全 文 ：备 纬 难 业 考报 2 0 05 , 1 4 ( 6 ) : 1 3 7 一 1 4 0
A c t a A g r i e : 一I t : , r a e B o 徉a l i一。 ` c i d e n t a l i s S i n i c a
南欧丹参抑菌活性部位的研究
麻妙锋 ’ · “ , 冯 吉利 ’ , 龙建友 2 , 吴文君 2
(l
. 西北农林科技大学生命科学学院 , 陕西杨凌 7 12 1。。 ; 2 西北农林科技大学农药研究所 , 陕西杨凌 7 1 2 10 0)
摘 要 : 对南欧 丹参 (S 以讨a 、 ,l “ 。 a) 的抑菌活性部位及生物活性研究结果表明 , 花序中含有 主要抑菌 活性成
分 . 且石油醚为南欧丹参花活性成分的最 佳提取溶剂 。 在离体条件下 , 花的石油醚提取物对多种供试真菌有
明显的抑制作用 , 其对油菜菌核病菌 ( s。 ,、 t i爪 “ 、 扮。 lt , “ m )的 E C 50 为 26 . 98 “ g ` m l ’ ;对 盆栽小麦白粉病
( E , ) 、 i p h。 g , a n : i , , i、 )的保护效果为 9魂, 9 4 % , 治疗效果为 8 4 . 2 1 % 。
关键词 : 南欧丹参 ; 抑菌活性 ; 生物测定
中图分类号 : Q 9 4 9 . 9 6 文献标识码 : A 文章编号 : 1 0 0 4一 1 3 8 9 ( 2 0 0 5 ) 0 6 一 0 1 3 7一 0 4
S t u d y o n t h e F u n g i c i d a l A e t i v i t y o f S a l v i a s c l a er a
M A M i
a o 一 f
e n g ’ , F E N G J i
一
11’ , IJ ( ) N G J i a n 一 y o u Z a n d WU W
e n 一 j
u n ’
( 1
.
C o l l e g
e o f I i fe S e i e n e
e s
,
N o r t h w
。 , t A 尽 F U n i v e r s i、 y , Y a n g l i n g S h a a n x i 7 12 10 0 , C h i n a ;
2
.
In s i t 。 t 。 o f P e s t i e id e 、 R e 、 e a r e h , N o r t h w e s l A 吕 F U n i v e r 、 i r y , Y a n g li n g S h a a n x i 7 12 10 0 . ( ’ h i n a )
A bs t r a e t : T h e p a p e r
s t u d i e d b i o a e t i v i t y o f S a l v i a s c l a
r e a a n d e o n f i r m e d i t
s a e t i v e p a r t s
.
T h e b i o a s
s a y
r e s u l t , i n d i e a t e d t h a t t h e f l o w e r s h a d m o s t l y a e t i v e e o m p o n e n t
s
.
I t a l s o s h o w e d t h a t t h e o P t im a l
s o l v e n t w h i e h e x t r a e t i n g a e t i v e e o m p o n e n t s w a s p e t r o l e u m e t h e r
.
T h e p e t r o l e u m e t h e r e x t r a e t e o u l d
m a r k e d l y i n h ib i t t h e v a r i o u s m y e e l ia l g r o w t h
,
i t s E C
: 。 v a l u e a g a i n s t s c e阳 t i n la s e l e阳 t i o r “ 胡 w a s 2 6 . 9 8 拼g
·
m l
碑 一 ` . In a d d i t i o n
,
p r o t e e t i v e e f f e e t a n d t h e r a p e u t i e e f f e e t o f t h e p e t r o l e u m e t h e r e x t r a e t a g a i n s t t h e
E , ) s iP h e g ar m i n i s w e r e 9 4
.
9 4% a n d 8 4
.
2 1% r e s p e e t i v e l y
.
