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苍耳草水及丙酮提取物的体外抗菌实验研究



全 文 :华西药学杂志
W C J·P S 2011,26(4)∶345 ~ 346
基金项目:四川省中药材标准起草说明项目(川食药监注[2008]21 号)
作者简介:蒋桂华(1970—) ,女,四川成都,硕士,教授,从事中药品种质量与资源开发的教学和科研工作。Email:bbg@ cdutcm. edu. cn
苍耳草水及丙酮提取物的体外抗菌实验研究
蒋桂华,敬小莉,张 俊,赵芙蓉,杨 莎,陈佳妮
(成都中医药大学药学院 中药材标准化教育部重点实验室 中药资源系统研究与开发利用省部共建国家重点实验室培育
基地,四川 成都 610075)
摘要:目的 考察苍耳草水及丙酮提取物的体外抗菌作用。方法 测定苍耳草水及丙酮提取物的最低抑菌浓度,研究两种
提取物对铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、鸭沙门氏杆菌、金色葡萄球菌、表皮葡萄球菌的抗菌作用。结果 苍耳草水提取物对 5
种细菌均有一定的抑菌作用;但丙酮提取物的抗菌作用较弱。结论 苍耳草水提取物具有一定的体外抗菌作用。
关键词:苍耳草;水提取物;丙酮提取物;最低抑菌浓度;体外抗菌活性
中图分类号:R96 文献标志码:A 文章编号:1006 - 0103(2011)04 - 0345 - 02
Antibacterial test of aqueous extract and acetone extract of Xanthium sibiricum
JIANG Gui - hua,JING Xiao - li,ZHANG Jun,ZHAO Fu - rong,YANG Sha,CHEN Jia - ni
(College of Pharmacy Chengdu University of Traditional Chinese Medicine,Key Laboratory of Standardization of Traditional Chinese
Medicinal Materials of Ministry of Education,Chengdu,Sichuan,610075 P. R. China)
Abstract:OBJECTIVE To study the antibacterial effects of aqueous extracts and acetone extract of Xanthium sibiricum Patrin ex
Widder. in vitro.METHODS Minimal inhibitory concentration of Xanthium sibiricum Patrin ex Widder. were determined in vitro. and
the antibiotic action of the two extracts against Pseudomonas aeruginosa,Escherichia coli,Salmonella anatum,Staphylococcus aureus and
Staphylococcus epidermidis was studied. RESULTS The aqueous extracts had antimicrobial effect,but the acetone extracts had little.
CONCLUSION It showed that the aqueous extracts of Xanthium sibiricum Patrin ex Widder. had obvious antibacteria action.
Key words:Xanthium sibiricum Patrin ex Widder.;Aqueous extract ;Acetone extract;MIC;Antibacterial activity in vitro
CLC number:R96 Document code:A Article ID:1006 - 0103(2011)04 - 0345 - 02
苍耳草为苍耳属植物苍耳 Xanthium sibiricum
Patrin ex Widder.的干燥地上部分,具有祛风散热、
解毒杀虫的功效;可用于治疗慢性鼻炎、麻风、肠伤
寒、皮肤癌、功能性子宫出血及皮肤、阴部瘙痒症等;
广泛分布于全国各地,药用资源丰富、价廉;被广泛
用于六神曲、神曲、治癣、感冒制剂中。苍耳子煎剂
在体外对金黄色葡萄球菌、炭疽杆菌、肺炎球菌、乙
型链球菌和白喉杆菌等具有较强的抑制作用;苍耳
子丙酮或乙醇提取物对红色发癣菌、水提物对堇色
毛癣菌有抗菌作用;苍耳根醇提物对白色念珠菌有
抑菌作用;苍耳叶的甲醇提取液对甜瓜霜病、白粉病
均具有较好的抑菌作用[1 - 3]。为考察苍耳草的抑菌
作用,对苍耳草的水、丙酮提取物进行了体外抗菌作
用的实验研究。
1 实验部分
1. 1 试药、菌种与仪器
苍耳草于 2009 年 7 月采自四川成都市都江堰,
经鉴定为苍耳 Xanthium sibiricum Patrin ex Widder.
