全 文 ：中药与临床 Pharmacy and Clinics of Chinese Materia Medica 2014;5(3)·28·
慢性肾功能衰竭（Chronic Renal Failure, CRF）
作为当前临床医学主要难题之一，主要的病理特征
为肾组织纤维化[1]。其发生受到多种因素的调节，
其中结缔组织生长因子CTGF[2]为近年来新发现的致
纤维化生长因子，被视为TGF-β1的下游反应元件，
能够促进系膜细胞分泌ECM，抑制细胞外基质降解
双重途径，诱导肾小管间质纤维化，干预CTGF的产
生，能够显著抑制肾脏组织纤维化的发生，目前已
成为防治肾脏纤维化的热点[2]；白细胞介素IL-6[3]作
重要的炎症因子，能促进系膜细胞增殖，且诱导产
生肾脏局部炎症，进而促进肾组织纤维化的发生；
纤维粘连蛋白FN[4]是肾脏纤维化的效应因子，是反
应肾脏纤维化的直观指标。地耳草总黄酮（MSN）
是从传统的治疗慢性肾功能衰竭中药中提取的有效
成分，临床治疗慢性肾衰得到了广泛证明。但是
MSN对CRF治疗的作用机理尚未完全清楚。本文以
5/6肾切除大鼠CRF模型为研究对象，以CTGF、IL-6
和FN为指标，利用ELISA及免疫组化等实验手段，
采取不同剂量实验分组对照法，探讨MSN对CRF模
型抗肾纤维化的具体作用机理。
1 材料
1.1 实验动物
SD大鼠，SPF级，108只，200~220 g，雄性，质
量合格证号：No.0006045，许可证号：SCXK（川）
2008-11，由成都中医药大学实验动物研究中心提供。
普通级动物房饲养（四川省实验动物使用许可
证号：SYXK（川）2008-11，温度：19~26℃，相对
湿度：40 %~70 ％，光照条件：12 h/12 h昼夜交替，
通风情况：10~15次/小时）；自由饮水；辐照鼠用
灭菌饲料，营养成分符合GB 14924.3-2010。
1.2 实验主要仪器
酶标仪，Thermo Mulliskan Ascant 公司；流式
细胞仪，Beckman-Coulter Quanta SC流式细胞分析
系统；超低温冰箱，日本SANYO, MDF-382E；离心
机，德国HERASE；纯水机，MilliPore；移液器，
Eeppendorf。
刘伟伟，高永翔，赵静，唐宋琪，李雪萍
[摘要] 目的：研究地耳草总黄酮（MSN）对大鼠CRF模型肾纤维化中结缔组织生长因子CTGF、白细胞介素IL-6和纤
维粘连蛋白FN表达的影响，探讨其抗纤维化作用机理。方法：采用ELISA法检测5/6肾切除大鼠CRF模型血清中CTGF和
IL-6的含量，采用免疫组化法检测FN的含量。结果：MSN低、中、高各剂量组CTGF、IL-6和FN含量远低于模型组，具
有明显统计学差异。结论：MSN能有效降低5/6肾切除大鼠CRF模型纤维化因子CTGF、IL-6及FN含量，干预CRF模型残
余肾组织纤维化，延缓慢性肾衰。
[关键词] MSN；CRF模型；肾纤维化；影响因子
[中图分类号] R 285.5 [文献标识码] A [文章编号] 1674-926X(2014)03-009-02
Research on infl uence of correlation genes on kidney fi brosis of 5/6 nephrectomized rats CRF model by MSN/LIU Wei-
wei, GAO Yong-xiang, ZHAO Jing, TANG Song-qi, LI Xue-ping//(College of Basic Medicine, Chengdu University of Traditional
Chinese Medicine, Chengdu 610075, Sichuan)
[Abstract] Objective:To study the MSN anti-fi brosis effect through the infl uence on CTGF, IL-6 and FN of chronic renal failure
