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雪梨与鱼腥草联合应用对吸烟大鼠肺部损害模型防治作用的研究



全 文 :第 21卷 第 8期
Vol.21 No.8
2015年 4月
April.2015Guiding Journal of Traditional Chinese Medicine and Pharmacy
*基金项目:国家级大学生创新性课题(教高司函[2013]102-
201310823002);湖南省大学生研究性学习和创新性实验计
划项目(湘教通[2013]191-426)
通讯作者:陈永衡,E-mail:58521344@qq.com
烟草烟雾中含有多种刺激性化合物,其中有氰 化钾、甲醛、丙烯醛等,它们可以破坏支气管黏膜,并
减弱肺泡巨噬细胞的功能,使肺和支气管容易发生
感染。香烟烟气自由基对单核细胞增生(泡沫细胞)、
大支气管和大血管周围水肿、肺泡壁增厚、大气管黏
膜皱褶、肺囊泡等指标都呈不同程度的阳性[1]。吸烟
雪梨与鱼腥草联合应用对吸烟大鼠
肺部损害模型防治作用的研究*
王 聪,许 佳,王 程,陈永衡
(长沙医学院,湖南 长沙 410219)
[摘要] 目的:探讨雪梨与鱼腥草联合应用对吸烟大鼠肺部损害模型中炎症、粉尘颗粒、肺气肿、水肿及充血等病变的防治
作用。方法:将20只大鼠(雌雄各半)分为5组(空白对照组、吸烟对照组、对照治疗组、实验治疗组、联合治疗组),每组4只,除空白
对照组外,其余组大鼠均吸烟45 d,每组每天12支,同时按组别要求分别进行灌胃治疗,然后取肺组织做石蜡切片及HE染色,观
察其组织病理变化。结果:雪梨单独应用治疗后肺内炎症细胞浸润得到一定改善,粉尘颗粒沉积明显减少,肺气肿程度略有减轻
但不明显,水肿及充血治疗效果不明显;但雪梨和鱼腥草联合应用时其肺部炎症改善治疗作用明显,粉尘颗粒沉积减少与雪梨
单独应用效果相似,肺气肿程度明显减轻,水肿及充血略有改善。结论:雪梨单独应用及雪梨与鱼腥草联合应用对吸烟大鼠肺部
损害模型中炎症、粉尘颗粒、肺气肿有一定防治作用,对水肿及充血防治作用不明显。
[关键词] 雪梨;鱼腥草;吸烟;肺部损害;防治作用;大鼠
[中图分类号] R285.5 [文献标识码] A [文章编号] 1672-951X(2015)08-0010-05
The Research on Prevention and Cure Effects of the Joint Applications of Snow Pear
and Houttuynia on Pulmonary-Injured Models of the Smoking Rats
WANG Cong, XU Jia, WANG Cheng, CHEN Yong-heng
(Changsha Medical University, Hunan Changsha 410219, China)
[Abstract] Objective: To explore the prevention and treatment effects of snow pear combined with Yuxingcao (Houttuynia
Cordata) on the pathological changes such as inflammation, dusty particles, emphysema, oedema and hyperemia in model mice
with lung injures for smoking. Methods: The twenty rats (half male and half female) were divided into five groups: blank control
group, smoking control group, control treatment group, experimental treatment group, combined treatment group, four rats each.
Except the blank control group, other groups take 12 cigarettes per day for 45 days. Each group received the corresponding
treatment. Then the lung tissues were taken to make paraffin sections and HE coloration to observe the pathological variations.
Results: After the treatment of snow pear, the number of the infiltration of pulmonary inflammatory cells, and dusty particles
both decreased to some extent. The emphysema slightly relieved but not obvious, and the treatment effects was not obvious on
oedema and hyperemia. However, with snow pear combined with Houttuynia Cordata, the effect on pulmonary inflammation was
obvious, and the reduction of dusty particles was somewhat like to the result of snow. The emphysema obviously relieved, and
the oedema and hyperemia improved slightly. Conclusion: The snow pear and joint applications of snow pear combined with
Houttuynia Cordata both have prevention and treatment effects on inflammation, dusty particles, emphysema in model mice with
lung injures for smoking, and the effects on oedema and hyperemia are not obvius.
