全 文 ：第 2 8 卷 第 2 期
1 9 9 5 年 6 月
实 验 生 物 学 报 V o l 。 2 8 , N o . 2
A e t a B io l o g ia e E x Pe r i m e n t a l i s S i n i e a J u n e 1 9 9 5
在离体条件下拐芹 ( A n ge Uca oP yt m o rP h 。 )形成胚性
愈伤组织和非胚性愈伤组织过程中
几种内源激素的变化
汤国庆 李文安
(中国科学院上海植物生理研究所 , 上海 2 0 0 0 3 2)
摘 要
以拐芹 ( A n g e乙i C a p o l夕阴 o r p h a ) 的叶柄为外
植体 , 在 I材加 2 , 4一 D ( 1 m g / L ) + K T ( 0 . ￡; m g /
)L M S 培养基上诱导脱分化 , 40 天内可形成愈
伤组织 。 在相同的培养基上经过继代培养 , 可
在 2 0 天内形成胚 性 愈 伤 组 织 ( E m b r y (》 g e n i c
C a l l u s , E C )不f l非胚性愈伤组织 ( N o n 一 E m b r y -
o g e n i c c a l l u s
, N E C )
。 将不同天 数 的培养物
作为样品 ,提取其内源激素 ; 气液相色谱 ( G as -
L i q u i d一 C h r o m a t o g r a p h y , G L C )测 定 结果 发
现 , 内源 A B A , G A 3 , C T K 和 I A A 的水平都
有变化 , 尤其是 A B A , G A 3 。 这些 结 果 表明
内源 A B A 和 G A 3在胚性愈伤组织和 非胚性愈
伤组织的分化过程中起着重要作用 。
关健词 : 内派激紊 脱分化 胚性愈伤组织 非胚性愈伤组织 气液相色讼
本文 1 9 9连年 3 月 7 日收至lj。 19 9 4 年 1 2月 s 口按受 。
T H E C H A N G E S O F S E V E R A L E N D O G E N O U S P H Y T O 一
H O R M O N E S D U R I N G T H E F O R M A T I O N O F E M 一
B R Y O G E N CI C A L L U S A N D N O N 一 E M B只Y O 一
G E N IC C A L L U S I N A N G E L IC A P O L Y一
M O R P H A I N V IT R O
T a n g (蚤u o 一 q i n
( S八a n g h a i l叮s t止t u t己 o f P l a n t P h y s io l o g ) 。 A c a d e矛,艺名a
L i W
e n 一 a n
S玄n ie a , 3 0 0 F e n g不i玲 R o a d , S儿a 凡g儿a 艺 2 0 0 0 3 2 )
I N T R O D U C T I O N
U s u a l l y
,
t h e e m b r y o g e n i e e a l l u s i n
-
d u e e d b y Z
, 4一 D e a n e a r r y o u t a l l P r o e e s s
o f d e v e l o Pm e n t o f e m b r y o g e n e s i s a n d r e
-
g e n e r a t i o n t o P l a n t l e t
.
P e r h a P s t h e e m
-
b r y o g e n i e e a l l u s h a s t h e e h a r a e t e r o f h o r
-
m o n e a u t o n o m y ( B i n n s 1 9 8 7 ) 〔 ` ]
.
S i n e e t h e m a t e r i a l o f P l a n t e e l l e u l
·
t u r e 15 d i f f i e u l t t o o b t a i n f o r e n d o g e n o u s
P h y t o h o r m o n e e x t r a e t i o n a n d a n a l y s i s
,
r e P o r t s o n t h e e h a n g e s o f e n do g e n o u s
204 汤国床
P hy to ho r m o n e i n the fo r m 〔飞 ti o n o fe m b -
r y o ge n i e e a l l u sw e r e r a r e i n the P a st
y e a r s
.
I n 1 9 9 7
,
F u j i m u r a a n d K o m a m i n e t
“ ]
d i s e o v e r e d t h a t t h e r e 15 n o d i f f e r e n e e
o f e n d o g e n o u s ￡、 u x i n l e v e l i n D a u e u s e a r o -
t a a m o n g a l l s t a g e o f s o m a t i e e m b r y o g e n e
-
5 15
.
A t t h a t t i m e
,
t h e y d e t e e t e d b y t h e
m e r h o d o f A v e n a e u r v a t u r e t e s t
.