的干燥地上部分;普通营养琼脂培养基[4]:取 3 ~ 5 g
牛肉膏、10 g蛋白胨、5 g NaCl、16 ~ 20 g琼脂,加 1 L
水,调 pH7. 0 ~ 7. 2、121 ℃湿热灭菌 30 min;普通营
养肉汤培养基:取 3 ~ 5 g 牛肉膏、10 g 蛋白胨、5 g
NaCl,加 1 L水,调 pH 7. 0 ~ 7. 2、121 ℃湿热灭菌 30
min。铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、鸭沙门氏杆菌、金
色葡萄球菌、表皮葡萄球菌菌株(成都中医药大学
病原生物学与免疫学实验室)。手提式压力蒸汽灭
菌锅(上海华线医用核子仪器有限公司)。
1. 2 方法与结果
1. 2. 1 苍耳草提取物的制备 取 20 g 苍耳草粉
末,用 10 倍量的水浸泡 1 h,煮沸 30 min,过滤。药
渣加 8 倍水继续煎煮,煮沸 20 min,过滤,合并两次
滤液,于水浴上浓缩成 1 g·mL -1的药液,即得水提
物。取 20 g苍耳草粉末,加入 200 mL 丙酮溶液,加
热回流提取 1 h,过滤。药渣中加入 150 mL 丙酮溶
液继续回流 45 min,过滤,合并两次滤液,于水浴上
浓缩成 1 g·mL -1的药液,即得丙酮提取物。
1. 2. 2 供试菌液的制备 供试菌种需在营养肉汤
中转种、活化 2 ~ 3 代后备用;取活化后的在 37 ℃恒
温培养箱中培养 24 h 的铜绿假单胞菌、大肠埃希
DOI:10.13375/j.cnki.wcjps.2011.04.013
菌、鸭沙门氏杆菌、金色葡萄球菌、表皮葡萄球菌的
普通营养肉汤培养物,用灭菌的生理盐水 10 倍递增
稀释到 10 -4 ~ 10 -5倍,得 104 ~ 105 CFU·mL -1的供
试菌悬液。
1. 2. 3 体外抗菌试验 首先用纸片法进行粗筛,取
6 mm直径的滤纸片在各供试原液中浸泡后,分别点
种在涂布有各供试菌的平板中,经 37 ℃恒温培养箱
中培养 24 h后抑菌圈无或较小(d≤10 mm) ,说明
抑菌作用较弱;进一步采用二倍递增稀释浓度法检
测最低抑菌浓度。采用二倍递增稀释法,分别接种
一定浓度的铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、鸭沙门氏杆
菌、金色葡萄球菌、表皮葡萄球菌于不同稀释浓度的
含药平板上,经 37 ℃、24 h培养,观察不同细菌的生
长情况,判断供试药物的体外抑菌效果[5 - 6]。取 1
g·mL -1苍耳草水提取物和丙酮提取物药液,分别设
定含药平板浓度分别为 100、50、25、12. 5、6. 25、
3. 125 mg·mL -1,即稀释至 10、20、40、80、160、320
倍。用移液枪取 20 μL稀释菌液点种在含药平板及
普通营养琼脂平板上。在 37 ℃恒温培养箱中培养
24 h后,观察各类细菌的生长情况并做好记录。从
表 1、2 可以看出:苍耳草两种提取物对 104 ~ 105
CFU·mL -1菌量的铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、鸭沙
门氏杆菌、金色葡萄球菌、表皮葡萄球菌的抑制作用
有差异,水提物较丙酮提取物的抑菌作用明显。
表 1 苍耳草水、丙酮提取物的体外抗菌作用
Table 1 Antibacterial effects of aqueous extracts and acetone extracts of Xanthium sibiricum in vitro
C /mg·mL -1
水提物 /丙酮提物
铜绿假单胞菌 大肠埃希菌 鸭沙门氏杆菌 金色葡萄球菌 表皮葡萄球菌
营养琼脂平板(CK)
100 - / + - / - - / + - / - - / - + / +
50 - / + - / + - / + - / - - / - + / +
25 - / + - / + - / + - / - - / - + / +
12. 5 - / + - / + - / + - / + - / + + / +
6. 25 + / + - / + + / + - / + - / + + / +
3. 125 + / + + / + + / + + / + + / + + / +
“ + -”表示有细菌生长或无细菌生长
表 2 苍耳草水、丙酮提取物的最低抑菌浓度
Table 2 MIC of aqueous extracts and acetone extracts of Xanthium
sibiricum in vitro
菌种
MIC /mg·mL -1
水提物 丙酮提物
铜绿假单胞菌 12. 5 +
大肠埃希菌 6. 25 100
鸭沙门氏杆菌 12. 5 +
金色葡萄球菌 6. 25 25
表皮葡萄球菌 6. 25 25
“ +”表示有细菌生长
2 讨论
文中首次以苍耳草水、丙酮提取物对常见的铜
绿假单胞菌、大肠埃希菌、鸭沙门氏杆菌、金色葡萄
球菌、表皮葡萄球菌进行体外抗菌试验,结果表明:
苍耳草水提取物对这 5 种供试菌株均有一定的抑菌
作用,而丙酮提取物抑菌作用较弱。
参考文献:
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收稿日期:2010 - 10 - 21
643 华 西 药 学 杂 志 第 26 卷