全 文 ：２０１３年１２月 甘　肃　农　业　大　学　学　报 第４　８卷
第６期１０４～１０９ ＪＯＵＲＮＡＬ　ＯＦ　ＧＡＮＳＵ　ＡＧＲＩＣＵＬＴＵＲＡＬ　ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ 双 月 刊
基于ＳＳＲ标记的迎春樱自然居群遗传
多样性分析
商韬１，王贤荣１，南程慧２，张琼１
（１．南京林业大学森林资源与环境学院，江苏 南京　２１００３７；２．南京森林警察学院，江苏 南京　２１００３７）
摘要：采用ＳＳＲ分子标记对迎春樱（Ｃｅｒａｓｕｓ　ｄｉｓｃｏｉｄｅａ）４个居群共１１２个单株的遗传多样性进行了研究．结果
显示：１５对ＳＳＲ引物共检测到５４条等位基因，平均每位点等位基因３．６个，平均多态位点比率为８６．６７％．Ｎｅｉ′ｓ基
因多样性指数为０．３６７　６～０．４９９　０，Ｓｈａｎｎｏｎ信息指数为０．５８８　３～０．８５１　５．分子方差分析（ＡＭＯＶＡ）表明，迎春樱
７８％的遗传变异来自居群内，２２％的遗传变异来自于居群间．居群间基因流（Ｎｍ）为０．６９４　４，遗传分化系数（Ｆｓｔ）
为０．２６４，表明迎春樱居群间的遗传分化水平较高，基因交流受阻．聚类分析结果显示，４个居群可聚为２支．对迎春
樱居群中等遗传多样性和居群间较高遗传分化形成的可能原因进行了分析，并提出了迎春樱的保护利用策略．
关键词：迎春樱；居群；ＳＳＲ；遗传多样性
中图分类号：Ｓ　６８５．９９　　　　文献标志码：Ａ　　　　　文章编号：１００３－４３１５（２０１３）０６－０１０４－０６
第一作者：商韬（１９８９－），男，硕士研究生，研究方向为植物资源学．Ｅ－ｍａｉｌ：ｓｈａｎｇｔａｏ１１２２＠１２６．ｃｏｍ
通信作者：王贤荣，女，教授，博导，研究方向为植物分类学、植物资源学．Ｅ－ｍａｉｌ：ｗａｎｇｘｉａｎｒｏｎｇ６６＠ｎｊｆｕ．ｅｄｕ．ｃｎ
基金项目：江苏省农业科技支撑计划（ＢＥ２０１２３４６）．
收稿日期：２０１３－０９－１０；修回日期：２０１３－１０－２４
Ｇｅｎｅｔｉｃ　ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｉｎ　ｎａｔｕｒａｌ　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ　ｏｆ　Ｃｅｒａｓｕｓ
ｄｉｓｃｏｉｄｅａｂａｓｅｄ　ｏｎ　ＳＳＲ　ｍａｒｋｅｒｓ
ＳＨＡＮＧ　Ｔａｏ１，ＷＡＮＧ　Ｘｉａｎ－ｒｏｎｇ１，ＮＡＮ　Ｃｈｅｎｇ－ｈｕｉ　２，ＺＨＡＮＧ　Ｑｉｏｎｇ１
（１．Ｃｏｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｆｏｒｅｓｔ　Ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ　ａｎｄ　Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ，Ｎａｎｊｉｎｇ　Ｆｏｒｅｓｔｒｙ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｊｉｎｇ　２１００３７，Ｃｈｉｎａ；
２．Ｎａｎｊｉｎｇ　Ｆｏｒｅｓｔ　Ｐｏｌｉｃｅ　Ｃｏｌｅｇｅ，Ｎａｎｊｉｎｇ　２１００３７，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｇｅｎｅｔｉｃ　ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　１１２ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｓ　ｆｒｏｍ　４　Ｃｅｒａｓｕｓ　ｄｉｓｃｏｉｄｅａ　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ　ｗａｓ　ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄ　ｕ－
ｓｉｎｇ　１５ＳＳＲ　ｍａｒｋｅｒｓ．Ａ　ｔｏｔａｌ　ｏｆ　５４ａｌｅｌｅｓ　ｗｅｒｅ　ａｍｐｌｉｆｉｅｄ，ａｎｄ　ｔｈｅ　ｍｅａｎ　ｎｕｍｂｅｒ　ｏｆ　ａｌｅｌｅｓ　ｐｅｒ　ｌｏｃｕｓ　ｗａｓ
３．６，ｔｈｅ　ａｖｅｒａｇｅ　ｏｆ　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ　ｌｏｃｕｓ　ｐｅｒｃｅｎｔａｇｅ　ｗａｓ　８６．６７％．Ｔｈｅ　Ｎｅｉ＇ｓ　ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｉｎｄｅｘ　ｗａｓ　０．３６７　６～
０．４９９　０ａｎｄ　Ｓｈａｎｎｏｎ＇ｓ　ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｗａｓ　０．５８８　３～０．８５１　５．Ｔｈｅ　ＡＭＯＶＡ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｍａｊｏｒｉｔｙ　ｏｆ