[Key words] Snow Pear;Yuxingcao (Houttuynia Cordata);Smoking;Lung Injures;Prevention and Treatment Effects;Rats
!!!!!!

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科研报告
10
DOI:10.13862/j.cnki.cn43-1446/r.2015.08.004
Guiding Journal of Traditional Chinese Medicine and Pharmacy
第21卷 第8期
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2015年 4月
April.2015
所致肺氧化损伤实质上是烟雾刺激气道后氧化应激
过强所致以巨噬细胞和中性粒细胞为主的多种炎症
细胞参与的气道慢性炎症反应[2]。
雪梨性凉、味甘、微酸,具有滋阴润肺、止咳化
痰、养胃清热之功效;适用于肺阴虚(表现为干咳无
痰或少痰、痰黏稠、咯血、颧红、潮热盗汗、舌红少苔)
以及慢性支气管炎、支气管扩张、阻塞性肺气肿、肺
结核等疾病[3]。
本研究通过对雪梨果汁作用于吸烟大鼠受损害
肺部模型前后的组织病理改变及形态学的观察,探
讨雪梨对吸烟所致肺部损伤的防治作用,为今后进
一步研究其药理作用提供实验基础。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 动物 SPF级SD大鼠,起始体质量为(140±20)g,
雌雄各半,由湖南斯莱克景达实验动物有限公司提
供,许可证号:SCXK(湘)2011-0003。
1.1.2 试剂 优质雪梨(岳阳市洞庭贸易有限公司)、
鱼腥草(湖南省松岭堂中药饮片有限公司,生产批
号:工10301)、白沙牌香烟(焦油量:10 mg,烟气烟碱
量:1.0 mg,烟气一氧化碳量:13 mg,湖南中烟工业有
限责任公司)。
1.1.3 器材 大鼠被动吸烟实验盒(自制)、榨汁机。
1.2 方法与步骤
1.2.1 动物分组 20只大鼠,雌雄各半,随机分为5
组,每组雌雄各2只,共4只。空白对照组(A组):不吸
烟加蒸馏水灌胃;吸烟对照组(B组):吸烟加蒸馏水
灌胃;对照治疗组(C组):吸烟加鱼腥草熬制液灌
胃;实验治疗组(D组):吸烟加雪梨果汁灌胃;联合治
疗组(E组):吸烟加鱼腥草熬制液与雪梨果汁联合灌
胃。
1.2.2 吸烟模型的建立 根据程控模拟吸烟机[4]模
拟人的吸烟习惯,采用大鼠被动吸烟实验盒,其由烟
气发生装置和送排气装置两部分组成。B、C、D、E组
大鼠每组每天吸烟3次,4支/次,12支/d,连续吸烟
45 d,总吸烟量为540支。平均3.5 min吸完1支烟,前
后2支吸烟时间间隔为30 s,实验结束后,大鼠仍在
吸烟实验盒中观察10 min。
1.2.3 干预方式 雪梨果汁制备:取新鲜优质雪梨
榨汁,滤渣后取其新鲜果汁原浆。鱼腥草熬制液制
备:100 mL蒸馏水中加入0.7 g鱼腥草加热熬制5 min,
待其冷却至室温。在吸烟的同时进行治疗:A、B组用
0.2 mL/10 g蒸馏水灌胃,C组用0.2 mL/10 g鱼腥草熬
制液灌胃,D组用0.2 mL/10 g雪梨果汁灌胃,E组用
0.1 mL/10 g鱼腥草熬制液加0.1 mL/10 g雪梨果汁灌
胃,2次/d,共灌胃60 d。实验期内,大鼠自由进食饮
水。
1.2.4 实验观察指标 实验结束,从大鼠尾静脉注
射4%水合氯醛处死大鼠,为保持肺泡完整性,结扎
气管后取出整个呼吸道及肺,用止血钳压于4%福尔
马林中固定,乙醇脱水后,放入松节油替换出组织块