I n 1 9 8 2
,
N o m a e t a l [
3 ] d i s e o v e r e d t h a t s e v e r a l k i n
-
d s o f g i b b e r e l l i n P I之zy im P o r t a n t r o l e i n
t h e P r o e e s s o f s o m a t i e e m b r y o g e n e s i s i n
刀口u e u s e a or t a a n d P i m P i n e l l a a 凡 15 2` 刀2 L .
b y H P L C a n d G C 一R C d e t 〔 e t i o n . A n d
t h e n i n 1 9 9 0
,
E r i k A u b o i r o n e t a l t 4 ]
r e P o r t e d t h a t a t m o s Ph e r i e e o n s t i t u e n t o f
t h e e u l t u r e v e s s e l s 15 o n i m P o r t a n t f a e t o r
f o r s u e e e s s f u l s o m a t i e e m b r y o g e n e s i s i n
H e v ae b r as i乙落e n s i s a n d t h o u g h t t h a t e t h y -
l e n e 15 t h e k e y f a e t o r
.
H e r e w e P r e s e n t
o u r e x P e r i m e n t a l r e s u l t s t h a t s h o w t h e
e h a n g e s o f e n d o g e n o u s a b s e i s i e a e i d
,
9 1
-
b b e r e l l i n A 3
, : 飞u x i n , z e a t i n a n d 〔d iH 〕Z
l e v e l s d u r i n g 、 o m : l t i e e m b r y o g e n e s i s i n
A 柞 g e不i e a P o l y ” Zo r P入a , e s P e e i a l l y a b s e j s i e
a e id a n d g i b b e r e l l i l l A
.
李文安 2 8 卷
111 P 2 0
s , a j飞d t h e n d i s s o l v e d i n N , 0 一b i s 一 ( t r i ·
m e t h y ls i l y l ) a e e t a m i d e ( B S A ) t o P r e P a r e t r im e
-
t h y l s i l y l d e
r i v a t i v e s
.
D e r i
、 a t i v e s w e r e h e a t e d
o v e r 8 0
`
C I勺 r 2 h b e f o r e G L C ( G a s L i q u i d C h -
r o 一n a to g r a p h ) a n a l y s i s
.
G L C
e q u iP m
e
m t w
a s 5 8 9 0 M o d e l d e t e
e t o r
,
3 2 9 0 A i n t e g r a t
o r
( H e w l e t t P a e k a r d C o
.
)
.
C h r
o ·
m a t o g r a P h y e o l u m n w a s P H一 1 ( M e t h y S i li e o n e
G u m ) 1 0 m 只 o . 5 3 m m x 2 . 6 5 砰m f i lm t h i e k n e s s .
T h e G L C w a s o P e r a t e d u n d e r t h e f o l l o w i n g e o n
,
d i t i o n
:
h y d r o g e n f l o w
,
3 0
.
0 m l /m in ; a i r f ] ow
-
3 0
.
0 m l / m i n
; n i t r o g e n e a r r i e r g a s f l o w
,
2通. s m l /
m i n
; i n j e
e t o r t e m P e
r a t u r e 2 3 0 oC a n d d e t e e t o r
t e一n P e r a t u r e 2 8 0℃ . T e m P e r a t u r e P r o g r a m m i n g
5 t a r t e r a t t s。℃ a n d i n e r e a s e d l i n e r l y t o 2 8 0℃
a t t h e r a t e o f 1 5℃ / m i n . R e t e n t i o n t im e a n d
t e m P e r a t u r e o f e
a e h P e a k w e r e r e e o r d e d a n d
e o m P a r e d t o t h o s e o f t r i ln e t h y l s i l y ] d e r iv a t i v e s
o f a u t h e n l i e s t a n d a r d s
.
R E S U L T
M A T E R IA L S A N D M E T H O D S
P l a n t M a te r i a l s a n d C a l l u s C u l t u r e
A 几 g e 乙玄e a P o 不y m o r Ph a b e l o n g s 一 t o t h e f a m i l y
o f U m b e l l i f e r a e
,
w i l d t y P e
, a n d 15 P e e u l i a r t
o
C h i n a
.
T h e P r e P a r a t i
o n f o r s t e r i li z e d P l a n t le t
w a s a e e o r d i n g t o r o u t i n e m e t h o d s
.
