全 文 ：贵州苗药酢浆草水提物的抗炎镇痛作用
＊
崔 珺1，杨雅欣2，郑 林3，董 莉3，何 彬3，刘 亭4，李 靖4，穆 琼1*
(1．贵州医科大学 全科医学教研室，贵州 贵阳 550004;2．贵阳中医学院 药学院，贵州 贵阳 550002;3．贵州医科大学 民族药与中药开
发应用教育部工程研究中心，贵州 贵阳 550004;4．贵州医科大学 贵州省药物制剂重点实验室，贵州 贵阳 550004)
［摘 要］目的:研究贵州苗药酢浆草水提取物的抗炎镇痛作用。方法:60 只清洁级昆明系小白鼠采用冰醋
酸法复制小鼠腹腔毛细血管通透性增高模型，随机分为空白组、模型组、阳性组以及酢酱草水提物低、中、高剂量
组，每组 10 只;另取 50 只小鼠采用冰醋酸法复制小鼠扭体模型，随机分为模型组、阳性组以及酢酱草水提物低、
中、高剂量组，每组 10 只;空白组和模型组给予同体积生理盐水灌胃，阳性组给予 0. 005 mg /g阿司匹林灌胃，酢
酱草水提物低、中、高剂量组分别给予 0. 07 mg /g、0. 14 mg /g、0. 21 mg /g酢酱草水提物灌胃，均连续灌胃 3 d，小
鼠腹腔毛细血管通透性增高模型末次灌胃 1 h后处死，用紫外分光光度计测定小鼠腹腔清洗液的吸光度值，以
判定腹腔毛细血管通透性的变化;记录小鼠扭体模型 10 min内的扭体次数，并计算扭体抑制率;采用 DPPH实验
初步考察酢酱草水提取物的自由基清除能力。结果:酢浆草水提物中、高剂量组小鼠腹腔清洗液的吸光度值低
于模型组，差异有统计学意义(P ＜ 0. 01 或 P ＜ 0. 001) ;小鼠扭体模型 10 min 内扭体次数少于模型组，差异有统
计学意义(P ＜ 0. 001) ;1 ～ 100 mg /L浓度的酢浆草水提物能够发挥直接清除 DPPH自由基的作用。结论:酢浆
草水提物具有抗炎镇痛作用。
［关键词］小鼠;苗药;酢浆草;植物提取物;抗炎;镇痛;贵州
［中图分类号］Ｒ29;ＲZ273 ［文献标识码］A ［文章编号］1000-2707(2016)04-0427-03
Effect of Anti-Inflammatory and Analgesia Activities of Aqueous
Extracts of Miao Medicine Oxalis corniculata L．
CUI Jun1，YANG Yaxin2，ZHENG Lin3，DONG Li3，HE Bin3，LIU Ting4，LI Jing4，MU Qiong1
(1． Department of General Practice，Guizhou Medical University，Guiyang 550004，Guizhou，China;2． School of Pharmacy，
Guiyang University of TCM，Guiyang 550002，Guizhou，China;3． Engineering Ｒesearch Center of Ministry of Education
for the Development and Application of Ethnic Medicine and TCM，Guizhou Medical University，Guiyang 550004，
Guizhou，China;4． Guizhou Provincial Key Laboratory of Pharmaceutics，Guizhou Medical
University，Guiyang 550004，Guizhou，China)
［Abstract］Objective:To investigate anti-inflammatory and analgesia effects of aqueous extracts of
Miao medicine Oxalis corniculata L(CJCS)． Methods:Sixty Kunming mice of clean grade were ran-
domly divided into control group，model group，positive control group and low-dose group，middle-
dose group，high-dose group of CJCS，10 mice per group． Among these groups，glacial acetic acid was
adopted to induce and construct celiac capillary permeability model． Another fifty mice were randomly
divided into model group，positive control group and low-dose group，middle-dose group，high-dose
