全 文 ： 中国民族医药杂志 2009年 5月第 5期
匀 , 滤过 ,取续滤液用微孔滤膜(0.45μm)滤过 ,精密吸取该
溶液与对照品溶液各 10μl, 注入高效液相色谱仪 , 依法测
定 , 结果见表 5。
表 4 重复性实验结果
样品量(mg) 含量(mg/g) X RSD%
153.7 10.675 10.666 10.881
152.0 10.401 10.456 10.492
153.7 10.800 10.838 10.918 10.657 1.80
152.5 10.773 10.876 10.728
151.9 10.476 10.410 10.463
表 5 森登四味胶囊栀子苷含量测定结果
批号 栀子苷含量(mg/粒) X RSD(%)
010222 2.72 2.72 2.82 2.81 2.72 2.77 1.76
020405 2.70 2.69 2.72 2.74 2.71 2.71 0.71
010419 3.14 3.34 3.45 3.42 3.40 3.40 1.19
010430 2.95 2.84 2.92 2.88 2.95 2.91 1.64
2.2.10 回收率试验:采取加样回收率法 , 精密称定以知含
量的样品约 80mg,置 50ml具塞锥型瓶中 , 精密加入已知浓
度的对照品溶液(0.78mg/ml)0.8、 1.0和 1.2ml, 分别加入
甲醇成 25ml, 称定重量 ,超声提取 40分钟 , 放置室温 , 再称
定重量 , 用甲醇补足减失的重量 , 摇匀 ,滤过 ,取续滤液用微
孔率膜(0.45μm)滤过 , 精密吸取该溶液与对照品溶液各
10μl注入液相色谱仪依法测定 , 计算回收率。 平均回收率
为 100.17%, 相对标准偏差为 2.56%。结果见表 6。
表 6 回收率试验结果
编
号
样重
g
栀子苷
重 mg
加入栀子
苷量 mg
测得量
mg
回收率
% X
RSD
%
1 0.094 1.0020 0.6256 1.6213 98.99
2 0.094 0.9637 0.6256 1.5673 94.48
3 0.080 0.8560 0.7820 1.6692 103.98 100.17 2.56
4 0.090 0.9594 0.7820 1.7751 101.75
5 0.087 0.9242 0.9384 1.8560 99.29
6 0.090 0.9541 0.9384 1.8974 100.53
3 讨 论
3.1 采用本方法测定森登四味胶囊中栀子苷含量 , 方法简
单易行。
3.2 经加样回收试验 、精密度试验 、稳定性及重复性试验
表明该方法准确可靠。
参考文献
〔1〕中华人民共和国卫生部药品标准.蒙药分册 〔S〕.1998.
185.
〔2〕童玉懿.栀子及其他制剂中栀子苷的高效液相色谱分析
〔J〕.中国中药杂志 , 1989, 14(4):36.
2009年 3月 5日收稿
超声波处理法提取蓍草总黄酮的研究
内蒙古自治区中蒙医医院(呼和浩特 010020) 杜 鹃 白音夫 ＊
包头医学院(包头 014010) 常 亮
摘 要:目的:对比研究超声波处理法与加热回流法提取蓍草总黄酮效率。方法:采用单因素比较与正交优选最佳提取方
法。结果:超声波处理法与加热回流法在同等条件下 , 超声波处理提取蓍草总黄酮提取率高于回流提取法。结论:40倍体积
的 60%乙醇 , 超声提取 30min为蓍草总黄酮提取率最佳条件 ,超声处理时间与乙醇浓度同等重要因素 ,大于溶剂量因素。
关键词:蓍草;超声提取;总黄酮
中图分类号:R291.2 文献标识码:B 文章编号:1006-6810(2009)05-0050-02
当前提取中草药有效成分多采用乙醇回流提取法 , 该
方法有提取时间长 、耗能大 、杂质多等缺点。应用超声波提
取中草药有效成分可缩短提取时间 , 提高提取率 〔1〕。本文
比较超声波处理法与传统加热回流法提取蓍草总黄酮的效
率 , 并对超声波处理法提取最佳条件进行优选。
＊白音夫:通讯作者yaohua2@sina.com
1 仪器与试剂
1.1 紫外分光光度计:210型(日本岛津公司);十万分之
光电天平:TG332A型(湘仪制造);超声波清洗仪:AS2060B
型 ,功率 80W, 频率 20KHz(上海科学仪器公司制造)。
1.2 试药:甲醇:色谱纯由美国 Tedai公司生产。芦丁由中
国药品生物制品检定所提供。蓍草由试验人员在内蒙古乌
盟灰腾梁采集 ,并由相关专业人员鉴定。
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DOI :10.16041/j.cnki.cn15-1175.2009.05.043
2009年 5月第 5期 中国民族医药杂志
2 方法与结果
2.1 标准曲线:精密称取干燥的芦丁对照品 10.35mg置
50ml量瓶中 , 加甲醇溶解至刻度 , 分别精密吸取 1、 2、3、 4、
5、6ml溶液置 10ml量瓶中 ,加甲醇至刻度。浓度分别为 0.