ｇｅｎｅｔｉｃ　ｖａｒｉａｔｉｏｎ　ｏｃｃｕｒｒｅｄ　ｗｉｔｈｉｎ　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ（７８％ ），ａｎｄ　２２％ｏｃｃｕｒｒｅｄ　ａｍｏｎｇ　ｔｈｅ　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ．Ｔｈｅ　ｃｏｅｆｆｉ－
ｃｉｅｎｔ　ｏｆ　ｇｅｎｅｔｉｃ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ（Ｆｓｔ）ａｎｄ　ｇｅｎｅ　ｆｌｏｗ（Ｎｍ）ｗｅｒｅ　０．２６４ａｎｄ　０．６９４　４，ｗｈｉｃｈ　ｉｎｄｉｃａｔｅｄ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ
ｇｅｎｅｔｉｃ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ　ｗａｓ　ｒｅｌａｔｉｖｅｌｙ　ｅｖｉｄｅｎｔ，ｗｉｔｈ　ｆｅｗｎｅｓｓ　ｇｅｎｅ　ｆｌｏｗ　ｉｎ　Ｃｅｒａｓｕｓ　ｄｉｓｃｏｉｄｅａ　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ．Ｔｈｅ
４ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ　ｗｅｒｅ　ｄｉｖｉｄｅｄ　ｉｎｔｏ　２ｃｌａｄｅｓ　ａｃｃｏｒｄｉｎｇ　ｔｏ　ｇｅｎｅｔｉｃ　ｄｉｓｔａｎｃｅ．Ｔｈｅ　ｐｏｓｓｉｂｌｅ　ｆｏｒｍａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｍｉｄｄｌｅ
ｌｅｖｅｌ　ｇｅｎｅｔｉｃ　ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｈｉｇｈ　ｇｅｎｅｔｉｃ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ　ｗｅｒｅ　ｄｉｓｃｕｓｓｅｄ，ａｎｄ　ｆｕｒｔｈｅｒ　ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ　ａｎｄ　ｓｕｇ－
ｇｅｓｔｉｏｎｓ　ｆｏｒ　ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｃｏｎｓｅｒｖａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅｓｅ　ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ　ｗｅｒｅ　ｐｒｏｐｏｓｅｄ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｃｅｒａｓｕｓ　ｄｉｓｃｏｉｄｅａ；ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ；ＳＳＲ；ｇｅｎｅｔｉｃ　ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ
　　
第６期 商韬等：基于ＳＳＲ标记的迎春樱自然居群遗传多样性分析
　　迎春樱（Ｃｅｒａｓｕｓ　ｄｉｓｃｏｉｄｅａ）隶属于蔷薇科（Ｒｏ－
ｓａｃｅａｅ）李亚科（Ｐｒｕｎｏｉｄｅａｅ）樱属（Ｃｅｒａｓｕｓ），为樱属
资源的中国特有种，分布于我国的安徽、江西、浙江
等省，生于海拔２００～１　１００ｍ的山谷林中或溪边灌
丛中［１］．其花期较早，花色淡雅，树姿轻盈，花开时极
为美观，具有较高的观赏价值，开发利用前景广
阔［２］．有关该种居群变异、群落生态学等方面的研究
结果表明：迎春樱叶部、花部表型变异相对较大，在
野生群落中种群衰退明显，自然更新困难，加之人为
的干扰与破坏严重，属渐危类群［３］．Ｎｅｉ等［４］研究表
明：物种表型进化是由相互作用的基因突变引起的，
不同分类等级物种的表型多样性是新突变和遗传基
因的累积产物，新突变基因通过自然选择和基因漂
变被纳入基因组中并产生遗传保守性，从而影响表
型进化的方向．因此，深入研究迎春樱遗传多样性水
平及居群遗传结构，对科学有效地制定迎春樱资源
保护策略、引种驯化以及开发利用具有重要意义．
在日益发展的众多分子标记技术中，微卫星
（ｍｉｃｒｏｓａｔｅｌｉｔｅ）ＤＮＡ，即简单重复序列（ｓｉｍｐｌｅ　ｓｅ－
ｑｕｅｎｃｅ　ｒｅｐｅａｔ，ＳＳＲ）因其广泛分布于基因组、共显
性、重现性好、多态性丰富等特点，被广泛应用到居
群遗传结构分析、系统发育与进化、种质资源鉴定和
评价等领域［５－８］．ＳＳＲ在樱属植物中的应用多见于国
外［９－１１］．在国内，吕月良［１２］应用ＳＳＲ技术对福建山
樱花（Ｃ．ｃａｍｐａｎｕｌａｔａ）的居群遗传多样性进行了研
究．张琪静等［１３］进行了甜樱桃（Ｃ．ａｖｉｕｍ）品种ＳＳＲ
指纹检索系统的开发及遗传多样性分析．目前国内
外尚未见采用ＳＳＲ标记对迎春樱居群遗传多样性
及居群遗传结构进行研究的报道．本研究采用ＳＳＲ
