全 文 ：药
A C ta
学 学 报
P ha r ma u e et ia eS in ia e1 9 8 6 , 2 1 ( 3 ) : 1 8 3~ 18 6
东北鹤虱果实中抗菌活性成分的研究
王秀纯 裴月湖 李 铣 朱廷儒
(沈阳药学院 , 沈阳 )
` 提要 自紫草科植物东北鹤虱 L a 夕刃嘛 a e c h伽at a iG l jb . 果实中分离出十六种化合物 。 其中 晶
X l l l ( 一 )一绿花倒提壶酸 ( (一 ) 二 v i r i d i r l o r i e a e记 )为一新的天然产物 , 晶 X v l为一新醋贰 , 对香
豆酸一 a ~ L 一鼠李咄喃糖试〔 1一 ( p 一 e o u m a r o y l )一 a 一 L 一 r h a m n o p y r a n o s e 〕。 并鉴定其它八种化合物为棕
搁酸 J 、 尿囊素 111、 腺嗓吟 V l 、 腺式 V l 、 L 一亮氨酸 X 、 L 一撷氨酸 X l 、 L 一酪氨酸 X l 和唬拍酸
X V
。
I
、
V l
、
X l l l
、
X V 和 X V I 显示 T 不同程度的抗菌活性 。
关键词 东北鹤虱 ; 抑菌活性 ; (一 )一绿花倒提壶酸 ; 对香豆酚 一 a 一 L 一鼠李 n比喃糖贰
东北鹤虱 L a夕夕嘛 a 。。从 n at a G il b . 为紫草科鹤虱属植物 ,俗称赖毛子 、 粘珠子 , 广泛分
布于我国华东 、 东北等地 。 其果实在东北地 区代中药鹤虱 (菊科天名精果实 )人药 , 用于驱肠
道寄生虫 ( ` ’ 。 近年来临床用该果实制剂防治痔疮术后感染效果 良好 , 体外抑菌试验表明该药
对金黄色葡萄球菌 、 绿脓杆菌和大肠杆菌等有较强的抑制作用 。 东北鹤虱果实的化学成分除
油脂分析外 , 其余未见报道 。 我们以体外抑菌活性为指标 , 对东北鹤虱果实的成分进行了分
析 , 共分得十六个化合物 。 通过理化常数比较 、 光谱数据分析 , 鉴定其中八个化合物分别为
棕搁酸 I 、 尿囊素 111 、 腺嘿吟 V l 、 腺昔 V H 、 L 一亮氨酸 X 、 L 一撷 氨 酸 X l 、 L 一酪氨 酸 x l
和唬拍酸 X V 。 晶 X l l l 为首次在天然界发现的 (一 ) 一绿花倒提壶酸 ( (一 ) 一 v i r i d i f l o r i e a e i d ) 。
晶 X V I 为一新的醋戒 , 对香豆酞 一 。 一 L 一鼠李咄喃糖试 ( 1一 ( p 一 e o u m a r o y l ) 一 a 一 L 一 r h a m n o p y r a -
双 o s e ) 。
C O O H
1
H O一 C 一 C H ( C H: ) :
1
H O一 C一 H
尹沁眼
C H
3
X 11 1
晶 x I H 为无色针晶熔点 1 40 ~ 1 4 2℃ , 与三氯化铁一铁氰化钾试剂反应阴性 , 加热后则
呈蓝色斑点 。 澳 甲酚绿反应及过碘酸反应阳性 。 红外光谱中有一 C o O H 吸收 ( 3 3 0 0~ 2 5 0 ,
1 7 0 0 e m
一 , )
。 ’ H 核磁共振谱表明尚有一 C H ( C H s ) 2 ( d 1 . 9 9 , m , I H , J = 7 H z ; 占 0 . 8 4 , d ,
!