中的乙醇,再进行石蜡包埋,切成3~5 μm的薄片。用
松节油脱去切片中的石蜡,再经高浓度到低浓度的
乙醇,最后入蒸馏水,分别进行苏木素(hematoxylin,
H)和伊红(Eosin,E)染色,即HE染色。染色后的切片
经无水乙醇脱水,盖玻片封固,用光镜对切片进行观
察。根据肺组织损伤程度分为阴性(-)、中性(±)、阳
性(+)、强阳性(++)、极强阳性(+++)5个级别,级别
越高,表示损伤越严重。
2 结 果
2.1 炎症细胞浸润 各组炎症细胞浸润程度比较
见表1;A组属正常大鼠,除正常淋巴小结外,几无炎
症细胞浸润(图1);B组大鼠小支气管、血管黏膜下
和周围肺组织存在大量炎症细胞浸润,以中性粒细
胞和嗜酸性粒细胞为主。上皮细胞有部分脱落,血管
壁充血水肿,黏液分泌增加(图2)。C、D两组气管周
围炎症细胞浸润较B组程度轻,周用组织轻度水肿
和上皮脱落(图3,图4);E组炎症细胞浸润有很大程
度改善(图5)。说明雪梨或鱼腥草治疗对肺内炎症细
胞浸润有一定改善作用,且雪梨和鱼腥草联合运用
时其改善治疗作用最佳。
表 1 吸烟及治疗后大鼠肺部组织病理组织学观察结果
动物数 炎症细胞浸润 粉尘颗粒 水肿及充血 肺气肿 肺泡壁增厚
(只) 级别 动物数(只) 级别 动物数(只) 级别 动物数(只) 级别 动物数(只) 级别 动物数(只)
A组 4 - 3 - 4 - 4 - 4 - 3
± 1 ± 1
B组 4 +++ 3 ++ 2 +++ 4 +++ 3 +++ 2
++ 1 + 2 ++ 1 ++ 2
C组 4 + 4 ± 3 ++ 3 + 1± 4
- 1 + 1 ± 3
D组 4 ++ 2 ± 4 ++ 4 + 2 + 2
+ 2 ± 2 ± 2
E组 4 + 1 - 2 + 2 - 3 - 3
± 3 ± 2 ± 2 ± 1 ± 1
注:根据石蜡切片中各种病变在肺组织内的可见程度分
为无(-)、偶可见(±)、可见(+)、较多(++)、大量(+++)总共5个级别。
2.2 各组大鼠肺气肿严重程度情况 A组大鼠属空
组别
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白对照的正常大鼠,其肺泡结构完整,无明显变化
(图6)。B组肺泡扩张明显,间隔明显变窄,肺泡孔扩
大,肺泡间隔断裂形成肺大泡(pulmonary bulls),肺
毛细血管减少,小支气管和细支气管可见慢性炎症
细胞浸润(图7)。而C组肺气肿较B组程度轻(图8)。D
组可见肺泡略有扩张,肺泡间隔断裂少见,周围组织
轻度水肿和上皮脱落(图9)。E组与A组的观察结果
相似,较B组有明显改善,肺泡结构基本完整,小支
气管和细支气管慢性炎症细胞浸润偶可见(图10)。
2.3 粉尘颗粒 在吸烟大鼠肺部损害模型中,粉尘
颗粒在肺组织内的可见程度可分为5级(表1),偶可
见程度(±)中,A、B、C、D、E各组所占例数分别为0、
0、3、4、2例;可见及可见以上程度(+、++、+++)中仅
存在于B组。组织病理:A组肺组织中未见粉尘颗粒
(图11);B组肺组织内可见棕褐色粉尘颗粒(图12);
C、D、E组肺组织内棕褐色粉尘颗粒偶可见(图13)。
说明雪梨或鱼腥草治疗对肺内粉尘颗粒沉积均有一
定改善作用。
正常大鼠肺组织
图 1 A组(HE×100)
肺组织可见大量慢性炎症细胞浸润、肺水肿、支气管上皮血
管扩张充血、支气管黏膜上皮部分坏死脱落
图 2 B组(HE×100)
肺组织可见炎症细胞浸润及支气管上皮血管扩张充血程度
减轻、部分肺泡壁结构趋向正常
图 3 C组(HE×100)
组织可见肺泡间隔增宽、肺泡壁上皮血管轻度扩张充血、炎
症细胞浸润程度减轻
图 4 D组(HE×100)
组织可见肺泡壁结构基本正常、肺泡腔内 HBC及水肿液明