group of CJCS，10 mice per group． Among these groups，glacial acetic acid was adopted to induce and
construct writhing model． Control group and model group was orally administered with equal volume of
physiological saline，and positive group was orally administered with 0． 005 mg /g of aspirin． Low-dose
group，middle-dose group and high-dose group was orally administered with 0． 07 mg /g，0． 14 mg /g
and 0． 21 mg /g of CJCS，respectively． All groups received continuous oral administration of 3 d，and
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第 41 卷 第 4 期
2016 年 4 月
贵 阳 医 学 院 学 报
JOUＲNAL OF GUIYANG MEDICAL COLLEGE
Vol． 41 No． 4
2016． 4
* * 通信作者 E-mail:mu0731@ 126． com
网络出版时间:2016 － 04 － 20 网络出版地址:http:/ /www． cnki． net /kcms /detail /52． 5012． Ｒ． 20160420． 1823． 030． html
the mice were sacrificed 1 hour after the last intragastric administration of glacial acetic acid for celiac
capillary permeability model． The absorbance value of celiac washing liquid of sacrificed mice was de-
tected by UV spectrophotometer to determine changes in celiac capillary permeability． For the writhing
model，the writhing times within 10 min were recorded and writhing inhibition rates were calculated．
DPPH assay was adopted to preliminarily evaluate the free radical scavenging activities of aqueous ex-
tracts of CJCS． Ｒesults:The absorbance value of celiac washing liquid of middle-dose group and high-
dose group were significantly lower than that of model group，(P ＜ 0． 01 and P ＜ 0． 001)． The writhing
times within 10 min of middle-dose group and high-dose group were significantly lower than that of
model group (P ＜ 0． 001)． The results suggested that middle-dose group and high-dose group of CJCS
could remarkable suppressed the increase of peritoneal capillary permeability induced by acetic acid． 1
～ 100 mg /L concentration of CJCS could show strong free radical scavenging activity in vitro． Conclu-
sion:CJCS aqueous extracts have anti-inflammatory and analgesia effects．
［Key words］mice;Miao medicine;Oxalis corniculata L．;plant extracts;anti-inflammatory;analge-
sia;Guizhou