石 H , J = 7 H z )和一 C H一 C H 3 ( d 3 . 8 , q , I H , J 二 6 H z ; 占 2 . 0 9 , d , 3 H , J 二 6 H z ) 基团 。
, 3C 核磁共振谱共有六个峰 : d 1 4 . 8 , 1 6 . 3 , 3 1 . 3 , 6 5 . 9 , 8 1 . 8 , 1 7 3 . 9 ( C D 3 C O C D 3 ) 。 其 中
“ 8 · 9 表明 C ” 3一于” 一中亚甲基碳与氧原子相连接’ : C “ 3一斤” 一 ` 8 ` · 8 吸收峰表明梭基 的
0 H
!“ 碳一 L应连有经基 : 一甲一 oC o “ 。 质谱 m /“ 6 2 `M + , 改变电离电压后“组出 ’ , “ 8 ( 6 ”% ,
O H
’
本文于 19 85 年 3 月 4 日收到
DOI : 10. 16438 /j . 0513 -4870. 1986. 03. 005
药 学 学 报 12卷
,
M + 一 C 0 2 ) , 1 0 3 ( 1 0 0% , M + 一 C 0 2一 C H 3 ) 。 由此可得分子结构 C H 3一 C H O H一 C O H一 C O O H 。 .
}
C H ( C H 3 ) 2
·
X n l 的理化性质与上述结构的 2 5 , 3 5 一异构体一致 ` 2 , “ , , 故鉴定为 2 5 , 3 5 一 2 , 3一二羚基一 2 -
异丙基丁酸即 (一 ) 一绿花倒提壶酸 ( ( 一 ) 一 vi r id if fo r ic ac id ) 。 迄今为止在天然界发 现 的该酸
均为与咄咯里西嚏类生物碱结合成醋的形式存在 ( 4 , “ ’ , 自植物中分到游离酸尚属首 次 。 虽在
提取过程中使用了酸 , 但对该果实的丙酮提取液的薄层层析和纸层析鉴定结果均直接检出了
游离的 ( 一 ) 一绿花倒提壶酸 。 文献亦有报道该类醋对酸稳定 ( 5 ’ 。
晶 X V I 为无色棱柱状结 晶双熔点 8 2~ s 3 O e 和 2 5 8~ z g o o C 。 M o l i s h 反应 及 三 氯化铁反
应阳性 。 场解析质谱得分子量为 3 2 0 。 红外光谱 2 6 5 5 , 1 6 3 5 , 2 6 0 2 , 1 5 7 5 , 1 5 1 0 , 9 5 0 , 5 2 5
e m
一 , 吸收峰及 ` H 核磁共振谱 J 6 . 3 5 ( d , z H , J = 1 6 H z ) , 7 . 6 7 ( d , i H , J = 1 6 H z 大和 7~
7
.
8 ( A A
’ B B, 系统 )吸收峰表明有对一香豆酞基 。 质谱中 1 4 7 ( 1。。% ) 峰及 ’ H核磁共振谱 1 . 20
( d
, 3 H )峰为鼠李糖基信号 。 将 x v l 分别用酸和碱水解 , 在两种水解液中检查出了对一香豆
酸和鼠李糖 , 因此 X v l 为对香豆酸和鼠李糖结合成的醋试 。 分子量 3 10 , 所 !柳觉元与糖应为
1 :1 结合 。 晶 X V I 的红外光谱中在 1 0 1 0~ 1 1 0 0 c m 一 ` 区间有三个吸收峰以及 ’ H 核磁共振谱
中 d 5 . 5 6 ( d , I H , J = Z H z )的特征信号 , 表明 X V I 是一个毗喃型醋试 ` 6 , 。 克分子比旋度与
a 一 L一鼠李糖 甲贰相近 , 故为 a 贰键 。 所以 X V I 为对香豆酞一 a 一 L 一鼠李咄喃糖试 。
上述十个化合物对金黄色葡萄球菌 、 绿脓杆菌 、 大肠杆菌的体外抑菌试验结果表明 , 棕 `
搁酸 、 腺嘿吟 、 墟拍酸 、 ( 一 ) 一绿花倒提壶酸和对香豆酸 一 a 一 L 一鼠李咄喃糖贰均具 有 不同程
度的抗菌活性 。
实 验 部 分
熔点用 K of l e r 熔点测定器测定 (未校正 ) 。 红外光谱用 P E 5 9 9 B 型和 IR 一 27 G 型红外分 ·
光光度计测 .得 ( K Br 压片 ) 。 核磁共振谱用 F X 一 60 Q 型和 P E 一 R 32 型核磁共振光谱 仪 ( T M S
