全 文 :第 5卷 第 2期 农 药 学 学 报 Vol. 5 No. 2
2003年 6月 CHIN ESE JOURNAL OF PEST ICIDE SCIENCE June 2003
①
南欧丹参花提取物杀菌活性初步研究
麻妙锋* , 吴文君 , 张智芳 , 白红进
(西北农林科技大学 农药研究所 ,陕西 杨凌 712100)
摘要: 采用系统溶剂对南欧丹参 Salvia sclarea L.花进行提取 ,以孢子萌发试验法、抑制菌丝生长速
率法和盆栽试验系统测定了粗提物对植物病原真菌的生物活性。结果表明 ,石油醚为提取南欧丹参
花活性成分的最佳溶剂。石油醚提取物在离体条件下能显著抑制多种供试真菌菌丝的生长 ,其对番
茄灰霉病菌 Botry tis cinerea的 EC50值为 77. 20μg /m L;对盆栽小麦白粉病 Erysiphe graminis的防
护效果为 94. 94% ,治疗效果为 84. 21%。
关 键 词: 南欧丹参 ;杀菌活性 ;生物测定
中图分类号: S482. 292; Q946. 887 文献标识码: A 文章编号: 1008-7303( 2003) 02-0090-04
南欧丹参 Salvia sclarea L. 属唇形科 ( Labiatae)鼠尾草属植物 ,又名麝香丹参、香紫苏 ,原
产地中海 ,于 20世纪 70年代初引入我国 ,在陕西、河南、河北等省栽培 [1, 2 ]。关于南欧丹参的杀
菌活性 ,曾有文献报道其提取物中的硬尾醇 ( Scla reo l)对大豆和小麦的锈病有抑制作用 [3~ 6 ] ,
而对其他病原真菌的作用未见报道。 笔者用南欧丹参花提取物对 7种重要的农作物病原真菌
进行了室内毒力测定及盆栽药效试验。
1 材料与方法
1. 1 供试材料
南欧丹参花: 2001年 7月采自陕北 ,室温阴干备用。
供试病原菌:番茄灰霉病菌 Botrytis cinerea、小麦赤霉病菌 Fusarium graminearum、辣椒
疫霉病菌 Phytophthora capsici、玉米大斑病菌 Exserohilum turcicum、苹果炭疽病菌 Glomerella
cingulata、玉米小斑病菌 Bipolaris maydis、小麦白粉病菌 Erysiphe gram inis。以上菌种由西北
农林科技大学植物保护学院植物病理教研组提供。
盆栽植物:小麦 ,为易感病品种辉县红。
1. 2 南欧丹参花的提取
在室温条件下 ,将阴干的南欧丹参花 ( 500 g )用石油醚、乙酸乙酯、丙酮平行冷浸提取 3 d,
分别将提取液减压浓缩 ,浓缩后的液体置于通风橱内吹干备用 [7, 8 ]。
1. 3 室内杀菌活性测定
1. 3. 1 抑制孢子萌发法 参照文献 [9 ]方法进行。在孢子萌发试验法中 ,当对照的萌发率达到
85%后 ,检查所有处理的萌发率。以孢子萌发后的芽管长度大于孢子短半径为萌发 ,计算抑制
孢子萌发率。
1. 3. 2 抑制菌丝生长速率法 参照文献 [9 ]方法进行。用直尺测量菌落直径 (须十字交叉量取
2次 ,取其平均数 ) ,计算抑制菌丝生长率。
① 作者简介:麻妙锋 ( 1974-) ,女 ,陕西渭南人 ,助教 ,主要从事农药化学研究 .
1. 3. 3 盆栽试验法 供试药液:先将南欧丹参花的石油醚提取物和 95%硬尾醇配成乳油 ,再
以清水稀释 ,浓度均为 100μg /mL。
保护作用测定:将催过芽的易感病小麦种子播种在事先准备好的花盆中 ,等到植株长到三
叶一心时 ,先喷供试样品 , 24 h后接种小麦白粉病孢子粉。每个处理设 3个重复 ,每重复 1盆 ,
同时设喷清水为对照。 7 d后按小麦白粉病的分级标准及文献方法计算病情指数和防治效
果 [9 ]。
治疗作用测定: 先在保湿条件下接种小麦白粉病孢子粉 , 24 h后在植株上喷施供试样品。
每个处理设 3个重复 ,每重复 1盆 ,同时设喷清水对照。7 d后按小麦白粉病的分级标准及文献
方法计算病情指数和治疗效果 [ 9]。
2 结果与分析
2. 1 不同溶剂对南欧丹参花的提取效果
选用石油醚、乙酸乙酯和丙酮 3种极性不同的溶剂对南欧丹参花进行平行提取。提取物在
500μg /mL供试浓度下 ,以番茄灰霉病菌、辣椒疫霉病菌、小麦赤霉病菌、苹果炭疽病菌、玉米
小斑病菌为供试菌种 ,采用抑制菌丝生长速率法测定提取物对 5种供试菌种的杀菌活性。结果
见表 1。
Table 1 Inhibi tion o f samples against the g row th of the hyphae
Samples
Inhibition rate(% )
Botrytis cinerea
Phytophthora
capsici
Fusarium
graminearum
Glomerella
cingulata
Bipolaris
maydis
Pet roleum
ether ex tr act
82. 7 a* 72. 5 a 53. 0 a 64. 0 a 56. 6
Ethy l aceta te
ex tra ct
67. 6 b 58. 3 b 36. 8 c 66. 4 a 0
Acetone ex tra ct 66. 4 b 56. 6 b 45. 5 b 61. 1 a 0
* Th e same column fol low ed b y di fferen t letters are signifi cant ly dif f erent at th e 5% level by Duncan′s Mult iple Rang e
Tes t. Th e same as in th e fol lowing tables.