酢浆草为酢浆草科植物酢浆草(Oxalis cornicu-
lata L. )的新鲜或干燥全草，始载于《本草纲目》，
为贵州省苗族常用药材。酢浆草含黄酮类物质、有
机酸、酯类物质等成分，具有清热解毒、消炎止痛、
利湿消肿、凉血散瘀之功效［1 － 3］。临床现有的制剂
主要采用水提方法制备而得，但对其相关抗炎、镇
痛药理作用研究仍然较少［4］。本实验探讨酢浆草
水提取物的抗炎镇痛作用，为酢浆草的临床应用提
供理论依据。
1 材料与方法
1. 1 主要药物与试剂
选用贵州本地秋季采收的干燥酢浆草全草作
为研究对象(经贵州医科大学龙庆德副教授鉴定
为酢浆草 Oxalis corniculata L. 真品) ;酢浆草提取
物由本实验室自制;阿司匹林维生素 C 泡腾片购
于沈阳奥吉娜药业有限公司(批号 120203) ，依文
思蓝购于国药集团化学试剂有限公司(批号
20120608) ，冰醋酸(分析纯，上海申博化工有限公
司，批号 1003102) ，乙腈(色谱纯，天津市科密欧化
学试剂有限公司，批号 20110816) ，DPPH 试剂(1，
1-二苯基-2-苦基肼试剂，M = 394. 32，BＲ 级)购于
Sigma公司。
1. 2 主要仪器和动物
高速万能粉碎机(林大机械有限公司，50 ～
200 目)、梅特勒电子天平(梅特勒托利多仪器上海
有限公司，120 g /0. 1 mg 及 500 g /0. 1 g)、紫外分
光光度计(岛津 UV2401)。选用清洁级昆明系小
白鼠，18 ～ 22 g，雌雄各半，由贵阳医学院实验动物
中心提供，合格证号 SCXK(黔)2008 － 0005。
1. 3 方法
1. 3. 1 腹腔毛细血管通透性的测定 采用冰醋酸
复制小鼠腹腔毛细血管通透性增高模型。取 60 只
小鼠，雌雄各半，随机分为 6 组，每组 10 只，即空白
组、模型组、阳性组以及酢浆草水提取物低(0. 07 mg /
g)、中(0. 14 mg /g)、高(0. 21 mg /g)剂量组;空白
组和模型组以 0. 01 mL /g 给予同体积生理盐水灌
胃，阳性组以 0. 005 mg /g剂量给予阿司匹林灌胃，
酢浆草水提物低、中、高剂量组以不同剂量灌胃。
各组小鼠每日灌胃 1 次，连续灌胃 3 d。末次灌胃
1 h 后，小鼠尾静脉注射 0. 6%依文思蓝生理盐水
溶液 0. 01 mL /g，随即腹腔注射 0. 8%冰醋酸生理
盐水溶液 0. 01 mL /g致炎。2 h 后脱颈处死小鼠，
腹腔注射 6 mL 生理盐水，轻揉小鼠腹部，轻微振
摇，于腹腔收集腹腔清洗液，4 000 r /min 离心
15 min，取上清液，用紫外分光光度计于 590 nm 波
长处测定吸光度值［5］，以判定各组小鼠腹腔毛细
血管通透性的变化。
1. 3. 2 扭体实验 采用冰醋酸复制小鼠扭体模型。
取 50只小鼠，雌雄各半，随机分为 5 组，每组 10 只，
即模型组、阳性组、酢浆草水提物低 (0. 07 mg /g)、
中(0. 14 mg /g)及高(0. 21 mg /g)剂量组。模型组
以 0. 01 mL /g给予同体积生理盐水灌胃，阳性组以
0. 005 mg /g剂量给予阿司匹林灌胃，酢浆草水提物
以低 (0. 07 mg /g)、中(0. 14 mg /g)、高(0. 21 mg /g)
剂量予以不同剂量灌胃。各组小鼠每日灌胃 1 次，
连续灌胃 3 d。末次灌胃 1 h 后，予各组小鼠腹腔
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贵 阳 医 学 院 学 报 41 卷
注射 0. 8%的冰醋酸生理盐水溶液 0. 01 mL /g，稳
定 5 min 后，记录 10 min 之内小鼠发生扭体反应
(腹部内凹、躯干和后腿伸张、臀部高起为 1 次扭体
反应)的次数，并计算药物对扭体反应的抑制率［5］。
抑制率(%)=生理盐水组扭体均数 －给药组
扭体均数 /生理盐水组扭体均数 × 100%
1. 3. 3 自由基清除能力测定 实验时，配制浓度
为 1 × 10 －4 mol /L的 DPPH 乙醇溶液(即自由基溶
液) ，闭光置于摇床上轻轻摇动 10 min，备用。将
酢浆草水提物配成 10 倍终浓度的水溶液(浓度分
别为 0 mg /L、1 mg /L、10 mg /L、100 mg /L) ，吸取各
浓度药液 300 μL，分别加入 1 × 10 －4 mol /L 的 DP-
PH 醇溶液 2 700 μL。摇匀后标记为待检测样品，
室温放置 30 min后使用紫外分光光度计于 517 nm
波长处检测各样品的吸光度值，以判定不同浓度酢
浆草水提物对自由基溶液的清除水平。每组 3 个
复孔，重复 3 次实验［6］。
1. 4 统计学方法
采用 SPSS(13. 0)统计软件进行分析，结果用
均数 ±标准差(x ± s)表示，单因素方差分析(One-