0207、0.0414、0.0621、 0.0828、 0.1035、 0.1242μg· ml-1 , 取
3ml用紫外分光计在 400nm波长处测定 ,测定结果分别为 ,
0.086、0.161、0.237、0.321、0.395、 0.480, 回归方程:Y=0.
0044+3.804x, r=0.999。
2.2 不同浓度乙醇对蓍草总黄酮提取率的影响:称取相同
质量蓍草粉末(8目)10份 ,各加 20倍溶剂 ,固定频率 , 按表
1分组提取 ,提取 30min。 结果经超声波处理 , 用 60%以上
乙醇提取 , 蓍草总黄酮提取率可达 8.9%;用加热回流提取 ,
60%以上乙醇提取 , 蓍草总黄酮可达 8.3%。 表明 , 用超声
波处理提取蓍草总黄酮提取率略高于回流提取率。
表 1 不同浓度乙醇对蓍草总黄酮提取的影响
分组 20% 40% 60% 80% 100%
超声波法 7.3% 8.1% 8.9% 8.7% 8.3%
回流法 6.2% 7.3% 8.3% 8.1% 8.4%
2.3 超声波处理时间对蓍草总黄酮提取率的影响:称取相
同质量蓍草粉末(8目)10份 , 各加 20倍 60%乙醇溶液 , 固
定频率 , 按表 2分组 , 提取时间 15、30、 45、 60、 90min。结果
超声波处理 30min蓍草总黄酮可达 8.5%;加热回流提取
30min蓍草总黄酮可达 8.3%。 表明用超声波处理提取蓍
草总黄酮在同等提取时间下可提高提取率。
表 2 提取时间对蓍草总黄酮提取率的影响
分组 15 30 45 60 90(min)
超声波法 7.3% 8.5% 8.5% 8.6% 8.4%
回流法 6.1% 8.1% 8.3% 6.5% 8.5%
2.4 溶剂比例对蓍草总黄酮提取的影响:称取相同质量蓍
草粉末(8目)10份 ,各加 20倍 60%醇溶液 ,固定频率 , 按表
3分组加入溶剂 , 各提取 30min。结果 ,加入溶剂为 1:20, 超
声波法提取 , 蓍草总黄酮提取率均可达 8.4%, 回流法提取
可达 8.5%,表明蓍草总黄酮提取溶剂比例不得低于 1:20。
2种提取方法中 , 增加提取溶剂剂量 ,可小幅度增加提取率。
表 3 溶剂量对蓍草总黄酮提取率的影响
分组 1:10 1:20 1:40 1:60 1:80
超声波法 7.7% 8.4% 8.6% 8.5% 8.4%
回流法 7.0% 8.5% 8.6% 8.7% 8.7%
2.5 提取条件的优化:在单因素考察基础上 ,称取相同质
量的蓍草 9份 , 分别置于 9个锥形瓶中 ,选用 L9(34)正交表
进行优化。结果最佳提取条件为 A1B2C1 , 即在蓍草粉末中
加入 20倍体积的 60%乙醇 , 超声提取 30min,得到的蓍草总
黄酮最多。根据极差分析结果 ,影响蓍草总黄酮提取率的 3
个因素中 ,乙醇浓度影响因素最大 ,其次是提取时间 , 影响
最小的是溶剂量。
表 4 L9(34)正交优选设计及结果
No A超声时间min
B乙醇浓度
%
C溶剂量
ml
D空白
总黄酮
%
1 1(30) 1(40) 1(1:20) 8.6
2 1 2(60) 2(1:40) 8.7
3 1 3(80) 3(1:80) 9.1
4 2(60) 1 2 8.5
5 2 2 3 8.6
6 2 3 1 7.7
7 3(80) 1 3 8.3
8 3 2 1 9.4
9 3 3 2 8.2
K1 26.4 25.4 25.7
K2 24.8 26.7 25.4
K3 25.9 25.0 25.1
k1 0.7 0.3 0.3
k2 0.9 1.0 0.0
k3 0.2 0.7 0.3
R 0.7 0.7 0.3
3 结果讨论
单因素对比研究结果 , 超声波处理法提取蓍草总黄酮
最佳提取条件为:乙醇浓度 60%,提取时间 30min, 溶剂比
例 1:40;加热回流提取法最佳提取条件为:乙醇浓度 60%,
提取时间 30min,溶剂比例 1:60。 表明两种提取条件基本
一致 ,但超声波处理提取蓍草总黄酮同等条件下高于回流
提取法。
提取中加入 20倍体积的 60%乙醇 ,超声提取 30min,蓍
草总黄酮提取率最高。影响蓍草总黄酮提取率的 3个因素
中 ,超声处理时间与醇浓度同等重要因素 , 大于溶剂量因
素。
参考文献
〔1〕王艳 ,张铁军.微波萃取技术在中药有效成分提取中的
应用〔J〕.中草药 , 2005, 36(3):470-472.
2008年 11月 21日收稿
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