rats. Method:The model of chronic renal failure was established in 5/6 nephrectomized rats．Expressions including the CTGF and the
IL-6 were examined by ELISA method. FN expressions were examined by immunohistochemical method. Result: Signifi cant difference
of CTGF, IL-6 and FN contents could be found between disease model and normal rats. Conclusion:MSN can delay chronic renal failure
by reducing CTGF, IL-6 and FN content．It can interfere renal interstitial fi brosis to delay the chronic renal failure．
[Key words] MSN；CRF Model；kidney fi brosis；infl uence genes
地耳草总黄酮对5/6肾切除大鼠CRF模型肾纤维化相关因子影响研究
·药理毒理·
[作者单位] 成都中医药大学基础医学院，四川 成都 610075
[作者简介] 刘伟伟，中西医结合基础专业博士研究生
Email: sherly_liu@163.com Tel:13880691373
[通讯作者] 高永翔，教授，主要从事中药的免疫安全性与有
效性研究
[收稿日期] 2014-02-20
中药与临床 Pharmacy and Clinics of Chinese Materia Medica 2014;5(3) ·29·
1.3. 实验材料及试剂
手术刀，手术剪，缝合针，缝合线，持针钳，
镊子，止血钳，无菌纱布，无菌棉球，无菌明胶海
绵，无菌手套，动物手术台，电子天平；10%水合
氯醛，乙醚，75%酒精，碘伏消毒液，甲硝唑氯化
纳注射液，无菌生理盐水。
2 实验方法
2.1 造模方法及结果
取检疫合格SPF级SD大鼠108只，随机分为
6组，每组18只。分别为模型对照组、MSN高、
中、低剂量组、阳性对照组、正常对照组（假手术
组）。对模型对照组、MSN高、中、低剂量组、阳
性对照组行左肾2/3切除术，用明胶海棉压迫切面止
血，1周后摘除右肾[5]；正常对照组作平行假手术对
照。另随机从造模组取2只大鼠解剖取残余肾脏组
织，做病理切片HE染色，残余肾脏形态学改变说明
肾小体内细胞增生，系膜基质增生，肾小管扩张，
间质纤维组织增生，炎细胞浸润，出现慢性肾衰纤
维化早期病理改变，肾衰模型建立成功[6～10]。术后21
d及51 d分别抽血做尿素氮，血肌酐、尿酸等生化指
标检测，均证实肾功能降低，出现慢性肾衰趋势。
2.2 检测方法
ELISA方法检测血清CTGF及IL-6含量，免疫组
化法检测FN表达量，SPSS17.0统计分析实验结果。
3 实验结果
MSN对模型大鼠CRF模型肾纤维化相关因子影
响结果见表1。具体因子影响见图1-图3。
表1 MSN对模型大鼠血清促纤维化因子含量的影响（x±s）
组别 N CTGF IL-6(ng.mL-1) FN(μg.L-1)
模型对照组
MSN高剂量组
MSN中剂量组
MSN低剂量组
阳性对照组
假手术组
注：与模型对照组比较，* P＜0.05

图1 MSN对模型大鼠血清促纤维化因子CTGF含量的影响

图2 MSN对模型大鼠血清炎症因子IL-6含量的影响

图3 MSN对模型大鼠肾脏免疫组化FN含量的影响
由表1和图1可知，MSN高、中剂量组CTGF含量
明显低于模型对照组和阳性对照组（P＜0.05），提
示MSN药物能够显著降低CTGF含量，从而抑制肾脏
间质纤维化的产生，且作用强于金水宝。由表1和图
2可知，MSN各剂量组IL-6的含量显著低于模型对照