内标 ) 。 旋光值用 P E 2 41 型旋光仪测得 。 质谱用 JM S D 3 0 0一 JM A 2 0 0 0 色谱质谱仪 。 柱层析
用硅胶系上海五四农场产品 , 柱层析用聚酸胺为中国人民解放军八三 三 O 五 部队 7 01 厂产 -
品 。
(一 ) 有效部分的分离
东北鹤虱果实粗粉石油醚脱脂 , 水煎 。 水煎液浓缩后依次用乙醇沉淀 ( A ) 、 酸沉淀 ( B )
(P H Z )
, 酸水液调至中性后分别用乙酸乙醋 ( C ) 、 正丁醇 ( D )萃取 。 残水液再调至 p H Z , 继
用乙醚 ( E ) 、 乙酸乙醋 ( F )和正丁醇 ( G )萃取 。 抑菌试验表明 B , D , E , F 为抗菌活性部分 。
酸沉淀物 ( B ) 45 9 用硅胶柱分离 , 依次以不同比例石油醚一二氯 甲烷 , 二氯甲烷一乙酸 _
乙醋洗脱 。 分别在 5% 乙酸乙醋一二氯甲烷和乙酸乙醋洗脱液中得到晶 I ( 20 m g )和晶 n ( 2。。
m g )
。
正丁醇萃取物 ( D )浓缩后析出淡黄色沉淀物 ( D a 12 9 ) , 母液继续浓缩 , 放置得粘稠状物
( D b 7 9 )及母液浓缩物 ( D c 10 9) 。 D a 以聚酞胺柱分离 , 用不同比例的乙酸乙 醋一 95 % 乙醇
洗脱 , 分别在 比例为 8 : 2 和 7 : 3 洗脱部分中得晶 111 ( 6 0 m g )和晶 I V ( 20 m g ) 。 D b 部分以硅 二
胶柱分离 , 用不同比例的氯仿一乙酸乙醋一 甲醇洗脱 , 分别在比例为 20 : 1 : 1 , 1 0 : 1 : 1 , 20 :
2 : 3 和 2 8 : 3 : 4 洗脱部分中得到晶 V ( 20 m g ) , 晶 V l ( 4 0 m g ) , 晶 V l l ( 2 0 m g ) , 和 晶 V l l l ( 2今
功 g) 。 D 。 部分以硅胶柱层析 , 用不同比例的氯仿一 甲醇洗脱 。 分别在比例为 1 0 : 1 洗脱液中·
3期 药 学 学 报
得 J f I晶 I X (2 0 m g) , 2 : 8 洗脱液中得到晶 X ( 3 0 m g ) , 晶 X l ( 20 m g )和晶 X l l ( 4 0 m g ) 。
乙醚提取物 ( E )拌以适量硅胶 , 在沙氏提取器中依次用乙醚 、 乙奋酸乙醋 、 乙醇和甲醇提
取 。 将活性最强的乙醚提取部分用聚酞胺柱分离 , 以不同比例的二氯甲烷一乙酸乙醋, 、 乙酸 :
乙醋一 甲醇洗脱 , 分别在 60 % 乙酸乙醋一二氯 甲烷和 1% 甲醇一乙酸乙醋洗 脱 液 中得到晶
X l l l ( 3 0 0 m g )和晶 X I V ( 1 5 m g ) 。
乙酸乙醋萃取物 ( F )用硅胶柱层析 , 以不同比例二氯甲烷一乙酸乙醋洗脱 , 分别在比例
为 3 : 7 和 7 : 3 洗脱部分中得到晶 X V ( 1 9 )和晶 X V I ( 5 0 m g ) 。
(二 ) 化合物的鉴定
棕搁酸 ( I )熔点 6 1~ 6 1 . 5 OC ; 尿囊素 ( I l x ) ,无色棱柱状结晶熔点 2 3 8~ 遵o o C ,统拍酸 ( X V )
无色针状结晶熔点 1 86 ~ 1 8 8℃ , 红外光谱均与标准品一致 , 混合熔点不变 。 棕 搁 酸用三氟 .
化硼甲醇液 甲醋化 , 经气相色谱分析 , 保留时间与标准品一致 。
腺嘿吟 (V )I 白色粉末状结晶 2 2 0℃升华 。 腺昔 ( V l l) 无色针状结晶熔 点 2 34 ~ 2 3 6℃ ,
「a 〕D 一 6 1 . 4 。 ( c , 0 . 2 1 1 5 , 水 ) 。 二者红外光谱和 ` H 核磁共振谱均匀标准品一致 。
L
一亮氨酸 ( X ) 、 L 一撷氨酸 ( X l ) 、 L 一酪氨酸 ( X H )熔点及比旋光度均与文献值一致 , 红外
光谱与 S a dt l e r 标谁图谱相符 。
( 一 ) 一绿花倒提壶酸 ( X l l l )无色针晶熔点 1 4 0~ 1 4 2 “ C (石油醚一乙醚 ) , 〔a 〕D一 0 . 4 。 ( C ,
0
.