K e y w o r d s : S a l v i a s c l a er a ; F u n g i e id a l a e t i v i t y ; B i o a s s a y
南欧丹参 ( S “ vl l’a , cl a er a )是唇型科 鼠尾草
属二年生或多年生草本植物 ,别名香紫苏 ,莲座鼠
尾草 ,原产地中海 , 于 20 世纪 70 年代初引人我 国 ,
在陕西 、河南 、 河北等省栽培 仁` · ’ 马。 国内外对南欧丹
参的研究主要集 中在医药及香料领域 ,关于南 欧
丹参农用抑菌活性方面的研究报道很少 。 本文对
南欧丹参的抑 菌活性部位及 生物活性进行 了研
究 , 旨在为其综合利用提供依据 。
1 材料与方法
1
.
1 试验材料
南欧丹参花于 2 0 01 年 7 月购于陕西农垦科研
中心香 料厂 ( 采 自陕北南 泥湾 、 直 罗镇 、 槐 树庄
等 ) 。
南欧丹参种子和茎叶于 2 0 0 3 年 6 月中旬采 自
西北农林科技 大学农药研究所试验 田 , 室温阴干
备用 。
供 试 病 原 菌 为 番 茄 灰 霉 病 菌 ( B (,t yr lst
c i n e er a )
、 小 麦 赤 霉 病 菌 ( F u s a r i u 。
g ar m i n 尸a r u m )
、 玉 米 大 斑 病 菌 ( E x s e、 h i zu 。
t u r’, i c u m ) 、 油 菜 菌 核 病 菌 ( , c e ort i n故
s c ze rt, i
o r u m )
、 小 麦 根 腐 病 菌 ( B t’p o l a lsr
s o o k i n i a n a )
、 烟 草 赤 星 病 菌 ( A l t尸 r n a rI’a
l o n g i户e s ) 、 苹 果 轮 纹 病 菌 ( aM c呻人 o m a
ka二 a t s u ka i )、 小麦白粉病菌 ( E勺 s i p h` g ar m i n i: )
等 8种病原真菌 。 以上菌种由西北农林科技大学
植物保护学院植物病理教研组提供 。
盆栽植物为小麦 , 品种为辉县红 。
收稿日期 : 2。。 5一。 6一 2 7 修回日期 : 2 0 0 5一 0 7一 2 6
作者简介 : 麻妙锋 ( 1 9 7 4一 ) . 女 ,陕西渭南人 . 讲师 , 主要从事农药化学研究 。 E m o il : d m fjl @ 163 . co m
西 北 农 业 学 报 14卷
P D A 培养基为马铃薯 2 0 9 、 葡萄糖 20 9 、 琼
脂 2 0 9 和蒸馏 水 1 0 0 0 m L , x Z I C 高温灭 菌 3 0
1
.
2 试验方法
1
.
2
.
1 植物提取物的制备 在室温条件下 ,将阴
干 的南欧丹参花 ( 1 5 0 9 )用石油醚 、 乙酸 乙醋 、
丙酮分步冷浸提取 3 d 、 Z d 、 l d ,合并 3 次提取液 ,
分别将提取液减压浓缩 , 浓缩后的液体置通风橱
内吹干备用 , 一 6: 。
在 室 温 条 件 下 , 将 阴 干 的 南 欧 丹 参 种 子
( 2 5 0 9 ) 和茎叶 ( 3 0 0 9 ) 分别用石油醚 、 乙酸 乙酪 、
丙酮分步冷浸提取 3 d ,分别将提取液减压浓缩 ,
浓缩后的液体置通风橱内吹干备用 。
1
.
2
.
2
. 抑菌活性测 定 抑制菌丝生长速率法 : 以
丙酮为溶剂 ,将一定浓度的待测样品溶液 1 m I J 加
到 g m L 的 P D A 培养基 中混合均匀 , 倒人 高温灭
菌的培养皿中制成带药培养基 ,待培养基凝固后 ,
每个培养基平面放入 3个供试菌饼 (直径 5 m m ) ,
每个处理 3 次重复 (丙酮为对照 ) , 25 C培养 3 ~ 4
d
, 用十字交叉法测量菌落扩展直径 ,计算菌丝生
长抑制率川 。
抑制抱子萌发法 : 以清水为溶剂 ,将一定浓度
的待测样品溶液与抱子悬浮液充分混合 ,滴加在
洁净干燥的凹玻片上 , 15 ~ 20 C保湿培养 24 h (清
水为对照 ) , 当对照的萌发率达到 85 %后 , 检查所
有处理的萌发率 。 以抱子萌发后的芽管长度大于
抱子短半径为萌发 ,计算抱子萌发抑制率〔’ !。
1
.