分子标记技术，对迎春樱主要分布区的４个天然居
群的遗传多样性水平、居群遗传结构以及居群间的
亲缘关系进行了分析，以期明确迎春樱主要分布区
现存居群的遗传多样性水平及居群遗传结构，以此
为迎春樱资源的有效保护和合理利用提供参考依
据，也为探明迎春樱的起源、演变等提供基础资料．
１　材料与方法
１．１　试验材料
本研究选取分布于安徽黄山、江西庐山、浙江天
目山、浙江白云山４个迎春樱自然居群进行取样，各
居群的概况见表１．根据居群现有分布规模，每个居
群随机选取２０株以上生长状况良好的植株作为样
株，总株数不足２０株的居群则全部选为样株，４个
居群共计１１２个样株．在样株上采集健康的幼嫩叶
片，放入装有干燥硅胶的自封塑料袋中干燥，备用．
表１　４个迎春樱居群采样点概况
Ｔａｂ．１　Ｄｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｆｏｕｒ　ｓａｍｐｌｉｎｇ　ｓｉｔｅｓ　ｏｆ　Ｃｅｒａｓｕｓ　ｄｉｓｃｏｉｄｅａ
居群代号 居群来源地 样本数量 海拔／ｍ 纬度 经度
ＨＳ 安徽黄山 ３２　 ８３０　 ３０°０９′ １１８°０７′
ＬＳ 江西庐山 １６　 ５７４　 ２９°３６′ １１５°５５′
ＴＭＳ 浙江天目山 ３４　 ６０６　 ３０°２１′ １１９°２６′
ＢＹＳ 浙江白云山 ３０　 ４３２　 ２８°２４′ １１９°５４′
１．２　ＤＮＡ提取和ＳＳＲ－ＰＣＲ
采 用 改 良 ＣＴＡＢ 法 提 取 叶 片 基 因 组 总
ＤＮＡ［１４］．并用紫外分光光度计与１％的琼脂糖凝胶
电泳检测ＤＮＡ的浓度和质量．从相关研究中［１５－１７］
选择３０对引物进行扩增反应预试验，筛选出扩增条
带清晰、多态性丰富、重复性好的１５对引物（表２）
用于ＳＳＲ扩增反应．引物均由南京金斯瑞生物科技
有限公司合成．
ＳＳＲ－ＰＣＲ扩增反应在ＴＣ－Ｅ型ＰＣＲ仪（Ｂｉｏｅｒ）
上进行，ＰＣＲ反应相关试剂均购自上海捷瑞生物工
程有限公司．反应体系为：模板ＤＮＡ　０．５μＬ（ＤＮＡ
浓度为４０～６０ｎｇ／μＬ），上下游引物各０．３μＬ，Ｍｉｘ
混合液５μＬ，加双蒸水补足至１０μＬ．扩增程序为：
９４℃预变性５ｍｉｎ；９４℃变性４５ｓ，５５～５８℃退火
４５ｓ，７２ ℃延伸４５ｓ，共３５个循环；７２ ℃延伸
８ｍｉｎ．ＰＣＲ扩增产物用８％的变性聚丙烯酰胺凝胶
电泳分离，改良银染法染色［１８］，对所呈现的带谱进
行拍照统计．
１．３　数据分析
选择清晰、可重复的条带统计，用 Ａ、Ｂ、Ｃ等大
写字母进行记录，无带记为“．”．用Ｐｏｐｇｅｎｅ　１．３２软
件［１９］计算等位基因数（Ｎａ）、有效等位基因数（Ｎｅ）、
５０１
甘 肃 农 业 大 学 学 报 ２０１３年
表２　筛选出的ＳＳＲ引物序列特征
Ｔａｂ．２　Ｔｈｅ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ　ｏｆ　ＳＳＲ　ｐｒｉｍｅｒｓ
引物 引物序列（５′→３′） 长度／ｂｐ 退火温度／℃ 参考文献
ＡＭ２８７６４８
Ｆ：ＡＴＧＡＴＧＣＴＡＣＣＡＣＡＡＧＧＧＡＣＴＣＧＴ
Ｒ：ＧＴＴＴＡＧＣＴＧＣＡＣＡＴＡＣＧＣＴＴＴＴＡＣＣＴＣＣ
２７０－３５５　 ５５ Ｙｏｓｈｉａｋｉ　ｅｔ　ａｌ．２００９
ＡＭ２８７８４２
Ｆ：ＡＴＴＴＧＡＣＡＧＴＧＡＧＧＡＣＡＴＧＡＣＣＧＡ
Ｒ：ＧＴＴＴＡＣＡＡＴＴＡＡＡＧＧＴＧＧＧＴＴＡＧＧＧＣＣＡ
１５０－１７０　 ５５ Ｙｏｓｈｉａｋｉ　ｅｔ　ａｌ．２００９
ＡＭ２８８２０５
Ｆ：ＡＧＧＡＡＣＴＴＴＧＧＣＣＡＴＡＴＧＡＡＴＧＡＴ
Ｒ：ＧＴＴＴＧＴＴＧＣＡＡＴＡＧＴＣＣＣＡＴＣＡＣＴＧＣ
１８１－１８５　 ５５ Ｙｏｓｈｉａｋｉ　ｅｔ　ａｌ．２００９
ＤＮ５５３４２７
Ｆ：ＡＣＴＧＡＣＴＣＡＴＧＣＧＧＴＴＡＴＡＴＧＣＡＧ
Ｒ：ＧＴＴＴＡＡＧＧＴＣＧＡＣＡＡＣＴＡＣＴＧＴＡＣＡＡＴＧＣ
２０１－２０９　 ５５ Ｙｏｓｈｉａｋｉ　ｅｔ　ａｌ．２００９
ＤＮ５５４４９９
Ｆ：ＡＴＡＧＴＧＣＡＧＴＴＧＡＧＡＡＡＣＧＡＧＣＡＧ
Ｒ：ＧＴＴＴＡＡＧＧＴＧＣＡＧＴＴＣＧＴＴＧＴＣＧＡＴＧＴ
２０７－２２５　 ５５ Ｙｏｓｈｉａｋｉ　ｅｔ　ａｌ．２００９
ＤＹ６３８６８７
Ｆ：ＡＣＡＣＴＣＧＧＡＴＣＡＴＡＧＡＡＡＴＣＴＣＣＧ
Ｒ：ＧＴＴＴＣＣＴＧＡＡＡＣＣＣＴＧＴＴＧＴＣＧＡＡＴ
１４８－１５１　 ５５ Ｙｏｓｈｉａｋｉ　ｅｔ　ａｌ．２００９
ＤＹ６４０３６４
Ｆ：ＡＣＡＡＣＴＣＴＴＴＣＴＧＧＧＴＴＣＡＴＴＧＣＴ
Ｒ：ＧＴＴＴＡＡＡＡＣＴＣＧＴＡＴＧＣＴＴＣＣＣＡＡＧＧＧＴ
２２８－２３８　 ５５ Ｙｏｓｈｉａｋｉ　ｅｔ　ａｌ．２００９
ＤＹ６４０８４９
Ｆ：ＡＣＡＣＴＣＧＧＡＴＣＡＴＡＧＡＡＡＴＣＴＣＣＧ
Ｒ：ＧＴＴＴＣＣＴＧＡＡＡＣＣＣＴＧＴＴＧＴＣＧＡＡＴ
２９２－３１８　 ５５ Ｙｏｓｈｉａｋｉ　ｅｔ　ａｌ．２００９
ＤＹ６４７４２２
Ｆ：ＡＧＡＣＡＣＣＣＴＡＴＣＡＣＡＡＴＧＴＣＧＣＡＡ
Ｒ：ＧＴＴＴＧＣＧＡＡＣＡＧＣＧＡＴＡＡＣＣＴＴＡＡＴＣＣ
１５６－１５８　 ５５ Ｙｏｓｈｉａｋｉ　ｅｔ　ａｌ．２００９