T h e p e t i o l e (。 . 5一 1 e m lo n g ) , a s e x p la n t ,
w a s i n e u b a t e d o n M u r a s h i g e a n d S k
o o g
, s ( M S )
m e d i u m s u PP le m e n t e d w i t h Z
,
4一D ( 1 m g / L ) a n d
K T ( 0
。
2 5 m g / L )
, a t Z竺一 2 5℃ , 4 0 0 0 l x 工s h / d a y ,
t h e e a l l u s
a P P e 刁r e d i n 4 0 d a y s · D u r i n g s u b e u l-
t u r i n g e o n t i n u a l ly
o n t h e s a m
e
m
e d i u m
之王f t e r -
w a r d
,
t w o t y P e o f e a ll u s w o u l d f o r m
, o n e w
a s
e m b r y o g e n ie e a l l u s ( E C ) a n d t h e o t h e r w a s
n o n 一 e m b r y o g e n i e c a ll u s ( N E C )
·
E C e o u l d e a
r r y
o u t s o m a t i e e m b r y o g e n e s is o n M S Z
,
4一D 一 l r e e
m e d i u m
,
b u t N E C
e o u l d n
声
t
.
T h e E x t r a e t i
o n a n d D e t e c t i o n o f E n d o g e n
-
o u s P h y t o h o r 幻比o n e
E n d o g e n o u s h o r m o n e s w e r e e x t r a e t e d a n d
Pu r i f i e d a e e o r d i n g t o t h e P r o e e d u r e s o f D i n J i n
e t a l
.
1 5 ] S i l y l a t io n P r o e e d u r e a s f o l l o w i n g
:
S
a m
-
P l e w a s d i s s o l
v e d i n 9 5% e t h y l
正l e
h o h o l
,
d r ie d
I n v i t r o t h e d e d i f f e r e n t i a t i o n o f P e
-
t i o l e s e g m e n t o f A 凡 g e l i e a P o乙y n 飞o r孔P a i n -
d u e e d b y Z , 4一 D w i t h i n 4 0 d a y s i n e l u d e d
t w o P r o e e s s e s
.
I n o n e P r o e e s s t h e e x P l a n t
e x P a n d a n d d e e o l o r i z e f r o m g r e e n t o w h i
-
t e i n 花飞P P r o x im a t e 2 0 d a y s
.
I n t h e o t h e r
P r o e e s s t h e e 乏芝l l u s e m e r g e i n 石定n o t h e r 2 0
d a y s 芜zf t e r w a r d . D u r i n g s u b e u l t u r e , e a l l i
w e r e d i v id e d i n t o t w o t y P e s
,
t h e y e l l o w i
-
。 h e m b r y o g e n i e e a l l u s a n d t h e g r e y w h i t e
n o n 一 e m b r y o g e n i e e a l l u s
.
T h e e h a n g e s o f s e v e r a l e n d o g e n o u s
Ph ) t o h o r m e n e l e v e l s d u r i n g t h e d e d i f f e r
-
e n t i a t i o n a n d t h e f o r m a t i o n o f C a l l u S
1
.
E n d o g e n o u s a b s e i s i e a e id ( A B A )
( n g / g F W ) ( F i g
.
1
.
)
: T h e l e v e l o f A B A
i n e r e a s e d q u j e k l y f r o m 1 6 5
.
3 t o 2 2 7 0
.
3
j n o一 s t h d a y 之I n d r h e n d e e r e a s e d t o 1 6 2 ,
n e a r ! y t o t h e n a t u r a l l e v e l i n 2 0 t h d a y
,
T h e s e e o n d P e a k w a s f o r m e d i n 2 0一 4 0 t h
d a y
,
t h e l e v e l o f A B A i n e r e a s e d q u i e k l y
f f o m 1 6 2 t o 2 4 0 7
.
9
.
2
.
E n d o g e n o u s g i b b e r e l l j n A n ( G A )
( n g / g F W ) ( F i g
.
1
.
)
: T h e l e v e l o f G A
` 十 7
i n e r e a s e d a l i t t l e w i t h i n o一 4 0 t h d a y .
B u t t h e l e v e l o f G A
3 i n e r e a s e d f r o m 3 6
.
7
t o 3 17
.
5 t h e n d e e r e a s e d t o 1 5 3
.
9 i n t h e
2 期 在离沐条件下拐 {字形成胚性愈佼组织不叫1:胚件愈伤组织过程中几种内源激索的 变化 2 0 5
夕 砂
: 二 川川
~ 丈
谈 全 ,
; )点
F ig
.
1 C h a n g e s o f l e v e l s o f e n d o g e n o u s
A B A a n d G A d u r i n g d e d i f f e r e n t蔺a t i .〕 n
w i t h i n 40 d a y s
.
0一 1 g t h d a y . A t l a s t t h e l e v e l o f G A 3
i n e r e a s e d v i o l e n t l y f r o m 1 5 3
.
9 t o 2 5 2 8
.
1
j n t h e 1 9一 4 0 t h d a y .
3
.