组，高于假手术组（P＜0.05）；MSN各组与阳性对
照组无明显差异（P＞0.05），可见MSN能够显著降
低IL-6的含量。由表1和图3可知，MSN各剂量组FN
的含量均显著低于模型对照组(P＜0.05)，与假手术
组无明显差异（P＞0.05）。说明慢性肾衰时，FN含
量上升，MSN能抑制变性上皮内该蛋白的表达，降
低FN含量，从而抑制肾脏纤维化。
4 结论
研究表明，MSN能够抑制促纤维化因子CTGF的
含量和致炎因子IL-6的产生，进而抑制肾小球、肾小
管局部炎症，抑制系膜细胞增殖，防治肾组织纤维
化的产生，此外，MSN还可以直接抑制纤维化效应
因子FN的产生，从而显著抑制或延缓肾脏纤维化。
[参考文献]
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[5] 潘卉萱,程骏章,姜鸿,等.肾大部分切除大鼠肾衰模型制备方
12
13
14
13
10
14
8.39±0.14
8.07±0.16*
8.08±0.12*
8.25±0.11*
8.20±0.10*
8.16±0.11*
11.12±1.09
6.78±0.64*
6.88±0.69*
6.62±0.57*
6.50±0.41*
5.57±0.57*
0.3173±0.0049
0.2896±0.0036*
0.2913±0.0051*
0.2902±0.0024*
0.2885±0.0038*
0.2847±0.0025*
（下转第34页）
中药与临床 Pharmacy and Clinics of Chinese Materia Medica 2014;5(3)·34·
静脉滴注，清热解毒（用喜炎平前冲管：0.9% NaCL
100 mL），口服二甲双胍控制血糖。2月7日患者有
胸闷气紧症状，加用灯盏细辛（20 mL+100 mL 5%
GS）改善微循环，2月9日患者述偶有头晕，停用喜
炎平和泮托拉唑，2月12日仍头晕，期间其它治疗不
变，14日停用灯盏细辛，15日患者未述头晕。
分析：该例不良事件与使用喜炎平、泮托拉
唑、二甲双胍、灯盏细辛有合理的时间关系，即用
药在先反应在后。查阅说明书泮托拉唑说明书中虽
有头晕记录，但和头孢呋辛联合用药11天无头晕症
状发生，可排除泮托拉唑致头晕可能。灯盏细辛与
二甲双胍说明书中也均有头晕记载，喜炎平无头晕
不良事件记载。在使用喜炎平和泮托拉唑联合用药
并口服二甲双胍，无头晕发生，而使用灯盏细辛第
三天出现头晕。头晕当天停喜炎平和泮托拉唑，其
它治疗不变，三天后患者仍述头晕。14日停用灯盏
细辛，第二天患者述头晕消失。分析头晕可能与灯
盏细辛有关。是否与合并用药有关尚不能确定。
3 病例三
患者，男，16 岁，42 公斤，无过敏史，原
患病症西医诊断：寻常性银屑病。中医诊断：湿
热症。临床使用喜炎平清热解毒。合并用药：第
一组：10%葡萄糖酸钙10 mL+Vit C 2.0 + 5% GS
100 mL；冲管：0.9% NS 50 mL；第二组：喜炎平
8 mL+5% GS 200 mL，30滴/分, 静脉滴注。在输喜
炎平注射液100 mL时，患者自诉头晕，无头痛，
胸闷，心慌等不适。测血压:88/50 mmHg，立即停
药，输入0.9%NS 250mL，半小时后患者自诉头晕
有所好转，无不适，嘱其卧床休息，密切观察病
情，测血压:74/48 mmHg（患者平时血压一直很低：
70-78/45-55 mmHg)，考虑血压偏低，给予5% GS
250 mL静脉滴注，患者神清，无任何异常，嘱安静
休息，事后，未再诉不适。
分析：该例不良事件在使用喜炎平过程中出
现，停药后好转，虽然说明书与文献[1~5]无类似不良
事件记载，但该例不良事件在使用喜炎平用药过程
中发生，故与喜炎平有较强的关联性。同时考虑有
可能和患者空腹或情绪或患者的个体体质（血压一
直偏低）有关，但输第一组液体时确无反应。所以
提示该例不良事件与喜炎平有较强的因果关系。
[参考文献]
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