ｐｃｈｇｍｓ３
Ｆ：ＡＣＧＣＴＡＴＧＴＣＣＧＴＡＣＣＡＴＣＴＣＣＡＴＧ
Ｒ：ＣＡＡＣＣＴＧＴＧＡＴＴＧＣＴＣＣＴＡＴＴＡＡＡＣ
１７０－２３０　 ５６ Ｄｏｗｎｅｙ　Ｌ．ｅｔ　ａｌ．２０００
ＰＳ１２Ａ０２
Ｆ：ＧＣＣＡＣＣＡＡＴＧＧＴＴＣＴＴＣＣ
Ｒ：ＡＧＣＡＣＣＡＧＡＴＧＣＡＣＣＴＧＡ
１５０－１７８　 ５６ Ｄｏｗｎｅｙ　Ｌ．ｅｔ　ａｌ．２０００
ＰｃｅＧＡ３４
Ｆ：ＧＡＡＣＡＴＧＴＧＧＴＧＴＧＣＴＧＧＴＴ
Ｒ：ＴＣＣＡＣＴＡＧＧＡＧＧＴＧＣＡＡＡＴＧ
１４５－１９８　 ５８ Ｄｏｗｎｅｙ　Ｌ．ｅｔ　ａｌ．２０００
Ｍ９ａ
Ｆ：ＧＣＣＧＡＡＡＣＣＣＴＡＧＧＴＧＡＧＣＧ
Ｒ：ＣＡＧＧＡＴＧＣＴＴＧＣＧＧＴＧＣＴＴＧ
１３３－１６３　 ５８ Ｓａｔｏｓｈｉ　Ｏ．ｅｔ　ａｌ．２００５
ＰＭＳ２
Ｆ：ＣＡＣＴＧＴＣＴＣＣＣＡＧＧＴＴＡＡＡＣＴ
Ｒ：ＣＣＴＧＡＧＣＴＴＴＴＧＡＣＡＣＡＴＧＣ
１３２－１５２　 ５８ Ｃａｎｔｉｎｉ　ｅｔ　ａｌ．２００１
ＰＭＳ３
Ｆ：ＴＧＧＡＣＴＴＣＡＣＴＣＡＴＴＴＣＡＧＡＧＡ
Ｒ：ＡＣＴＧＣＡＧＡＧＡＡＴＴＴＣＡＣＡＡＣＣＡ
１８５－２１３　 ５８ Ｃａｎｔｉｎｉ　ｅｔ　ａｌ．２００１
等位基因预期杂合度（Ｈｅ）、等位基因观察杂合度
（Ｈｏ）、Ｎｅｉ′ｓ基因多样性指数（Ｈ）、Ｓｈａｎｎｏｎ信息指
数（Ｉ）和多态性条带百分率（ＰＰＬ），来估算遗传多
样性水平；采用ＧｅｎＡＬＥｘ　６软件［２０］进行分子方差
分析（ＡＭＯＶＡ），估测遗传变异在居群内和居群间
的分配情况；基于等位基因频率，在假设遗传平衡的
条件下，计算居群间的遗传分化系数（Ｆｓｔ）和基因流
（Ｎｍ），并据Ｐｏｐｇｅｎｅ计算得到的 Ｎｅｉ′ｓ遗传距离
（ＧＤ）和遗传一致度（ＧＩ），用 ＵＰＧＭＡ方法进行聚
类，分析各居群之间的遗传关系．
２　结果与分析
２．１　居群的遗传多样性
应用Ｐｏｐｇｅｎｅ　１．３２软件对迎春樱４个居群的
遗传多样性进行统计分析，结果如表３所示．在物种
水平上，筛选出的１５对ＳＳＲ引物在１１２份样品上
共检测到５４条等位基因，位点平均观察等位基因数
为３．６，平均有效等位基因数为２．５３，多态位点百分
率达１００．００％，平均期望杂合度为０．５６１　２，Ｓｈａｎ－
ｎｏｎ多样性指数为０．９７１　０．图１为引物ＰＭＳ３在
ＨＳ居群上的扩增电泳图．
在居群水平上，１５对引物揭示的迎春樱群体的
Ｓｈａｎｎｏｎ多样性指数范围为０．５８８　３～０．８５１　５，平
均值为０．７１２　６；期望杂合度的变化范围为０．３７４　５
～０．５０８　１，平均值为０．４４４；观测杂合度的变化范围
是０．１９１　１～０．２５６　９，平均值为０．２１６　５；Ｎｅｉ′ｓ基因多
样性指数的变化范围是０．３６７　６～０．４９９　０，平均值为
０．５５８　０；有效等位基因数的变化范围是１．７２７　４～
２．２９７　０，平均值为１．９９１　６．可见，迎春樱各居群的遗
６０１
第６期 商韬等：基于ＳＳＲ标记的迎春樱自然居群遗传多样性分析
传多样性水平较丰富，其中天目山（ＴＭＳ）居群的遗传
多样性水平最高，白云山（ＢＹＳ）居群遗传多样性水平
最低，各居群的遗传变异由高到低依次为ＴＭＳ居群
＞ＨＳ居群＞ＬＳ居群＞ＢＹＳ居群．
１～３２：安徽黄山（ＨＳ）居群的１～３２号单株；Ｍ：ｐＢＳ　ＤＮＡ／Ｍｓｐ　Ｉ
图１　引物ＰＭＳ３对迎春樱基因组ＤＮＡ的扩增图谱
Ｆｉｇ．１　ＳＳＲ　ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｐａｔｔｅｒｎ　ｏｆ　Ｃｅｒａｓｕｓ　ｄｉｓｃｏｉｄｅａ　ｇｅｎｏｍｉｃ　ＤＮＡ　ｂｙ　ｐｒｉｍｅｒ　ＰＭＳ３
表３　４个迎春樱自然居群的遗传多样性分析
Ｔａｂ．３　Ｔｈｅ　ｇｅｎｅｔｉｃ　ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｆｏｕｒ　ｗｉｌｄ　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ　ｏｆ　Ｃｅｒａｓｕｓ　ｄｉｓｃｏｉｄｅａ
居群代号
观察等位
基因数（Ｎａ）
有效等位
基因数（Ｎｅ）
观测杂
合度（Ｈｏ）
期望杂
合度（Ｈｅ）
Ｎｅｉ′ｓ基因
多样性指数
（Ｈ）
Ｓｈａｎｎｏｎ
指数（Ｉ）
多态位点
比率／％ （ＰＰＬ）
ＨＳ　 ３．１３３　３　 ２．２０４　７　 ０．２５６　９　 ０．４７８　９　 ０．４７０　５　 ０．８０６　９　 ９３．３３
ＬＳ　 ２．２８５　７　 １．７３７　４　 ０．２１７　７　 ０．４１８　０　 ０．３８３　２　 ０．６０３　７　 ８０．００
ＴＭＳ　 ３．１３３　３　 ２．２９７　０　 ０．２００　２　 ０．５０８　１　 ０．４９９　０　 ０．８５１　５　 ９３．３３
ＢＹＳ　 ２．４２８　６　 １．７２７　４　 ０．１９１　１　 ０．３７４　５　 ０．３６７　６　 ０．５８８　３　 ８０．００
平均 ２．７４５　２　 １．９９１　６　 ０．２１６　５　 ０．４４４　９　 ０．４３０　１　 ０．７１２　６　 ８６．６７
