全 文 ：北方园艺 2008(3):19～ 21 ·试验研究 ·
第一作者简介:赵榆(1982-),女 ,辽宁沈阳人, 沈阳农业大学在读
硕士 ,从事果树种质资源与遗传育种研究。 E-mail:hy tdexfbh@
163.com。
通讯作者:郭修武。 E-mail:guoxw@163.com
收稿日期:2007-09-18
植物激素对河岸葡萄试管苗生长的影响
赵 　榆 , 郭修武
(沈阳农业大学园艺学院 ,辽宁沈阳 110161)
　　摘　要:以河岸葡萄为试材 ,对影响其试管苗生长的植物激素进行研究。结果表明:IAA 与
6-BA组合试管苗增殖作用好于NAA 、IBA分别与 6-BA组合;细胞分裂素诱导增殖作用ZT >6-BA
>KT ,最佳增殖培养基为ZT 0.5mg/ L+IAA 0.05mg/ L ,外植体成苗率为90%,试管苗生长健壮。
关键词:植物激素;河岸葡萄;试管苗
中图分类号:S 663.103.6　文献标识码:A 　文章编号:1001-0009(2008)03-0019-03
　　葡萄为葡萄科(Vitaceae)葡萄属(Vitis .linn)多年生
落叶藤本果树。自1983年以来 ,沈阳农业大学陆续从国
外引进了 30多个无病毒葡萄抗寒砧木品种或品系 ,经
多年研究试验已筛选出若干优良抗寒砧木系列 ,其中河
岸系列砧木可抵抗-13℃低温 ,且与其他栽培品种嫁接
亲和性强 ,是有望成为替代贝达的抗寒砧木。利用组织
培养技术 ,建立高效的快繁体系 ,加速其推广应用。
1　材料与方法
1.1　无菌苗的建立
试材选用河岸系列砧木 1-3号 ,取自沈阳农业大学
葡萄试验园。于2007年 1月将休眠枝进行温室沙培 ,待
长出 3 ～ 5片叶时 ,用无菌剪剪去大叶 ,用自封袋封好迅
速带回实验室。用饱和洗涤剂溶液浸泡 10min ,再用水
冲1 ～ 2 h ,在超净工作台上用无菌工具把茎段上的苞片
剥去 ,放入无菌三角瓶 ,75%酒精浸泡20 s ,再用2%升汞
浸泡 6 ～ 8min ,无菌水冲洗 5 ～ 8次 ,用灭过菌的滤纸将
水吸干 ,将伤口处剪断 ,将单芽茎段接入经高温灭过菌
的培养基中。每处理25个茎段 ,3次重复。接种后置于
2支40 W 的日光灯下(光强 2 000 ～ 2 500 lx),光照
16 h/d ,培养室温度(24±1)℃。
1.2　试验设计
MS 为基本培养基 , 以细胞分裂素与生长素
10∶1配比 ,添加琼脂 6 g ·L-1 ,白砂糖 30 g ·L-1 ,灭菌
前pH 值调至 5.8。设置 6种激素组合 ,观察不同生长
素种类和 6-BA配比对试管苗的影响。A1 :0.5mg ·L-1
6-BA+0.05mg·L-1 IAA;A2 :0.5 mg · L-1 6-BA +
0.05 mg ·L-1 NAA ;A3 :0.5 mg · L-1 6-BA +0.05
mg ·L-1 IBA;A4 :1.0 mg · L-1 6-BA +0.1 mg ·L-1
IAA;A 5 :1.0mg·L-1 6-BA +0.1 mg ·L-1 NAA;A 6:
1.0mg·L-16-BA+0.1 mg ·L-1 IBA ,每种培养基接种
25个外植体 ,3次重复。45 d后调查成苗、生根 、愈伤及
侧芽萌发情况。
以 MS为基本培养基 ,添加琼脂 6 g ·L-1 ,白砂糖
30 g ·L-1 ,灭菌前 pH 值调至 5.8 ,设置 8种激素组合:
B1 :6-BA 0.5 mg/L +NAA 0.05 mg/ L;B2 :KT 0.5
mg/L+NAA 0.05mg/ L;B3 :ZT 0.5 mg/L +NAA 0.05
mg/L;B4:6-BA 1.0mg/L;B5 :KT 1.0 mg/ L;B6 ZT 1.0
mg/L;B7 6-BA 1.0 mg/L +KT 0.5 mg/L;B8 :KT 1.0
mg/L+ZT 0.1 mg/ L。
1.3　数据统计
成苗率=成苗数/接种数×100%,生根率=生根