2
.
3 盆栽试验 在石油醚提取物中加入 0 . 2%
吐温一 2 0 ,用 自来水稀释 1 0。。 倍 , 使最终浓度为 1
0 0 0 拜9 . m I J I 。
保护作用 : 将催过芽的小麦种子播种在事先
准备好的花盆中 ,等到植株 长到三叶一心时 ,先喷
供试样品 , 24 h 后接种小麦白粉病抱子 。 每个处
理设 3 个重复 , 每重复 1 盆 , 同时喷清水 (含 0 . 2%
吐温一 2 0) 为对照 。 7 后按小麦 白粉病菌的分级标
准及文献方法 f ’ 1计算病情指数和防治效果 。
治疗作用 : 先在保湿条件下接种小麦 白粉病
菌抱子 , 24 h 后在植株上喷施供试样品 。 其余同
保护作用 } 7 , 。
1
.
2
.
4 计算公式 菌丝生长抑制率 、 袍子萌发抑
制率 、 病情指数和防治效果的计算公式分别为 : 菌
丝生长抑制率 (% )一 (对照菌落直径 一处理菌落
直径 )/ 对照菌落直径 只 1 0 ,袍子萌发抑制率 ( 写 )
一 (对照 萌发率 一 处理萌发 率 )/ 对照 萌发率 又
10
,病情指数一 艺 (各级发病数 x 该级代表数 )/
(总株数 火最高级代表值 ) , 防治效果 ( % ) 二 (对照
病情指数一处理病情指数 )/ 对照病情指数 x l 0 。
2 结果与分析
2
.
1 南欧丹参种子提取物的抑菌活性
石 油醚 、 乙 酸乙 醋 、 丙酮 3 种提 取物 在 5 0 0
拜g · m L 一 ’浓度下 ,采用抑制菌丝生长速率法测定
其对 5 种供试病原菌的抑菌活性 ,结果见表 1 。
表 l 种子提取物对 5 种植 物病原真菌菌丝生长的抑制作用
aT b l
e 1 I n h ib i t i o n o r s e e d s e x t r a e t a g a in s t t h e g r o w t h o f t h e h y Ph a e
供试菌
F u n g i
相对抑制率 In h i b i* i o n / %
石油醚提取物
P e t r o l e u m e 〔h e r e x 是r a e 之
乙酸 乙醋提取物
E飞h y l a e e t a l e e x l r a e l
丙酮提取物
A e
e 飞o n e e x 飞r a e l
番茄灰霉病 菌 B ,t yr tJ’ “ , , “ 2 . 8
烟草赤星病 菌 A lt er , ` r 、 l朋 .i^ P o 4 8 . 9 40 . 4 招、 8
油菜菌核病菌 S 。尸 r, r i o z“ s: l o r o t i o r u m 2 . 3 1 . 2 4 1
小麦根腐病菌 B IP o l。 八 : : 。 l)r k i , , la n a 3 0 . 企 3 6 . 9 2 6 . 2
苹果轮纹病菌 解“ 。 r,) Ph o m a ka二 u r s u涛“ 1 4 2 . 1 2 2 . 4 3 1. 9
注 : … 表示促进菌丝生长 , 下同 。
N o t e
: … i n d i e a t e d p r o m o t in g g r o w th o f t h e m y e e l i a o f 之r i a l p a t h o g e n s , 一h e s a m e a s in zh e f o l l o w i n g t a b l e s .
由表 1 可知 , 石油醚 、 乙 酸乙醋 、 丙酮提取物 由表 2 可知 , 3 种提取物对以上 5种病原真菌
对以上 5 种病原真菌均没有明显的抑制作用 , 证 均没有明显的抑制作用 ,证明茎叶也不是南欧丹
明种子不是南欧丹参的主要抑菌活性分布部位 。 参 的主要抑菌活性分布部位 。
2
.