种级水平 ３．６００　０　 ２．５３０　４　 ０．２２１　７　 ０．５６１　２　 ０．５５８　０　 ０．９７１　０　 １００．００
２．２　居群的遗传分化
采用分子方差分析（ＡＭＯＶＡ）迎春樱自然居群
微卫星位点的变异总量及在群体间和群体内的分布
进行了确定，结果表明，迎春樱有２２％的遗传变异
存在于居群间，７８％的遗传变异存在于居群内（表
４），居群内的遗传变异大于居群间的遗传变异，居群
内变异是其居群的主要变异来源．该结果与由居群
间的遗传分化系数（Ｆｓｔ＝０．２６４）得到的结果相一
致．此外，居群间的基因流（Ｎｍ）为０．６９４　４，表明居
群间基因交流受阻，由遗传漂变等因素引起的居群
间遗传分化较大．
２．３　遗传距离和聚类分析
根据Ｎｅｉ方法计算出不同居群的遗传距离和遗
传一致度（表５）．居群间遗传距离范围为０．２３９　２～
０．５０６　３，遗传一致度范围为０．６０２　７～０．７８７　３，
ＴＭＳ与ＬＳ居群的遗传距离最大，遗传一致度最
表４　迎春樱自然居群的ＡＭＯＶＡ分析
Ｔａｂ．４　ＡＭＯＶＡ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｗｉｌｄ　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ　ｏｆ　Ｃｅｒａｓｕｓ　ｄｉｓｃｏｉｄｅａ
变异来源 自由度 方差总和 平均方差 变异组分
变异百
分率／％
Ｐ
居群间 ３　 ９７．６０３　 ３２．５３４　 １．０５２　 ２２ ＜０．０１
居群内 １０８　 ３９８．８４４　 ３．６９３　 ３．６９３　 ７８ ＜０．０１
总量 １１１　 ４９６．４４６　 ４．７４５　 １００
７０１
甘 肃 农 业 大 学 学 报 ２０１３年
低，分别为０．５０６　３和０．６０２　７，ＴＭＳ与ＢＹＳ居群
间遗传距离最小，遗传一致度最高，分别为０．２３９　２
和０．７８７　３．
表５　居群间的Ｎｅｉ′ｓ遗传距离（ＧＤ）和
遗传一致度（ＧＩ）
Ｔａｂ．５　Ｎｅｉ′ｓ　ｇｅｎｅｔｉｃ　ｄｉｓｔａｎｃｅ　ａｎｄ　ｇｅｎｅｔｉｃ　ｉｄｅｎｔｉｔｙ
ａｍｏｎｇ　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ
居群代号 ＨＳ　 ＴＭＳ　 ＬＳ　 ＢＹＳ
ＨＳ ＊＊＊＊ ０．７５２　７　 ０．７５０　８　 ０．６４５　８
ＴＭＳ　 ０．２８４　１ ＊＊＊＊ ０．６０２　７　 ０．７８７　３
ＬＳ　 ０．２８６　６　 ０．５０６　３ ＊＊＊＊ ０．６１７　６
ＢＹＳ　 ０．４３７　２　 ０．２３９　２　 ０．４８１　９ ＊＊＊＊
　　下三角：Ｎｅｉ′ｓ遗传距离；上三角：遗传一致度．
　　利用 Ｎｅｉ′ｓ遗传距离，采用平均聚类法（ＵＰＧ－
ＭＡ）对４个迎春樱自然居群进行聚类．４个居群被
分为２个类群，来自浙江的ＴＭＳ与ＢＹＳ居群聚为
一组，居群遗传距离最近，来自安徽的 ＨＳ居群与江
西的ＬＳ居群聚成另一组（图２）．
图２　基于Ｎｅｉ′ｓ遗传距离的居群
ＵＰＧＭＡ聚类图
Ｆｉｇ．２　ＵＰＧＭＡ　ｄｅｎｄｒｏｇｒａｍ　ｂａｓｅｄ　ｏｎ　Ｎｅｉ′ｓ
ｇｅｎｅｔｉｃ　ｄｉｓｔａｎｃｅ
３　讨论与结论
３．１　迎春樱自然居群及其物种水平遗传多样性
ＳＳＲ分子标记在研究植物居群基因组的基因
漂流、遗传多样性及种质资源保护上有很大的潜力．
本试验利用ＳＳＲ分子标记技术对迎春樱４个自然
居群的１１２个个体进行分析，结果表明，迎春樱物种
水平的多态位点比率为１００．００％，位点平均观察等
位基因数为３．６，平均有效等位基因数为２．５３；
Ｎｅｉ′ｓ遗传多样性指数为０．５５８　０，Ｓｈａｎｎｏｎ多样性
指数为０．９７１　０．Ｓｈａｎｎｏｎ指数和Ｎｅｉ′ｓ指数既可以
反映条带的丰富程度，又能反映均匀程度，而丰富度
与均匀度是衡量多样性的２个重要指标［２１］．在居群
水平上，Ｎｅｉ′ｓ指数计算的各种群遗传多样性比
Ｓｈａｎｎｏｎ指数计算的值偏低，二者估计的各种群内
平均遗传多样性的变化趋势一致．其中，天目山
（ＴＭＳ）居群的遗传多样性水平最高，白云山（ＢＹＳ）
居群遗传多样性水平最低，各居群的遗传变异由高
到低依次为ＴＭＳ居群＞ＨＳ居群＞ＬＳ居群＞ＢＹＳ
居群．苏倩［２２］利用ＳＳＲ分子标记技术分析了福建
山樱花野生群体的遗传多样性，得出福建山樱花
Ｓｈａｎｎｏｎ指 数 平 均 为 １．４２６　９，Ｎｅｉ′ｓ 指 数 为
０．６８９　３；蔡宇良［２３］利用ＤＮＡ扩增片段序列对野生
中国樱桃种质资源的遗传分析，得出野生中国樱桃
Ｓｈａｎｎｏｎ指数为０．３８０　８，Ｎｅｉ′ｓ指数为０．２４３　７．从
数值上看迎春樱物种存在中等水平的遗传多样性，
说明迎春樱有较强的适应环境的能力及其被改造和
利用的潜力．但是，由于迎春樱本身生长的自然环境
恶劣，野外种群数量不多，再加之人类肆意不科学地
开发利用，迎春樱面临着遗传多样性丢失的严峻形
势．因此，应该加大迎春樱资源保护的力度，科学地
开发利用．
３．２　迎春樱自然居群的遗传结构
遗传分化是反映遗传结构的重要指标．植物居
群间的遗传分化是长期进化的结果，包括分布范围