数/接种数×100%,褐死率=褐死数/接种数×100%,侧
芽萌发率=侧芽萌发数/接种数×100%。
2　结果与分析
2.1　不同生长素对河岸葡萄试管苗生长的影响
用茎段作为外植体接种到MS基本培养基 ,添加不
同生长素 IAA 、NAA 、IBA 0.05mg/L 与6-BA 1.0mg/ L
组合 ,调查外植体萌发和生长发育情况 ,结果表明:组合
A 145 d成苗率为 66.31%;A 245 d成苗率为 66.05%;
A 3 59.74%,接种于 IAA 0.1mg/L +6-BA 1.0 mg/L组
合的外植体叶片深绿健康 ,45d成苗率最高 ,外植体平均
7 ～ 9 d芽变绿膨大 ,45 d试管苗展叶 3 ～ 5片;侧芽萌发
率A1 >A 2>A 3 ,如表1所示最高侧芽萌发率为22.22%,
说明 IAA 0.1 mg/ L+6-BA 1.0 mg/L 组合的增殖系数
最高(图1),其次是 NAA和 IBA;A2茎段基部愈伤生成
率最高达 42.20% ,显著高于 A1和 A3的 10.52%和 7.
79%,说明NAA诱导愈伤组织的效果最好 ,明显高于 IBA
和 IAA;NAA诱导的茎段基部膨大形成疏松的白色愈伤
组织 ,生长迅速 ,少数茎段基部为绿色致密的愈伤组织 ,且
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·试验研究· 北方园艺 2008(3):21～ 23
愈伤组织的形成不影响上部芽的生长;IAA和 IBA诱导
的茎段愈伤组织一般为致密浅绿色 ,愈伤组织生长缓慢。
　　表 1　不同生长素对河岸葡萄试管苗生长的影响
处理
组合
6-BA
/mg ·L-1
IAA
/mg ·L-1
NAA
/mg·L-1
IBA
/mg ·L-1
45d成苗
率/%
生根
率/ %
基部愈
伤率/ %
侧芽萌
发率/ %
A1 1.0 0.1 - - 66.31 0 10.52 22.22
A2 1.0 - 0.1 - 66.05 0 42.20 19.29
A3 1.0 - - 0.1 59.74 0 7.79 16.67
A4 0.5 0.05 - - 65.33 30.67 0 0
A5 0.5 - 0.05 - 53.33 46.67 24.00 0
A6 0.5 - - 0.05 57.33 26.67 0 0
图1　不同培养基侧芽萌发情况
注:图 A:MS+IAA 0.1 mg/ L+6-BA 1.0 mg/ L;
图B:MS+6-BA 0.1 mg/ L+KT0.5 mg/ L。
　　表 2 不同细胞分裂素与生长素组合对河岸葡萄试管苗生长的影响
处理 20 d萌发率/ % 褐死率/ % 基部愈伤生成率/ % 侧芽萌发数/个 45 d增殖系数 45 d苗高/ cm 45 d生根率/ %
B1 60 0 42.20 19.29 3.46 3.90 46.67
B2 21.57 37.25 15.68 0 1.01 0.29 23.53
B3 90 0 70 20 3 3 15
B4 76.67 5.00 0 41.67 3.02 2.27 0
B5 39.13 34.78 0 0 1.24 1.12 0
B6 81.40 2.32 18.60 23.25 3.11 2.71 0
B7 90 0 0 50 2.80 2.27 0
B8 80 0 0 0 2.64 2.40 3.33
2.2　不同细胞分裂素和生长素浓度组合对河岸葡萄试
管苗生长的影响
　　选用 2种浓度配比 6-BA 1.0 mg/L+(IAA 、NAA 、
IBA)0.1 mg/L 和 6-BA 0.5 mg/ L+(IAA 、NAA 、IBA)
0.05mg/L ,如表 1所示 ,A4 、A5 、A6 45 d成苗率分别为
65.33%、53.33%、57.33%,A4 >A6 >A5但均低于相同生
长素的 A1 、A2 、A3 ;生根率 A5 >A4 >A6 , 说明 6-BA
