全 文 ：第 22卷 第 3期
1 9 94年分月
河南师范大学学报 (自然科学版 )
zo
u a r n
lo f H
。 a n nNo ro a u l n i v e rs iy t( N
a ru ra S l e ie n c e)
V
o l
.
2 2 N o
.
3
A
u
g
.
1 4 99
黄槐叶片培养中形态分化过程
的扫描电镜观察
冯 莉 李庚午 张嘉宝 朱命炜
(河南师范大学生物系 , 4 53 00 2 , 新乡 )
摘要 利用扫描电镜对黄槐叶片培养中形态分化过程进行了观察 。 结果表明 : 叶片脱分
化形成愈伤组织时 , 细胞最初进行无丝分裂其中有类似酵母的 “ 出芽 ” 方式的无丝分裂 , 愈伤
组织再分化形成不定芽的过程中 , 最初愈伤组织表面分化出球状体 , 它为一顶端凹陷 , 具有
分化潜力的细胞团 , 其顶端可以分化形成不定芽原基 , 最后 发育成不定茅 。 球状体可以看成
是具有形成不定芽能力的繁殖单位 , 将具有球状体与芽的 愈伤组织进行继代培养 , 可以大量
快速繁殖黄槐幼苗 。
关键词 黄槐 ; 脱分化 ; 愈伤组织 ; 球状体 ; 不定芽
分类号 Q 9 4 5 . 4 5
豆科植物组织和细胞培养的研究工作国内外已有不少报道 , 但大多数偏重于草本经济
作物 ,而木本植物通过培养获得再生植株的为数不多 [’ , 2, 3 1。 我们以黄槐叶片为实验材料 ,
在获得再生植株的基础上 , 对其培养过程中形态分化进行了扫描电镜观察 , 为进一步研究
黄槐快速繁殖及木本豆科植物形态发生提供参考 。
1 材料和方法
黄槐幼叶取 自北京香山植物 园 , 叶片培养方法和条件均 同前文 l4[ 。 在培养过程中 , 定
期取样 , 戊二醛及锹酸双固定 , 常规扫描电镜制样 。
2 观察结果与讨论
2
.
1 叶片脱分化形成愈伤组织
叶片接种于 M s + N A A l m g / L + 2 , 4 一 D l m g / L + 6一 B A Zm g / L 的诱导培养基上 , 暗
培养 g d , 可出现少量 愈伤组织 。 扫描电镜观察表明 : 叶片脱 分化形成愈伤组织的初期 ,
细胞分裂旺盛 , 其中有类似于酵母 “ 出芽 ” 方式的无丝分裂 (图 l , 2) 。 由于活跃的无丝分
裂 , 形成 了细胞大小不等 , 排列混乱的愈伤组织 (图 3 ) 。
2
.
2 球状体的分化和不定芽的发生
文稿收到 日期 : 1993 一 03 一 19
DOI : 10. 16366 /j . cnki . 1000 -2367. 1994. 03. 016
第 22卷 第 3期
1 9 94年分月
河南师范大学学报 (自然科学版 )
z o
u r n a
lo fH
。 n an N o r o au ln iv er s iyt (N
ar u r aS l e in e ce )
V
o l
.
22 N o
.
3
A
u
g
.
1 4 99
黄槐叶片培养中形态分化过程
的扫描电镜观察
冯 莉 李庚午 张嘉宝 朱命炜
(河南师范大学生物系 , 4 53 00 2 , 新乡 )
摘要 利用扫描电镜对黄槐叶片培养中形态分化过程进行了观察 。 结果表明 : 叶片脱分
化形成愈伤组织时 , 细胞最初进行无丝分裂其中有类似酵母的 “ 出芽 ” 方式的无丝分裂 , 愈伤
组织再分化形成不定芽的过程中 , 最初愈伤组织表面分化出球状体 , 它为一顶端凹陷 , 具有
分化潜力的细胞团 , 其顶端可以分化形成不定芽原基 , 最后 发育成不定茅 。 球状体可以看成
是具有形成不定芽能力的繁殖单位 , 将具有球状体与芽的 愈伤组织进行继代培养 , 可以大量
快速繁殖黄槐幼苗 。
关键词 黄槐 ; 脱分化 ; 愈伤组织 ; 球状体 ; 不定芽
分类号 Q 9 4 5 . 4 5
豆科植物组织和细胞培养的研究工作国内外已有不少报道 , 但大多数偏重于草本经济
作物 ,而木本植物通过培养获得再生植株的为数不多 [’ , 2, 3 1。 我们以黄槐叶片为实验材料 ,
在获得再生植株的基础上 , 对其培养过程中形态分化进行了扫描电镜观察 , 为进一步研究
黄槐快速繁殖及木本豆科植物形态发生提供参考 。
1 材料和方法
黄槐幼叶取 自北京香山植物 园 , 叶片培养方法和条件均 同前文 l4[ 。 在培养过程中 , 定
期取样 , 戊二醛及锹酸双固定 , 常规扫描电镜制样 。
2 观察结果与讨论
2
.