E n d o g e n o u s a u x i n ( I A A )
a n (】 e y -
t o k i n i n s ( C T K ) (
n g / g F W )
: T h e l e v 。: 1 o f
I A A m a i n t a i n e d a h i g h p e a k ( 4 2 0一 4 3 0 )
i n t h e s一 1 2 t h d a y . I n t h e 1 9一4 0 t h
d a y
,
i t i n e r e a s e d f r o m 1 9 8 t o 4 1 0
.
(
、
F i g
.
2
.
)
n o n 一 e m b r y o ge n i e e a l l u s ( N E C )
T h e e a l l i w e r e d i v i d e d i n t o t w o t y
-
P e s d u r i n g s u b e u l t u r i n g
,
w h i e h o n e w a s
E C
, a n d o t h e r w a s N E C ; E C e o u l d e a r r y
o u t SO m a t i e e m b r y o s e n e s i s o n M S
o
m e d i
-
u m
,
b u t N E C e o u l d n 产 t
.
W e e h o s e t h e t w o
t y P e s o f e a l l u s a s s a m P l e t o e x t r a e t e n d o
-
g e n o u s P h y t o h o r m o n e s a n d d e t e e t e d b y
G L C
,
t h e r e s u l t s o f d e t e e t i o n w e r e a s f o
-
110 W S
:
1
.
E n d o g e n o u s a b s e i s i e a e i d ( A B A )
( n g / 9 FW ) ( F i g
.
4 , 5 )
:
T h e l e v e l o f
A B A w a s h i g h e r ( 1 9 0 4
.
0 ) i n E C t h a n
t h a t ( 7 4 9
.
3 ) i n N E C a t 6 0 t h d a y
.
C o m
-
Pa r i n g w i t h t h e e a l l u s f o r m e d i n 4 0 d a y s
,
t h e l e v e l o f A B A o f E C m a i n t a n e d a h i g
-
h e r l e v e l
.
G A闷
口 . 二 二目曰 . . . 曰 .公
, 2 几 3 ` 4 含舀
爵匕三一ùō训“.一沐ó拢望-1-币十lr ,甲-óùōù如ū!润
l己,
沪J山江比三砰叶一!ùō一.砂J-l卜
F i g
IA A
d a y s
2 C h a n g e o f l e v 日 o f
d u r 节n g d e d if f e r e n t i a t i o n
e n d o g e n o u s
w i t h乡n 40
ǐ IJ|ǎ沙
ó .粗侣ù`ó莞-内`lq已.补月盆记,-叼.`峪ù己JO峨l合工`上卜
T h e l e v e l o f t o t a l C T K i n e r e a s e d
f r o m 1 9 0 t o 5 4 9 a n d t h e n d e e r e a s e c! In
5一 1 9 t h d a y , b u t i t i n e r e a s e d t o 8 6呀} i n
1 9一 4 0 t h d a y . I t 15 v e r y i n t e r e s t i n g t h a t
t h e e h a n g e o f 〔d i H 〕2 l e v e l e l o s e l y P a r a -
l l e l e d t o t h a t o f t o t a l C T K
.
( F i g
.
3
.
)
F ig
。
4 C h a n g e s o f l e v e l s o f s e v e r a l e n d o
-
g e n o u s Ph y t o h o mr
o n e s ( A B A
,
G A
。 ,
C T K
,
I A A ) f r o m th e e a ll u s t o E C
o n M S + 2
,
4一D ( 1 m g / L ) + K T
( 0
.
25 m g / L ) m
e d i u m
但 拜蒸薰
二匕止习” ’ 品厂川
基美三封
F i g
.
5 C h a n g e s o f le v e l s o f s e v e r a l e n d o
-
g e n o u s p h y to h o mr
o n e s ( A B A
,
G A
。 ,
C T K
,
I A A ) f r o m t h e e a l l u s t o
N E C o n M S + 2
.
4一D ( 1 m g / L ) + K T
( 0
.
2 5 m g / L ) m e d i u m
.
.
.ó月“”皿川引水
ù`去留鉴二卜é
淇叫ùe1-比`一
二份-淤`一三L
F i g
.
3 C h a n g e o f l e v e l o f e n d o g e n o u s C T K
d u r i n g d e d i f f e r e n t i a t i o n w i th i n 4 0
d a y s
T h兮l e V e l S o f e n d o 郎n o u s
m o n e S I n
e m b r y o ge n l e e a l l u s
Ph y t o h o r -
( E C )
a n d
2
.
E n d o g e n o u s g i b b e r e l l i n A n ( G A
n
)
( n g / 9 FW ) ( F i g
.