的改变、生境的片断化和居群的隔离等，是基因突
变、遗传漂变、基因流以及自然选择等因素的综合反
映［２４］．Ｗｅｉｇｈｔ研究指出遗传分化系数Ｆｓｔ＞０．２５，
则群体间存在的遗传差异很大［２５］．迎春樱居群在
ＳＳＲ分子水平上，其遗传分化系数（Ｆｓｔ）为０．２６４，说
明其居群间遗传分化程度较高．分子方差分析
（ＡＭＯＶＡ）结果也表明，迎春樱有２２％的遗传变异
存在于居群间，７８％的遗传变异存在于居群内，居群
内变异是其居群的主要变异来源．这与亲缘关系较
近的其它樱属植物基于ＳＳＲ标记的研究有类似结
果［１４］．ＵＰＧＭＡ聚类分析结果显示４个居群被分为
２个类群，遗传距离与地理位置没有明显的相关性．
基因流（Ｎｍ）一定程度上能反应居群间遗传物
质的交流．Ｗｒｉｇｈｔ认为，如果居群间基因流指数
Ｎｍ＞１，基因流则能发挥均质化作用，可有效防止
不同地区亚居群间遗传分化的产生；反之，如果居群
间基因流指数Ｎｍ＜１，则各居群间基因交流受阻，
居群走向遗传分化［２５］．迎春樱居群间基因流Ｎｍ为
０．６９４　４，表明迎春樱居群间基因交流受阻，遗传漂
变导致居群间产生较大的遗传分化．对此推测为迎
８０１
第６期 商韬等：基于ＳＳＲ标记的迎春樱自然居群遗传多样性分析
春樱居群分布范围狭窄，且在空间上相互隔离，致使
花粉和种子等的迁移受限，从而导致各居群基因交
流受阻，遗传分化增大．此外，群体的种子来源、形成
机制和演化历史可能有所不同，逐渐形成了迎春樱
现在的遗传结构．
３．３　迎春樱种质资源的保护策略
根据野外实地调查得知，迎春樱自然居群分布
范围狭窄，加之人为破坏严重、生境破碎化、有性生
殖存在障碍等因素的影响，迎春樱已经逐渐步入渐
危物种的行列．结合本研究迎春樱自然居群间遗传
分化较大的结果，认为在迎春樱种质资源保护策略
上，应在较大范围内保护现有个体数量维护居群的
完整性，同时应防止边缘个体因人为开采被损伤而
造成潜在变异资源流失；在对该种资源进行就地保
护时，应设立多个保护点保护自然居群及其周围生
境，让其进行自然更新，扩大居群的规模；同时继续
对迎春樱的繁殖技术做更深入细致的研究，解决大
规模生产中的实际问题，建立种质资源圃和良种基
因库等措施都对迎春樱这一观赏价值极高的特有种
的保护及开发利用具有重要的现实意义．
参考文献
［１］　俞德浚，李朝銮，陆玲娣，等．中国植物志·第３８卷
［Ｍ］．北京：科学出版社，１９８６：５４－５６
［２］　王贤荣，黄国富．中国樱花类植物资源及其开发利用
［Ｊ］．林业科技开发，２００１，１５（０６）：３－６
［３］　南程慧．迎春樱居群变异与繁殖生物学研究［Ｄ］．南
京：南京林业大学，２０１２
［４］　Ｎｅｉ　Ｍ．Ｔｈｅ　ｎｅｗ　ｍｕｔａｔｉｏｎ　ｔｈｅｏｒｙ　ｏｆ　ｐｈｅｎｏｔｙｐｉｃ　ｅｖｏｌｕ－
ｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｎａｔｉｏｎａｌ　Ａｃａｄｅｍｙ　ｏｆ　Ｓｃｉ－
ｅｎｃｅｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｕｎｉｔｅｄ　Ｓｔａｔｅｓ　ｏｆ　Ａｍｅｒｉｃａ，２００７，１０４：
１２２３５－１２２４２
［５］　周延清．ＤＮＡ 分子标记技术在植物研究中的应用
［Ｍ］．北京：化学工业出版社，２００５
［６］　Ｃｉｐｒｉａｎｉ　Ｇ，Ｍａｒｒａｚｚｏ　Ｍ　Ｔ，Ｍａｒｃｏｎｉ　Ｒ，ｅｔ　ａｌ．Ｍｉｃｒｏｓａｔ－
ｅｌｉｔｅ　ｍａｒｋｅｒｓ　ｉｓｏｌａｔｅｄ　ｉｎ　ｏｌｉｖｅ（Ｏｌｅａ　ｅｕｒｏｐａｅａ　Ｌ．）ａｒｅ
ｓｕｉｔａｂｌｅ　ｆｏｒ　ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌ　ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｉｎｇ　ａｎｄ　ｒｅｖｅａｌ　ｐｏｌｙ－
ｍｏｒｐｈｉｓｍ　ｗｉｔｈｉｎ　ａｎｃｉｅｎｔ　ｃｕｌｔｉｖａｒｓ［Ｊ］．Ｔｈｅｏｒｅｔｉｃａｌ　ａｎｄ
Ａｐｐｌｉｅｄ　Ｇｅｎｅｔｉｃｓ，２００２，１０４：２２３－２２８
［７］　Ｃｈａｓｅ　Ｍ，Ｍｏｌｅｒ　Ｃ，ｋｅｓｓｅｌｉ　Ｒ，ｅｔ　ａｌ．Ｄｉｓｔａｎｃｅ　ｇｅｎｅ　ｆｌｏｗ
ｉｎ　ｔｒｏｐｉｃａｌ　ｔｒｅｅｓ［Ｊ］．Ｎａｔｕｒｅ，１９９６，３８３（６５９９）：３９８－３９９
［８］　王晓娟，张建农，曲亚玲，等．甜瓜抗白粉病基因的ＳＳＲ
标记［Ｊ］．甘肃农业大学学报，２０１２，４７（０４）：６１－６３
［９］　Ａｎｔｏｎｉｕｓ　Ｋ，Ａａｌｔｏｎｅｎ　Ｍ，Ｕｏｓｕｋａｉｎｅｎ　Ｍ，ｅｔ　ａｌ．Ｇｅｎｏ－
ｔｙｐｉｃ　ａｎｄ　ｐｈｅｎｏｔｙｐｉｃ　ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｉｎ　ｆｉｎｎｉｓｈ　ｃｕｌｔｉｖａｔｅｄ　ｓｏｕｒ
ｃｈｅｒｒｙ（Ｐｒｕｎｕｓ　ｃｅｒａｓｕｓ　Ｌ．）［Ｊ］．Ｇｅｎｅｔｉｃ　Ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ　ａｎｄ