2 南欧丹参茎叶提取物的抑菌活性 2 . 3 南欧丹参花提取物的抑菌活性
将 3 种提取物在 5 0 0 拜9 . m L 一 ’浓度下 , 采用 将 3 种提取物在 5 0 0 拌g · m L 一 ’ 浓度下 ,采用
抑制菌丝生长速率法测定其对 5 种供试病原菌的 抑制菌丝生长速率法测定其对 5 种供试病原菌的
抑菌活性 , 结果见表 2 。 抑菌活性 ,结果见表 3 。
6 期 麻妙锋等 : 南欧丹参抑菌活性部位的研究 · 13 9·
表 2 茎叶提取物对 5 种植物病 原真菌菌丝生长的抑 制作 用
Ta b l e2 I n b h i it i on of s t iek s a n d I ea v s ex et ra et a g a in s t t h eg r ow t h of t h ehy P ha e
相对抑制率 I n h ib it in o/%供试菌
F n ug i
石油醚提 取物
P
e飞 r ol e um e飞 h e r e父飞 a r e、
乙 酸乙 醋提取物
E飞 hy l a e e飞a 飞 ex et ra e飞
丙酮提取物
A e e飞 n oe e义飞 ra e、
2 5 l 26 3
OJ月J 11,j
.…月匕Q归`0门n勺八,é月任户3OJ工Jób.…只ù口U91qJJ任门j日改几
只é .改且一刁庄OC
.…一了自9ó`曰,ùl月4,d乙4番茄灰霉病菌 B o t即了i , `下n r er a烟草赤星病菌 几 I t已 r , , a r i “ l口” g ` p e s油菜菌核病菌 S` r r o t i , , i a , 。 l r r o t i o r “ , , ,
小麦根腐病菌 ilj p ,)l “ 汀、 翎。 ik 。 “ a1I
苹果轮纹病菌 腼 ` rt, 六。 , , , a k u w a t , “ h “ `
由表 3 可知 ,石油醚提取物对供试 5 种病菌菌 提取物中 。
丝生长的抑制活性最高 ,乙酸乙醋提取物次之 ,丙 2 . 4 南欧丹参花石油醚提取物的生物活性研究
酮提取物最低 , 因此花是南欧丹参的主要抑菌活 2 . 4 . 1 室内毒力刚 定 石油醚提取物对供试病
性分布部位 ,且生物活性物质主要集 中在石油醚 原真菌菌丝生长的毒力测定 ,结果见表 4 。
表 3 花提取物对 5 种植物病原真菌菌丝生长的抑制作用
T a b le 3 I n h i b i t i o n o f f , o w e r s e x t r a e t a g a i n s t t h e g r o w th o f t h e h y p h a e
一一一一一一一一一一一一一一一一一一一一一一一一一一一丽万丽裤 ~丽币不i丽兀舜 一供试菌
F u n g i
石油醚提取物
P e t r o l e
u
m e t h e
r e x t r a e t
乙 酸乙醋提取物
E t h y l a c
e t a 飞e e x飞 r a e、
丙酮提取物
A c e飞o n e e天 l r a e飞
落丽瘫荡畜丽不不蕊而二— 一一一一 飞乏而 一 6 7 · 6 “ 6 · `烟草赤星病菌 A l z o r n a r i a 10 , ,g , P r s 7 9 . 8 6 2 . 9 4 9 . 3油菜菌核病菌 S ` r r耐 , n 沁 、 `了尸 r耐 i o r `2 , n 9 0 . 6 7 2 . 6 6 2 . 5
小麦根腐病菌 B IP o l a r i s s t) r o ki 。 ; a n u 74 . 2 6 2 . 心 4 1 . 7
苹界轮纹病单aM ,r 仲 h)t m o ak 叨 at 砂些 - 一 巡业一一一一一一一一二班二一一一一从表 4 可看出 , 南欧丹参花石油醚提取物对油 2 . 4 . 2 对抱子 萌发的抑制作 用 石油醚提取物
菜菌核病菌毒力最高 , E C 50 为 26 . 98 拌g · m I J 一 ’ , 在 1 0 0 0 拌g · m l 碑一 ’浓度下 , 其对 3 种病原真菌抱子
其次为烟草赤星病菌和番茄灰霉病菌 , E C 50 分别 萌发的抑制作用结果表明 , 石油醚提取物对供试 3
为 5 8 . 0 7 、 7 . 2 0 拼g · m L 一 ’ 。 种真菌的抱子萌发均无明显抑制作用 。
表 4 花的石油醚提取物抑制 5 种病原真菌菌丝生长 的毒 力
T a b le 4 T o x ie i t y o f f l o w e r s e x t r a c t a g a i n s t t h e g r o w t h o f h y p h a e
供试菌
F
u n g i
回 归方程
R e g r e s
s
i o n e q u a t i o n
E C
林g , 盆 相关 系数 (r )C o e f f i e i e n t
番茄灰霉病菌 B 优即r i、 。 i o e o a
烟草赤星病菌 A l t o r n a r i a z o n g iP 尸 s
油菜菌核病菌 S ` , r o r i n i a : ` ze。 , t i o r u 。
小麦根腐病菌 方 i P o z a叮 , 、 o r,) 走i o i a o a
苹果轮纹病菌 入了“ ` r,) 户h o m“ 走u二 a z s诫 a ,
y = 2
.