4 , 5 ) : A s t h e s a m e
w i t h A B A
,
t h e l e v e l o f G A
3 w a s h i g h e r
i n E C ( 1 5 9 7
.
3 ) t h
a n t h a t i n N E C
( 4 7 1
.
6 )
,
t h e l e v e l o f G A 。 m a i n t a n e d a
h i g h l e v e l i n E C w a s s e e o n d o n l y t o
2 0 6汤国庆 李文安 2 8卷
t h a t of e a l lt js f r om e d i n 4 0 d a y s
.
on
t h e ot h e r h a n d
,
t h e l e v e l s o f G A 4 , 7
m a i n t a i n e d v e r y l o w l e v e l
.
3
.
E n d o g e n o u s a u x i n ( I A A )
a n d e y
-
t o k i n i n s ( C T K ) (
n g / g FW ) ( F i g
.
4 , 5 ) :
I t w a s v e r y s t r o n g e t h a t t h e l e v e l s o f
I A A a n d C T K e n d o g e n o u s P h y t o h o r m o n e
m a i n t a i n e d a P P r o x im a t l y t h e s a m e l e v e l
,
a n d a P P r o x im a t l y e q u a l w i t h t h e e a l l u s
f o r m e d i n 4 0 d a y s
, a n d t h e r e w a s n o d i f
-
fe r e n e e b e t w e e n E C ( I A A 4 7 0
, C T K
8 1 7 ) a n d N E C ( I A A 3 8 9
,
C T K 7 4 5 )
.
D I S C U S S I O N
A s t h e s e d i a g r a m s s h o w i n g
,
t h e l e v e l
o f A B A w a s i n e r e a s e d r a P i d l y i n o一 s t h
da y
, a n d t h e n d e e r e a s e d i n s一 2 0 t h d a y .
E a e h o f e n d o g e n o u s e G A
3 , 仁d iH 〕2 a n d
I A A a l s o h a s a s m a l l P e a k i n o一 2 0 t h
d a y
.
B u t t h e i n e r e a s e o f t h e i r l e v e l s w a s
l o w e r t o A B A a l o t
.
I t w a s i n t e r e s t i n g
t h a t e n d o g e n o u s o G A
3 , D i一 z e a t i n a n d I A A
l e v e l s i n e r e a s e d b y a bi g m a r g i n i n 2 0 t h
d a y l a t e r s y n e h r o n o u s l y w i t h e n d o g e n o u s
A B A
, e s P e e i a l l y e n d o g e n o u s G A
3
.
I n E C
,
t h e l e v e l s o f e n d o g e n o u s A B A
a n d G A
o
m a i n t a i n e d h i g h l e v e l h i g h e r t o
N E C
B i o e h e m i e a l d e v e l o Pm e n t i n t h e e m
-
b r y o id m a y b e r e l a t e d t o t h e o n s e t o f e e l l
d i f f e r e n t i a t i o n ( A z一 A b t a 1 9 7 8 ) 工“ ]
.
I n 1 9 8 7
,
R a j
a s e k a r a n K e t a l
.
[ ? 1 d i s e o v e r e d t h a t e n
-
d o g e n o u s A B A 15 o n e o f t h e i m OP
r t a n t
f a e t o r e o n t r o l l i n g t h e e m b r y o g e n i e e a P a e i
-
t y o f l e a f e x P l a n t s i n N a P i e r g r a s s
.
W h
e n
P r o v i d i n g e x o g e n o u s l y
,
A B A e a n j n d u e e
t h e e a l l u s t o u n d e r g o s o m a t i e e m b r y o g e n e
-
5 15 i n C艺t r u s 5 1凡 e n s i s ( K o e h b a , 1 9 7 8 ) [ 8 ] .
T h e t e n d e n e y t o w a r d h i g h e r A B A l e v e l
i n e m b r y o g e n j e a l l y e o m P e t e n t e x P l a n t o r
e a l l u s j s a s s o e i a t e d w i t h i n i t i a t i o n o r e x
-
P r e s s i o n o f e m b r y o g e n i e e a P a e i t y
.
A s r e
-
Po r t e d a b o v e
,
i n o u r e x p e r i m e n t
,
t h e f j r s t
P e a k o f e n d o g e n o u s A B A m a y m e a n t h a t
A B A w a s i n i t i a t o r i n o一 5 t h d a y , a n d
t h e n r e s u l t e d i n o t h e r e n d o g e n o u s P h y t o
-
h o r m o n e s e h a n g i n g a n d d e d i f f e r e n t i a t j o n
;
m o r e o v e r
,
t h e h i g h l e v e l s o f A B A i n t h e
e a l l u s f o r m e d i n 4 0 d a y s a n d i n E C m a y
b e r e l a t e d t o e m b r y o g e n i e e a P a e j t y o f
t h e m s e l v e s
.