Way ANOVA)后，用 Dunnett s test 分析方法比较组
间差异，两组间比较采用 T- test 法，P ＜ 0. 05 为差
异有统计学意义。
2 结果
2. 1 小鼠腹腔毛细血管通透性
模型组小鼠腹腔清洗液的吸光度值与空白组
比较明显升高，差异有统计学意义(P ＜ 0. 001) ，说
明冰醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增高的炎症
模型建立成功。酢浆草水提物中、高剂量组小鼠腹
腔清洗液的吸光度值与模型组比较明显降低，差异
有统计学意义(P ＜ 0. 01，P ＜ 0. 001)。见图 1。
2. 2 小鼠扭体实验
如表 1 所示，阳性组以及酢浆草水提物中、高
剂量组的扭体次数与模型组比较明显减少，差异有
统计学意义(P ＜ 0. 001) ，酢浆草水提物中、高剂量
组小鼠的扭体抑制率低于阳性组小鼠，提示中、高
剂量组酢浆草水提物可抑制小鼠扭体。见表 1。
2. 3 自由基清除能力
以酢浆草提取物浓度为 0 mg /L组吸光度值为
参照，1 ～ 100 mg /L浓度的酢浆草水提取物组能够
发挥直接清除 DPPH 自由基的作用。酢浆草水提
取物浓度 1、10 及 100 mg 时共吸光度值分别为
(1)与空白组比较，P ＜ 0. 001;(2)与模型组比较，
P ＜ 0. 01;(3)与模型组比较，P ＜ 0. 001
图 1 各组小鼠腹腔毛细血管
通透性(x ± s，n = 10)
Fig． 1 The celiac capillary permeability
in each group
(87. 24 ± 0. 15)、(85. 13 ± 0. 16)及 (64. 21 ±
0. 11) ，均低于未加酢浆草的吸光度值(100. 00 ±
0. 15) ，差异有统计学意义(P ＜ 0. 01)。
表 1 各组小鼠的扭体次数和
扭体抑制率(珋x ± s，n = 8)
Tab． 1 The writhing times and writhing inhibition
rates in each group
组别 扭体次数(10 min) 抑制率(%)
模型组 18. 2 ± 1. 67
阳性组 2. 75 ± 1. 21(1) 84. 9
酢浆草水提物
低剂量组 16. 4 ± 2. 12 9. 89
中剂量组 8. 50 ± 1. 02(1) 53. 3
高剂量组 7. 12 ± 1. 48(1) 60. 9
(1)与模型组比较，P ＜ 0. 001
3 讨论
酢浆草是贵州省苗族习用药材，收载于《贵州
省中药材、民族药质量标准》2003 年版［2 － 3］，以酢
浆草为主药开发的制剂品种在临床上发挥了较好
的治疗作用，带动当地制药产业和经济水平的发
展。目前，水提取法是酢浆草等临床制剂常用的提
取方法，酢浆草药理活性研究主要集中在体外抗菌
方面，关于酢浆草提取物体内抗炎镇痛药效的报道
仍然十分薄弱，极大限制了酢浆草的临床应
用［4，7 － 9］。
(下转第 435 页)
924
4 期 崔 珺等 贵州苗药酢浆草水提物的抗炎镇痛作用
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放化疗治疗局部晚期非小细胞肺癌［J］． 贵阳医学院
学报，2014(2) :225 － 228．
(2016－01－05 收稿，2016－03－28 修回)
中文编辑:文箐颍;英文编辑:刘

华
(上接第 429 页)
本文采用酢浆草水提取物，建立药理学抗炎和
镇痛模型，以此考察酢浆草水提物在体内的抗炎和
镇痛药效，并初步研究其抗炎作用方式。本研究
中，实验小鼠均没有中毒死亡等现象，说明酢浆草
安全性较高。在经典抗炎镇痛药理模型中［5］，冰
醋酸使小鼠腹腔毛细血管通透性明显增高，渗出液
吸光度值显著上升，表明小鼠腹腔毛细血管通透性
增高模型建立成功。腹腔注射冰醋酸以后小鼠出
现不同程度的扭体，表明小鼠扭体模型建立成功。
实验结果提示酢浆草水提物可明显降低腹腔毛细
血管通透性，抑制冰醋酸所致小鼠扭体反应，两个
经典实验共同说明酢酱草水提物具有抗炎镇痛作
用。本研究结果显示，酢浆草水提取物能够在 1 ～
100 μg /mL浓度内发挥直接清除 DPPH 自由基的
作用，推测酢浆草水提取物的抗炎活性可能与其能
够较好的直接清除机体内 DPPH 等自由基有关。
目前对于酢浆草的最佳提取方法及其作用机制还
有待于进一步研究。
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(2016－01－06 收稿，2016－03－23 修回)
中文编辑:文箐颍;英文编辑:刘 华
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4 期 邓楚钟等 同源重组与 Gibson Assembly方法构建腺病毒载体