0.5mg/L 加生长素0.05mg/ L有利于茎段基部生根;基
部生成愈伤的只有A5为24%,加入 IAA 、IBA 0.05mg/ L
与6-BA 0.5 mg/L 组合不能诱导愈伤组织的形成;A4 、
A5 、A 6的侧芽萌发率均为0。
2.3　不同细胞分裂素与生长素组合对河岸葡萄试管苗
生长的影响
　　由表 2看出B3培养基的外植体 20 d萌发率最高达
90% ,B1和B3培养基为 60% 、21.57% ,明显低于B3 ,说
明加入 ZT 有利于苗的萌发和生长 ,外植体 1周左右即
萌发 ,而 B1培养基虽然萌发率低于 B3 ,但其外植体生根
率高于B3培养基 ,可诱导外植体一次成苗;KT 诱导的试
管苗萌发较晚 ,且萌发后嫩茎逐渐褐化死亡 ,生长的苗
叶片边缘褐化 ,褐死率为 37.25%,生长缓慢 ,增殖系数
低;加入生长素 NAA 茎段基部生成愈伤 ,由愈伤生成
根 ,但 B3培养基愈伤生成率 70%,萌发率为 90%,表明
生成愈伤和根不影响芽的萌发。
2.4　单独用细胞分裂素对河岸葡萄试管苗生长的影响
单独使用细胞分裂素 6-BA ,葡萄试管苗叶片浅绿 ,
叶小 ,茎较粗 ,萌发率为 76.67%,侧芽萌发率为41.67%,
增殖系数为 3.02;而单独使用ZT 试管苗颜色正常 ,叶片
中等 ,萌发率为 81.40%,侧芽萌发率为23.25%,增殖系
数是 3.11 ,说明6-BA能有效抑制试管苗的顶端优势 ,促
进下部侧芽萌发 ,可提高增殖系数 ,但试验中侧芽只萌
动或抽生一节的较多 ,真正抽节生长能继续增殖的较少
(图 1)。单独使用 KT 成苗率增殖系数均较低。
2.5　附加2种细胞分裂素对河岸葡萄试管苗生长的影响
如表 2所示 ,添加 6-BA 1.0 mg/ L+KT 0.5mg/ L
的外植体萌发率为 90% ,高于单独使用一种细胞分裂
素 6-BA或KT;B8培养基ZT 浓度仅为 0.1 mg/L 但萌
发率却为 80%,表明作用效果ZT>6-BA>KT。
3　讨论与小结
试验研究了不同植物激素种类和配比对葡萄抗寒
砧木河岸品系的影响 ,结果表明:ZT 0.5 mg/L +NAA
0.05 mg/ L为最佳增殖培养基。植物激素作为外源物质
在组织培养中是必不可少的 ,它通过调节外植体的内源
激素比例来促进试管苗的生长发育 ,不同的激素种类和
比例对不同材料是有差异的 ,研究通过选用不同生长素
和细胞分裂素种类和比例选出适宜于葡萄抗寒砧木河
岸葡萄的最佳激素种类[ 1-3] 。
以河岸葡萄茎段作为外植体的培养中 ,生长素 IAA
0.1mg/L与 6-BA 1.0mg/L 组合试管苗成苗率最高 ,侧
芽萌发率也最高。而最佳的一次成苗培养基为 IAA
0.05 mg/ L+6-BA 0.5 mg/L ,诱导愈伤组织的最好生长
素为 NAA ,生根诱导最佳生长素为 IBA。虽然 NAA诱
导生根率最高 ,但由于其生根方式是先形成愈伤组织 ,
对移栽不利 ,这与前人试验一致[ 4-5] ,用 IBA诱导一次成
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北方园艺 2008(3):21～ 23 ·试验研究 ·
高压脉冲电场对茄子陈种子萌发影响
迟 燕平1 , 殷 涌光1 , 韩玉 珠2
(1.吉林大学 生物与农业工程学院 ,吉林长春 130022;2.吉林农业大学园艺学院,吉林长春 130118)
　　摘　要:利用主成分分析和二次通用旋转组合试验方法研究了高压脉冲电场对茄子陈种子
萌发的影响。结果表明:高压脉冲电场可以促进茄子陈种子萌发 ,尤其是可以明显提高种子的发
芽势。通过分析建立场强和时间对于发芽综合指标(Y)的数学关系模型Y =127.40400+
4.85051X1 +2.98890X2 -10.63825X21 -5.87325X22 ,得出场强为 6.50 kV/cm ,作用时间为200 s效
果最好。