5 0 0 , 乙醇 ) 。 马钱子碱盐熔点 2 0 7~ 2 1 0 o C (乙醇 ) 。 红外光谱 v e m 一 , 3 4吐s , 3 3 0 0 , 3 3 0 0~ ,
2 5 0 0 , 1 7 0 5 , 1 2 5 0 , 1 1 6 0 , 1 0 8 5 , 1 0 0 0 , 9 0 0 , 7 4 2
。 核磁共振 ( D M S O 二 d 6 ) d 0 . 8 4 ( d , 6 H , J ·
= 7 H z )
, 1
’ .
0 9 ( d
, 3 H , J二 6 H z ) , 1 . 9 9 ( m , I H , J = 7 H z ) , 3 . 5 0 ( q , I H , J = 6 H z ) ,
4
.
9~ 7
.
9 ( b r
, 3 H )
。 低分辨质谱 m / z (% ) 1 6 2 ( M + , 改变电离 电压后测得 ) , 1 2 8 ( 7 0 ) , 1 0 3,
( 1 0 0 )
, 8 5 (吐。 ) , 4 5 ( 6 0 ) , 与标准图谱相符 。
对香豆酞 一 a 一 L 一鼠李咄喃糖试 ( X V I ) 无色棱柱状结晶 , 双熔点 81 ~ 83 1 8 8~ 1 9 0 OC
(氯仿一 甲醇一丙酮 ) 。 「a 〕。 一 1 2 7 . 5 “ ( C , 0 . 1 3 5 4 , 乙醇 ) 。 质谱 ( F D ) m / e (% ) 3 2 0 (M 十 , 2 8 . 6 ) ,
1 6 4 ( 2 8
.
6 )
, 1 6 3 ( 6 4
.
4 )
,
1 2 4 0 , 1 0 7 0
,
1 0 2 5 , 9 8 0
1 4 7 ( 1 0 0 ) 红外光谱 m 一 l 3 4 0 0 , 1 6 8 5 , 1 6 3 5 , 1 6 0 2 , 1 5 7 5 , 1 5 1 0
9 2 0 5 2 5
。 ’ H
一核磁共振谱 ( 6 0
J = 7 H z )
, 3
.
6 1~ 4
.
0 5 ( m
, 糖上质子 ) , 5 . 5 6 ( d , I H ,
7
.
6 7 ( d
, I H , J = 1 6 H z )
, 7~ 7
.
5 ( A A
` B B `系统 ) 。
M H z
,
C D 3C O C D 3 )占 1 . 2 0 ( d , 3 H ,
J二 2 H z ) , 6 . 3 5 ( d , I H , J = 1 6 H z ) ,
晶 ( X V )I 的酸和碱水解 X V I 分别用 5% N a 0 H 和 6% H C I水解 20 分钟后 , 酸水解液及 .
碱水解液酸化后分别用乙醚提取 。 醚提液的薄层层析 (氯仿一甲醇一乙酸 45 : 8 : 4 ; 乙酸乙醋
一乙酸 95 : 5) 和纸层析 (水饱和的苯酚 ; 正丁醇一乙酸一水 4 : 1 :5 上层 ) 碱性高锰酸钾 (红色
背景白色斑点 )及三氯化铁 (黄色斑点 ) 呈色 , 均只显单一斑点 , 其 R f 值与反式对一香豆酸标 .
准品一致 。 醚提取后的酸水解液按常法处理后经纸层析 (正丁醇一乙酸一水 :4 1 : 5止层 ; 水 .
饱和的苯酚 ; 丙酮一水 9 : 1 ) , 邻苯二 甲酸一苯胺试剂显色 , 鉴定与鼠李糖标准品 R f 值一致 、
( 0
.
3 5 , 0
.
2 3 , 0
.