1 5 2 + 1
.
5 0 9了
夕一 3 . 2 9 4 + 0 . 9 6 7 ) ·
夕一 3 . 2 3 8十 1 . 2 3 1 ) ,
y = 3
.
5 7 3斗 0 . 7 26 x
夕= 0 、 4 5 0 + 1 . 9 8 1了
77
.
2 0
5 8
.
0 7
26
.
9 8
9 2
.
6 4
9 7
.
88
0
.
9 3 2 8
0
.
9 4 7 4
0
.
9 5 8 5
0
.
9 7 9 6
0
.
9 7 2 3
表 5 石油醚提取物对 3 种病原真菌抱子萌发的抑制作 用
T a b l e 5 I n h i b i t io n o f s a m P l e
s a g a in s t t h e g e r m i
n a t io n o f t h e s P o r e s
供 试样品
S a m P l e
s
相对抑制率 I n h i b i一i o n / %
小麦根腐病菌
B IP
o
l a r i s
s口
r’) k i n i “ n a
玉米大斑病菌 小麦赤霉病菌
E 了 `尸 rt, h i l己了 n Z t u ZT i 〔 u m F u s“ r i“ n了 g 护 a n矛i n e “ r ￡亡m
石油醚提取物 P e z r o l e u rn e r h e r e x r r a e t 2 3 . 6 4 7 . 7 5 8 . 8
2
,
4
.
3 盆栽试验结 果 南欧丹参花石油醚提取 病有很好的防治作用 , 无论是保护作用还是治疗
物 在 1 0 0 0 拜g · m l厂 ’浓度下盆栽防治小麦 白粉 作用 ,防效均在 80 % 以上 。
病 , 结果表明 , 花的石油醚提取物对盆栽小麦白粉
表 6 石油醚提取物对盆栽小麦白粉病的保护和治疗作用
T a b l e 6 T h e e f f ie a c y o f s a m p l e s a g a in s t t h e E yr s i P h e g ar m i拄 15
供试样品
S a m P le s
病情指数 In d e x o f di s e a s e 相对防效 / % R o l a r i v e o f f i e a e y
保护处理 治疗处理
P
r o t e e t i
v e t r e a tm
e n r T h e r a P e u t i e t r
e a m e n z
保护处理 治疗处理
P r o t e e z i v e t r e a rm e n t T h c
r a p e u r i e t r
e a tn e n t
石油醚提取物 P e r r o l e u m e t h e r 以 r r a e t 3 . 0 5 9 . 2 0 9 4 . 9 4 8 4 . 2 1
(二K 6 0 . 3 0 5 8 . 4 2
1 4 0 西 北 农 业 学 报 1 4卷
3 结 论
根据对研究结果的分析与讨论 , 可知南欧丹
参抑菌活性成分主要存在于其花中 ,石油醚是提
取活性成分的最佳溶剂 , 在离体条件下能够抑制
多种病菌菌丝的生长 , 尤其对供试油菜菌核病菌
菌丝的抑制作用最为明显 ;但在抱子萌发试验中
对供试 3 种抱子的抑制活性均较低 。 盆栽试验表
明 ,石油醚提取物在 1 0 0 拜g · m L 一 ’的浓度下对
盆栽小麦白粉病有 良好的防治作用 。
今考文献 :
〔 1」 中科 院西北植物研 究所 . 秦岭植物志 (第 一卷 ) . 种 子植物
(第四 册 )[ M 〕. 北京 ;科学出版社 , 19 7 9 . 2 64 .
