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作 者 ：吕颐

期 刊 ：天津医科大学 2006年 09期 页码：56

关键词：结肠平滑肌细胞；原代培养；东北鹤虱；血清药理；钙离子；

摘 要 ：目的:建立离体大鼠结肠平滑肌细胞分离、纯化、原代培养及鉴定的方法,在细胞水平研究东北鹤虱药物血清的平滑肌松弛作用机制。 方法:1.采用混合酶法即胰蛋白酶消化杂细胞,胶原酶Ⅱ消化平滑肌细胞,分次消化、分次收集细胞,配合机械法吹打、过细胞筛得到细胞悬液,用含10%胎牛血清的DMEM液培养细胞,通过台盼兰染色法检查细胞数量及存活率,差速贴壁法纯化细胞,原代培养的细胞绘制生长曲线。2.新分离平滑肌组织常规甲醛固定、石蜡包埋、HE染色鉴定组织纯度,免疫组织化学ABC法用特异性平滑肌肌动蛋白α-actin鉴定原代培养细胞。3.分别用东北鹤虱水提醇沉溶液5g/mL、10g/mL、15g/...

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