Ｃｒｏｐ　Ｅｖｏｌｕｔｉｏｎ，２０１２，３（５９）：３７５－３８８
［１０］　Ｍａｒｉｅｔｔｅ　Ｓ，Ｔａｖａｕｄ　Ｍ，Ａｒｕｎｙａｗａｔ　Ｕ，ｅｔ　ａｌ．Ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ
ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ　ａｎｄ　ｇｅｎｅｔｉｃ　ｂｏｔｔｌｅｎｅｃｋ　ｉｎ　ｓｗｅｅｔ　ｃｈｅｒｒｙ　ｅｓｔｉ－
ｍａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ＳＳＲｓ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｇａｍｅｔｏｐｈｙｔｉｃ　ｓｅｌｆ－ｉｎｃｏｍｐａｔ－
ｉｂｉｌｉｔｙ　ｌｏｃｕｓ［Ｊ］．ＢＭＣ　Ｇｅｎｅｔｉｃｓ，２０１０，１１：７７
［１１］　Ｙｏｓｈｉａｋｉ　Ｔ，Ｍａｄｏｋａ　Ｋ，Ｓｈｕｒｉ　Ｋ，ｅｔ　ａｌ．Ｇｅｎｅｔｉｃ　ｓｔｒｕｃ－
ｔｕｒｅ　ｏｆ　Ｃｅｒａｓｕｓ　ｊａｍａｓａｋｕｒａ，ａ　Ｊａｐａｎｅｓｅ　ｆｌｏｗｅｒｉｎｇ
ｃｈｅｒｒｙ，ｒｅｖｅａｌｅｄ　ｂｙ　ｎｕｃｌｅａｒ　ＳＳＲｓ：ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ　ｆｏｒ
ｃｏｎｓｅｒｖａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｐｌａｎｔ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ，２００９，１２２
（４）：３６７　３７５
［１２］　吕月良．福建山樱花群体遗传多样性、繁育技术体系
和育种策略研究［Ｄ］．南京：南京林业大学，２００６
［１３］　张琪静，张新忠，代红艳，等．甜樱桃品种ＳＳＲ指纹检
索系统的开发及遗传多样性分析［Ｊ］．园艺学报，
２００８，３５（３）：３２９－３３６
［１４］　Ｍｕｒｒａｙ　Ｈ　Ｇ，Ｔｈｏｍｓｐｏｎ　Ｗ　Ｆ．Ｒａｐｉｄ　ｉｓｏｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｈｉｇｈ－
ｅｒ　ｗｅｉｇｈｔ　ＤＮＡ［Ｊ］．Ｎｕｃｌｅｉｃ　Ａｃｉｄｓ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ，１９８０，８
（１９）：４３２１－４３２６
［１５］　Ｙｏｓｈｉａｋｉ　Ｔ，Ｓａｎｅｙｏｓｈｉ　Ｕ，Ｓｈｕｒｉ　Ｋ，ｅｔ　ａｌ．Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ
ｏｆ　１３ＥＳＴ－ＳＳＲｓ　ｆｏｒ　Ｃｅｒａｓｕｓ　ｊａｍａｓａｋｕｒａ　ａｎｄ　ｔｈｅｉｒ
ｔｒａｎｓｆｅｒａｂｉｌｉｔｙ　ｆｏｒ　Ｊａｐａｎｅｓｅ　ｆｌｏｗｅｒｉｎｇ　ｃｈｅｒｒｉｅｓ［Ｊ］．
Ｃｏｎｓｅｒｖａｔｉｏｎ　Ｇｅｎｅｔｉｃｓ，２００９，１０：６８５－６８８
［１６］　Ｄｏｗｎｅｙ　Ｓ　Ｌ，Ｉｅｚｚｏｎｉ　Ａ　Ｆ．Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ　ＤＮＡ　ｍａｒｋｅｒｓ
ｉｎ　ｂｌａｃｋ　ｃｈｅｒｒｙ（Ｐｒｕｎｕｓ　ｓｅｒｏｔｉｎａ）ａｒｅ　ｉｄｅｎｉｔｉｆｉｅｄ　ｕｓｉｎｇ
ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ　ｆｒｏｍ　ｓｗｅｅｔ　ｃｈｅｒｒｙ，ｐｅａｃｈ，ａｎｄ　ｓｏｕｒ　ｃｈｅｒｒｙ
［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ａｍｅｒｉｃａｎ　Ｓｏｃｉｅｔｙ　ｆｏｒ　Ｈｏｒｔｉｃｕｌｔｕｒａｌ
Ｓｃｉｅｎｃｅ，２０００，１２５（１）：７６－８０
［１７］　Ｃａｎｔｉｎｉ　Ｃ，Ｉｅｚｚｏｎｉ　Ａ　Ｆ，Ｌａｍｂｏｙ　Ｗ　Ｆ，ｅｔ　ａｌ．ＤＮＡ　ｆｉｎ－
ｇｅｒｐｒｉｎｔｉｎｇ　ｏｆ　ｔｅｔｒａｐｌｏｉｄ　ｃｈｅｒｒｙ　ｇｅｒｍｐｌａｓｍ　ｕｓｉｎｇ　ｓｉｍ－
ｐｌｅ　ｓｅｑｕｅｎｃｅ　ｒｅｐｅａｔｓ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ａｍｅｒｉｃａｎ　Ｓｏ－
ｃｉｅｔｙ　ｆｏｒ　Ｈｏｒｔｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ，２００１，１２６（２）：２０５－２０９
［１８］　梁宏伟，王长忠，李忠，等．聚丙烯酰胺凝胶快速高效
银染方法的建立［Ｊ］．遗传，２００８，３０（１０）：１３７９－１３８２
［１９］　Ｙｅｎ　Ｆ　Ｊ，Ｙａｎｇ　Ｒ　Ｃ，Ｂｏｙｌｅ　Ｔ　Ｂ　Ｊ．Ｐｏｐｇｅｎｅ，ｔｈｅ　ｕｓｅｒ－
ｆｒｉｅｎｄｌｙ　ｓｈａｒｅｗａｒｅ　ｆｏｒ　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ　ｇｅｎｅｔｉｃ　ａｎａｌｙｓｉｓ