〔2〕 翟周平 . 香紫苏 [ J」. 植物杂志 , 2 0 00 , ( l ) : 14 .
〔3」 翟周平 . 香萦苏残 渣的综合开 发利用 〔J」. 农业 科技通 讯 ,
2 0 0 2
.
( 9 )
:
33
.
[ 4」 翟周平 . 香紫苏浸膏提取 的初步研究〔」〕, 香料香精化妆品 ,
2 0 0 0
,
( 4 )
: 4~ 5
.
〔5 j U lu b e le n A . T e r p e n o id s f r o m , a l v i a s e l a r e a 〔 J 〕 .
P h y t o e h e m i s t r y
,
1 9 9 4
,
3 6 ( 4 )
:
9 7 1
.
仁6〕 U lu 6 e l e n A . D `z e r p e n o id s 斤o m t h e r o o r s o [ 、 a l v i a s e l a re a
仁J口. P h y z o e h e m is z r y , 4 4 ( 7 ) : 1 2 9 7~ 一2 9 9 .
仁7〕 方中达 . 植病研究 方法 ( 第 3 版 )[ M 〕, 北 京 : 中国农业出版
社 . 19 9 8 .
城, 峨加碱》 二阅加义 > 减 ) 减知减》 今二碱> 减 > 拭加川》 二今减 ) 弓<钾戒加 ;今洲 ) 洲》 洲> 川 ) 哎 >二心洲》 诚> 〕令减> 洲 》 洲加义》 减》 减> 写阅> 口 < , 义》 (吠卜 〕 <洲减沐减冰戒钾减卜戒 > 减加减 ) 洲 ) 城知
(上接第 1 3 6 页 )
参考文献 :
〔1」 中国医学 科学院药物研究所 . 构祀黑果病 的初步研究 [ J」.
植物保护 , 1 98 0 , ( 2 ) : 2 5一 2 6 .
[幻 程 廉 . 拘祀炭疽病发生规律及防治研究〔月 , 西北农学 院
学报 , 19 8 3 , ( 2 ) : 2 5 ~ 2 7 ·
〔3」 邓 放 . 构祀炭疽病病菌的培养性状研究〔」〕. 吉林农业 大
学学报 . 1 9 85 , ( 1 ) 门 ~ 4 .
仁4〕 邓 放 . 王子权 ,朱士 云 . 拘祀炭疽病侵染 和发病规律的研
究 [ J〕. 吉林农业大学学报 · 1 9 88 , 10 ( 2 ) : 1 1一 1 5 ·
〔5」 任月萍 . 构祀黑果病 研究初报仁J」. 宁夏农 业科技 , 19 89 .
( 2 )
: 34 ~ 3 5
.
仁6」 张锦 秀 . 李岩涛 , _王克 宁 , 等 . 拘祀 炭疽病发生规律及防治
[ J〕 . 内蒙古农业科技 , 19 9 2 , ( s ) : 2 4 ~ 2 6 .
口」 张锦 秀 , 李岩涛 , 杨宝胜 , 等 . 拘祀炭疽病病原 菌鉴定 〔J」.
内蒙古农业科技 , 1 9 9 1 , ( 2 ) : 3 4 .
仁8」 刘 秀娟 , 黄圣明 , 杨 叶 , 等 . 不 同地 区潜伏侵染香焦 果实
的炭疽病生物学特性研究 [ J〕 . 热带作物学报 , 1 9 96 , 17 ( 1卜
3 8~ 4 4
.
〔9 〕 杨 叶 ,唐广缘 , 黄意毅 ,等 海南省香蕉果实潜伏炭疽病生
物学特性研究仁J」. 植物病理学报 , 2 0 0 0 , 3 0 ( 4 ) ; 3 3 7~ 5 4 2 .
〔l叼 方仲达 . 植病研 究法「M 〕. 北京 : 农业出版社 · 1 979 . 74 ~
7 5
.