毒大戟抗癌活性成分二萜内酯的分离鉴定．中药通报，13（5）：291-293.
刘桂芳．1989．狼毒大戟的化学成分研究．中草药，（7）：2-4.
刘萍，林娟．2000．狼毒大戟水提物对小鼠致突变作用的实验研究．山东医科大学学报，38（1）：26-27.
刘文粢．1997．狼毒大戟萜类和蒽醌类化合物的分离鉴定．中药材，20（7）：351-353.
宋友文，谢珍，胥洪灿．1997．脚癣狐臭酊剂抗皮肤病真菌及安全性研究．中国实验方剂学杂志，3（2）：13-15.
王爱军，袁丛英．2006．绿色生物农药研究现状及发展．河北化工，（1）：54-56.
赵奎君，徐国钧，金蓉鸾，徐珞珊，张蒲芝．1995．狼毒类中药对结核杆菌抗菌作用的比较．中国药科大学学报，26（2）：122-124.
Chen Chun-tao．1999．Diterpenes and aromatic compounds from Euphorbia fischeriana．Phytochemistry，52（1）：117.
Lee Seung-Ho，Tanaka T，Nonaka Gen-ichiro，Nishioka L，Zhang Ben．1991．Allose gallates from Euphorbia fischeriana．Phytochemistry，
30（4）：1251-1253.
Shelton A L．2000．Variable chemical defences in plants and their effects on herbivore behaviour．Evolutionary Ecology Research，2（2）：
231-249.
表 12 4 种提取工艺的提取物对 3 种病原真菌的抑菌率
提取工艺
抑菌率/%
黄瓜枯萎病菌 JSF 甜瓜枯萎病菌 菜豆炭疽病菌
4 d 7 d 4 d 7 d 4 d 7 d
A2B4C4D2E3 83.69 42.93 70.62 76.39 91.10 71.13
A3B4C3D2E4 62.61 52.76 54.60 64.31 62.04 43.63
A3B3C2D2E3 28.41 39.91 30.42 49.10 41.10 42.08
A2B4C4D3E1 80.95 76.58 61.67 70.28 85.28 69.48