C o m P a r i n g w i t h z y g o t i e e m b r y o d e
-
v e l o Pm e n t
, e n d o g e n o u s G A 3 15 v e r y i m
-
P o r t m a n t f a e t o r t h a t r e g u l a t e z y g o t i e e m
-
b r y o d e v e l o p m e n t ( A l p i 1 9 8 8 ) [
“ 〕. O n t h e
e o n t r a r y
,
i t 15 k n o w n t h a t e x o g e n o u s G A
3
e a n i n h i b i t
, a t l e a s t P a r t i a l l y
, e m b r y o g e
-
n e s i s ( H a l p e r i n
,
1 9 7 0 )
[ ` “ ) , F u j i m u r a a n d
K o m a m i n e 1 9 7 5〔 ’ ` 1 )
.
F u t h e r m o r e
,
i n 1 9 8 2
,
N o m a e t a l
. 汇3 J d i s e o v e r e d t h e f i r s t e v i d e n -
e e o f P o s s i b l e i n v o l v e m e n t o f e n d o g e n o u s
G A s i n s o m a t i e e m b r y o g e n e s i s
, a n d t h e y
t h o u g h t t h a t h i g h l e v e l o f G A i n h ib i t i t e d
t h e s o m a t i e e m b r y o g e n e s i s i n e a r r o t a n d
a n i s e e e l l e u l t u r e
.
N o m a e t a l
.
s P e e u l a t e d
t h a t t h e a n t i e m b r y o g e n e s i s e f f e e t o f 2
.
4一
D m i g h t b e b r o u g h t a b o u t v i a h i g h l e v e l s
o f a b i o l o g i e a l l y a e t i v e
, e n d o g e n o u s
,
P o l a r
G A ( e
.
9
.
G A
3
)
.
T h e r e m o v a l o f Z
, 4一D
m a y a l l o w a r a P i d m e t a b o l i s m o f t h i s
G A
, r e d u e i n g i t t o a l e v e l P e r m i t t i n g
e m b r y o g e n e s i s d e v e l o Pm e n t
.
I n o u r e x P e
-
r im e n t
,
w h e n t h e E C a n d t h e N E C w e r e
i n e u b a t e d o n t h e Z
, 4一 D一 f r e e M S m e d i u m
,
t h e G A l e v e l o f E C d e e r e a s e d r a P i d l y
n ” a r l y t o n a t u r a l l e v e l ( 9 6 n g / 9 F W ) a t
6 t h d a y
,
b u t t h e G A
3 i n N E C m a i n t a i n
-
e d a t a r e l a t i v e h i g h l e v e l ( 6 0 9 n g / 9 F w )
.
T h u s
,
t h e r e l a t i o n b e t w e e n Z
, 4一 D a n d
e n d o g e n o u s G A
3
j n e m b r y o g e n i e e a p a e i t y
i n A n g e墓云e a P o不y m o r P瓦a j s s o m e h o w e l e a r .
( s e e F j g
.
6 , 7
.
)
^ 日 ^
、 勺~ 二、
〔 、 T K ,
号
0洲阴仙“O护J户」ō州.,二一亏轰芝彗二é-盆`ó`吕ó一户ó尝ùó二户冲ù益三é``ó声衅`一护JJ卜
F i g
.
6 C h a n g e s o f l e v e l s o f s e v e r a l e n d o
-
g e n o u s p h y t o h o r m o n e s ( A B A
,
G A
。
C T K
,
I A A ) a f t e r ht e E C w a s j n
-
e u b a t e d o n Z
,
4一D 一 f r e e m e d i u m
( M S
o )
2期 在离体条件下拐芹形成胚性愈伤组织和 J}:胚性愈伤组织过 程中几种内源激素的变化 2 n 7
in d i ca t￡d t h a t e n d o g e n o u s A B A a n d G A 3
P la y j m P o r t a n t r o l e s i n t h e P r o e e s s o f t h e
e e l l d i f f e r e n t i a t i o n i n t h e e m b r y o g e n i e
e a l l u s a n d t h e n o n 一 e m b r y o g e n i e e a l l u s .圣一些。 冬^G人 J`州溯撇圳仆ǎ,ó J即ùù决`门-l二-ó之ù一。长任工洲-,自-`众户ù工声.óJ因1州决一侧1 。毒
F i g
。
7 C h a n g e s o f l e v e l s o f s e v e r a l
·
g e n o u s Ph y t o h o r m o n e s ( A B A
,
e l l d o
-
G A
。
C T K
,
IA A ) a f t e r t h e N E C w a s i n
-
e u b a te d o n Z
,
4一 D 一 f r e e m e d ; u m
( M S
o )
K e y w o r d段: E n d o 即n o u s P h y t o h o r m o n e , D e -
d i f f e r e n t i a t i o n
.