［Ｍ］．Ｃａｎａｄａ：Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　Ｂｉｏｌｏｇｙ　ａｎｄ　Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ
Ｃｅｎｔｒｅ　Ｐｒｅｓｓ，１９９７
（下转第１１５页）
９０１
第６期 张晓贺等：不同施肥处理对新垦盐碱荒地盐分运移的影响
水盐时空变异性研究［Ｊ］．中国生态农业学报，２０１１，
（３）：４９１－４９９
［５］　乔玉辉，宇振荣．灌溉对土壤盐分的影响及微咸水利用
的模拟研究［Ｊ］．生态学报，２００３，２３（１０）：５０－５２
［６］　高瑾，刘延锋，周金龙，等．干旱区灌排条件下田间土壤
盐分动态分析［Ｊ］．中国农村水利水电，２００４（１１）：１４－
１６
［７］　李新文．甘肃灌溉农业与国内外灌溉农业的比较分析
与建议［Ｊ］．农业技术经济，２００２（１）：５１－６３
［８］　徐德辉．甘肃河西走廊及沿黄灌区农业节水现状分析
［Ｊ］．人民黄河，２０１１，３３（１１）：１１２－１１６
［９］　徐存东，冯起，翟禄新，等．干旱区扬水灌溉对灌区地下
水盐演化的影响［Ｊ］．甘肃农业大学学报，２０１０，４５（４）：
１１９－１２４
［１０］　鲁如坤．土壤农业化学分析方法［Ｍ］．北京：中国农业
科技出版社，１９９９
［１１］　魏光辉，董新光，杨鹏年，等．棉花膜下滴灌土壤盐分
运移规律分析［Ｊ］．水土保持研究，２００９，１６（０６）：１６２－
１６６
［１２］　毛任钊，松本聪．盐渍土盐分指标及其与化学组成的
关系［Ｊ］．土壤，１９９７，２９（６）：３２６－３３０
［１３］　刘广明，杨劲松，姚荣江．影响土壤浸提液电导率的盐
分化学性质要素及其强度研究［Ｊ］．土壤学报，２００５，
４２（２）：２４７－２５２
［１４］　谢承陶．盐渍土改良原理与作物抗性［Ｍ］．北京：中国
农业科技出版社，１９９３
［１５］　买买提·阿扎提，艾力克木·卡德尔，吐尔逊·哈斯
木．土壤盐渍化及其治理措施研究综述［Ｊ］．环境科学
与管理，２００８，３３（５）：２９－３３
［１６］　田忠孝，曹季江．有机质改良盐碱土的初步研究［Ｊ］．
土壤肥料，１９９３（１）：１６－１９
［１７］　沈其荣，余玲，刘兆普，等．有机无机肥配合施用对滨
海盐土土壤生物态氮及土壤供氮特征的影响［Ｊ］．土
壤学报，１９９４，３１（３）：２８７－２９２
［１８］　魏由庆．从黄淮海平原水盐均衡谈土壤盐渍化的现状
和将来［Ｊ］．土壤学进展，１９９５，２３（２）：１８－２４
［１９］　刘春卿，杨劲松，陈德明．管理调控措施对土壤盐分分
布和作物体内盐分离子吸收的作用［Ｊ］．土壤学报，
２００４，４１（２）：２３１－２３５
［２０］　胡育骄，王小彬，赵全胜，等．海冰水灌溉对不同施肥
方式下土壤盐分运移及棉花的影响［Ｊ］．农业工程学
报，２０１０，２６（９）：２０－２６
［２１］　黄强，殷志刚，田长彦，等．施有机肥条件下的土壤溶
液盐分变化动态［Ｊ］．干旱区研究，２００１，１８（１）：５３－５６
（责任编辑　李辛

）
（上接第１０９页）
［２０］　Ｐｅａｋａｌ　Ｒ，Ｓｍｏｕｓｅ　Ｐ　Ｅ．ＧＥＮＡＬＥＸ　６：ｇｅｎｅｔｉｃ　ａｎａｌｙｓｉｓ
ｉｎ　Ｅｘｃｅｌ．Ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ　ｇｅｎｅｔｉｃ　ｓｏｆｔｗａｒｅ　ｆｏｒ　ｔｅａｃｈｉｎｇ　ａｎｄ
ｒｅｓｅａｒｃｈ［Ｊ］．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　Ｅｃｏｌｏｇｙ　Ｎｏｔｅｓ，２００６（６）：２８８－
２９５
［２１］　Ｎｅｉ　Ｍ．Ｇｅｎｅｔｉｃ　ｄｉｓｔａｎｃｅ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ［Ｊ］．Ａ－
ｍｅｒｉｃａｎ　Ｎａｔｕｒａｌｉｓｔ，１９７２，１０６：２８３－２９２
［２２］　苏倩．福建山樱花种源遗传多样性研究［Ｄ］．南京：南
京林业大学，２００７
［２３］　蔡宇良．野生樱桃种质资源的遗传分析及其栽培品种
的ＤＮＡ指纹鉴定［Ｄ］．西安：西北大学，２００６
［２４］　Ｓｃｈａａｌ　Ｂ　Ａ，Ｈａｙｗｏｒｔｈ　Ｄ　Ａ，Ｏｌｓｅｎ　Ｋ　Ｍ．Ｐｈｙｌｏｇｅｏ－
ｇｒａｐｈｉｃ　ｓｔｕｄｉｅｓ　ｉｎ　ｐｌａｎｔｓ：ｐｒｏｂｌｅｍｓ　ａｎｄ　ｐｒｏｓｐｅｃｔｓ［Ｊ］．
Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　Ｅｃｏｌｏｇｙ，１９９８，７：４６５－４７５
［２５］　Ｗｒｉｇｈｔ　Ｓ．Ｔｈｅ　ｇｅｎｅｔｉｃａｌ　ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ　ｏｆ　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ［Ｊ］．
Ａｎｎａｌｓ　ｏｆ　Ｅｕｇｅｎｉｃｓ，１９５１，１５：３２３－３５４
（责任编辑　胡文忠）
５１１