1 叶片脱分化形成愈伤组织
叶片接种于 M s + N A A l m g / L + 2 , 4 一 D l m g / L + 6一 B A Zm g / L 的诱导培养基上 , 暗
培养 g d , 可出现少量 愈伤组织 。 扫描电镜观察表明 : 叶片脱 分化形成愈伤组织的初期 ,
细胞分裂旺盛 , 其中有类似于酵母 “ 出芽 ” 方式的无丝分裂 (图 l , 2) 。 由于活跃的无丝分
裂 , 形成 了细胞大小不等 , 排列混乱的愈伤组织 (图 3 ) 。
2
.
2 球状体的分化和不定芽的发生
文稿收到 日期 : 1993 一 03 一 19
第 3 期 冯 莉等 : 黄槐叶片培养中形态分化过程的扫描电镜观察 59
仍保 留增殖和器官分化能力的原 因 。 为了大量快速繁殖试管苗 , 可将该 愈伤组织进行分
割 , 继代培养 , 以促进球状体的不断产生和不定芽的不断分化 , 这不失为快 速繁殖的一种
手段 。
参 考 文 献
l 张谦 。 豆科植物组 织和细胞培养的种类名录 , 植物生理学通讯 , 1 98 6 , ( 5 ) : “ 一 76
2 安利佳 , 李风趁 .豆科植物组织培养的研究 .植物学报 . 1 992 , 34 ( 10) :7 43 一 75 2
3 H a m m a t t N e t a l
.
R e g e n e r a t i o n i
n
le g u m e s
.
C e l l C
u l t u r e a n d S o m a ti e C e l I G e n e t ie s o f P la n t s ,
198 6
,
( 3 ) : 67一 9 5
4 冯莉 , 张嘉宝 .黄槐叶片组织培养及植株再生的研究 。 河南师范大学学报 , 19 92 , 2 0 (4 ) : 89 一 9 4
5 冯莉 , 张嘉宝 。 离体培养中黄槐叶片细胞脱分化的细胞学观察。 河南师范大学学报 , 1991 , 19 (4 ) :
8 5一 90
6 陆文裸 。 离体 培养 中胡萝 卜细胞脱分化状态下无 丝分裂的活体连续观察 。 中国科学 B 辑 , 19 8 3 ,
( 4 ) : 3 2 1一 3 2 6
7 V a s il W
,
H i ld e b r a b d t A C
.
D i fcT
r e n t ia t i o n o f t o b a c o p l a n t s fr
o
m s i
n g le i s
o
l a t e d ce l1 i
n
m ie r o e u l t u r e s
.
S e i e n e e
,
1 96 5
,
1 50 : 8 89~ 89 2
S c a n n i n g E le e t r o n 入l i e r o s e o P i e o b s e r v a t io n o n M o r P h o l o g i e a l D i fe r e n t i a t i o n
o f L e a v e s C u l ilt r e o f C a s s i a S u r a l l e n s is B “ r m
.
F e n g L i L i G e n g w u Z h a n g J ia b a o Z h u M i n g w e i
( B 1
0 】o g y D e p a r t m e n t o f H e n a n N o r m a 1 U 苗 v e r s i t y , 4 5 30 0 2 , X in x ia n g )
A b s t r a e t s e a n n in g e le c t
r o n m ie
r o s e o p ie
o
b s e
r v a t i
o n o n m o r p h o l o g ie a l d i fe
r e n ti a t i
o n o f l e a v e s
e u l t u r e of C e s s i
a 胭 r a r l e n s is B o r m s h o w e d t h a t : ( l ) I n t h e e a r ly s t a g e o f e a l l u s fo r m a t i o n ,
ajn i t
o s i s
, e s p e c i a l! y a m it o s is o f y e a s t b u d d i n g w a s th e m a in w a y o f e e ll d i v i s i o n i n p r o ce s s o f e e l l
d
e
d ife r e n t ia t io n i n i t ia t io n
.
( 2 ) I n t h e P r o ce s s
o f a d v e n t i t io u s b u d fo 丽 a t i o n , g lo b o id w h ic h 15 a e e ll
m a s s w i t h h o l lo w o n t h e t o P w a s fo
r m e d o n t h e s u
r fa e e o f e a ll u s if r s t
,
t h e n t h e p
r
im o r d iu m o f a d v e n t i
-
it o u s b u d r e d ifc r e n t ia te d o n t h e t
o p o f g l o b o i d
,
if n a ll y
,
t h e a d v e n t it i o u s b u d d e v e lo P e d in t o
p l a
n t le t
.
T h e g l
o
b
o
id ca
n b e e o n s i d e r e d a s a p r o li fe r a t io n u n i t p r o d u e in g a d v e n t i t io u s b u d
.
T h e
r e fo r e a
la r g e n u m b e r o f P l a n U e t s e a n b e o b t a in e d v ia e a ll u s 一 g lo b o id 一 a d v e n t i t io u s b u d a fl e r m a n y g e n e r a t i o n s
o f s
u
b e
u
l t u
r e
.
K e y w o r d s C a s s i a s u r a r r e n s is B u r m
.
; d e d ife
r e n t ia t io n ; e a ll u s , g lo b o i d ; a d v e n t i t io u s
b u d