E m b r y o助 n i e
e a l l u s ( E C )
.
N o n 一 e m b r y o醉 n i e
c a一l u s 一 ( N E C ) . G a s一 L iqu i d -
C h r o m a t o g r a Ph y ( G L C )
.
和尸叫口叱
T h e r o l e o f e n d o g e n o u s a u x i n a n d
e y t o k i n i n s h a s r e e e i v e d l i t t l e a t t e n t i o n
.
I n
1 9 7 9
,
F u j im u r a a n d K o m a m i n e [
“ ] f ( ) u n d
t h a t t h e e a r l y s t a g e o f e m b r y o g e n e s i s 15
s e n s i t i v e t o b o t h a u x i n a n d a n t i一 a u x i n
a n d t h a t t h e l e v e l a n d /
o r t h e P o l a r i z e d
d i s t r ib u t i o n o f e n d o g e n o u s a u x j n i n t h i s
s t a g e m a y b e e r i t i e a l f o r t h e i n d u e t i o 〕1 o f
e m b r y o g e n e s i s
.
B u t i n A n g e l ica P o乙y m o r · P几a ,
w e d i s e o v e r e d t h a t a l l k i n d s o f e a l l u s m a
-
i n t a i n e d h i g h l e v e l s o f a u x i n ( I A A )
a n d
e y t o k i n i n ( 〔d i H 〕 Z ) , a n d t h e r e 15 n o d i f f e -
r e n e e b e t w e e n E C a n d N E C
.
5 0 i n t h e
v i e w o f e n d o g e n o u s P h y t o h o r m o n e
,
v 话h e n
a u x i n a n d e y t o k i n i n P r o v id e d e x o g e n o u s
-
l y
,
t
wo
t y P e s o f e n d o g e n o u s Ph y t o h o r m o
-
n e s m a y b e n o t t h e k e y f a e t o r s o f e o n
-
t r o l l i n g e e l l d i f f e r e n t i a t i o n i n t h e e m b r y o
-
g e n i e e a l l u s a n d n o n 一 e m b r y o g e n i e e a l l u s
b e f o r e u n d e r g o j n g s o m a t i e e m b r y o g e n e s i s
.
R E F E R E N C E S
A B S T R A C T
T h e P e t o i l e o f A n g e乙尤e a P o l y m o r P子za ,
a s e x P l a n t
,
w a s j n e u b a t e d o n r h e M S m e
-
d i u m s u p p l i e m e n t e d w i t h Z
, 4一 D ( 2 m g / L
+ K T ( 0
.
2 5 m g / L )
a n d r e s u l t e d i n d e d i f
-
f e r e n t i a t i o n t o f o r m e a l l u s w i t h j n 4 0 d a
-
y s
, a n d t h e n t w o d i f f e r e n t e a l l u s a P P e a r e d
2 0 da y s a f t e r w a r d t h r o u g h s u b e u l t u r e
.
T h e s a m P l e o f e x t r a e t i o n o f e n d o g e n o u s
P h y t o h o r m o n e w e r e e h o s e n
,
f r o m e u l t u r e s
o f v a r i o u s d a y s
.
T h e r e s u l t s d e t e e t e d b y
G L C s h o w e d t h a t t h e l e v e l s o f A B A
,
G A s
,
C T K a n d I A A h a v e d r a m a t i e a l l y e h a 丈z g e d ,
e s p e e i a l l y j n A B A a n d G A
3
.
A l l t h e s e
〔 1 〕 B i n n s , A . N . , J . L a b r i o l a , R . C . B l a e k ,
1 9 8 7
,
I n i t i a t i o n o f a u x i n a u t o n o m y i n
N i e o 才玄a 咋a g忍u才京n o s a e e l l b y th e e y t o b i o ·
s y n t h e s i s g e n e f r o m A g r o b a e t己 r东u 机 t u川e -
f a e 乞e n s · P不a ”亡a , 1 71 : 5 39一 5 4 8 .
仁2 〕 F u j im u r a , T . a n d A . K o m a m i n , 1 9 7 9 ,
I n v ul v e m e n t o f e n d o g e n o u s A u x i n I n
S o m a t i e E m b r y o g e n e s i s i n a e a r r o t e e l l
s u s P e n s i o n e u l t u r e
.