关键词:高压脉冲电场;茄子陈种子;萌发
中图分类号:S 641.104+.1　文献标识码:A　文章编号:1001-0009(2008)03-0021-03
　　种子生活力的高低除了受遗传因子的控制外 ,环境
因素对其影响也十分重要 ,特别是外界电磁场对生物体
的影响越来越受到重视[ 1-2] 。我国从 20世纪 90年代开
始对生物学与静电技术这一交叉领域做了大量研究 ,并
第一作者简介:迟燕平(1971-), 女, 吉林省吉林市人 ,在读博士,
主要从事陈种子利用方面研究。E-mail:daping 2002@sohu.com。
收稿日期:2007-09-18
取得了较多的研究成果。很多试验结果都证明静电场
对生物体 ,尤其对一些农作物和种子有明显的效应。内
蒙古大学梁运章先生采用静电场处理甜菜种子 ,其含糖
量提高 0.6度 ,产量提高 7%左右 ,创经济效益近亿
元[ 3-4] 。南京农业大学的康敏等人采用 10 kV/cm 的正
静电场处理番茄及小青菜种子 ,可使番茄出苗数增加
30%,产量增加 99.1%;小青菜出苗数增加 33.4%,产量
增加 18.3%[ 5] 。高伟娜用高压静电场处理水稻陈种子 ,
苗 ,茎段基部组织致密 ,直接生根 ,生根效果好。
不同细胞分裂素对外植体的作用不同 ,试验应用
KT 、6-BA 、ZT 单独使用 ,以及与生长素配合使用来调查
河岸葡萄砧木试管苗的生长及增殖情况 , ZT 0.5
mg/ L+NAA 0.05 mg/L 和 6-BA 1.0 mg/L +KT 0.5
mg/ L萌发率可达 90%;6-BA和KT 组合诱导侧芽萌发
较好 ,可达50%;单独使用6-BA也能达到41.67%;不使
用6-BA而添加KT 1.0 mg/ L+ZT 0.1mg/L ,侧芽萌发
率为 0 ,可见 6-BA能打破顶端优势 ,促进侧芽萌发 ,提高
增殖系数 ,但不加生长素单独使用细胞分裂素的培养基
的试管苗叶片较小 , 浅绿色 , 茎较粗壮 , 如 6-BA
1.0mg/L 、6-BA 1.0mg/L+KT 0.5 mg/L;ZT 0.5 mg/L+
NAA 0.05mg/L处理的试管苗生长正常 ,叶片深绿 ,大小
适中 ,为最佳增殖培养基。
参考文献
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响[ J] .河北科技师范学院学报 ,2006 ,20(3):17-21.
Effect of Plant Growth Regulator on the Growth of Vitis Riparia in Vitro
ZHAO Yu , GUO Xiu-wu
(College of Ho rticulture , Shenyang Agriculture University , Shenyang , Liaoning 110161 , China)
Abstract:Vitis Riparia was used as tissue culture materials in this paper.The results indicated that the medium with
auxin IAA had the best effects than with NAA and IBA;The highest bud germination were obtained when explants were
incubated on MS media with ZT 0.5 mg/ L +IAA 0.05 mg/L , it reached 90% , and the health shoots in vitro.
Keywords:Plant grow th regulator;cVitis Riparia;In vitro shoots
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