1 6 )
。
致谢 本院郭允珍副教授鉴定生药材料 。 南京药学院赵守训教授惠赠尿囊素标淮品 , 辽宁省药物研究
所植化室惠赠腺昔标准品 。 辽宁省理化测试中心和本院仪器分析室 、 药分研究室代测光谱 。 本室徐素华老
师代做抑菌实验
1 86药 学 学 报1 2卷
参 考 文 献
1
.江苏新医学院 .中药大辞典 .第一版 .上海人民出版社 , 19 7 : 2 6 2 9 .
2
.
C r o w l e y H C
, e t a l
.
T h e a lk a l o i d s o f H e l苏o t r o夕 i左砚 s 路刃落招 . 叨 L , , w i t h o b s e r v a r i o n s o n v i r i d i f l o r i c a e id
A “ s t J C h e饥 1 9弓9 ; 12 : 6 9 4 .
3
.
D r y L e o n a r d J
, e t a l
.
T h e s e n e e i o a l k a l o id s
.
P a r t I X
.
t h e s y n th e s i s a n d r e s o l u t i o n o f 3
,
4
一
d i h y d r o x y 一 2-
m e t h y l P e n t a n e
一 3一 e a r b o x y l i e a e id s : v i r id i f l o r i e a n d t r a e h e l a n t i e a e id
.
J C h e饥 S o c 1 9 5 2 ; ( 5 ) : 3 4 4 5 .
d
. 林启寿 . 中草药成分化学 。 第一版 。 北京 : 科 学出版社 , 1 9 77 : 6 9 1一 69 .2
5
.
D
` s i l v a J B a n d N o t a r i R E
.
K i n e t i e s a n d m e e h a n i s m s o f a q u e o u s d e g r a d a t i o n o f th e a n t i e a n e e r a g e n t
,
i n d
-
i e i n e N
一 o x id e
.
I 介 t J P h a 了饥 1 9 8 1 ; 8 : 4 5
6
. 林启寿 . 中草药成分化学 . 第一版 . 北京 : 科学出版社 , 19 7:7 12 .6
气
S T U D I E S O N T H E A N T I B A C T E R I A L
T H E F R U I T O F L A P P U L A E C H
C O N S T I T U E N T S I N
G I L I B
W A N G X i
u 一C h u n
,
P E I Y u e 一 H u , L l X i a n a n d Z H U T i n g 一 R u ( T
.
R
.
Z H U )
(邃左e n y a 儿 9 C o l l e君 e o f p 几a 犷饥 a c y , 召h e 那 , a ” g )
A B S T R A C T S i x t e e n e o n s t i t u e n t s ( I~ X V I ) w
e r e i s o l a t e d f r o m t h e f r u i t
.
o f
L a刃夕舰 l a e c h艺n a t a G i l i b 二 E i g h t o f t h e m w e r e i d e n t i f i e d a s P a lm i t i e a e i d ( I ) , a l l a n t o i n
( 1 11)
, a d e n i n e ( V l )
, a d e n o s i n e ( v l l )
,
L 一 l e u e i n e (X )
,
L 一 v a l i n e ( X l )
,
L : t y r o s i n e ( X l l )
,
a n d s u e e i n i e a e i d ( X V )
.
(
一
)
一 V i r i d i f l o r i e a e i d ( X l l l ) w a s f o u n d f r o m n a t u r a l r e s o u r e e
f o r t h e f i r s t t i m e
.
A l l o f t h e m w e r e f i r s t r e P o r r e d t o o e e u r i n t h e L a P P u l a g e n u s
.
A n e w e o m P o u n d
,
1 一 ( P
一 e o u m a r o y l )
一 a 一 L 一 r h a m n o P y r a n o s e ( X V I )
,
w a s e l u e i d a t e d o n
t h e b a s i s
、 o f s P e e t r a l d a t a a n d e h e m i e a l e v i d e n e e
.
A n t ib a e t e r i a l e x P e r i m e n t s h o w e d
t h a t e o m P o u n d s l
,
V l
,
X l l l
,
X V a n d X V I w e r e a l l a e t i v e
.
S t r u e t u r e d e t e r m i n a t i o n
一
o f t h e o t h e r e o m P o u n d s 15
K e y w o r d s
·
(
一
)
一
V i r id i f l o r i e
L 件夕夕倪 l a
s t i l l u n d e r w a y
.
e c h艺n a t a G i l ib : B o r r a g i n a e e a e : A n t i b a e t e r i a l e o n s t i t u e n t s ;
a e i d ; 1
一
( P
一
C o u m a r o y l )
一 a 一 L 一 r h a m n o Py r a n o s e