2
.
P f l a n z e ” P九y ￡止。乙
B d
,
9 5 : 3一 1 9 .
〔 3 〕 N o m a , M . , J . H u b e r , D . E r n s t , R . P .
P h
a r i s
,
1 9 8 2
,
Q u a n t i t a t io n o f g i b b e r e l l i
n s
a n d t h e m e t a b o li s m o f [ 3H 〕 g i bb e r e ll i n
A 1 d u r i n g s o m a t i e e m b r y o g e n e s i s i n
e a r r o t a n d a n i s e e e l l e u l t u r e s
.
P不a n t a -
1 55 : 3 if g一 3 7 6 。
仁4 〕 A u b o i r o n , E . , M . P . C a r r o n . M . F . N i -
e o le
,
1 9 9 0
,
I n f l u e n e e o f a t m o s Ph e r ie
g a s e s
,
P a r t i e u l a r l y e t h y l e n e
, o n s o m a t i e
e m b r y o g e n e s i s o f H e v e a b r a￡玄忍i已” s 玄￡. P卜
a 月 t C e不l , T止s s u e a n d O r g a , , e u乙才u r e , 21 :
3 1一 3 7 。
〔 5 」 D i ji n , S h e n z h e n d e , 1 9 7 9 T h e m e t h o d ,
o f P h y t o h o r m o n e s e x t r a e t i o n a n d b i o lo
-
g i e a l一 t e s t ` T入e C o m m u 儿 i e a t i o ” o f P王a n r
P h y s i o l o g y N o
.
2 : 2 7一 3 9 .
〔 6 〕 A I一 A B T A 5 . , H . A . C o l l i n , 1 9 7 8 , C e l l
d i f f e r e n t i a t lo n j n e zn b r y oj d s a n d P l a n t l e t s
o f e e le
r y t i s s u e e u l t u r e s
.
N e w P儿y t o 忍。 ·
9 is t
,
8 0 : 5 17一 5 2 1 .
〔 7 j R a j a s e k a r a n , K . , M . B . H e i n 1 . K . V a -
5 11 1 9 5 7
,
E n d o g e n o u s a b s e i s i e a e i d a n d
i n d o l e一 3一 a e e t i e a e i d a n d s o r n a t i e em b r y o ·
g e n e s i s i n e u l t u r e d l e a f e x P la n t s o f P e 打 -
n is e t u m P u r Pu r e u附 S e h u m P正a n t P h y s io ·
王o g y , 8 4 : 心7一5 1 .
〔 s 」 K o e h b a J · , P . S Pi e g e l一 R o y . , H . N e u m a n n
2 05汤国)少泛 李文安 28 卷
5
.
S a a d
,
1 9 7 8
,
S t im u l a t in n o f e m b r y o
一
m a t i e P l a n t e e l l s
·
I n : C o n t r o l m e e h a n i s
-
g e n e s i s i n C乞艺r us o v u Za r c a l l u s b y A B A , m s i n t h e e x p r e s s l o n o f e e l lu l a r Ph e no -
E t h e Ph o n
,
C C C a n d A la r a n d i t s s u PP r e
一
t y P e s
,
S y m P
.
I n t
.
S o e
.
f o r C e l l B IOI
·
s s io n b y G A 3
.
2
.
P f不a 玲z e n Ph y s `o 乙, 8 9 : 1 9 7 0 ; P P : 1 6 9一 1 9 1 , P a d y k u l a , H · A .
4 2 7一 4 3 2 . e d . A e a d e m i e P r e s s . N ew Y o r k , L o n d o n .
〔 9 〕 A IP i . A , 1 9 8 8 , G i b b e r e l l i n s i n e m b r y o 〔1 1〕 F u j im u r a , T . , A , K o m a m i n e , 1 9 7 5 , E f -
d e v e l o Pm e n t
.
I n : P l a n t G r o w t h S u b s t a
n · f e e t s o f v a r i o u s g r o w t h r e g u l a t o r s o n t h e
e e , p p 峨6 8一 4 7 5 . R . P P h a r i s , 5 . D . e m b r y o g e n i s i s i n a e a r r o t e e l l s u s P e n -
R o d
, e d s S P r i n g e r 一 V e r l a g
.
s 一o n e u l t u r e . P之a 刀 t S e ` . L e t t . , 5 : 3 5 9一
〔1 0〕 H a l Pe r i n , W · , 1 9 7 0 , Em b r y o s f r o m 5 0 · 3 6 4 ·