显减少、支气管管壁上皮炎症细胞浸润明显减少
图 5 E组(HE×100)
肺泡结构完整,无明显变化
图 6 A组(HE×100)
肺泡扩张明显,间隔明显变窄,肺泡孔扩大,肺泡间隔断裂
形成肺大泡。
图 7 B组(HE×100)
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2.4 水肿及充血 除空白对照(A组)无明显病理改
变以外,其余4组肺组织均有一定程度的充血及水
肿,肺泡间隔有不同程度的增厚。B组大鼠肺部血管
壁充血明显,水肿程度较高,黏液分泌增加。而C、D、
E组虽较B组充血程度略轻,水肿略有改善,但均与
对照组差别不大。笔者认为,造成此结果与大鼠处死
方法及肺组织的取材方法有关,与雪梨对吸烟大鼠
肺部损害模型的防治作用关系并不明显,故在此不
做深入探讨。
3 讨 论
烟草烟雾中多种刺激性化合物,如丙烯醛、氰化
钾等对肺部损害的作用机制较为复杂,香烟烟气中
的自由基含量远远高于生物体必需的水平,烟气自
由基不但会直接攻击生物细胞组织,同时还会消耗
体内大量的超氧化物歧化酶(SOD)等抗氧化物质,
而使体内自身的自由基含量过高,两方面的作用都
能使蛋白质、核酸受到破坏,发生脂质过氧化,形成
氧化压力和硝化压力,导致肿瘤、炎症和许多心血管
疾病的发生[5-7]。本实验结果显示,B组大鼠长期吸烟,
肺部小支气管、血管黏膜下和周围肺组织存在大量
炎症细胞浸润,以中性粒细胞和嗜酸性粒细胞为主,
上皮细胞有部分脱落,这与王勤等[8]报道的血管黏膜
下和周围肺组织存在大量炎症细胞浸润、上皮脱落、
血管壁水肿是一致的,说明吸烟大鼠肺部损害模型
部分肺泡扩张,间隔略变窄
图 8 C组(HE×100)
肺泡略有扩张,肺泡间隔断裂少见,周围组织轻度水肿和部
分上皮脱落
图 9 D组(HE×100)
肺泡结构基本完整,组织充血不明显,小支气管和细支气管
慢性炎症细胞浸润偶可见
图 10 E组(HE×100)
肺组织中未见粉尘颗粒
图 11 (HE×400)
肺组织内可见棕褐色粉尘颗粒
图 12 (HE×400)
肺组织内棕褐色粉尘颗粒偶可见
图 13 (HE×400)
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主体成分的述语动词外,还包括述语动词所带的宾语和/或补语。 (下转第21页)
制作成功。
雪梨中的多酚类物质如原花青素、儿茶素、绿原
酸等[9],以及鱼腥草中的黄酮类物质,都对自由基的
清除和抗氧化有很好的效果[10-11]。本实验研究结果表
明,雪梨和鱼腥草联合应用对吸烟大鼠损害模型中
炎症、粉尘颗粒、肺气肿的改善治疗作用效果明显。
其机理可能为多酚类物质与黄酮类物质共同作用,
与超氧阴离子(O2-)反应后阻断自由基所引发的连
锁反应,同时产生抗氧化物质,使体内自由基的含量
减少,从而达到防治肺部损害的目的。
本研究初步探索了雪梨和鱼腥草联合应用对吸
烟大鼠损害模型中炎症、粉尘颗粒、肺气肿的改善治
疗作用,肯定了雪梨和鱼腥草两种食材联合应用在
治疗肺部损害方面的可能性,对于开发新型治疗肺
部损害的药物及其使用方法上具有一定的参考意
义。雪梨和鱼腥草联合应用这一方法受多种因素的
影响,进一步我们可以尝试寻找到更加优化的治疗
吸烟对肺部损害的方案,探查其更合适的配比浓度、
具体作用机理,以及在其他作用功效等方面进行深
入的研究。
参考文献
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(收稿日期:2014-12-16 编辑:蒋凯彪)
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