由表 1可知 ,石油醚提取物室内对番茄灰霉病菌、辣椒疫霉病菌、小麦赤霉病菌的抑制效
果与乙酸乙酯和丙酮提取物有显著性差异 ,石油醚提取物对番茄灰霉病菌的抑制率达 82. 7% ;
乙酸乙酯、丙酮提取物对玉米小斑病菌无抑制效果 ;而三者对苹果炭疽病菌的抑制效果无明显
差异。 因此 ,南欧丹参花的最佳提取溶剂为石油醚。
2. 2 南欧丹参花的石油醚提取物对番茄灰霉病菌菌丝生长的抑制作用
取石油醚提取物 ,以番茄灰霉病菌为供试菌种 ,同时以 95%硬尾醇为对照 ,设置 500、 250、
125、 62. 5和 31. 25μg /mL供试浓度梯度进行抑菌作用的毒力测定 ,结果见表 2。
由表 2可以看出 ,石油醚提取物对番茄灰霉病菌菌丝生长的 EC50为 77. 20μg /mL, 95%
硬尾醇的 EC50为 63. 57μg /mL,石油醚提取物对番茄灰霉病菌菌丝的毒力略低于 95%硬尾
醇。
No 91. 2 麻妙锋等:南欧丹参花提取物杀菌活性初步研究
Table 2 Toxici ty of samples against the g row th of the Botrytis cinerea hyphae
Samples
Reg r ession equation
( y= )
EC50
/μg· m L- 1
Standard er ro r
( SX 50 )
95% Degree of
confidence /μg· m L- 1 X2
Petro leum e the r
ex tract
2. 152+ 1. 509x 77. 20 0. 055 2 48. 24~ 96. 56 0. 659 0
95% Sclar eol 2. 447+ 1. 416x 63. 57 0. 067 3 36. 76~ 90. 98 2. 293
2. 3 南欧丹参花的石油醚提取物对病原菌孢子萌发的抑制作用
以 95%硬尾醇为对照 ,测定了石油醚提取物在 1 000μg /mL浓度下 ,对番茄灰霉病菌、小
麦赤霉病菌、苹果炭疽病菌和玉米大斑病菌孢子萌发的抑制作用。
结果 (见表 3)表明 ,石油醚提取物除对小麦赤霉病菌孢子萌发有一定抑制作用以外 ,对其
余 3种真菌孢子萌发无明显的抑制作用 ,与 95%硬尾醇差异显著。
Table 3 Inhibi tion o f samples against the germina tion o f the spo res
Samples
Inhibition rate(% )
Botrytis cinerea
Fusarium
graminearum
Glomerella
cingulata
Exserohilum
turcicum
Petr oleum ether
ex tra ct
6. 30 b 58. 8 b 20. 2 b 14. 2 b
95% Sclar eol 56. 2 a 100 a 42. 1 a 32. 1 a
2. 4 盆栽试验结果
盆栽防治小麦白粉病试验结果如表 4所示。石油醚提取物和 95%硬尾醇对小麦白粉病都
有良好的防治作用 ,防效均在 80%以上。
Table 4 The ef ficacy of samples against the Erysiphe gram inis
Samples
Relativ e efficacy (% )
Pro tec tiv e effect The rapeutic effect
Petro leum ether ex tract 94. 94 84. 21
95% Scla reo l 86. 37 94. 73
3 讨 论
南欧丹参花的石油醚提取物对 7种重要的农作物病原菌都有明显的生物活性。在离体条
件下能够抑制病菌菌丝的生长 ,尤其对番茄灰霉病菌菌丝的抑制作用最为明显。但在抑制孢子
萌发试验中 ,石油醚提取物比 95%硬尾醇效果低得多 ,其原因尚需进一步研究。 盆栽试验表
明 ,石油醚提取物和 95%硬尾醇在 100μg /mL的浓度下均对小麦白粉病有良好的防治作用。
92 农 药 学 学 报 Vol. 5
参考文献:
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Study on the Fungicidal Activity of
Salvia sclarea Extracted from Its Flowers
M A Miao-feng
* , WU Wen-jun, ZHANG Zhi-fang , BAI Hong-jin
( Institute of Pesticide Science , Northwest Sci-Tech University
of Agriculture and Forest , Yangling 712100,China )
Abstract: The flow ers of Salv ia sclarea w ere ex tr acted with sy stema tic solv ents and the fung icidal activities
w ere tested in v itro and in v ivo. The bio assa y r esults indica ted tha t th e optimal solv ent ex tr acting activ e
components wa s petr oleum ether. It also show ed that the petr oleum e th er ex trac t could ma rkedly inhibit the
va rious mycelia l g row th, its EC50 value against Botry tis cinerea was 77. 20μg /m L. In addition, pr otectiv e
effect and therapeutic effect of the pe tro leum e the r ex tr act ag ainst the Erysiphe graminis we re 94. 94% and
84. 21% , respectiv ely.
Key words: Salvia sclarea; fungicidal activity; bio assa y
No 93. 2 麻妙锋等:南欧丹参花提取物杀菌活性初步研究